L'ENSEMENCEMENT C'EST QUOI ?
En microbiologie : l’ensemencement est l’étape de transport entre votre milieu
(substance alimentaire ou biologique ou culture bactérienne) et votre nouveau
milieu de culture. à l’aide d’une « pipette Pasteur »ou anse de platine ou
écouvillonnage.
Qu’est ce qu’on doit faire avant commencer le travail ?
Travailler dans une zone stérile
La désinfiction de paillasse
Le pipteage a la bouche est strictement interdit
La pipette Pasteur ne sert qu'une fois seulement o
Tester la stérilité de boites coulées : incuber les boites dans une étuve à 35°C
pendant 18 à 24h, même haut de là, l’absence de culture bactérienne valide le
test.
L’ensemencement doit être effectué dans des conditions d’asepsie rigoureuses
à partir d’un prélèvement d’une colonie ou d’un bouillon bactérien avec une
anse de platine ou une pipette de pasteur
Les matériels utilisés
Matériel à utiliser Utilisation
1 Brûleur (Bec) Bunsen Pour créer une zone
stérile afin d’éviter ls
contamination de nos
échantillons(pour la
1 briquet sécurité, seul ce type de
briquet est utilisé)
1 bouillon de culture en éprouvette Pour le prélèvement
1 gélose ordinaire (contenue dans une boîte À ensemencer
de Pétri)
1 fil bouclé (Manche de Koch ou anse de Instrument pour le
platine) prélèvement et
l’ensemencement
1 crayon gras ou permanent Pour identifier la gélose
avec ce quel contient, le
nom de l’étudiant, la date
et la températude
d’incubation
1 support à éprouvette Pour tenir le tube de
bouillon avant et après le
prélèvement
Mode opératoire
Ensemencement sur milieu liquide On peut ensemencer un milieu liquide :
-soit à partir d’un produit liquide, on met quelques gouttes dans le milieu à
ensemencer avec pipette de pasteur,
-soit à partir d’un produit solide, écraser la colonie prélevée à l’aide d’une anse
de platine ou pipette de pasteur sur la paroi du tube, pour obtenir une
suspension homogène. Ecraser la colonie a la surface de la paroi du tube et
bien mélangé avec le milieu liquide