La chromatographie sur couche mince (ccm)
Principe gnral de la chromatographie:
Note : On qualifie de polaire un compos qui possde un moment dipolaire, plus le module de ce moment est lev, plus le
compos est dit polaire.
On dpose lentre du systme un mlange de corps sparer. Le support o lon dpose les corps est appel phase
stationnaire. Elle est en gnral assez polaire, voire ionique ( base de silice : difice macromolculaire minral fait de
liaisons trs polarises Si-O ou dalumine , constitu de liaison Al-O, on peut y voir un empilement dions Si4+ et O2- ou Al3+ et
O2- ). Les corps seront entrans par un vecteur liquide ou gazeux appel luant. Lluant est moins polaire que la phase
stationnaire.
Le temps que met chaque corps dpend de la diffrence dattraction quexerce sur lui lluant et la phase stationnaire (on peut
comparer cela des enfants (corps entraner) qui se promnent trans par leurs parents (luant) dans des magasins de jouets
(phase stationnaire). Plus les corps sont polaires, plus il faut un luant polaire pour les faire migrer.
La vitesse d'lution d'un compos donn, sur un support donn et avec un luant donn, est caractristique de ce corps.
Sur colonne ionique , les composs ioniques sont quasiment fixes, les produits protiques migrent difficilement, les composs
polaires plus facilement et les composs apolaires (exemple : alcne), trs facilement.
Aussi la chromatographie est une mthode commode , soit de dtection des diffrents constituants d'un mlange , soit de
sparation de ces constituants ( chromatographie dite prparative).
Il existe diffrents types de chromatographies :
-chromatographie en phase gazeuse (cpv : phase stationnaire solide, luant gaz)
-en phase liquide sur colonne (sous pression normale, moyenne ou haute c.a.d : 1 10 ou 100 bars environ : phase
stationnaire solide , luant liquide).
-sur couche mince (silice dpose sur un support inerte : ccm, luant liquide qui monte par capillarit)
-sur papier (la silice est remplace par un papier spcial)
Nous allons tudier la ccm .
La chromatographie sur couche mince CCM.
1) Prparation de la chromatographie
Dans un bocal, introduisez environ un cm de mlange luant. Fermez le bocal et attendez 10 minutes au moins pour que
l'atmosphre se sature en luant ( sinon , lors de sa monte , l'luant s'vaporera).
Dcoupez soigneusement une plaque adapte aux dimensions du bocal. Faites bien attention raliser une dcoupe franche
(cutter). La plaque se dcoupe retourne (face stationnaire loppos du cutter).
Tracez un lger trait de stylet en bas de cette plaque, une hauteur telle qu'il se trouve au dessus de l'luant quand la plaque
sera dans la cuve. (ne pas confondre lger trait et labour)
2) Ralisation
Prenons par exemple le cas de deux produits A et B que je cherche identifier dans un mlange. Je mets sparment A , B
et le mlange en solution dans un peu de solvant trs volatil ( ther , alcool ou l'luant par exemple). Je dpose , en trois
points de la ligne rgulirement espacs et loignes du bord , une goutte de chacune des solutions. J'effectue cela
l'aide d'un capillaire , et je ralise des taches assez petites ( 5 mm de diamtre maxi).
J'introduis la plaque dans le bocal que je referme. L'luant commence monter par capillarit. Lorsque l'luant atteint
quasiment le haut de la plaque (mais imprativement avant qu'il ne soit parvenu tout en haut), je sort la plaque du bocal ,je
marque d'un coup de stylet le niveau atteint par l'luant, et je laisse l'luant scher l'air.
Je rvle les taches , soit avec de l'iode , soit en les clairant avec une lampe UV ( la silice tant recouverte de composs
photosensibles l'UV, les taches se distinguent de la couche de fond par une coloration diffrente) soit par un rvlateur
chimique.
La situation peut se prsenter comme suit:
___________________
___________________ F front de l'luant
* *
A
Nous avions dpos de gauche droite : A, le
mlange, et B .
*
----------------- O
_________________
le rapport RfA = OA/OF est caractristique du
constituant A pour ces conditions d'lution.
idem pour RfB.
Utilisez une pince pour dposer les plaques dans le bocal. Ne le remuez pas lorsquil contient une plaque. Si lluant fait
des vagues, il montera de faon irrgulire.
J-Y Magna
