Service de Biologie

de la Reproduction

NEURULATION ET MODELAGE DU MESODERME

(fin 3e semaine et 4e semaine du développement)

I. Neurulation

Pr. Manuel MARK

Faculté de Médecine et Hôpitaux Universitaires de Strasbourg
 NEURULATION: DEFINITION

La neurulation est la transformation de l'ectoderme médian en neurectoderme, dont dérivent:

- le tube neural (= ébauche du Système Nerveux Central, SNC);
- les crêtes neurales
(à l'origine de l'essentiel du Système Nerveux Périphérique, SNP).

ectoderme

CCN
en train
de migrer

Tube neural
Chorde
 - La neurulation comporte 3 stades : plaque, gouttière et tube neural.

Fin de la 3e semaine

4e semaine

Coupes transversales
d’embryons aux 3
stades de la neurulation
 NEURULATION: STADE DE LA PLAQUE NEURALE

Membrane bucco-pharyngienne
Ebauche de
l’encéphale
Mésoderme préchordal
(vu par transparence)

Ebauche de
Canal chordal
la moelle
(vu par transparence)

Reste de la ligne primitive

Disque embryonnaire en vue dorsale

La plaque neurale apparaît au jour 18, soit avant la formation du premier somite (jour 20);
elle progresse en direction caudale.
 Mb bucco-pharyngienne

Ebauches cardiaques

La plaque neurale est située

Plaque neurale
au dessus du mésoderme
axial. Chorde Plaque
neurale
(18 jours)
Mésoderme
para-axial

Noeud
Mésoderme latéral
Ligne primitive

Epithélium
Mb. cloacale amniotique
Allantoïde Somatopleure e.e.

Splanchnopleure e.e.

Endoderme de la v.v.
 L’INDUCTION NEURALE: EXPERIENCE DE SPEMANN ET MANGOLD

Cette expérience (1924) prouve que la différenciation de

l'ectoderme en neurectoderme s'opère en réponse à des
signaux inducteurs verticaux (sous la forme de
molécules diffusibles), sécrétés par le mésoderme axial.
 Les inductions embryonnaires se réalisent:
- sur de courtes distances (quelques dizaines de microns au
maximum);
- soit par contact direct entre 2 tissus (ex: par des molécules
d’adhésion), soit par un facteur paracrine.
 Elles mettent en œuvre:
- un tissu inducteur (sécrétant, par exemple, une molécule
inductrice) qui stimule
Hans Spemann (1869-1941). - un tissu compétent (à proximité du tissu inducteur et
Prix Nobel de Médecine et de exprimant des récepteurs spécifiques), afin d’en modifier la
Physiologie en 1935 destinée
 L’INDUCTION NEURALE: EXPERIENCE DE SPEMANN ET MANGOLD

Future
région Zone
ventrale DONNEUR marginale RECEVEUR
dorsale
Gastrula de tritons, début de la gastrulation , vues externes.
(Rq: L’embryon des amphibiens au stade de la gastrulation est sphérique , celui de l’Homme
est plan et discoïde)
Des embryons provenant de 2 espèces sont
utilisés: espèce à pigmentation foncée /espèce
non pigmentée. Ce stratagème permet
d’identifier les tissus du greffon de ceux de
l'hôte, sur la base de la pigmentation. Axe embryonnaire surnuméraire
DONNEUR RECEVEUR
greffon EXPERIENCE DE
SPEMANN ET MANGOLD

Future Axe normal

région RECEVEUR
Vue dorsale ventrale Coupe longitudinale

Tube neural
Axe dérivé du receveur
surnuméraire Chorde entièrement
dérivée du greffon

Le système nerveux de l’axe surnuméraire

provient exclusivement de l'hôte (= embryon
receveur) et est induit par le greffon Coupe transversale
L’INDUCTION NEURALE: EXPERIENCE DE SPEMANN ET MANGOLD
(mécanismes cellulaires)

Le crapaud Xénope, un animal modèle en Biologie du Développement

Vertébré, dont les embryons:

- sont de grande taille;
- sont accessibles aux manipulations microchirurgicales;
- peuvent être obtenus en grandes quantités.
(…mais ne sont pas bien adaptés aux études génétiques )
 L’INDUCTION NEURALE: EXPERIENCE DE SPEMANN ET MANGOLD
(mécanismes cellulaires)

Zone marginale dorsale (ZMD = Têtard normal

organisateur de Spemann)
Dorsal
de l’embryon receveur pigmenté.

ZMD greffée provenant d’un

embryon donneur albinos. Ventral

Expérience de Spemann et Mangold reproduite chez le Xénope

De Robertis et Kuroda. Ann. Rev. Cell. Biol. 2004

Note. Un « organisateur » est un tissu de l’embryon capable d’induire la formation d’autres

tissus et de les agencer dans l’espace
 L’INDUCTION NEURALE: EXPERIENCE DE SPEMANN ET MANGOLD
(mécanismes cellulaires)
Ectoderme
Axe dorso-ventral
dorsal

Ectoderme
ventral
Blastocèle
Zone marginale
dorsale

Fin de la segmentation Début de la gastrulation

Le modèle: gastrula de Xénope (vue en coupe longitudinale).

Elle est sphérique et comporte une calotte animale correspondant au tissu

ectodermique et comprend:
- L’ectoderme ventral, normalement, destiné à donner l'épiderme.
- L’ectoderme dorsal normalement, destiné à donner le tissu nerveux.
 L’INDUCTION NEURALE: EXPERIENCE DE SPEMANN ET MANGOLD
(mécanismes cellulaires)
Ectoderme Neurectoderme
dorsal

Chorde

Zone marginale
Ectoderme ventral dorsale

Epiderme

Gastrula de Xénope, vue en coupe.

Elle est sphérique et comporte une zone marginale dorsale (= organisateur de Spemann), à
l’origine de la chorde qui s’invagine sous l’ectoderme dorsal.
L’ectoderme dorsal en contact de la chorde se différencie en neurectoderme
L’ organisateur de Spemann de l'embryon d'amphibien est fonctionnellement similaire à la ligne
primitive des mammifères.
 L’INDUCTION NEURALE: EXPERIENCE DE SPEMANN ET MANGOLD
(mécanismes cellulaires)
Greffon= zone
marginale dorsale du
donneur

Région
ventrale Zone marginale
greffée du dorsale du receveur
receveur Coupe selon l’axe
Vue externe
antéro-postérieur

1. Dans le conditions physiologiques, l’ectoderme ventral donne de l'épiderme.

2. Expérimentalement, l’ectoderme ventral adopte une destinée neurale au contact de la
chorde qui est dérivée de la ZMD greffée.

Dans le conditions normales, la ZMD est responsable de l’induction neurale.

 L’INDUCTION NEURALE: MODELE DU CERVEAU PAR DEFAUT
(bases moléculaires)

Des données plus récentes indiquent que l'induction neurale correspond à une

suppression de la différenciation épidermique. C'est le « modèle du cerveau par

défaut ».

(qui est tout à fait compatible avec celui de Spemann).

L’INDUCTION NEURALE: DEMONSTRATION DU MODELE DU CERVEAU PAR DEFAUT

De nombreuses cellules présentes dans l’organisme adulte peuvent être distinguées sur des
critères morphologiques (= fondement de l’histologie et de l’anatomopathologie).

La plupart des cellules embryonnaires sont morphologiquement indifférenciées (=

impossibles à distinguer les unes des autres en microscopie optique ou électronique après une
coloration standard), d’où la nécessité de recourir
à des marqueurs moléculaires (soit ARNm, soit protéines), spécifiques du tissu qui est analysé.
Ces marqueurs seront détectés soit par l’hybridation in situ, soit par l’immunohistochimie.

- @N-CAM (molécule d’adhésion cellule-cellule) = neurectoderme

- @ Kératine épidermique (filament intermédiaire) = épiderme
- @ Brachyury (Bra) (facteur de transcription) = mésoderme
ont été utilisé dans les expériences de cultures d’explants suivantes….
L’INDUCTION NEURALE: DEMONSTRATION DU MODELE DU CERVEAU PAR DEFAUT

Epiderme
Calotte animale intacte (= épithélium de la peau)

Mésoderme

Zone marginale dorsale seule

Mésoderme +
Tissu nerveux

Co-culture calotte animale / zone marginale dorsale Cultures d’explants

Ca2+ Ca2+

Tissu nerveux

Calotte animale « dissociée » puis « réassociée »

 L’INDUCTION NEURALE: DEMONSTRATION DU MODELE DU CERVEAU PAR DEFAUT

Epiderme HYPOTHESE: un signal

Calotte animale intacte (épithélium de la peau) diffusible autocrine (= sécrété
Expression de la kératine épidermique par et agissant sur les cellules
ectodermiques) induit la
Cultures d’explants destinée épidermique.

La dissociation des cellules ectodermiques a pour effet de diluer ce facteur autocrine dont la
concentration tombe en dessous du seuil permettant d’induire la destinée épidermique  les
cellules ectodermiques deviennent, par défaut, des précurseurs de cellules nerveuses.

Ca2+ Ca2+
Tissu nerveux
Expression de la N-CAM

Calotte animale « dissociée » puis « réassociée »

L’INDUCTION NEURALE: DEMONSTRATION DU MODELE DU CERVEAU PAR DEFAUT
La différenciation neurale provoquée par la dissociation des cellules ectodermiques de la
calotte animale doit pouvoir être empêchée par l'adjonction de l'inducteur de la
différenciation épidermique au milieu de culture.

Neurectoderme
(expression, par les cellules, de la N-CAM)

Test, sur des cultures de cellules ectodermiques préalablement dissociées puis réassociées,
Activine
de l’action d’inducteurs potentiels de la différenciation épidermique

Mésoderme
(expression, par les cellules, de Bra)

Bone Morphogenetic Protein 4 BMP4 est l’inducteur épidermique et,

(BMP4)
par conséquent, l’inhibiteur neural

Épiderme
(expression, par les cellules, de
la kératine épidermique)
 PROPRIETES DE L’INDUCTEUR NEURAL (OU INHIBITEUR DE L’EPIDERME)
1. In vitro: induire du tissu neural Ligne médiane
à partir de la calotte animale
intacte, en l’absence du tissu
inducteur physiologique.
Récepteur
non-ligandé
Ectoderme de BMP4
Neurectoderme

Noggine ou
chordine

BMP4
2. In vivo: être exprimé par la
(ligand)
ZMD et par la chorde avant
l’apparition du neurectoderme.
Chorde
 EN CONCLUSION

La différenciation de l'ectoderme en neurectoderme s'opère en réponse à des

molécules diffusibles (= les peptides chordine et noggine) sécrétées par la

zone marginale dorsale (ZMD ~ ligne primitive) et par son tissu dérivé (= la

chorde) et qui sont des inhibiteurs de la voie de signalisation de BMP4

Ces inducteurs neuraux diffusent « verticalement » de la ZMD

et de la chorde vers l’ectoderme
 GOUTTIÈRE NEURALE

Gouttière neurale

Mésoderme Au début de la 4e semaine

(22e jour), la plaque neurale
s'invagine vers le
mésoderme sous-jacent.
Chorde
(Rq: invagination =
internalisation d’un groupe
Endoderme de cellules).
 PLAQUE ET GOUTTIÈRE NEURALES

Bord sectionné
de l’amnios

Plaque
neurale

2 mm
Gouttière
neurale
Somites
cervicaux

Ligne Embryons humains

en vue dorsale
primitive

18 jours
(apparition de la plaque neurale) 22 jours (apparition de la gouttière neurale)
 GOUTTIÈRE NEURALE

La formation de la gouttière neurale résulte d'une constriction de l'apex (= le pôle apical, au contact
de la cavité amniotique) des cellules neuroépithéliales.

Anneau apical de
microfilaments
d’actine

Colchicine Cytochalasine B

aplatie cylindrique trapézoïdale

ECTODERME CELLULES NEURECTODERMIQUES OU NEUROÉPITHÉLIALES
 GOUTTIÈRE NEURALE

Ectoderme

Cellules aplaties à cuboïdes

(selon l’espèce)
Plaque neurale

Cellules cylindriques:
plus hautes que larges
Gouttière neurale

Cellules en forme de trapèze

GOUTTIÈRE ET TUBE NEURAL

Gouttière neurale

La formation du tube
neural résulte de la
Ectoderme
soudure, sur la ligne
médiane, des 2 lèvres

Mésoderme de la gouttière neurale.

Représentation schématique
d’une coupe transversale
de l’embryon
Endoderme
 TUBE NEURAL
Tube neural
Mésoderme
Mésoderme

Le tube neural se détache de

l'ectoderme qui se ferme au
dessus de lui. L'embryon est
alors au stade neurula

Chorde

Représentation schématique
d’une coupe transversale
de l’embryon au stade neurula
 GOUTTIÈRE ET TUBE NEURAL

La fermeture de la gouttière neurale:

- débute au 22è jour dans la future région
cervicale;
- progresse à la fois en direction céphalique
et caudale.
 GOUTTIÈRE ET TUBE NEURAL

Ebauches
cardiaques Neuropore antérieur
(fermeture à 24 jours)

Tube
neural

Embryons humains,
en vue dorsale

Gouttière Bord sectionné

neurale de l’amnios

22 jours 23 jours

Neuropore postérieur (fermeture à 26 jours)

 NEUROPORES

Neuropore antérieur

Neuropore postérieur

Embryon en vues dorsales

 TUBE NEURAL
encéphale

 Après la fermeture du neuropore antérieur, la

partie céphalique du tube neural

future moelle
(= encéphale, cerveau) se dilate et subit des
phénomènes de flexion.
 Au cours 5e semaine, la flexion de l’encéphale
sur la future moelle atteint 90°.

La portion la plus antérieure de l’encéphale (=

prosencéphale) forme, avec le mésenchyme et
l’ectoderme qui l’entourent, la masse fronto-
Embryon humain de 5 semaines
nasale.
 MECANISME DE LA FERMETURE DU TUBE NEURAL

Plaque neurale
Jour 18 Ectoderme

Interactions (moléculaires)
E-cadhérine
au niveau des Chorde homophiliques = entre des
membranes
cytoplasmiques molécules identiques, fonctionnant
Gouttière neurale à la fois comme récepteur et
Jour 22 ligand.

Ectoderme

N-cadhérine
Molécules de chordine
Chorde et de noggine
sécrétées par la chorde
 CRETE NEURALE

Précurseurs des cellules

de la crête neurale (CCN) dans
le neurectoderme
à sa jonction avec l’ectoderme

Chorde Quelques heures

avant la fermeture du
ectoderme
tube neural

CCN
en train
de migrer

Tube neural
D’après Wolpert et coll. Principles of Development, 2002
 INDIVIDUALISATION DE LA CRETE NEURALE

Ectoderme
(épithélium) Neurectoderme
(épithélium)

Cellule de
la crête neurale

Conversion épithélio-mésenchymateuse des précurseurs des cellules de la crête

neurale (CCN): arrêt de l’expression de la N-cadhérine, perte de la cohésion cellulaire,
acquisition de pseudopodes.
MIGRATION DE LA CRETE NEURALE

Crête neurale
vagale - Les CCN migrent par amiboïsme en
(originaires de la
suivant des « chemins » tracés dans la
jonction
cervico-occipitale) MEC des tissus embryonnaires.
- Fibronectine et laminine (= des
molécules matricielles) sont souvent
utilisées comme substrats migratoires.
Crête neurale
troncale - Leur migration n’est pas un
phénomène cellulaire-autonome (=
les CCN ne contiennent pas
l’information qui leur permettrait de se
diriger par elles-mêmes dans la
direction souhaitée).

La migration des CCN est contrôlée par leur environnement

 PROLIFERATION ET POTENTIALITES DE LA CRETE NEURALE

Potentialités des CCN

Les CCN se multiplient activement pendant (et après) leur migration et, au
terme de celle ci, se différencient en de très nombreux types cellulaires

Les cellules de la crête neurale sont multipotentes

 LA CRETE NEURALE ET LE SNP

Toutes les
Potentialités des CCN
cellules gliales
du SNP

Presque tous les neurones

du SNP

Autres types cellulaires

Les cellules de la crête neurale sont multipotentes

 NEURULATION ET MODELAGE DU MESODERME

II. Modelage du mésoderme

Plan:
 Dispositif initial.
 Modelage initial: formation du mésoderme para-axial, intermédiaire et latéral.
 Modelage secondaire: métamérisation, séparation du mésoderme latéral en 2 feuillets.
 DISPOSITIF INITIAL (fin de la 3e semaine)

Chorde

Ectoderme

Mésoderme

Cœlome
extra-emb. Endoderme

Le mésoderme forme 2 nappes de cellules, séparées par la chorde et continues

avec le mésoderme extra-embryonnaire
 MODELAGE DU MESODERME (fin de la 3e semaine)

Mésoderme
para-axial
ou somitique

Chorde
(mésoderme axial)

Cœlome
extra-emb.

Les cellules mésodermiques jouxtant la ligne médiane prolifèrent

pour former une région épaisse, le mésoderme para-axial, ou interne, ou somitique.
 MODELAGE DU MESODERME (fin de la 3e semaine)

Mésoderme
para-axial
ou somitique
Mésoderme latéral

Chorde
(mésoderme axial)

Cœlome
extra-emb

Dans le mésoderme latéral apparaissent des cavités qui confluent pour former les moitiés
droite et gauche du cœlome embryonnaire, cavité générale de l’embryon, à l’origine (chez
le fœtus) des cavités péricardique, pleurales, et péritonéale.
 MODELAGE DU MESODERME (fin de la 3e semaine)

Mésoderme
Mésoderme intermédiaire
para-axial
ou somitique
Mésoderme latéral

Chorde
(mésoderme axial)

Cœlome
extra-emb

Le mésoderme intermédiaire est une bande étroite de tissu unissant mésoderme para-
axial et mésoderme latéral.
MÉTAMÉRISATION OU SEGMENTATION DU MÉSODERME

Chez tous les vertébrés:

- le mésoderme para-axial (sauf celui de la tête),
- une (très petite) partie du mésoderme intermédiaire,
sont découpés en structures paires (blocs de
mésoderme = soit somites, soit néphrotomes ),
symétriques par rapport aux structures axiales
(= chorde et tube neural).
 METAMERISATION DU MESODERME PARA-AXIAL

Bord sectionné
de l’amnios
20 jours =
apparition de
Plaque la 1ere paire
neurale
de somites
Gouttière - dans la future
neurale région occipitale;
- progression
Somite jusqu’à l’extrémité
caudale;

Ligne - 3- 4 paires/jour;
primitive - arrêt vers 30 jours.

18 jours: stade présomitique 22 jours

 METAMERISATION DU MESODERME PARA-AXIAL

Seul le mésoderme para-axial antérieur à

la région occipitale ne se segmente pas.

Tube ~ 40 paires
neural
- 4 p. de somites occipitaux ;

Saillie des - 7 p. de somites cervicaux;

somites - 12 p. de somites thoraciques;
- 5 p. de somites lombaires;
Mésoderme
para-axial - 5 p. de somites sacrés;
encore
- 8 à 10 p. de somites coccygiens.
non segmenté

22 jours 23 jours
 LES
METAMERISATION DU SOMITES PARA-AXIAL
MESODERME

La grande majorité des

somites est formée au
cours de la 4e semaine.
22 jours
Vues externes d’embryons humains durant la 4e semaine
21 jours

24 jours 28 jours
 LES SOMITES

Mésoderme crânien
Progression de la somitogenèse non segmenté

Somites

Mésoderme
para-axial
non (= pas encore) segmenté

Un embryon au stade
12 somites
(vues dorsales)

Les somites forment des reliefs bien visibles à la face dorsale de l’embryon.
- Leur nombre sert à exprimer l’âge de l’embryon, entre 20 jours et la fin de la 4e
semaine qui correspond au stade de développement de 28 somites.
Au cours de la 4e semaine, l’embryon passe de 2 à 28 paires de somites
 METAMERISATION DU MESODERME INTERMEDIAIRE

Somites
Néphrotomes
~ 2-3 par somite

- Uniquement dans région cervicale;

- A l’origine du premier rein
de l’embryon (= pronéphros), très
transitoire et sans dérivés définitifs.
Chorde

Cœlome
extra-emb.
 MESODERME LATERAL
Somatopleure
Somites extra-embryonnaire
Mésoderme
intermédiaire

Somatopleure
Cœlome (embryonnaire)
extra-emb.

Moitiés droite et gauche

du cœlome Splanchnopleure
(embryonnaire). (embryonnaire)

Cavités:
- péricardique
Splanchnopleure
- pleurales extra-embryonnaire
- péritonéale
 MESODERME LATERAL

Plaque neurale Zone cardiogène

du mésoderme latéral
A B au jour 18

2 ébauches cardiaques primordiales

Bord sectionné et 2 aortes primitives
de l’amnios
se forment, par cavitation, dans le
mésoderme latéral situé antérieurement
Fossette primitive et de part et d’autre de l’extrémité
de la plaque neurale.
Sillon primitif

Vue dorsale (vers 18 jours)

 MESODERME LATERAL

Plaque neurale

Somatopleure
embryonnaire

Cœlome
embryonnaire
Zone cardiogène Splanchnopleure
embryonnaire
A B
Coupe transversale (vers 20 jours)

2 ébauches cardiaques et 2 aortes primitives se localisent ensuite dans la splanchnopleure

à la fin de la 3e semaine.
Situation de l’embryon au cours de la neurulation
Illustrations d’après:
Langman. Embryologie Médicale, Masson, 1976
 Larsen. Human Embryology, Churchill Livingstone, 1993
Moore. L’être Humain en Développement; Vigot, 1974

Wolpert. Principles of Development, 2007