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Techniques de Coloration de Gram et État Frais

Le document décrit les étapes pour réaliser une coloration de Gram et un état frais sur deux souches bactériennes afin de déterminer si elles sont Gram positif ou Gram négatif. Les étudiants doivent ensemencer des bouillons, réaliser des frottis pour la coloration de Gram, et observer au microscope pour noter leurs résultats.

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Le document décrit les étapes pour réaliser une coloration de Gram et un état frais sur deux souches bactériennes afin de déterminer si elles sont Gram positif ou Gram négatif. Les étudiants doivent ensemencer des bouillons, réaliser des frottis pour la coloration de Gram, et observer au microscope pour noter leurs résultats.

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Les examens microscopiques : coloration de

Gram et état frais

Objectifs : * Savoir réaliser une préparation microscopique colorée par la


technique de Gram
* Savoir différencier des bactéries à Gram positif des bactéries à Gram
négatif
* Déterminer le principe de la coloration de Gram
* Savoir réaliser une suspension bactérienne
* Savoir réaliser un état frais et comprendre son interprétation

1er jour

Manipulation : Etude de la coloration de Gram

Par binôme, vous disposez de deux souches pures présentées sur :

Ensemencer
un bouillon Souche notée K ou B
nutritif présentée sur gélose nutritive
ordinaire à inclinée
partir d’une
oëse

Réaliser par personne une suspension à partir de la souche sur GNi ( B ou K)

L'un des binômes réalisera l'autre binôme réalisera


4 frottis à partir de la suspension 4 frottis à partir de la suspension
bactérienne K bactérienne B

OBSERVATIONS MICROSCOPIQUES INDIVIDUELLES


de vos colorations mais également des préparations de votre binôme
(observation à l’objectif x 100)

COMPTE RENDU
Consigner vos observations dans un tableau

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NUMERO DU ETAPES DE LA RESULTATS OBTENUS
FROTTIS COLORATION DE ( observation à l’objectif x 100)
GRAM
Souche B Souche K

Frottis 1 Etape 1

Frottis 2 Etapes 1 et 2

Frottis 3 Etapes 1, 2 et 3

Frottis 4 Les 4 étapes

2ème jour

Manipulation !: Réalisation d’un état frais

A partir du bouillon nutritif ordinaire ensemencé le 1er jour, effectuer :


Un état frais (observer aux objectifs x10 et x 40)
Une coloration de Gram (observer aux objectifs x10, x 40 et
x100)

" Compte-rendu : Analyser, interpréter et conclure sur vos 2 manipulations.

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