La réplication de l’ADN
SBI4U
L. Kutchaw
http://www.youtube.com/watch?v=
HBwyNrkYnp0
http://www.youtube.com/watch?v=
-qAr5Ib_6as
Le 3 théories de la réplication de l’ADN
La théorie conservatrice: la réplication comporte la
formation de deux nouveaux brins fils à partir des
matrices parents et ces deux nouveaux brins s’unissent
ensuite pour créer une nouvelle double hélice.
La théorie semi-conservatrice: chacune des
molécules filles se compose d’un brin parent et d’un
nouveau brin.
La théorie dispersive: les molécules parents sont
décomposées en fragments et que les deux brins d’ADN
filles sont constitués d’un assortiment d’ADN parental et
de nouvel ADN.
Hypothèse: La réplication de l’ADN est semi-conservatrice
Protocol:
1. Croissance
2. Transfère des bactéries
bactérienne dans un
dans un milieu N 14 (léger)
milieu N 15 (lourd)
3. Échantillonnage à 0
4. Avant la première réplication l’ADN minutes, 20 minutes
parent est 100% N 15 (lourd) (une réplication
complète) et 40 minutes
(2 réplications
complètes)
Résultats:
Après 2 générations, la
moitié de l’ADN est hybride
(N14/N15) et l’autre moitié
est léger (N14)
Conclusion: Le modèle de réplication est seulement possible si chaque
molécule d’ADN contient un brin parent (N15) et un nouveau brin (N14). Donc,
la réplication de l’ADN est semi-conservatrice.
Meselson et
Stahl 1957
Donc, la
réplication de
l’ADN est semi-
conservatrice!
La réplication de l’ADN ce fait en trois
étapes
L’activation:
À l’origine de réplication (100 à
200 pb), les enzymes se lient à
l’ADN et sépare les deux brins
pour former une bulles de
réplication.
L’ADN polymérase s’insère
entre les deux brins et catalyse
l’ajout de nucléotides
complémentaires formant un
nouveau brin d’ADN (cet
endroit est la fourche de
réplication)
Les hélicases sont responsable
de dérouler l’ADN et de
maintenir cette conformation
Chez les eucaryotes, les
fourches de réplication se
déplacent 10X plus lentement
que chez les procaryotes
L’élongation
ADN polymérase lie des nouveaux nucléotides
seulement à l’extrémité 3’ (-OH). Donc, l’élongation se
passe dans la direction 5’ à 3’
L’amorce est utilisé point de départ à l’ancrage. Cette
séquence est synthétisé par primase.
Sur le brin complémentaire, l’élongation doit aussi se
passer dans la direction 5’ à 3’ mais pas en brin
continu…l’ADN polymérase forme des fragments
d’Okazaki.
Suite…
Le brin principal (avancé): répliqué dans le sens
5’-3’ sans interruption
Le brin secondaire (retardé): l’ADN polymérase
ajoute des nucléotide à l’extrémité 3’, ADN
ligase colle les brins ensemble (catalyse la
formation de liaisons phosphates entre les
nucléotides)
Revue: élongation
L’achèvement
À la fin de l’élongation
deux nouvelles
molécules filles sont
(presque) terminées.
Elles s’enroulent
automatiquement dans
leur structure
hélicoïdale.
MAIS il y a un
problème à chaque
extrémité du
chromosome linéaire!
Et là! Le secret de la vie éternelle?
Le problème: L’ADN polymérase coupe
une amorce d’ARN d’un fragment
d’Okazaki, l’espace est comblé par les
nouveaux nucléotides ajoutés à l’extrémité
3’ mais l’extrémité 5’ demeure un brin
simple.
La cellule n’a pas d’enzymes capables de
travailler dans le sens 3’-5’!
Les nucléotides du brin simple se
détachent: le résultat est des molécules
d’ADN filles plus courtes que la molécule
d’ADN mère.
(fig. 7.27)
La vie nous étonne encore!
Les télomères: sont les séquences de
nucléotides retrouvés à l’extrémité des
chromosomes linéaires.
La télomérase est une enzyme qui
prolonge les télomères.
Les répétions des télomères et le cancer.
L’érosion des télomères entraîne la mort
de la cellule (sénescence).
L’activité du gène qui code la télomérase
est directement liée à la longévité de la vie
et le cancer.
Les cellules cancéreuses qui évite le
mécanisme naturel de l’apoptose
démontre une activité acrue de la
télomérase.
Suite…
http://ww
w.nature.
com/nrd/j
ournal/v5/
n7/box/nr
d2081_B
X1.html
La vérification et la correction
La réplication de l’ADN semble ordonné mais en
réalité elle est chaotique, donc il est nécessaire
d’avoir un mécanisme de correction en place.
Le taux d’erreur: une erreur tous les 10 000 à
100 000 nucléotides.
L’ensemble des enzymes qui participent à la
réplication de l’ADN est connu sous le nom de
machine à répliquer
La fidélité finale de la réplication est de
1/10 000 000.
Les télomères et la télomérase
La découverte et
leur fonction de
protection
chromosomique:
Herman Muller et
Barbara McClintock Les chromosomes humains
proposent les comportent des milles de
caractéristiques de répétition d’une séquence de 6
nucléotides aux extrémités
manière indépendante <<TTAGGG>>
en 1930
Muller, 1930
Étudiant de Thomas Hunt Morgan
Induit des mutations aléatoires dans les
chromosomes de la mouche du vinaigre
(Drosophilia) et remarque que les
extrémités chromosomiques semble
résister aux rayons-X.
Il propose que les extrémités doivent
comporter des gènes de <<protection>>
Il a été accordé le prix Nobel en 1946 pour
la génération de mutations par l'irradiation
aux rayons-X
Il n’avait pas tout à fait raison…
McClintock, 1941
Modèle: maïs
Étudie le conséquences des
ruptures chromosomiques en
produisant des chromosome de
maïs dicentriques qui se
divisent lors de la mitose.
Elle remarque que les
extrémités (télomères) sont
instables (fragiles) une fois
brisés et ont tendance à se lier
à n’importe quelle autre
séquence simple à proximité.
Suite…McClintock
En répétant son protocole avec divers types de cellules chez le même
organisme modèle, les cellules embryonnaire donnaient des
résultats intéressants. Une fois l’extrémité chromosomique a subit une
rupture, un mécanisme semble <<réparer>> la séquence. Aujourd’hui
les scientifiques attribuent cette réparation à <<télomérase>>, une
enzyme active chez les cellules souches, les cellules embryonnaires
et certaines cellules somatiques.
Mise en application
Le traitement du cancer à l’aide de la
composition de l’ADN riche en guanine.
Information:
les oncogènes et les télomères sont riches en guanine.
Ces sections d’ADN (et d’ARN) peuvent prendre un structure
secondaire nommé G-quadruplex
Les traitements contre le cancer implique le développement
de drogue qui peuvent ciblé et se lié au G-quadruplex
La liaison peut empêcher l’élongation des télomères ou
inciter l’apoptose des cellules cancéreuses
Düchler, 2012.
(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22424091)
Ressources supplémentaires
http://www.nature.com/scitable/topicpage/t
elomeres-of-human-chromosomes-21041
http://mon.ftp.a.moi.chez-
alice.fr/Ecole/DEUG_SV2/Moleculaire/Mol
ecul2.pdf
http://www.biofondations.gc.ca/francais/Vi
ew.asp?x=738
Trop pertinent au cours de
Biologie 12 pré-u!!!
Nous allons visionner la version française
ensemble en classe (la qualité de l’image
laisse un peu à désirer) mais la version
anglaise sur Netfilx est disponible en HD.
