CHAPITRE II
SPECTROSCOPIE
D’ABSORPTION DANS
L’UV-VISIBLE
I - DOMAINE UV-VISIBLE
Domaine UV-visible ≈ 800 - 10 nm
visible : 800 nm (rouge) - 400 nm (indigo)
proche-UV : 400 nm - 200 nm
UV-lointain : 200 nm - 10 nm
II - PRINCIPE ET REGLES DE SELECTION
Transition UV-visible (souvent 180 à 750 nm) :
saut d’un électron d’une orbitale
moléculaire fondamentale occupée à une
orbitale moléculaire excitée vacante.
La matière absorbe alors un photon dont l'énergie
correspond à la différence d'énergie entre ces niveaux
fondamental et excité.
Transitions dans UV-visibles énergies les plus
importantes de la chimie (13000 à 50000 cm-1 soit
160 à 665 [Link]-1)
Ces énergies Ordre de grandeur des énergies de
liaison des molécules
parfois Plus généralement
ruptures de transitions électroniques
liaisons entre différents
niveaux d’énergie des
molécules
III - ABSORPTION DE LA LUMIERE &
LOI DE BEER-LAMBERT - SPECTRE
D’ABSORPTION
lumière
monochromatique
solution
absorbante de
concentration C
cuve d’épaisseur l
Une partie de ce
rayonnement absorbée par
l’échantillon et une partie
transmise
Relations entre I0 et I d’après Bouguer, Lambert
et Beer
Intensité d'une lumière monochromatique
traversant un milieu où elle est absorbée
décroît de façon exponentielle :
I = I0e-klC
* I0 intensité de la lumière incidente
*I intensité transmise
*l épaisseur de la cuve (cm)
*C concentration des espèces absorbantes
*k constante caractéristique de l’échantillon
I = I0e-klC log(Io/I) = klC/2.3 = l C
log(I0/I) = A : absorbance
I/I0 = T : transmission
%T : transmittance
: coefficient d'extinction
molaire
caractéristique de la substance à une λ donnée
Si C est la molarité, en [Link]-1
loi de Beer-Lambert : A = - log T = l C
Validité de la loi de Beer-Lambert
s'applique pour des radiations monochromatiques
s’applique pour des solutions suffisamment diluées
pour ne pas modifier les propriétés des molécules
(association, complexation …)
SPECTRE D’ABSORPTION
• Spectre UV-visible : tracé de l’absorbance
en fonction de la longueur d’onde
(usuellement exprimée en nm)
• Bande caractérisée par position λmax , son
intensité reliée au coefficient d’extinction
molaire εmax
A = ε l C ; valeur de ε
indique si transition
permise ou interdite
Si une seule transition, couleur du complexe :
couleur complémentaire de la couleur absorbée
pendant la transition
Spectres d'un grand
nombre de molécules
corrélations entre Règles empiriques
structures et maxima
d'absorption de Woodward,
Fieser et Scott
pour diènes et
Tableaux avec composés
incréments reliés aux carbonylés
divers facteurs de insaturés
structure
Prévoir *
VI - APPLICATIONS DE LA
SPECTROSCOPIE UV-VISIBLE
VI.1 - Analyse qualitative
Peu de renseignements sur la structure
moléculaire
Le spectre UV ou visible ne permet pas
l’identification d’un produit mais celle
du groupement chromophore qu’il
contient.
VII.2 - Analyse quantitative
Très employée
Utilisation de la loi de Beer-Lambert
Ces mesures ont des applications
dans divers domaines
- En laboratoire :
Suivi de la cinétique d’une réaction
Mesure des constantes de dissociation d’acides
et de bases ou des constantes de complexation…
Dosage du benzène dans le cyclohexane
Détermination de la composition d’un mélange
Etude d’isomérie cis-trans ou de tautomérie
- Police scientifique & Expertise judiciaire
- Environnement :
Ozone dans l’air des villes
Métaux lourds dans l’eau
Mesure du phénol dans l’eau (à la bande 200-300
nm)
Matière organique, matières en suspension,
nitrates contenus dans l'eau
- Lutte antidopage
- Mesure des couleurs (industrie des peintures)
- Agroalimentaire (turbidité…)
En spectroscopie UV, la caféine présente
une bande caractéristique.
Sachant que l'absorbance est
proportionnelle à la concentration de la
substance , il va être possible de doser la
caféine par spectrométrie UV à 272 nm.
- Pharmacie :
dosage du fer dans un médicament
Dosage des molécules actives dans une
préparation pharmaceutique
Exemple d’application au dosage et à la
caractérisation de principes actifs
Aspirine
Spectre UV de l’acide
acétylsalicylique
- Parfums et cosmétiques
Les crèmes solaires contiennent des filtres UV
ou « écrans solaire ».
Ces filtres absorbent les radiations UV les plus
dangereuses pour la peau.
UV C 200-290 UV B 290-320 UV A 320-400
nm nm nm
Effets Biologiques Dangereux Coup de soleil Bronzage
Absorption Totale Partielle Faible
atmosphérique
Spectre UV du 4-méthoxycinnamate de [2-
éthyl-1-hexyl], Filtre typique UV B :
O
CH3O CH CH C C2H5
O CH2 CH
C4H9
1.2
1
Absorbance
0.8
0.6
0.4
0.2
0
250 300 350 400 450
Longueur d'onde / nm
ε 30 000 [Link]-1 à λmax = 310 nm
VII - TECHNIQUES EXPERIMENTALES
VII.1 - Appareillage
Etude des absorptions appareil appelé
spectromètre
Schéma de principe d'un spectromètre
d'absorption UV- visible double faisceau
Source
Rôle : fournir la radiation lumineuse
Région UV (190 à 400 nm), lampe à
décharge au deutérium
Région 350-800 nm : une lampe
à filament de tungstène
Monochromateur
Rôle : disperser le rayonnement
polychromatique provenant de la source
radiations monochromatiques
Afin d’éviter de détériorer l’échantillon avec
le rayonnement UV provenant de la source,
celui-ci est placé à la sortie du
monochromateur et ne sera donc traversé que
par un domaine étroit de longueurs d'onde.
Diviseur de faisceau ou photomètre
Lumière monochromatique sortant du
monochromateur séparée en deux faisceaux
compartiment de l’échantillon
compartiment de la référence
Le détecteur est relié à un enregistreur qui
permet de tracer un spectre d’absorption
de l’échantillon analysée
VII.2 - Echantillonnage
Composés étudiés dans divers états
physiques : gazeux
liquide
solide
L’ étude se fait en solution diluée
VII.2.1 - Solvants
Solvant doit :
- dissoudre le produit
- être transparent dans la région d’étude
Exemple : Hexane utilisable comme solvant à
des longueurs d’onde supérieures à 210 nm
VIII.2.2 - Cellules
* Solution placée dans une cellule ou cuve
* Différentes épaisseurs
* En quartz pour le domaine UV-visible
* En verre pour le domaine visible
