TP de biochimie
TPN°3 : Détermination d'indice acide d'un
triglycéride
Gherib Asma
2016
2ème Année Biologie Tronc commun LMD -Université Mentouri 1-
Table des
matières
Objectifs 3
I - TP N° 3 :Détermination d'indice acide d'un triglycéride 4
1. Définition d'indice d'acidité : ................................................................................................................. 4
2. Principe : .................................................................................................................................................. 5
3. Mode opératoire : ................................................................................................................................... 5
4. Exercice : Compte rendu ........................................................................................................................ 5
Questions de synthèse 6
Abréviations 7
Bibliographie 8
Objectifs
-Apprendre à utiliser les outils de laboratoire.
-Connaître les notions de base des oses (chiralité, énantiomères et
stéréoisomères...).
-Identifier un ose inconnu grâce à des réactions chimiques spécifiques.
-Calculer l'indice acide d'un corps gras (huile végétale).
-Identifier les acides aminés à partir des réactions colorimétriques.
-Calculer les constantes de dissociation d'un acide aminé : PK et Phi.
-Apprendre la manipulation de la chromatographie de partage liquide-liquide.
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TP N° 3 :Détermination d'indice acide d'un triglycéride
TP N° 3 :Détermination
d'indice acide d'un I
triglycéride
Définition d'indice d'acidité : 4
Principe : 5
Mode opératoire : 5
Exercice : Compte rendu 5
Objectifs
-Calculer l'indice acide d'un corps gras (huile végétale).
Les triglycérides ( aussi appelés triacylglycérols ou TAG) sont des glycérides dans lesquels les trois
groupes hydroxyle du glycérol sont estérifiés par des acides gras. Ils sont le constituant principal
des graisses animales et des huiles végétales tel que l'huile d'olive.
Structure d'un triglycéride
1. Définition d'indice d'acidité :
C'est la masse en « mg » deKOH> nécessaire pour neutraliser l'acidité libre contenue dans 1g de
*
corps gras.
L'indice d'acidité permet d'apprécier la quantité des acides gras libres R-COOH, résultat d'une
hydrolyse éventuelle du triglycéride (lipase, humidité, chaleur....).
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TP N° 3 :Détermination d'indice acide d'un triglycéride
2. Principe :
Dans une matière grasse l'acidité résulte uniquement de la présence de carboxyles appartenant
à des acides gras :
réaction
Le dosage peut être direct: une masse de corps gras est dissoute dans un mélange
éthanol-éther préalablement neutralisé par KOH ou NaOH>, en présence de phénol phtaléine.
*
L'acidité libre est dosée par la potasse alcoolique titrée, en présence de phénol phtaléine. Cette
méthode présente l'inconvénient de placer la potasse alcoolique dans la burette.
Le dosage peut se faire au retour : dosage retenu pour le TP : La prise d'essai de matière grasse
est dissoute dans un excès de KOH. L'excès est dosé par une solution titrée d'acide
chlorhydrique HCL.
3. Mode opératoire :
Pour ce dosage le triglycéride homogène est une solution isobutanol-éthanolique (40g/l). Deux
échantillons :
1- Huile d'olive (HO).
2- Huile végétale du commerce (HV).
Dans une fiole d'erlenmeyer, verser : 10ml KOH (0,2N) + 10ml de HO + 2à 3 gouttes de phénol
phtaléine, titrer le mélange par une solution d'HCL( 0,2N),jusqu'à décoloration stable qui dure
30sec.
Témoin : 10ml KOH (0,2N) +10ml solvant isobutanol-éthanol + 2à 3 gouttes de phénol
phtaléine, titrer le mélange par une solution d'HCL (0,2N), jusqu'à décoloration stable qui dure
30sec.
Procéder de la même manière avec l'HV.
Calculer l'indice d'acidité des deux échantillons.
Conclure
4. Exercice : Compte rendu
Rédiger un compte rendu par binôme qui comporte les parties suivantes :
-Principe
-Mode opératoire
-Calcul
-Interprétation des résultats
-Conclusion
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Questions de synthèse
Questions de synthèse
-Comparer entre les deux valeurs calculé[Link] une justification.
..........................................................................................................................................................................................................
..........................................................................................................................................................................................................
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Glossaire
Abréviations
KOH : Hydroxyde de potassium
NaOH : Hydroxyde de sodium
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Références
Bibliographie
Pr. Meziani Z.(2009).Recueil de travaux pratiques de biochimie.Département de Biochimie
Lecoq R.(1965). Manuel d'analyses alimentaires et d'expertises usuelles Tome1 Edition
[Link] et Cie.
AUDIDIE.C.L.,[Link].F (1984). Manipulations d'analyses biochimiques. Edition Fec.
Et DOC. Lavoisier. Paris
DUBOIS. M. Gilles K.A HAMILTON. J.K REBERS. P.A ; SMIT.F.(1956) : Colorimetric method of
determination of sugars and related substances. [Link].28
DURAN :(1979) VERRERIE de laboratoire édition SCHOTT. MAINZ
ROGER.F : Les industries des corps gras Biochimie-Extraction-Raffinage p. 111-114 ;333-334
