DEUG SV 2 électrophysiologie réponses
corrigé de l’exercice n° 1 : calcul du potentiel d’équilibre d’un ion
a) Calculer la différence de potentiel EA – EB pour laquelle l’ion K+ est à l’équilibre.
Le mouvement d’un ion à travers une membrane perméable est dû :
• au potentiel chimique (force due à la différence de concentration de part et d’autre de la
membrane) ;
• au potentiel électrique (force due à la différence de potentiel de part et d’autre de la
membrane).
Le potentiel électrochimique d’un ion X de valence z est donné par la formule :
Dµ (Xz) = µB(Xz) - µA(Xz) = RTln ([Xz ]B/[Xz]A) + zF(EB – EA)
À l’équilibre électrochimique, la différence de potentiel électrochimique est nulle. La force
due à la différence de potentiel s’oppose exactement à la force due à la différence de
concentration entre les deux compartiments A et B séparés par la membrane.
La valeur de la différence de potentiel à l’équilibre est donnée par l’équation suivante, appelé
équation de Nernst :
EB – EA = - (RT/zF)ln ([Xz]B /[Xz]A)
R : constante des gaz parfaits (= 8,32 J K-1mole-1) ; T : température en Kelvin (°C + 273,15) ;
z : valence de l’ion ; F : constance de Faraday (96500 C)
pour une température de 29°C,
EB – EA = - (60/z)log ([Xz]B/[Xz]A) (mV).
L’ion K+ à l’équilibre satisfait à l’équation de Nernst :
EA – EB = - (60/z)log ([K +]A/[ K+] B) (mV)
EA – EB = - (60/)log (0,1/0,01) = -60 log10
EA – EB = - 60 mV
b) Pour cette différence de potentiel, quelle est la valeur du flux net de K+ ?
À l’équilibre, le flux net d’ion est nul.
Etienne Roux 1 UFR SV
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corrigé de l’exercice n°2 : flux d’un ion à travers une membrane
a) L’ion HCO3 - est-il à l’équilibre ? Satisfait-il à l’équation de Nernst ?
Calculons le potentiel d’équilibre pour l’ion, en utilisant l’équation de Nernst.
(EA – EB)eq = - (60/z)log ([Xz]A /[Xz]B) (mV)
(EA – EB)eq = + (60/)log (1/0,1) = +60 log10
(EA – EB)eq = + 60 mV
(EA – EB)eq est différent de EA – EB. L’ion n’est pas à l’équilibre électrochimique. Il ne
satisfait pas à l’équation de Nersnt.
b) Si l’ion n’est pas à l’équilibre, dans quel sens la force électrochimique va-t-elle le faire
migrer ?
Le mouvement de l’ion dépend de la force électrochimique à laquelle il est soumis. La
diffusion se fera dans le sens pour lequel la différence de potentiel électrochimique sera
négative (transformation spontanée).
Le potentiel électrochimique d’un ion X de valence z est donné par la formule :
∆µ (Xz) = µA(Xz) - µB(Xz ) = RTln ([Xz]A/[Xz]B) + zF(EA – EB)
À l’équilibre, le potentiel électrochimique est nul.
0 = ∆µ (Xz) = µA(Xz) - µB(Xz) = RTln ([Xz]A/[Xz]B) + zF(EA – EB)e q
Si ∆µ (Xz) est négatif, alors :
RTln ([Xz]A/[Xz]B ) + zF(EA – EB) < RTln ([Xz]A/[Xz]B ) + zF(EA – EB )eq
Donc : z(EA – EB) < z(EA – EB)eq
Si z(EA – EB ) < z(EA – EB )eq, l’ion diffusera de B vers A
Si z(EA – EB ) > z(EA – EB )eq, l’ion diffusera de A vers B
(EA – EB)eq = + 60 mV z(EA – EB)eq = - 60 mV
(EA – EB) = + 100 mV z(EA – EB) = - 100 mV
z(EA – EB ) < z(EA – EB )eq ; l’ion diffusera de B vers A
Etienne Roux 2 UFR SV
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corrigé de l’exercice n°3 : l’équilibre de Donnan
a) En quoi la membrane séparant A et B est-elle une membrane de Donnan ?
On appelle « membrane de donnan » une membrane perméable à certaines particules chargées
et pas à d’autres. C’est le cas ici, puisque la membrane est perméable à K+ et à Cl-, mais pas à
Y-.
Que décrit l’équation de Gibbs-Donnan ?
L’équation de Gibbs-Donnan décrit l’état d’équilibre de chaque paire d’ions monovalents de
part et d’autre d’une membrane de Donnan.
b) Les ions sont-ils à l’équilibre ?
Au départ, l’ion Cl- n’est pas à l’équilibre, étant en excès dans le compartiment B. Le flux de
Cl- va aller de B vers A. Ce flux de charges négatives va créer une différence de potentiel
négative ((EA – EB )<0), ce qui va provoquer un flux de K+ également de B vers A.
c) À l’équilibre, quelles seront les concentrations des différents ions dans chaque
compartiments ?
À l’équilibre, K+ et Cl- satisfont à l’équation de Gibbs-Donnan :
[K +]A [Cl-]A = [K +]B [Cl-]B (1)
L’électroneutralité de chaque compartiment induit par ailleurs que :
[K +]A = [Cl-]A + [Y-]A (2) et [K +]B = [Cl-]B (3)
La conservation de la matière induit que :
[K +]A + [K +]B = 0,2 M (4) [Cl-]A + [Cl-]B = 0,1 M (5) [Y-]A = 0,1 M (6)
(1) et (3) donnent : [K +]A [Cl-]A = ([K +]B)2
En remplaçant [K +]A et [Cl-]A par leurs équivalents calculés à partir de (4) et (5), on obtient :
(0,2 - [K +]B)(0,1 - [Cl-]B ) = ([K +]B)2 d’où :
(0,2 x 0,1) - [K +]B(0,1 +0,2) + ([K +]B)2 = ([K +]B )2
(0,2 x 0,1) = [K +]B)(0,1 +0,2)
[K +]B = (0,2 x 0,1) /(0,1 +0,2) = 0,2/3 = 0,066 M
[K+]B = 0,066 M ; [Cl-]B = 0,066 M ; [K+]A = 0,133 M ; [Cl-]A = 0,033 M ; [Y-]A = 0,1 M
Quelle sera la différence de potentiel entre A et B ?
K+ et Cl- étant à l’équilibre, ils satisfont à l’équation de Nernst. La différence de potentiel
peut donc être calculée à l’aide de cette équation, à partir de l’un ou l’autre de ces deux ions.
EA – EB = - 60log ([K +]A/[ K+]B ) = + 60log ([Cl-]A/[Cl-]B ) (mV)
EA – EB = - 60log2
EA – EB = - 18 mV
Etienne Roux 3 UFR SV
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corrigé de l’exercice n° 4 : différence de concentration ionique et
potentiel
a) premier cas : la membrane n’est perméable qu’à l’ion potassium.
Le potassium est-il à l’équilibre ?
Non, car les concentrations en K+ sont différentes dans les 2 compartiments et la différence de
potentiel est nulle.
Sinon, dans quel sens se fera le flux de K+ ?
Dans le sens du gradient de concentration, c’est-à-dire de A vers B.
Quel effet ce flux aura-t-il sur le potentiel de part et d’autre de la membrane ?
Le flux va accumuler des charges positives sur la face B de la membrane, créant ainsi une
différence de potentiel (EA – EB)<0)
À quelle valeur le potentiel se stabilisera-t-il ?
À la valeur du potentiel d’équilibre pour K+, soit EA – EB = – 60 mV.
+
NB : cette valeur va être obtenue sans variation significative de la concentration en K dans ch
compartiement, car un très faible mouvement de charge est suffisant pour induire un lareg
dépolarisation. La différence de charge (Q) nécessaire à l’établisement d’un potentiel membranaire
Em dépend de la capacitance membranaire Cm selon la formule : Q = Em x Cm
b) deuxième cas : la membrane n’est perméable qu’à l’ion sodium.
Le sodium est-il à l’équilibre ?
Non, pour les mêmes raisons que K+.
Sinon, dans quel sens se fera le flux de Na+ ?
De B vers A.
Quel effet ce flux aura-t-il sur le potentiel de part et d’autre de la membrane ?
Le flux va accumuler des charges positives sur la face A de la membrane, créant ainsi une
différence de potentiel (EA – EB)>0)
À quelle valeur le potentiel se stabilisera-t-il ?
À la valeur du potentiel d’équilibre pour Na+, soit EA – EB = + 60 mV.
c) troisième cas : la membrane est également perméable à K + et à Na + .
À quelle valeur le potentiel se stabilisera-t-il ?
À la valeur intermédiaire entre le potentiel d’équilibre pour K+et pour Na+, soit 0 mV.
Pour cette valeur de potentiel, et ces concentrations, K+ et Na+ seront-ils à l’équilibre ?
Non, car le potentiel de membrane est différent des potentiels d’équilibre de chaque ion.
d) que peut-on en conclure sur la participation des ions à l’établissement d’un
potentiel transmembraire ?
Le potentiel de membrane est la moyenne pondérée des potentiels d’équilibre de chaque ion
auquel la membrane est perméable. Plus la membrane est perméable à un ion, plus le poids de
cet ion dans l’établissement du potentiel de membrane sera important.
NB : D’un point de vue électrique, pour chaque ion, le facteur de pondération est la
conductance membranaire relative pour cet ion (le calcul de la valeur du potentiel de
membrane à partir des conductances relatives se fait à partir de l’équation de conductance,
traitée dans l’exercice n°6).
Etienne Roux 4 UFR SV
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corrigé de l’exercice n° 5 : potentiel de membrane – équation de
Goldman-Hodgkin-Katz (GHK)
a) Qu’est-ce l’équation de GHK ? Que permet-elle de calculer ?
L’équation de GHK, dite aussi équation de champ constant, permet de calculer la valeur du
potentiel de membrane en fonction des concentrations intracellulaires et extracellulaires des
ions K+, Na+ et Cl-, et de leur perméabilité, selon la formule :
RT P [K + ] + P [Na + ] + P [Cl - ]
E = E −E = − log( K i Na i Cl e )
m i e F + +
P [K ] + P [Na ] + P [Cl ] -
K e Na e Cl i
Si l’ion Cl- est à l’équilibre électrochimique, quelle est sa participation au potentiel de
membrane ? Comment peut-on alors simplifier l’équation de GHK ?
Si l’ion Cl- est à l’équilibre, distribué passivement de part et d’autre de la membrane, il ne
participe pas au potentiel de membrane. L’équation de GHK peut se simplifier ainsi :
RT P [K + ] + P [Na+ ]
E = E −E = − log( K i Na i )
m i e F +
P [K ] + P [Na ] +
K e Na e
b) Calculez le potentiel de membrane de l’axone de calmar
400 + 2,5 + 243
E = −60 log( ) mV
m 10 + 23 + 18
Em = -66 mM
c) L’ouverture de canaux sodiques augmente la perméabilité au sodium ; PNa = 20. Quelle est
alors la valeur du potentiel de membrane à l’équilibre ?
(1 × 400) + 20 × 50) + (0,45 × 540)
E = E − E = −60 log( )
m i e (1 × 10) + (20 × 460) + (0,45 × 40)
400 + 1000 + 243
E = −60 log( ) mV Em = +45 mM
m 10 + 9200 + 18
d) L’ouverture de canaux potassiques augmente considérablement la perméabilité au
potassium. La perméabilité au sodium et au chlore devient négligeable par rapport à la
perméabilité au potassium. Vers quelle valeur va alors tendre le potentiel de membrane ?
Le potentiel de membrane va tendre vers le potentiel d’équilibre pour le potassium, soit – 96
mV.
Etienne Roux 5 UFR SV
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corrigé de l’exercice n° 6 : équation de conductance
a) Donner, pour chaque ion, la formule donnant l’intensité du courant dû à cet ion en
fonction de la conductance membranaire pour cet ion, de son potentiel d’équilibre et du
potentiel membranaire Em .
Pour un ion donné X, l’intensité du courant en fonction de Em est donnée par la loi d’Ohm :
Rx .Ix = (Em – Ex )
où Rx est la résistance à l’ion, Ix le courant porté par cet ion, Ex son potentiel d’équilibre. Si
on exprime l’équation en fonction de la conductance à l’ion gx , on obtient :
Ix = (Em – Ex ) gx
b) Sachant qu’au repos le courant global – somme de l’ensemble des courants portés par
chaque ion – est nul, déterminer la potentiel membranaire de repos Em du muscle étudié.
Les courants ioniques à travers la membrane plasmique étant des courants en parallèle, le
courant global I est la somme des courants ioniques.
I = Σ Ix = Σ (Em – Ex ) gx
I = Σ Em gx – Σ Ex gx
I = Em Σ gx – Σ Ex gx
Puisqu’au repos, I = o, on obtient :
0 = Em Σ gx – Σ Ex gx
Σ Ex gx = Em Σ gx
Σ Ex gx )/Σ
Em = (Σ Σ gx Em = Σ Ex (gx /Σ
Σ gx )
où Σ gx est la somme des conductances, et gx /Σ gx la conductance relative de chaque ion.
Le potentiel membranaire est donc égal à la somme des potentiels d’équilibre de chaque ion
multipliés par la conductance relative de cet ion.
Pour le muscle étudié, on obtient donc :
Em = ENa(gNa /Σ gx ) + EK(gK /Σ gx ) + ECl(gCl /Σ gx )
Em = 60(0,05) - 89(0,5) -89(0,45) mV
Em = -81,6 mV
c) Quelle va être la conséquence de l’activation de canaux Na2+ sur les conductances
relatives ? Comment va varier le potentiel de membrane ?
L’ouverture de canaux sodium augmente considérablement la conductance relative au sodium.
Le potentiel membranaire va donc se rapprocher du potentiel d’équilibre de l’ion Na+.
Etienne Roux 6 UFR SV
DEUG SV 2 électrophysiologie réponses
corrigé de l’exercice n° 7 : conductance d’un canal unitaire
a) Calculez de potentiel d’équilibre pour l’ion Na+.
ENa = -60log([Na+]i/[Na+]e ) = -60log(10/120) mV
ENa = + 65 mV
b) Quelle est la conductance unitaire du canal ?
L’intensité du courant dépend de la conductance du canal et de la force électrochimique
appliquée selon la loi d’Ohm U=RxI
(la conductance g, exprimée en Siemens (S) étant égale à l’inverse de la résistance R).
La force électromotrice correspond à la différence entre le potentiel membranaire Em et le
potentiel d’équilibre ENa.
(Em - ENa) = I / g g = I /(Em - ENa)
g = 2.10-12 / 105.10-3 g = 19.10-12 S
c) quel est le signe du courant observé ? (par convention, un courant entrant est négatif, un
courant sortant est positif)
On a Em < ENa, donc zEm < zENa Le flux de Na+ va du milieu extracellulaire vers le milieu
intracellulaire. Le flux est entrant (cf. exercice n° 2).
Na+ étant un cation, le flux d’ion et le courant associé sont de même signe. Le courant est un
courant entrant, donc négatif.
Si (Em - ENa) est négatif, le courant est négatif aussi. Si le courant est porté par un cation, le
flux d’ion est entrant. S’il est porté par un anion, le flux d’ion est sortant.
d) quel est le nombre d’ions qui traversent le canal en 1 msec ?
1 A = 1C. sec-1
charge élémentaire de l’électron e = 1,6 10-19 C
1 A = 1C. sec-1
La charge élémentaire de l’électron étant 1,6 10-19 C, un C correspond à 1/(1,6.10-19) charges
élémentaires. 1 A est donc égal à 0,625.1019 charges élémentaires par seconde, 0,625.1016
charges élémentaires par milliseconde.
Le courant étant de 2.10-12 A, il correspond à 2 x 0,625.104 charges élémentaires par msec.
Na+ étant monovalent, le passage d’une charge élémentaire à travers le canal correspond au
passage d’un ion.
En une milliseconde, il passe donc 12500 ions à travers un canal.
Etienne Roux 7 UFR SV
DEUG SV 2 électrophysiologie réponses
corrigé de l’exercice n° 8 : détermination du potentiel d’inversion d’un
courant membranaire
a) tracez la courbe I-V. Déterminer le potentiel d’inversion du courant.
I 40
20
-80 -60 -40 -20 0 20 40 60 80
V
-20
-40
-60
-80
Le potentiel d’inversion du courant est de + 65 mV.
b) Les concentrations intracellulaire et extracellulaire en sodium de la cellule sont les
suivantes : [Na+] i = 10 mM [Na+] e = 130 mM.
Calculez le potentiel d’équilibre du sodium. Que peut-on dire de la nature du courant étudié ?
Eeq = -60 log(10/130) = + 67 mV.
Le potentiel d’équilibre de l’ion sodium est très proche du potentiel d’inversion du courant
étudié. Il est probable que le courant en question soit un courant sodique.
Etienne Roux 8 UFR SV
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compléments de réponse et précisions
équation de Goldman-Hodgkin-Katz (GHK)
L’équation de GHK est dite également équation de champ constant, car elle repose sur
l’hypothèse que les ions traversent la membrane plasmique indépendamment les uns des
autres dans un cham électrique constant. Il s’agit d’une simplification par rapport à la réalité,
mais
Pour un ion donné S, l’équation donne la valeur du courant Is porté par cet ion selon la
formule suivante :
( − ZFV
VF 2 [S ]i − [S ]e e
)
RT
I s = Ps Z s2 ×
RT ( − ZFV RT )
1− e
Ps : perméabilité de l’ion Zs : valence de l’ion V : différence de potentiel
F : constante de Faraday R : constante des gaz parfaits T : température
[S]i : concentration intracellulaire [S]e : concentration extracellulaire
La relation courant-potentiel n’est linéaire que lorsque les concentrations intra- et
extracellulaire sont égales.
La dérivation en voltage de l’équation de courant donne l’équation de GHK dans sa forme
classique. Si l’on veut tenir compte des ions divalents comme le calcium, la formule devient
un peu plus complexe :
RT P [K + ]i + PNa [Na + ]i + PCl [Cl- ] e + 4PCa [Ca 2 + ] i
E m = Ei − Ee = − log( K )
F + + -
PK [K ] e + PNa [Na ] e + PCl[Cl ]i + 4PCa [Ca ] e 2 +
Au repos, la perméabilité de la membrane plasmique pour le calcium est très faible et, en
pratique, on néglige sa participation au potentiel de repos et on ne le fait pas intervenir dans
l’équation de GHK.
rôle du Cl - dans le potentiel de membrane
Dans de nombreuses cellules nerveuses et musculaires de Vertébrés et d’Invertébrés, il
n’existe pas de transport actif des ions Cl-. Le chlore se distribue alors passivement de part et
d’autre de la membrane plasmique. Par conséquent, à l’équilibre, le potentiel d’équilibre du
Cl- est égal au potentiel de membrane. Le Cl- ne participe donc pas au potentiel de repos, et on
peut alors simplifier l’équation de GHK.
Lors de la dépolarisation due au potentiel d’action (PA), l’ion Cl- n’est plus à l’équilibre et il
y a un influx de Cl- dans la cellule, qui tend à s’opposer à la dépolarisation.
Dans certaines cellules, en particulier dans le muscle lisse, il exsite un transport actif de Cl- et
les concentrations ne sont pas à l’équilibre, la concentration intracellulaire étant plus
importante que celle prédite par un équilibre passif des ions. Dans ce cas, on ne peut donc pas
négliger la participation du Cl- au potentiel de repos.
Etienne Roux 9 UFR SV
DEUG SV 2 électrophysiologie réponses
équation de conductance
L’équation de conductance
Em = Σ Ex (gx /Σ gx )
est dite équation de conductance de corde (chord conductance equation). Ce nom fait
référence au fait que la conductance est la pente de la droite moyenne de la relation
courant/potentiel, droite passant par l’origine. L’équation de conductance de corde donne
donc une relation linéaire entre le courant et le potentiel. En réalité, cette relation n’est pas
strcitement linéaire, en particulier lorsque les concentrations ioniques de part et d’autre de la
membrane plasmique ne sont pas égales (cf. équation de GHK).
Parallèlement à l’équation de conductance de corde, on définit également la conductance de
pente (slope conductance), qui est la tangente, pour un point donné, de la courbe courant-
potentiel.
maintien des gradients de concentration en Na + et K +
Au repos, les concentrations en Na+ et K+ ne sont pas à l’équilibre, et les gradients de
concentrations sont maintenus par un mécanisme actif qui expulse les ions Na+ hors de la
cellule et capte les ions K+. Ces flux actifs nécessitent de l’énergie (cf. potentiel
électrochimique) et sont assurés par la pompe Na+-K + ATPase membranaire, l’énergie étant
fournie par l’hydrolyse de l’ATP.
Cette pompe a une stoechiométrie de 2 sur 3, c’est-à-dire que l’hydrolyse d’une molécule
d’ATP permet l’expulsion de 3 Na+ et de deux K+. Le transfert net de charge n’est pas nul,
une xcharge positive étant expulsée. La pompe est dite pour cette raison électrogénique. Cet
efflux de charge positive participe directement à l’établissement due différence de potentiel
transmembranaire négative.
La pompe Na+-K + ATPase membranaire intervient donc de deux manière dans l’établissement
du potentiel membranaire de repos :
• de manière directe par son effet électrogénique. La participation directe au potentiel de
membranen dans la plupart des cellules, est cependant assez faible (de l’ordre de 5 mV) ;
• de manière indirecte en maintenant les gradients de concentration en potassium et en
sodium. En effet, ces deux ions sont, dans la plupart des cellules, les plus perméants au
repos, et leurs différences de concentration intra- et extracellulaires sont les principaux
facteurs de l’établissement du potentiel de repos.
éléments de bibliographie :
JM Dubois et al. Les Canaux ioniques cellulaires. Polytechnica, Economica, Paris, 1999
(ISBN 2-84054-052-2)
D. Richard et al. Physiologie des animaux, tome 1. Nathan, Paris 1997
(ISBN 2-09-190725-1)
C. Hammond & D. Trisch. Neurobiologie cellulaire . Doin, Paris, 1990
(ISBN 2-7040-0623-7)
RM Berne et al. Physiology, 4th ed. Mosby, St Louis, 1998
(ISBN 0-8151-0952-0)
N. Sperelakis. Cell Physiology, 2nd ed. Academic Press, San Diego, 1998
(ISBN 0-12-656972-x)
Etienne Roux 10 UFR SV
