LE PROCESSUS de CANCERISATION

Dr Jacqueline DUFFOUR
ONCOGENETIQUE

Le cancer une maladie de lADN

p
q

Le Processus de Cancrisation

La Transformation Cellulaire

Caractrisation dune cellule cancreuse

Etapes de la cancrisation

Bases molculaires de la cancrognse

Anomalies intrinsques

Gntiques

Epigntiques

Facteurs de risque initiateurs

Chimiques, physiques, biologiques

Facteurs de risque promoteurs

Chimiques, hormones, parasites

Caractres multi-tapes des cancers

Hypermthylation des promoteurs de certains gnes

Modifications des histones

Anomalies extrinsques

Les diverses lsions gntiques

Les diffrents gnes impliqus dans loncognse (oncognes, gnes suppresseurs
de tumeur, de rparation de lADN..)

tapes de la transduction du signal de prolifration

Exemples: cancer colorectal

Les prdispositions gntiques aux cancers

Le Processus de Cancrisation

Le Processus mtastatique

Langiognse
Le processus de migration cellulaire

Les bases molculaires des thrapies anticancreuses

Les molcules cytotoxiques

En amont, au niveau et en aval de lADN

Les molcules cytostatiques: thrapies cibles

Perspectives thrapeutiques

La thrapie gnique et limmunothrapie

La Transformation cellulaire
Le cancer est li la prolifration anarchique et incontrle des cellules
rsultant dune perturbation de lhomostasie tissulaire
LHomostasie tissulaire est

Un Fragile quilibre entre:

La prolifration cellulaire
La diffrenciation ou la spcialisation irrversible des cellules
Llimination
Par snescence
Par apoptose

La transformation noplasique rsulte dune perturbation de ce

fragile quilibre

I- La Transformation cellulaire

Cet quilibre est maintenu par signaux (facteurs de

croissance, hormones, cellules voisines, matrice
extracellulaire) sous la responsabilit de gnes

La rupture de cet quilibre

Prolifration cellulaire incontrle
Insensibilit aux signaux extrieurs

Les causes de cette rupture:

Anomalies des gnes contrlant la vie et la prolifration
des cellules

Le cancer est en tout 1er lieu une maladie de lADN et

lenvironnement est associ ce processus

La Transformation Cellulaire

1-2 Caractristiques
dune tissu cancreux

Le passage dun tissu

normal un tissu
cancreux passe par
diverses tapes:
Tissu Normal

Dysplasie

Cancer in situ

C invasif

Mtastase

La Transformation Cellulaire

1-2 Caractristiques dune cellule cancreuse

Le passage dune cellule normale une cellule

cancreuse passe par diverses tapes:

1- Indpendance vis--vis des signaux de prolifration

2- Insensibilit aux signaux anti-prolifratifs

Transduction du signal et activation du cycle cellulaire

3- Rsistance lapoptose

4- Prolifration illimite: immortalit

Ractivation de la tlomrase

5- Capacit induire langiognse

6- Capacit dinvasion tissulaire et de diffusion
mtastatique

1 et 2 - Indpendance vis--vis des signaux

de prolifration et anti-prolifration
Transduction du signal cellulaire

1 et 2 - Indpendance vis--vis des signaux de

prolifration et anti-prolifration

Transduction du signal cellulaire et activation cycle cellulaire

1 et 2 - Indpendance vis--vis des signaux de

prolifration et anti-prolifration

Transduction du signal cellulaire et activation cycle cellulaire

La cellule cancreuse
3/ Apoptose

la cellule devient enfle

la membrane cellulaire clate

Perte de contact
avec autres cellules

condensation la fois
du noyau et du cytoplasme

mitochondries
et noyau intacts

Modifications
mitochondries

Condensation noyau
Corps apoptotiques

La ncrose est une mort

cellulaire dite accidentelle

l'apoptose est considre comme

une mort cellulaire ordonne ,

1-2 La cellule cancreuse

3/ Rsistance lapoptose

Arrt du cycle cellulaire

p53 - p21

fasR

bcl-x
bcl-2

bax

Apoptose
caspases
cytochrome c
dgradation de lADN

Absence dancrage
Mort des
cellules
Mitochondrie
Bcl2 drgul (+++) Apoptose
population cancreuse par insuffisance de destruction

La cellule cancreuse
4/ Immortalisation
Immortalisation = Maintien de la facult de prolifrer si milieu
adquat

Agents extrieurs

Les tlomres

Evnements mutationnels
alatoires

Extrmits des chromosomes constitues de squences rptes dont

lintgrit est assure par la tlomrase

Activit de la tlomrase

Perdue aprs la naissance (sauf cellules hmato)

Rle: assurer la stabilit de lextrmit des rom
Perte physio raccourcissements des tlomres jusqu longueur
critique
Au del = les cellules ne sont plus capables de se X Snescence
Ractivation de la tlomrase Immortalisation cellules (mais de
cellules en bon tat)

La cellule cancreuse
5/ LAngiognse

Definition
Formation de nouveaux vaisseaux sanguins partir de
vaisseaux existants (capillaires et veinules)
= novascularisation
Une tumeur solide ne peut pas se dvelopper au-del
dune certaine taille (1 2 mm3) en labsence de novascularisation Judah Folkman

Angiognse normale
dveloppement embryonnaire, croissance, cicatrisation,
menstruations
Angiognse pathologique
hmangiome
polyarthrite rhumatode
rtinopathies vaso-prolifratives
dveloppement tumoral

La cellule cancreuse
6/- Capacit dinvasion tissulaire et de diffusion
mtastatique.
Interactions cellule-environnement
Interactions cellule-environnement perturbes

Perte de linhibition de contact

Capacit de croissance des cellules transformes

Molcules en cause:

Protines de la matrice extracellulaire

= Intgrines: reconnaissent fibronectine, collagne, thrombospondine

(en rapport avec les rcepteurs membranaires)

Protines exprimes par les cellules voisines

Cadhrines: protines transmembranaires reconnaissent les cellules
voisines grce des molcules intracellulaires de liaison ( catnines
relies au cytosquelette)
Elles contribuent une meilleure adhrence des cellules entre elles

Gnes codant pour ces molcules dadhrence = gnes suppresseurs de

tumeurs

1-2 Etapes de la cancrisation

Le cancer est du une prolifration clonale ( partir dune seule cellule)

Le dveloppement dune tumeur survient par tapes successives

une seule altration de lADN ne suffit pas. Cest laccumulation de
plusieurs vnements gntiques ou pigntiques, rares et indpendants
qui permettent le dveloppement du cancer

Le gnome des cellules cancreuses sloigne de plus en plus de celui des

cellules normales

Avantage slectif des cellules tumorales/cellules normales

Dveloppement de /s populations cellulaires ayant acquis des modifications gntiques
supplmentaires confrant ce clone un pouvoir slectif (meilleur pouvoir de
prolifration de survie ou invasif)
Cet avantage sera transmis aux cellules filles

Instabilit gntique et cancer

Une cellule normale possde divers systmes de contrle de lintgrit de de son

gnome
La cellule cancreuse est caractrise par une instabilit gntique ( nombreuses
anomalies chromosomiques) lie une dficience des systmes de surveillance
et de rparation du gnome permettant la cellule daccumuler les altrations de
lADN

1-2 Etapes de la cancrisation

Consquences

Plus un cancer est dpist tt, plus les chances de

gurison

Au fur et mesure du dveloppement naturel dun

cancer, la chimiothrapie perd progressivement ses
chances defficacit:

+ une tumeur se dveloppe

- la fraction de cellules engages dans le cycle cellulaire

est grande
+ la diversit phnotypique avec apparition de clones
diffrencis chimio-rsistants

Une chimiothrapie a donc dautant plus de chances

dtre efficace quelle est applique prcocement

II-Bases molculaires de la
cancrognse

Le Processus de Cancrisation

La Transformation Cellulaire

Caractrisation dune cellule cancreuse

Etapes de la cancrisation

Bases molculaires de la cancrognse

Anomalies intrinsques

Gntiques

Epigntiques

Facteurs de risque initiateurs

Chimiques, physiques, biologiques

Facteurs de risque promoteurs

Chimiques, hormones, parasites

Caractres multi-tapes des cancers

Hypermthylation des promoteurs de certains gnes

Modifications des histones

Anomalies extrinsques

Les diverses lsions gntiques

Les diffrents gnes impliqus dans loncognse (oncognes, gnes suppresseurs
de tumeur, de rparation de lADN..)

tapes de la transduction du signal de prolifration

Exemples: cancer colorectal

Les prdispositions gntiques aux cancers

II-Bases molculaires de la cancrognse

Le cancer rsulte dune anomalie intrinsque de la cellule

rsultant daltrations de son gnome (ADN)
Ces anomalies de lADN peuvent tre dorigine gntique
ou pigntique
Ces anomalies gntiques peuvent tre dues
lintervention de facteurs exognes ou endognes
(dexposition)
Une lsion au niveau de lADN va entraner une mutation
ayant une certaine spcificit pour l'agent

Ex 1: agents alkylants atteinte frquente de l'O6 de la

guanine aboutissant une mutation G->T

Ex 2: hydrocarbures polycycliques une mutation base

purique vers T

Ex 3: radicaux oxydants (ou encore rayons UV) une double

mutation CC-> TT

II-Bases molculaires de la cancrognse

La prsence des ces anomalies gntiques lorigine du

cancer surviennent dans les cellules somatiques (90%)
Si ces anomalies gntiques surviennent dans les
cellules germinales (10% des cas)
Cancer
hrditaire

Prs de 300 gnes muts sont mis en cause dans le

processus de cancrisation

II- Bases molculaires de la cancrognse

II-1 Anomalies intrinsques

II-1-1 Les altrations gntiques survenant au cours de

la transformation maligne:

II-1-1-1 Diverses lsions gntiques

Mutations
Dltions chromosomiques
Translocations
Amplifications et rarrangements gniques
Modifications de lexpression ou de la fonction
biochimique des gnes touchs

II-1-1-2 Les diffrents gnes en cause

II-1-2 Les altrations pigntiques

II-Bases molculaires de la cancrognse

II-1-1-1 Diverses lsions gntiques

Altrations au cours de la rplication (accidentelles )

Altrations en dehors de la rplication (physique,
chimique, biologique)

Mutations

Par substitution, cest dire remplacement dun

nuclotide par un autre
Par dltion, cest dire suppression dun ou de
plusieurs nuclotides
Par insertion, cest dire addition dun ou de
plusieurs nuclotides

Les dltions et insertions

de 1 ou 2 nuclotides, dcalant le cadre de lecture (codons)

de 3 nuclotides, aboutissant la suppression dun acide
amin dans la protine exprime
de grande longueur, pouvant supprimer lexpression dun ou
de plusieurs exons, voire dun gne entier.

Bases molculaires de la cancrognse

Consquences

Mutations sans changement du cadre de lecture

Mutations au niveau des introns

Souvent sans consquences mais parfois empchent

lexcision-pissage et la fixation de facteurs de
rgulation

Mutations pouvant modifier lexpression dun gne

Silencieuses (codons codant pour le mme AA ou de mme

famille)
Faux-sens (AA diffrent)
Non-sens (codon stop)

squence rgulatrice de la transcription

Initiation de la transcription

Mutations avec dcalage du cadre de lecture

Graves car protine compltement diffrente (non

fonctionnelle)

Bases molculaires de la cancrognse

Ces altrations gntiques

Activent les gnes qui stimulent la croissance

cellulaire et la prolifration (Oncognes)
= tous les points de contrle de la division cellulaire
Inactivent les gnes qui linhibent (Gnes
suppresseurs de tumeurs GST)
Inactivent des gnes qui rparent lADN et
maintiennent lintgrit du gnome

Plusieurs altrations gntiques (sur diffrents gnes) sont

ncessaires pour transformer une cellule normale en cellule
cancreuse
Etapes multiples de la cancrognse

II-Bases molculaires de la cancrognse

II-1 Anomalies gntiques intrinsques

II-1-1-2-Les diffrents gnes

Oncognes et proto-oncognes

Gnes suppresseurs de tumeurs

Gnes gardiens de lintgrit du gnome

(de rparation de lADN)

ONCOGENES et Gnes SUPPRESSEURS de Tumeur

Gnes et cancer

ONCOGENES

mutations
dominantes
gain de fonction

GENES SUPPRESSEURS

mutations rcessives

perte de fonction

ORIGINE DES ONCOGENES

le plus souvent drivent de gnes cellulaires

normaux ou proto-oncognes
("c-onc")
rarement origine virale= formes altres de
gnes dorigine cellulaire (proto-oncognes),
capturs et modifis par les rtro-virus
("v-onc")

Oncognes viraux

Virus oncognes:

Virus ARN:

HTLV (lymphomes cellules T et leucmies)

HIV (sarcome de Kaposi)

Virus ADN

HPV Papilloma V (cancer du col utrin)

EBV Herpes V ( mononuclose, Mal de Hodgkin,
Lymphome de Burkitt)
HBV Hpatite V (hpatocarcinome)

paludisme

Proto-oncognes et oncognes
Rle: Transduction du signal cellulaire
Facteurs de
croissance: EGF,
FGF, PDGF.
Rcepteurs de FC
EGFR, PDGFR,
FGFR.
Les transducteurs
du signal de
prolifration
Protines G
RAS, RAF, SRC,
RET.
Les Facteurs de
transcription:
Myc, Jun, Fos..

Transduction du signal

Oncognes

MUTATIONS PONCTUELLES
Oncogne
H-ras

Mutation

Tumeur

Oncoprotine

vessie

GTPase

pancreas,
colon,
poumon
LMC

GTPase

N-ras

domaine
dactivit
ATPase
- domaine de
liaison aux
nuclotides

ret

domaine EC

Men 2A

ret

activit kinase

Men 2B

met

activit kinase

kit

activit kinase

cdk-4

interaction
avec p16

cancer
papillaire du
rein
(hrditaire)
sarcome
gastrique,
mlanome

rcepteur
tyrosine kinase
rcepteur
tyrosine kinase
rcepteur
tyrosine kinase

K-ras

GTPase

rcepteur
tyrosine kinase
contrle du
cycle cellulaire

MEN Multiple Endocrine Neoplasie + FMTC (cancer mdullaire de la thyroide)

Oncognes

AMPLIFICATION GENIQUE
Grand nombre de copies d un proto-oncogne normal
hyper-expression de la protine
Rcepteurs membranaires activit tyrosine kinase

HER-2neu (c-erB2): sein, estomac, ovaires

EGFR (c-erB1): glioblastome, cancer colorectal

famille myc

carcinome bronchique petites cellules:

N-myc, L-myc
neuroblastome (+/- glioblastome): N-myc

Facteur pronostic

Oncognes

Oncognes

TRANSLOCATIONS
oncogne

tumeur

fonction

c-myc

lymphome de
Burkitt

facteur de
transcription

bcr-abl

LMC

TK

trk

rcepteur TK

ret

cancer
papillaire
thyrode

PDGFR

LMC

bcl-1
cycline D1

lymphome B

cycle cellulaire

PRAD-1
cycline D1

adnome
p.thyrode

bcl-2

lymphome
folliculaire

Gnes et cycle cellulaire

Couples cyclines-cdk
(cycline dependent-kinase) ou dclenchent la
prolifration
Par cascades de phosphorylation

Inhibiteurs
des couples cycline-cdk
ou rgulent
la prolifration

G0G1sous leffet
de Facteurs de croissance
par leve de linhibition
exerce par la protine Rb
(non phosphoryle)

Gnes suppresseurs de tumeurs

APC, CDH1, CDH13, CDKN2A, DAPK1,

ESR1, FHIT, GSTP1, HOXA1, IGF2, MGMT,
NEUROG1, PDLIM4, PTEN, RARB,
RASSF1, RB, RUNX3, SOCS1, TIMP3,
TP73, VHL, WIF1.

Gnes suppresseurs de tumeurs

Vrrouillage du cycle cellulaire

Gne RB (13q)

Prot RB (Nal= HP lie E2F)

_

Phase G1
Protine RB Hphosphoryle

Protine RB phosphoryle

Phase S
Facteur de transcription
E2F
libration de E2F
Activation cycle
cellulaire

Rtinoblastome: tumeur embryonnaire de la rtine

Gnes suppresseurs de tumeurs gne RB

CDKN2A

P16 CDK4
P14 contrle
cellulaire via p 53

CDK4

Si mut cycle c/

Gnes suppresseurs de tumeurs

Gne APC

Localis en 5q21 (15 exons, 8532 pb)

Protine APC, /s-membranaire

Maintien de la sgrgation chromosomique normale
au cours de la mitose
Rle dans la stabilit des jonctions inter-cellulaires
Contrle indirect du cycle cellulaire (induit la
dgradation de la catnine)

Base molculaire de la polypose adnomateuse familiale

associe au gne APC
Mutation germinale
dltre dun allle du gne APC

Inactivation somatique de
lallle fonctionnel restant

Perte de la fonction APC

Activation constitutive de
La voie de signalisation
Wnt/-catnine/APC

Carcinogense colorectale
c-myc
Cycline D1

p21

Gne APC/E-Cadhrine et Catnine

La formation du complexe -catnine-APC-G3 S entrane une

diminution du pool intracellulaire de -catnine libre empchant
sa liaison au facteur de transcription Tcf
liaison -catnine la E-cadhrine favoriserait la migration des
cellules pithliales coliques vers le sommet des villosits. G3
s : glycogne 3 synthase ; cat : -catnine ; APC :
Adenomatous Polyposis coli.

Gnes suppresseurs de tumeur

et Cycle cellulaire

Cancer

Hyperactivit des rgulateurs + (cyclines et

cdk)

Altration des gnes codant pour cdki (p16

ou 21)

Amplification du gne de la cycline D1 ou A

Ex: mutation dans gne codant pour p16 ou MTS1 (CDKN2A)

Ex: mutation dans le gne codant pour p 21 transactive par
la protine p53 permettant le blocage du cycle en G1

Altration de la protine Rb qui en librant le

facteur E2F acclre le passage de G1 en S

Interactions virus-gnes

Papillomavirus (HPV) Cancer du col de lutrus

Protine virale E7 inhibe la fixation de la protine Rb aux

facteurs de transcription
Protine E6 inhibe p53 et lapoptose

Protines E1A et E1B de ladnovirus inactivent p53

et/ou RB
Le gne de la cycline A est mut (mutation
insertionnelle par le virus de lhpatite B) dans les
cancers primitifs du foie (allongement de la vie
de la cycline A accumulation de cette cycline A)

Interaction virus gnes

E7 prvient linhibition
de E6 par INK4A ou CDKN2A
INK4A bloque
Fonction de E6

E6 bloque lapoptose
Induite par lexpression
de E7

E6
coopration

Inhibition
de p53
et dapoptose

immortalisation

Activation
tlomrase

Induction
dinstabilit
chromosomique

Inactivation
INK4A

E7

immortalisation

Activation Stimulation Inactivation

src kinases Phase S
p21 et p27

proliferation

proliferation

progression

coopration

Libration
E2F
Amplification
centrioles

progression

Effet synergique sur

limmortalisaton cellulaire

Gnes contrlant lintgrit du

gnome (+/- rparation ADN)

Gnes contrlant lintgrit du gnome

Ils limitent le taux de mutation de lADN

Ce sont des gnes de rparation de lADN au cours de la

division cellulaire (notamment les erreurs de replication)
Cancer du sein et de lovaire: BRCA1 et 2
Cancers colorectaux: MMR MLH1, MSH2 et MSH6
Ataxie tlangiectasie et prdisposition aux leucmies ou
lymphomes: gne ATM: dtection des cassures de lADN

La Protine p53 participe indirectement cette fonction:

elle permet de rparer lADN et en cas dchec provoque
lapoptose

Gnes contrlant lintgrit du gnome

Rle de P 53

Bloque le cycle cellulaire en phase G1/S en cas de lsions de lADN

(en induisant la transcription du gne CIP/WAF1 inhibiteur du cycle
cellulaire) pour permettre les rparations de lADN

Induit lapoptose (transcription du gne pro-apoptotique BAX: Bcl2associated X protein) si altrations trop importantes pour tre rpares

Gnes suppresseurs de tumeurs

Gnes de rparation

DSB

MMR

Gnes de rparation DSB: cassure double brin

SYSTME MMR (MisMatch Repair)

= Systme de rparation des msappariements

SYSTME MMR (MisMatch Repair)

Rparation dficiente accumulation de nombreuses squences de

microsatellites

Microsatellites:

squences faites de rptitions (x20) en tandem de nuclotides ubiquitaires dans le

gnome (AAA) ou (CACA..)

Ces squences rptitives sont particulirement fragiles et lors de la rplication de

lADN, elles peuvent tre raccourcies ou rallonges

En labsence de rparation post-rplicative efficace dans la tumeur, les erreurs

persistent et se transmettent lors de la rplication suivante mergence et
persistance dallles de taille diffrente au niveau des cellules tumorales
= instabilit des microsatellites

Si ces erreurs de rplication surviennent dans des rgions non codantes pas de
consquences graves
Dtection de linstabilit des MS (MSI) dans les tumeurs au niveau de
marqueurs (Bat 25 Bat 26 = zones introniques de lADN avec 25 ou 26 A ou NR
21, NR 22, NR 24, MONO 27)

Si ces erreurs surviennent dans des gnes intervenant dans le contrle de la

prolifration cellulaire et/ ou lapoptose (TGF, MSH3 et 6, Bax) altration
de leur fonction

Instabilit des microsatellites

Le Processus de Cancrisation

La Transformation Cellulaire

Caractrisation dune cellule cancreuse

Etapes de la cancrisation

Bases molculaires de la cancrognse

Anomalies intrinsques

Gntiques

Epigntiques

Facteurs de risque initiateurs

Chimiques, physiques, biologiques

Facteurs de risque promoteurs

Chimiques, hormones, parasites

Caractres multi-tapes des cancers

Hypermthylation des promoteurs de certains gnes

Modifications des histones

Anomalies extrinsques

Les diverses lsions gntiques

Les diffrents gnes impliqus dans loncognse (oncognes, gnes suppresseurs
de tumeur, de rparation de lADN..)

tapes de la transduction du signal de prolifration

Exemples: cancer colorectal

Les prdispositions gntiques aux cancers

Phnomnes pigntiques

Dfinitions

Modifications de lexpression des gnes, non lies des

modifications de la squence de lADN

Des cellules de deux tissus diffrents ont le mme gnome mais

elles diffrent par leur pignome =

Ensemble des modifications pigntiques : mthylation de

lADN et/ou modifications des histones modulation de
lexpression des gnes (avec parfois extinction de leur expression)

Cible = nuclosome (ADN + histone)

Mthylations aberrantes de lADN au niveau des ilots CpG

Modifications post-traductionnelles des extrmits des histones

Phnomnes pigntiques

En situation normale:

1/ Mthylation des ilots CpG

Normalement la plupart des CpG en dehors des ilots sont mthyls/
CpG ilots non mthyls
Ilots CpG +++ non mthyls au niveau des promoteurs des gnes

2/ Lactylation des histones chromatine relche, accessible aux

complexes de transcription (FT, HAT (protines actylant les histones, CA co-A
transcriptionnels)

En situation tumorale:

1/ Mthylation inverse:
Hmthylation le long du gnome
Her mthylation au niveau des promoteurs

CpG mthyls = reconnus par des protines MBD qui vont empcher
la transcription (donc lexpression de certains gnes)

Dans le cas de gnes suppresseurs de tumeur ou de gnes de

rparation ADN prolifration++ et cancer

Phnomnes pigntiques
FT=F de
transcription

HAT=Protines
actylant
les Histones

Promoteur

Chromatine relche

HDAC=
dsactylation
Des histones

Transcription

DNMT=
Mthylation de lADN

Inaccessibilit aux
complexes de transcription

Phnomnes pigntiques
2/ Modifications des Histones

Phnomnes pigntiques: Gnes concerns par

linactivation au niveau des promoteurs

Phnomnes pigntiques

Lge est lorigine dhypermthylation des promoteurs

(cancer colo-rectal)

Les facteurs environnementaux pourraient induire des

modifications pigntiques +++ dont certaines pourraient se
transmettre aux gnrations suivantes (une partie de la
descendance des hollandaises victimes de la famine de 1944,
de taille beaucoup + petite)

Alcool?
Stress?
Etat psychologique ?

Le Processus de Cancrisation

La Transformation Cellulaire

Caractrisation dune cellule cancreuse

Etapes de la cancrisation

Bases molculaires de la cancrognse

Anomalies intrinsques

Gntiques

Epigntiques

Facteurs de risque initiateurs

Chimiques, physiques, biologiques

Facteurs de risque promoteurs

Chimiques, hormones, parasites

Caractres multi-tapes des cancers

Hypermthylation des promoteurs de certains gnes

Modifications des histones

Anomalies extrinsques

Les diverses lsions gntiques

Les diffrents gnes impliqus dans loncognse (oncognes, gnes suppresseurs
de tumeur, de rparation de lADN..)

tapes de la transduction du signal de prolifration

Exemples: cancer colorectal

Les prdispositions gntiques aux cancers

EPIDEMIOLOGIE CANCERS

Facteurs endognes
*Gntiques (5-10%)
*Hormonaux (12%)

AGE
CANCER
Pollution Atmosph
(0.5%)

ENVIRONNEMENT
Professionnel
(2%)

Comportement
MBiologiques
(15%)

Bactries: Hlicobacter P,
Virus: HBV, HPV, EBV
Parasites: Schistosomes

Tabac (24%)
Alcool (7%)
Alimentation
(20%?)
UV

Bases de la cancrognse: II-2-anomalies extrinsques

II-2-1-Agents initiateurs: lsion dfinitive de lADN

Carcinognes chimiques

HAP (tabac, ptrole..)

amines aromatiques (colorants, caoutchouc)

agents alkylants

Aflatoxine B1

Nitrosamines

Chlorure de vinyl
Virus

HTLV, HIV,

Ebstein Barr (EBV) (lymphome de Burkitt) HPV, HBV

Radiations ionisantes: Rx et UV

Crations dadduits Mutations

la plupart des produits chimiques ont besoin pour cela dune
activation mtabolique
Dans ce cas, des intermdiaires lectrophiles tels que les poxydes
ou les ions carbonium sont les responsables ultimes des lsions
induites sur divers sites nuclophiles de lADN

Bases de la cancrognse: II-2-anomalies extrinsques

II-2-1-Agents initiateurs: lsion dfinitive de lADN

Carcinognes chimiques

Benzopyrne

N-Nitrosodimthylamine

Sites primaires des lsions

sur lADN induites
Chimiquement

Mono-adduits

Ponts intra ou inter-brins

II-2-1-Agents initiateurs: lsion dfinitive de lADN

Produit

Lsion gnotoxique

Aflatoxines (B1)
(Aspergillus Flavus)
Amines aromatiques

Adduits de grande taille

Adduits de grande taille

(2-Actylaminofluorne)

Chlorure de vinyle

Mono-adduits

Chimiothrapies
(mitomycine,
Cisplatine,
Cyclophosphamide)

Mono-adduits, pontages intra et interbrins

Nickel

Mono-adduits et cassures simple brin

Bases de la cancrognse: II-2-anomalies extrinsques

II-2-2-Agents promoteurs:

Favorisent lexpression dune lsion gntique

pralablement induite par un agent initiateur

TPA (esters de phorbol activit protines kinases C)

(12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate)
Acclration de la prolifration. Donc la cellule dispose
dun temps plus court pour la rparation de lADN
rparation incomplte
Phnols?
Hormones: oestrognes

Activation de la transcription par recrutement de coactivateurs

Parasites: paludisme + EBV Lymphome de

Burkitt?
Autres contaminants chimiques (dioxines?)

Exemple dagents
promoteurs: Hormones et
RECEPTEURS NUCLEAIRES

Bases de la cancrognse: anomalies extrinsques

Agents Promoteurs:

Xnobiotiques et rcepteurs AhR (rcepteur cytosolique au

groupement aryl des hydrocarbures)
Dioxine

interfrences avec Protines

rgulatrices: Src, NFkB, Rb
AhR
ARNT (Ah Receptor Nuclear Translocator)
Dimrisation et Fixation sur XenobER transcription d
divers gnes

AhR

Enzymes impliqus dans mtabolisme des xnobiotiques dont

les dioxines (cytochrome p 450)
Mtabolisation des HAP Produits encore + cancrignes
(stress oxydant)
Mtabolisation des oestrognes effet anti-oestrognique

Potentiel de cancrognicit
Classe

Description du potentiel cancrigne

IARC

EPA

Cancrigne
humain

Preuve faite pour lhumain

2A

Cancrigne
humain
probable

Evidence limite de cancrognicit

chez h mais suffisante chez animaux
labo

2B

Cancrigne
humain
possible

Evidence limite de cancrognicit

chez h et absence dvidence
suffisante chez animaux labo

Non class
comme
cancrigne

Aucune vidence pour que le produit

soit cancrigne mais pas de donnes
de non cancrognicit

Non
Cancrigne

Aucune vidence de cancrognicit

chez h et chez animaux labo

Potentiel de cancrognicit

Etudes de cancrognicit chez lhomme

Indications de cancrognicit suffisantes

Relation de cause effet tablie entre lexposition
et la survenue de cancers dans le cadre dtudes

mthodologiquement valides (absence de biais)

Indications de cancrognicit limites
Une association positive mise en vidence mais
la validit de ltude est mise en doute (biais ne
peuvent tre exclus avec certitude)
Indications de cancrognicit insuffisantes
Validit des tudes remise en question
Pas de donnes disponibles
Indications dune absence de cancrognicit
Pas dassociation positive entre exposition et
cancers mise en vidence sur un grand nombre
dtudes

Potentiel de cancrognicit: CMR

C
M

Le Processus de Cancrisation

La Transformation Cellulaire

Caractrisation dune cellule cancreuse

Etapes de la cancrisation

Bases molculaires de la cancrognse

Anomalies intrinsques

Gntiques

Epigntiques

Facteurs de risque initiateurs

Chimiques, physiques, biologiques

Facteurs de risque promoteurs

Chimiques, hormones, parasites

Caractres multi-tapes des cancers

Hypermthylation des promoteurs de certains gnes

Modifications des histones

Anomalies extrinsques

Les diverses lsions gntiques

Les diffrents gnes impliqus dans loncognse (oncognes, gnes suppresseurs
de tumeur, de rparation de lADN..)

tapes de la transduction du signal de prolifration

Exemples: cancer colorectal et cancer broncho-pulmonaire

Les prdispositions gntiques aux cancers

II-3- Caractres multi-tapes des cancers

II-3-1 tapes de la transduction du signal

de prolifration

Schma de synthse. Cancrognse colorectale

II-3-2 Cancrognse dans le cancer colorectal sporadique

Deux schmas de cancrognse diffrents

1/La voie majoritaire: (85%

des CCR)
lie une instabilit
chromosomique
Tumeurs aneuplodes avec
perte dhtrozygotie (LOH)
Elment initiateur:
inactivation du gne APC
Puis plus tard mutation de KRAS
Et inactivation de p53
2/Linstabilit gntique
lchelle nuclotidique (15%
CCR)
Lie une inactivation de
certains gnes de rparation
de lADN (MMR)

Ces mutations confrent un

phnotype mutateur qui prdispose
la survenue de mutations dans
des gnes comportant des
rptitions de nuclotides (
catnine, Bax, rcepteur du TGF )
et impliqus dans la prolifration
cellulaire perturbations du
contrle de la prolifration

Cancrognse colique par instabilit chromosomique

GSK: srine-thronine glycogne-kinase

Catnine + TCF4 (Facteur de transcription) activateur de Myc

Cancrognse colique par instabilit chromosomique

2-Voie K RAS
Gnes RAS: H RAS, K RAS, N RAS
Gnes RAS code pour protine p 21
transduction du
signal prolifration
Protines RAS lies GTP: actives
Protines RAS lies GDP: inactives (grce aux protines G et Ras)
car la protine RAS a une homologie de squence avec la protine G
Si mutation RAS: perte de lactivit GTPase des protines RAS

Cancrognse colique par instabilit chromosomique

3- Voie TGF
TGF + Rcepteurs I et II phosphorylation SMAD2
Translocation de ce complexe dans le nx htrodimre
SMAD2/SMAD4

Transcription de gnes inhibant le cycle cellulaire (gne MTS2)

En fait TGF induit une accumulation de Rb sous forme non phosphoryle
(bloquant facteur de transcription E2F)

Si inactivation du gne TGF (ou son rcepteur) (tumeurs MSI) ou mutation

des gnes SMAD 2 et 4 (tumeurs LOH+)
carcinognse

4- Protine P 53

Cancrognse colique par instabilit chromosomique

P 53
4

Altrations gntiques et pigntiques des cancers

colorectaux MSI.

II-3-3 Cancrognse broncho-pulmonaire

Catnine

Prolifration
Myc

EGF

Ras
Rb

p14ARF
Diffrenciation

p53

Apoptose

Mutagnse/lsions ADN

II-3-3 Cancrognse broncho-pulmonaire

Le Processus de Cancrisation

La Transformation Cellulaire

Caractrisation dune cellule cancreuse

Etapes de la cancrisation

Bases molculaires de la cancrognse

Anomalies intrinsques

Gntiques

Epigntiques

Facteurs de risque initiateurs

Chimiques, physiques, biologiques

Facteurs de risque promoteurs

Chimiques, hormones, parasites

Caractres multi-tapes des cancers

Hypermthylation des promoteurs de certains gnes

Modifications des histones

Anomalies extrinsques

Les diverses lsions gntiques

Les diffrents gnes impliqus dans loncognse (oncognes, gnes suppresseurs
de tumeur, de rparation de lADN..)

tapes de la transduction du signal de prolifration

Exemples: cancer colorectal et cancer broncho-pulmonaire

Les prdispositions gntiques aux cancers

II-4 Les prdispositions gntiques aux cancers

Ce qui caractrise un cancer hrditaire

Reprsente 5 10 % environ des cancers

Lge prcoce de survenue du cancer

La prsence de nombreux ATCD familiaux: plusieurs

membres de la famille atteints sur plusieurs gnrations

Multiplication des localisations (ensemble ou dcales

dans le temps)

II-4 Les prdispositions gntiques aux cancers

Si mutation gntique dans cellule somatique

(colon, sein, rtine)

Forme sporadique de cancer (90% des

cancers)

Si mutation dans cellule germinale (spermatozode,

ovule)

Forme hrditaire de cancer (10% des

cancers)

II-4 Les prdispositions gntiques aux cancers

1-Polypose Adnomateuse Familiale: (PAF)
Transmission

Mode autosomique dominant

forte pntrance
expressivit variable: polypes
colo-rectaux duodnaux lsions
rtiniennes

Responsable de 1% des cancers

colo-rectaux

Clinique

Manifestations coliques

Polypes adnomateux multiples:

100 x1000 dans le clon et le

rectum

Manifestatations extra-coliques

Lsions rtiniennes (taches

blanches) visibles au fond dil
(70% des cas)
= Hypertrophie de lpithlium
pigmentaire rtinien (CHRPE)
Adnomes gastriques ou duodnaux
Tumeurs desmodes et conjonctives
Tumeurs de la thyrode, du cerveau

PAF Polypose adnomateuse familiale

Mutation du gne APC

Gne APC: gne suppresseur de tumeur

________________________

1 23 4 5
6 7
8 9 10
1114 15

Formes attnues

Formes
classiques

Exon 15
1245

1250

Formes profuses
T desmodes 1464
1444

_________________________

2- Le syndrome de Lynch (HNPCC)

Prdisposition au cancer colorectal non polyposique

Deux localisations risque:

Clon et rectum
Utrus (endomtre)
risque de C Estomac, voies urinaires, intestin,
ovaires et voies biliaires

Li une altration dun des gnes MMR de

rparation de lADN (MLH1, MSH2, MSH6 et
PMS2)

Altrations gntiques et pigntiques des cancers

colorectaux MSI.

II-4 Les prdispositions gntiques aux cancers

II-4 Les prdispositions gntiques aux cancers

III/ Le PROCESSUS METASTATIQUE

Le Processus de Cancrisation

La Transformation Cellulaire

Caractrisation dune cellule cancreuse

Etapes de la cancrisation
Bases molculaires de la cancrognse

Anomalies intrinsques

Gntiques

Epigntiques

Facteurs de risque initiateurs

Facteurs de risque promoteurs

Chimiques, hormones, parasites

tapes de la transduction du signal de prolifration

Exemples: cancer colorectal

Les prdispositions gntiques aux cancers

Le Processus mtastatique

Chimiques, physiques, biologiques

Caractres multi-tapes des cancers

Hypermthylation des promoteurs de certains gnes

Modifications des histones

Anomalies extrinsques

Les diverses lsions gntiques

Les diffrents gnes impliqus dans loncognse (oncognes, gnes suppresseurs de tumeur, de rparation de lADN..)

Langiognse
Le processus de migration cellulaire

Les bases molculaires des thrapies anticancreuses

Les molcules cytotoxiques

En amont, au niveau et en aval de lADN

Les molcules cytostatiques: thrapies cibles

Perspectives thrapeutiques

La thrapie gnique et limmunothrapie

III-1/ LAngiognse
Dfinition: formation de
nouveaux vaisseaux
sanguins partir de
vaisseaux existants
(capillaires et
veinules)
Une tumeur solide ne
peut pas se dvelopper
au-del dune certaine
taille (1 2 mm3) en
labsence de novascularisation Judah
Folkman
Switch angiognique:
passage de la phase
latente la phase
agressive

Processus de langiognse

LHypoxie est llment dclencheur de la translocation HIF et (Hypoxia

Inducible factor) promoteurs des gnes VEGF et PDGF

Langiognse est contrle par une balance d'inducteurs (VEGF+++, FGF,

PDGF, IGF, angiopoitine 2)
et d'inhibiteurs (thrombospondine, endostatine, angiostatines, angiopoitine 1)

synthse de facteurs pro-angiogniques +++

L'activation des cellules endothliales

Migration suivie d'une phase prolifrative

Diffrenciation des cellules en une structure de type capillaire
rseau vasculaire ncessaire au dveloppement des tissus tumoraux
(Cellules endothliales, pricytes, cellules musculaires lisses)

Oncognes activs:
Ras,src
p 53 dsactive

La cellule cancreuse
LAngiognse

Novaisseau
Pricyte

FGF+++
angiopoitine-1 Tie-2

thymidine
phosphorylase

Cellule
msenchymateuse

Cellule
endothliale

matrice
extracellulaire

Cellule musculaire lisse

L'angiopotine-2 peut
induire la perte de contact entre les cellules
L'angiopotine-1 assure ainsi la endothliales et les cellules voisines
dstabiliser ainsi le vaisseau sanguin
permabilit et la maturit des
x
vaisseaux sanguins (angiognse) dgrader la membrane basale des v ainsi
que la matrice extracellulaire environnante.

Tumor angiogenesis

La cellule cancreuse
LAngiognse

Facteurs et rcepteurs de croi ssance endothl i al e

Facteur

Rcepteur

FGF-1 (acide )

FGFR-1, 2, 3 , 4

FGF- 2 (basique, )
VEGF- A

VEGF-B
VEGF-C
HGF (scatter factor)
EGF
TGF-
Angiopoitine
( ang - 1 et ang- 2 )

Dis tribution tis s ulaire

cerveau, rein, os, rtine, coeur,

autres
FGFR- 1 , 2
cerveau, rein, rtine, coeur,
testicules, monocytes, autres
VEGFR- 1, VEGFR- 2 (flt) hypophyse, muscle, poumon,
prostate, coeur, monocytes, autres
inconnu
muscle, poumon, prostate, pancras,
autres
VEGFR-2/ VEGFR-3
coeur, placenta, ovaire, intestin,
autres
c-met
poumon, foie, peau, autres
EGFR (c-erbB)
ectoderme, rein, estomac
EGFR (c-erbB)
monocytes, kratinocytes, autres
Tie2
embryogense

Le VEGF a se lie 2 types de rcepteurs:

FLK1 (ou KDR ou VEGFR2)

la Neuropiline (Nrp1) qui est un co-rcepteur pour

VEGFR2 (trs prsent dans les cellules endothliales)

FLT1 (ou VEGFR1)

III-2/ Le processus de migration

des cellules

II-2 Le processus de migration cellulaire

II-2-1 Transition Epithlium-Msenchyme

Existe dj ltat physiologique

Embryognse (tube neural crte neurale)

Cicatrisation

Dans la cancrognse, cette transition est sous la dpendance de molcules

dadhrence intercellulaire

expression de la E-cadhrine

dans les cellules pithliales et

dans les cellules msenchymateuses

Modifications du
cytosquelette
Perte des cytokratines (cellules pithliales)

Vimentine dans cellules msenchymateuses

qui deviennent flexibles)

Scrtion de protases et

de la motilit cellulaire

Grce lintervention de facteurs adjuvants

HGF: Hpatocyte Growth Factor

Composants de la matrice extra-cellulaire

Facteur TWIST(anti-apoptotique) ou SNAIL (de transcription)

II-2 Le processus de migration cellulaire

Transition Epithlium-Msenchyme

Difficile mettre en vidence

Phnomne observ in vitro (Thiery JP. Epithelial-mesenchymal

transitions in tumour progression.Nat Rev Cancer 2002;2:442-54.

In vivo (Cancer colorectal la priphrie de la tumeur)

(Jass JR, Barker M, Fraser L, Walsh MD, Whitehall VL, Gabrielli B, et al. APC
mutation and tumour budding in colorectal cancer. J Clin Pathol 2003;56:6973

Une fois transformes les cellules msenchymateuses

tumorales ne sont pas des cellules normales (nexpriment
plus les kratines et expriment la vimentine)
Il semble que des modifications gntiques ne soient pas
ncessaires ce processus
Lenvironnement de la tumeur (facteurs scrts par la matrice
extracellulaire) suffit
La tumeur utilise un programme dj prsent (lembryognse,
cicatrisation)

II-2 Le processus de migration cellulaire

II-2-2 Rle +++ du stroma

Cellules stromales concernes:

Fibroblastes

Macrophages

Cellules endothliales
Laction des cellules stromales est modifie par les cellules tumorales:

Les fibroblastes modifis sont protumorignes (mcanisme non encore

lucid: modifications pigntiques des cellules stromales?)

II-2-3 Rle des cellules souches

Action sur langiognse et sur linvasion tumorale Scrtion de tous les

facteurs ci-dessus

Dans le processus mtastatique, seule la migration dune cellule souche

cancreuse pourra provoquer dans le tissu hte la croissance dune
mtastase
Ces cellules sont rares, rsistantes lapoptose et aux traitements
chimiothrapiques et ncessitent un environnement particulier pour
leur survie
Les autres cellules pourront accder dans les tissus-htes mais seront
capables de se X un nombre limit de fois seulement

II-2-4 Influence des facteurs pigntiques

= modifications rversibles ( des modifications gntiques qui sont

irrversibles)

II-2 Le processus de migration cellulaire

Les cellules souches
cellule
diffrencie
sans potentiel
de division

cellule
tumorale
sans potentiel
de division

nombre
limit
de divisions

nombre
limit
de divisions

nombre
illimit
de divisions

nombre
illimit
de divisions

cellule souche normale

cellule souche cancreuse

Mq (CD133, CD44)
permettant
de slectionner
les cellules souches

Cellules normales

Cellules cancreuses

II-2 Le processus de migration cellulaire

II-2-5 Dterminisme du tropisme pour un tissu mtastatique?

Avances grce la signature transcriptionnelle des tumeurs (par des puces ADN)
Signature transcriptionnelle : combinaison dexpression particulire de milliers de gnes
simultanment

Ramaswamy S, Ross KN, Lander ES, Golub TR. A molecular signature of metastasis in primary solid tumors.
Nature Genet 2003;33:49-54
Minn AJ, Gupta GP, Siegel PM, Bos PD, Shu W, Giri DD, et al. Genes that mediate breast cancer metastasis to
lung. Nature 2005;436:518-24

1-Explication mcanistique
Pigeage par les capillaires (Foie)
2-Facteur chimio-attracteur produit par les cellules cibles

3-Molcules particulires vhicules par les cellules endothliales et reconnues par

les cellules tumorales (ZIP code vasculaire)
4-Environnement favorable cre par le tissu cible (niche prte accueillir les cellules
tumorales). Cellules osseuses librent TGF ou la PTH-RP qui stimulent les
cellules cancer sein et prostate

II-2-6 Problme des mtastases (cellules tumorales isoles)

Elles se divisent peu sont inaccessibles aux chimiothrapies

Comment expliquer quun si petit nombre de cellules dormantes puissent donner
naissance des mtastases?

II-2-7 Rle des polymorphismes dans la progression tumorale

Caractristiques personnelles de lADN constitutionnel/ADN tumoral chez les

malades

II-2 Le processus de migration cellulaire

Micromtastases

Balance
Mitose/destruction
par systme immunitaire

Balance
Mitose/Apoptose

Evasion
immunitaire

Switch
angiognique

Macromtastase

Le Processus de Cancrisation

La Transformation Cellulaire

Caractrisation dune cellule cancreuse

Etapes de la cancrisation
Bases molculaires de la cancrognse

Anomalies intrinsques

Gntiques

Epigntiques

Facteurs de risque initiateurs

Facteurs de risque promoteurs

Chimiques, hormones, parasites

tapes de la transduction du signal de prolifration

Exemples: cancer colorectal

Les prdispositions gntiques aux cancers

Le Processus mtastatique

Chimiques, physiques, biologiques

Caractres multi-tapes des cancers

Hypermthylation des promoteurs de certains gnes

Modifications des histones

Anomalies extrinsques

Les diverses lsions gntiques

Les diffrents gnes impliqus dans loncognse (oncognes, gnes suppresseurs de tumeur, de rparation de lADN..)

Langiognse
Le processus de migration cellulaire

Les bases molculaires des thrapies anticancreuses

Les molcules cytotoxiques

En amont, au niveau et en aval de lADN

Lhormonothrapie
Les molcules cytostatiques: thrapies cibles
Perspectives thrapeutiques

La thrapie gnique et limmunothrapie

IV Les bases molculaires des

thrapies anticancreuses

1-Les molcules cytotoxiques

En amont, au niveau et en aval de lADN

2-Lhormonothrapie

3-Les molcules cytostatiques: thrapies cibles

4-Perspectives thrapeutiques

La thrapie gnique et limmunothrapie

IV 1-Les molcules cytotoxiques

1 /Agissent en amont de lADN

En perturbant le mtabolisme de lADN (anti-mtabolites)

= Analogues structuraux (5-FU)

2/Ont pour cible lADN

En interagissant directement avec lADN lui-mme (alkylants, intercalants

et inhibiteurs enzymatiques)
= Sels de platine, anthracyclines, Irinotecan

3/Agissent en aval de lADN

En agissant sur le fuseau et les micro-tubules (Drivs de lif: taxanes)

Concernent des cellules en division cellulaire

1 /Action en amont de lADN

Aprs sa pntration dans la cellule, le 5FU se lie aux sucres ribose ou doxyribose
pour former un pseudo nuclotide,
phosphoryl sous forme de 5-FUTP ou 5FdUMP.

Le 5-FUTP est incorpor dans le mRNA,

dont laction est inhibe par la prsence du
fluor. Ainsi, cette action nest pas
dpendante du cycle cellulaire.

Le 5-FdUMP (seule voie de la 5-FdUrd)

inhibe de faon irrversible la thymidilate
synthtase, aboutissant une dpltion de
thymidine monophosphate indispensable
pour la synthse du DNA. Cette seconde
action est cycle dpendante (plus
importante dans la phase S).

Lacide folinique augmente la quantit de

folates prsents dans la cellule et permet
des rponses tumorales plus importantes,
malgr une toxicit accrue.

2/Action directe sur lADN

Ractions chimiques avec lADN

Modifications structurales de lADN

Agents ALKYLANTS (lectrophiles) et apparents

Agents INTERCALANTS

Coupures au niveau de lADN

Inhibiteurs des Topoisomrases

Agents ALKYLANTS (lectrophiles)

Interaction avec lADN par des liaisons covalentes

Rplication impossible
Exemples:

Moutardes N:

Cyclophosphamide: Endoxan (aplasie svre)

Ifosfamide: Holoxan

Agents apparents: ponts inter-brins Rplication impossible

Sels de platine

Cisplatine (estomac, pancras)

Carboplatine (ovaire, poumons, ORL)

Oxaliplatine (C digestifs)

Aziridines (ATB): mitomycine C

Agents INTERCALANTS

Molcules caractrises par plusieurs noyaux aromatiques condenss, de dimension et

structure telles qu'elles provoquent stabilisation des coupures double brin et donc:
- un empchement de la progression des ARN et ADN polymrases
- une inhibition de la rplication et de la transcription

Ce sont des antibiotiques: Anthracyclines

Adriamycine (doxorubicine) MDR

Toxicit cardiaque +++
Epirubicine: -active mais - toxique

Molcules entranant des coupures au niveau ADN

= Inhibiteurs enzymatiques

Les ADN topoisomrases permettent laccessibilit lADN des

enzymes de rplication et de transcription

Ce sont des enzymes assurant la spiralisation/dspiralisation de

l'ADN aprs avoir cr des coupures transitoires de l'un (I) ou
des
deux (II) brins, puis leur ligation, permettant une relaxation des
forces de
torsion gnres au moment de la
rplication

Inhibiteurs topo-isomrase II

Inhibiteurs intercalants = Anthracyclines

Inhibiteurs NON intercalants: pas daction directe sur lADN

(stabilisation du complexe Topoisomrase II-ADN)
Etoposide: VP16 (lymphome, C bronchique)

Inhibiteurs topo-isomrase I:

La topo-isomrase I permet des coupures simples-brins

indispensables la rplication de lADN
Irinotcan: C colorectaux
Topotcan: C Ovaire

3/ACTION en AVAL de lADN

(sur le fuseau et les micro-tubules)

ALCALOIDES de la PERVENCHE
poisons du fuseau: se fixent sur la tubuline et inhibent la
polymrisation en tubules
Vincristine(Oncovin*) (1960)
Vinblastine (Velb*)
Vindsine (Eldisine*)
Vinorelbine (Navelbine*)

TAXANES
Stabilisent le fuseau en se fixant sur les microtubules et
inhibent leur dpolymrisation (1990)
Paclitaxel (Taxol*) (corce)
Doctaxel (Taxotre*)

(pines) hypersensibilit ++

IV-2 LHORMONOTHERAPIE
Tumeurs hormono-dpendantes
sein
oestrognes
prostate
andrognes
(tumeurs endocrines digestives)
Hormone + rcepteur nuclaire activation de la transcription
synthse protique prolifration

2 stratgies :
inhibition de la scrtion de l'hormone endogne
blocage du rcepteur

HORMONOTHERAPIE
Hypothalamus
LH-RH
FSH/LH

ACTH

Hypophyse

Ovaires
Testicule

Surrnales

Oestrognes
Progestrone
Testostrone

Oestrognes
Androstne dione

Testostrone

SEIN
PROSTATE

HORMONOTHERAPIE
SEIN:

SUPPRIMER Scrtion doestrognes

Castration chirurgicale: ovariectomie (plus pratique)

Administration de progestatifs Actate de mdroxyprogestrone : rtrocontrle - au niveau des cellules gonadotropes hypophysaires, blocage de la
scrtion doestrognes

Administration danalogues de la LH-RH : bloquent les rcepteurs au niveau

de lhypophyse

Inhibiteurs comptitifs:

Tamoxifne (Sein)
MDV3100 (Prostate)

En phase pr-mnopausique:

entranerait une inhibition de la scrtion de FSH/LH production de strodes

par les gonades en 2/3 semaines
Busrline (Bigonist), gosrline (Zoladex) uniquement dans le cancer de la prostate
(en cours dvaluation dans le cancer du sein)

anti-oestrognes: Tamoxifne

En phase post-mnopausique:

Anti-oestrognes et anti-aromatases

HORMONOTHERAPIE

SEIN:
Anti oestrognes
Tamoxifne:

Effet antagoniste (recrutement de co-rpresseurs)

=inhibiteur comptitif des oestrognes au niveau du rcepteur
loestradiol dont laction est plus complte
=Au niveau du sein, vagin et SNC

Effets agonistes (co-activateurs)

= au niveau os, foie, endomtre
= Complications thromboemboliques ( Antithrombine III dans le
foie)
= le risque de cancer de lendomtre
Prvient la dminralisation osseuse ( os)

ce traitement supprime compltement la production ovarienne

doestrognes, mais laissent persister une production
surrnalienne ou tumorale qui peut tre

HORMONOTHERAPIE

Le TAMOXIFENE

Rappel sur les rcepteurs nuclaires et les

oestrognes

Domaine LBD
(en 12 hlices)

AA 351: permet
le recrutement
des co-activateurs

HORMONOTHERAPIE

SEIN:

Inhibition de la biosynthse des strodes surrnaliens chez la femme mnopause,

principale source doestrognes
= Antiaromatases

Aromatase: transforme les andrognes des tissus priphriques en

oestrognes circulants

Antiaromatases 1re gnration

Antiaromatases 2me gnration

action irrversible sur laromatase et insuffisance surrnalienne

Aminoglutthimide: Orimtne (non strodienne)

Formestane (Lentaron); ne ncessite pas dHCortisone: (strodienne)

Antiaromatases de 3me gnration:

Ltrozole (Fmara) et anastrozole (Arimedex) sont des anti-aromatases

slectifs
agissent sur la rductase du cytochrome P450 (action rversible)

A comparison of letrozole and tamoxifne in postmenopausal women with early breast cancer. N
Engl J Med 2005; 353: 2747-57 (BIG) avantage au letrozole

IV-3 Les THERAPIES CIBLEES

Les THERAPIES CIBLEES: les cibles

Les Thrapies Cibles

Bevacizumab

Cetuximab Erbitux
Trastuzumab Herceptin
Rituximab Mabthera

Avastin

Inhibiteurs multikinases

Inhibiteur slectif

de EGF-R

Tarceva
Imatinib Glivec

(Erlotinib)

Lapatinib

Tyverb
(Anti Her1 et Her2)

Mabthera
Ac anti CD20
des Lcytes B (LNH)

Rituximab

Petites molcules inhibant VEGF-R et

dautres kinases (ITKs)
(Sorafenib Nexavar
Sunitinib Sutent)

Les Thrapies cibles

Molcules cibles =

Rcepteur dun facteur de croissance: EGFR ou VEGFR

Le facteur de croissance lui-mme: EGF ou VEGF

Une protine intervenant dans la signalisation rgulant la

prolifration cellulaire ou lapoptose (mTOR)

Un facteur dangiognse (VEGF)

Les THERAPIES CIBLEES (agents cytostatiques)

Thrapeutiques cibles =

Ac Monoclonal (Mabs)

Momab: Ac souris (1975)

Ximab: Ac chimrique (H/souris; 1984)
Zumab: Ac humanis (1988-91)
Mumab: humain (1994-99)

=Grosses molcules
=Cible extracellulaire
=Administration injectable
=Action irrversible: destruction du rcepteur

Molcule activit anti-thyrosine kinase (nibs) par inhibition enzymatique

=petites molcules
=Cible intracellulaire
=Administration orale
=Action rversible

Ces molcules peuvent tre associes:

Ex: TTT anti VEGF, anti rcepteur PDGF actif dans les cancers du rein
(nexavar ou sorafenib)

THERAPIES CIBLEES

Rcepteurs de facteurs de croissance

EGFR, HER-2

Les thrapeutiques Ac monoclonaux

= Cetuximab (Erbitux): C Clon, bronchique NSCLC, tte et cou, rnal
= Trastuzumab (Herceptine): C Sein, ovaire (hyperexpressuion de HER2)
= Les autres anticorps monoclonaux:
Panitumumab (anti EGFR)
Matuzumab (anti EGFR)
Pertuzumab (anti Erb2)
Les inhibiteurs de la tyrosine kinase associe lEGFR:

Gefitinib (Iressa): T Bronchique NSCLC et carcinome broncho-alvolaire

(mutation EGFR)
Erlotinib (Tarceva): C Bronchique non petites cellules (Europe)
Autres mdicaments: lapatinib: (Tykerb ou Tyverb en Fr)

(contre EGFR et Erb2) C sein

Rcepteur PDGF

Les thrapeutiques anti tyrosine kinases:

Imatinib msylate (Glivec)

bloque lactivit TK du rcepteur de PDGF: LMC et GIST
Bloque galement lactivit de 3 autres kinases: Bcr, Bcr-Abl et c-kit

Rcepteurs de facteurs de croissance

C du Poumon

C Sein (trastuzumab rduit de 50 % le

risque de rcidive (Piccart-Gebhart 2005)

C Colorectal

Rcepteurs de facteurs de croissance:EGFR

THERAPIES CIBLEES

Facteurs de croissance eux-mmes: Facteurs dangiognse

Le VEGF a se lie 2 types de rcepteurs:

Le facteur de croissance des fibroblastes-2 (FGF-2)

Le facteur de croissance de l'endothlium vasculaire (vascular endothelial growth
factor, VEGF)
Le PDGF

FLK1 ou KDR ou VEGFR2

FLT1 ou VEGFR1
et la neuropiline (Nrp1) qui est un co-rcepteur

Molcules Anti-VEGF

2 types de molcules:

Anticorps monoclonaux: Anti VEGF direct

Bevacizumab (Avastin)

C colorectal Tx de rponses de 35 45%

Inhibiteurs de la tyrosine kinase associe au rcepteur du VEGF

Sunitinib (Sutent) bloque la TK du complexe FlK1/KDR utilis dans les GIST

(aprs chec au Glivec) et Cancer Rein avanc

Sorafenib (Nevaxar): inhibition de la transduction du signal par la voie Raf

Kinase et MEK = inhibiteur multikinase

Autres molcules Anti-angiogniques

Thalidomide: anti-mtique grossesse

Interfron

THERAPIES CIBLEES

Facteurs dangiognse

THERAPIES CIBLEES

Transduction du signal

BRAF: 50% de mutations BRAF dans le Mlanome mtastatique

TTT cible inhibiteur de BRAF: Vmurafnib survie

PI3K: activit oncognique

Phosphatidylinositol 3-kinase
Active la kinase AKT (protine AKT apoptose et immortalit)

PTEN: enzyme qui contrebalance cette activit = gne suppresseur de

tumeur

mTOR: protine effectrice: srine-thronine kinase rgulant la

progression du cycle cellulaire ( )

= acclrateur de la croissance cellulaire

Molcules actives: inhibiteurs de mTOR

Temsirolimus (Torisel)
Everolimus (Certican)
Rapamycine (antibiotique et antifungique) bloque mTOR

THERAPIES CIBLEES
Rsistances aux thrapies cibles
Mutations K Ras
permettent de prdire la non-rponse au cetuximab et au
panitumumab dans le cancer colorectal
Dans ces cas l TTT anti-angiogniques (bvacizumab)
Mut kRAS dans le cancer bronchique:
Inhibiteurs de Mek ou de mTOR

Inefficacit de certains traitements?

Anti-angiogniques inefficaces dans le cancer du sein

Personnalisation des traitements

Association de thrapies cibles entre elles
Sein anti her 2+ Anti-thyrosine kinase double le rsultat

Activation oncognique de Ras

Facteur de
croissance, e.g.EGF

Rcepteur EGF

Mb cellulaire
P

Ras GDP
inactif

activation

Ras GTP
actif

raf

Inactivation par
hydrolyse de GTP

Complexe adaptateur
Grb2-SOS

GAP
P

MEK

Bloqu dans Ras mut

ERK

Facteurs de transcription
P

THERAPIES CIBLEES

THERAPIES CIBLEES

THERAPIES CIBLEES

Essais cliniques avec TTT cibles

PERSPECTIVES THERAPEUTIQUES

IV-4 PERSPECTIVES THERAPEUTIQUES

PERSPECTIVES THERAPEUTIQUES
Thrapie Gnique
La thrapie gnique ne concerne pas seulement la cancrologie
(2/3 des essais cliniques)
En thorie: un gne thrapeutique antitumoral peut tre utilis
pour tenter dinterfrer avec les anomalies du cycle cellulaire
pour dtruire les cellules cancreuses
Pour augmenter leur reconnaissance et leur limination par le
systme immunitaire
Pour ralentir leur invasion ou leur dissmination
A linverse, un transfert thrapeutique de gnes protgerait la
les cellules normales des effets de la chimiothrapie ou de la
radiothrapie
Des rsultats significatifs parfois spectaculaires ont t obtenus dans des modles
de tumeurs transplantes, souvent immunogniques et de ce fait sensibles de
nombreux traitements immunologiques ou chimiothrapiques
Peu de rsultats ont t publis sur des tumeurs animales spontanes ou
provoques par transgnse

PERSPECTIVES THERAPEUTIQUES
Thrapie Gnique

Ncessit dutiliser un vecteur (un virus) pour transfrer le

gne
Il peut sagir dun adnovirus (-utilis)

Subsiste toujours un caractre pathogne li aux gnes rsiduels non

liminables

Il sagit le + souvent dun rtrovirus

Permet d'insrer la nouvelle information gntique dans le gnome de la

cellule cible
Implique une tape de retrotranscription
Le virus sintgre uniquement dans des gnes qui sont en phase active de
transcription
Il est indispensable que les retrovirus soient compltement inactivs
Grande scurit biologique (actuellement drivs du HIV) Risque de
leucmies rare

Transfert de gnes dans les cellules souches

Lutilisation de la cellule souche hmatopotique adulte vise

thrapeutique a progress depuis 30 ans

PERSPECTIVES THERAPEUTIQUES

Thrapie Gnique
PROCEDES

Correction de mutations
inhibition doncogne
utilisation de gnes suppresseurs
Chimiothrapie molculaire
gne suicide
chimioprotection de tissus sains
Immunothrapie gnique (la majorit des essais)
in vitro (TIL, CD, cellules tumorales)
in vivo (cytokines, molcules de co-stimulation)

Oncolyse virale

PERSPECTIVES THERAPEUTIQUES

Thrapie Gnique

Correction de mutations
utilisation de gnes suppresseurs
Remplacer un gne mut ou un gne
manquant (gnralement un gne
suppresseur de tumeur) qui sert
contrler la prolifration cellulaire avec
une copie normale de ce gne.
Buts de lintro dun gne suppresseur:
Linduction dune mort cellulaire
(apoptose), et/ou
La production de modifications dans le
comportement, linvasivit ou le
potentiel mtastatique dune cellule.

PERSPECTIVES THERAPEUTIQUES

Thrapie Gnique

Exemples: utilisation de gnes suppresseurs

Cancers anaplasiques de la thyrode
Laltration ou la perte dexpression du gne p53 favorise la
ddiffrenciation des cancers papillaires ou vsiculaires vers une forme
anaplasique
La rexpression de p53 par thrapie gnique bloque le cycle cellulaire
des cellules tumorales de cancer anaplasique, mais sans induire
dapoptose
Chez la souris athymique, la transfection du gne p53 sauvage dans des
xnogreffes de tumeurs anaplasiques a rsult en une limitation de la
croissance tumorale et une augmentation de lefficacit de la doxorubicine

Nagayama Y, Yokoi H, Takeda K, Hasegawa M, Nishihara E, Namba H, et al. Adenovirusmediated tumor suppressor p53 gene therapy for anaplastic thyroid carcinoma in vitro and in
vivo. J Clin Endocrinol Metab 2000;85:40816.

Ces rsultats sont susceptibles dtre amliors par ladjonction dun

inhibiteur dhistone dsactylase rediffrenciant la cellule tumorale
Imanishi R, Ohtsuru A, Iwamatsu M, Iioka T, Namba H, Seto S, et al. A histone deacetylase
inhibitor enhances killing of undifferentiated thyroid carcinoma cells by p53 gene therapy. J Clin

Endocrinol Metab 2002;87:48214.

PERSPECTIVES THERAPEUTIQUES

Thrapie Gnique

Correction de mutations
inhibition doncogne (Thrapie gnique knockout)
Plusieurs mthodes
Dlivrance dun oncogne mutant dominant ngatif
Dlivrance dun ARN (ribozyme qui va dtruire lARNm de
loncogne)
Dlivrance dun ARNm antisens qui se lie lARNm produit
par loncogne
Rsultats +
sur cultures cel

PERSPECTIVES THERAPEUTIQUES
Thrapie

Gnique

Chimiothrapie molculaire
gne suicide (Ganciclovir)
Transfert de gnes rendant les cellules sensibles une drogue
Objectif: Activation dune prodrogue non toxique en drogue toxique
(uniquement dans les cellules tumorales)
Principe: transfrer in vivo dans les cellules tumorales un gne codant pour
une enzyme normalement absente du patrimoine des cellules

Exemple chez lhomme:

Vecteur= HSV 1 portant le gne de Thymidine kinase

Seules les cellules en division (cancreuses) intgrent le virus
Injection du virus dans la tumeur. 7 j aprs Ganciclovir pendant 14 j
Tk du virus va phosphoryler le Ganciclovir (non phosphoryl donc inactif)GCV-TP
(analogue de la guanosine) Apoptose cellules tumorales
Etude exprimentale
prometteuse
Essai de phase III dans
des glioblastomes oprs
Rsultats mitigs

PERSPECTIVES THERAPEUTIQUES

Thrapie Gnique

Immunothrapie gnique (la majorit des essais)

Les cytokines sont des facteurs impliqus dans la
prolifration cellulaire et ont des effets sur le systme
immunitaire qui peuvent tre dune utilit thrapeutique
Lide de base est de:
modifier la cellule tumorale ex vivo avec un gne codant
pour une cytokine
puis de r-administrer la cellule modifie au patient (aprs
une irradiation pour prvenir toute multiplication cellulaire) et
- laisser le systme de lhte mettre en place une rponse
systmique immune antitumorale.
ex de gnes cibles pour cette stratgie: IL1, IL2, IL4,
IL6, IL7, IL12, TNF, JE/MCP1 (SCYA2)

PERSPECTIVES THERAPEUTIQUES
Thrapie Gnique
Oncolyse virale
Principe: production dun adnovirus virus (0NYX-015): qui ne peut
se reproduire que dans des cellules contenant une p53 anormale
mais pas dans des cellules saines (rplication slective)
Le but est de modifier sa structure gntique afin de le rendre plus
destructeur pour certaines cellules cancreuses (dclenche une
ncrose), tout en pargnant les cellules saines
Cette "slection" est rendue possible par lexistence dans ces
cellules cancreuses dun gne "drgul" qui les diffrencie des
autres cellules, et qui est reconnu par le virus
Essai clinique chez patients atteints de cancer des VADS
Rsultats: Au bout de 6 mois aucune des tumeurs traites navaient
progress/tumeurs non traites
A controlled trial of intratumoral ONYX-015, a selectively-replicating adenovirus, in
combination with cisplatin and 5-fluorouracil in patients with recurrent head and neck
cancer, F. R. Khuri & al., Nature Medicine, 2000 Aot Volume 6, N8, pp 879-885.

PERSPECTIVES THERAPEUTIQUES
Thrapie Gnique

PERSPECTIVES THERAPEUTIQUES
Thrapie Gnique
Ncessit damliorer les stratgies
Utilisation de nouveaux vecteurs limitant les insertions
gnotoxiques
Rduction de la quantit de cellules exposes au vecteur
puis rinjectes au patient
Chimeric antigen receptor-modified T cells in chronic lymphoid leukemia.
Porter DL et al. N Engl J Med. 2011 365(8):725-33

Immunothrapie

Limmunothrapie passive

Elle constitue un volet important de ce quon appelle maintenant les thrapies

cibles. Limmunothrapie passive consiste en effet administrer au malade des
anticorps artificiels (dits monoclonaux ) destins viser une cible molculaire
prcise prsente de faon plus ou moins spcifique la surface des cellules
cancreuses..

Limmunothrapie active.

Le principe de l'immunothrapie anti-tumorale est d'amliorer le fonctionnement du

systme immunitaire en agissant sur l des dfenses et la dtection des tumeurs
furtives . Limmunothrapie active se pratique selon plusieurs modalits

limmunothrapie non spcifique

cette approche vise stimuler lactivit globale du systme immunitaire, sans cibler
la tumeur particulirement.
On peut utiliser pour cela des molcules nommes cytokines (par exemple
linterfron alpha) qui stimulent la prolifration des cellules immunitaires
On se sert aussi dans certains cas (cancer de la vessie, par exemple) de BCG forte
dose, qui sert vacciner contre la tuberculose.

Immunothrapie

limmunothrapie spcifique ou vaccination thrapeutique :

cette stratgie thrapeutique consiste prlever, mettre en culture et manipuler

au laboratoire les cellules tumorales ou les cellules immunitaires du malade avant
de les lui rinjecter.
Dans le premier cas, on cherche rendre les cellules tumorales plus
immunognes, cest--dire plus visibles par le systme immunitaire.
Dans le second cas, on cherche stimuler les cellules immunitaires pour les
rendre plus agressives et plus efficaces pour dtruire la tumeur.
Dans les deux cas, ces manipulations consistent introduire un gne appropri
dans les cellules du malade cultives en laboratoire dans des conditions qui ne
pourraient tre ralises sur le malade lui-mme. Il faut bien souligner que lon
parle ici de vaccination thrapeutique qui na rien voir avec la vaccination
prventive des maladies infectieuses (ttanos, poliomylite, etc).

Association thrapie cible par Vmurafnib (anti-BRAF) et immunothrapie

par Ipilimubab qui stimule le systme immunitaire dans le traitement du
mlanome mtastatique
(rsultats de lessai en cours)

Immunothrapie
Exemples rcents

1/Ex vaccination anti-tumoral MUC-1 dans le cancer bronchique

Etudes ralises chez lhomme (association vaccin/chimiothrapie dans le Cancer

bronchique). Rsultats encourageants mais pas sur la survie

Therapeutic vaccination with TG4010 and first-line chemotherapy in advanced non-small-cell lung cancer: a controlled
phase 2B trial. Quoix E, Ramlau R, Westeel V, Papai . Lancet Oncol. 2011;12(12):1125-33. Epub 2011 Oct 21.

2/Vaccination exprimentale chez la souris atteinte dun cancer de la prostate

Le vaccin a t fabriqu en intgrant dans le virus de la stomatite vsiculaire

(VSV) la banque d'ADN provenant du tissu prostatique sain de la souris.

MUC1 = glycoprotine surexprime par cellules tumorales bronchiques

Dans les cellules tumorales, MUC1 prsente une glycolysation rduite qui permet de
dcouvrir le core protique favorisant une rponse immunitaire humorale et cellulaire
Vaccin TG4010 (transgne)= souche attnue du virus de la vaccine dAnkara, modifi pour
exprimer la protine MUC1 et linterleukine 2

Travail de chercheurs de Leeds (UK) en association avec l'quipe de la Mayo Clinique

(USA). Le systme immunitaire a pu auto-slectionner les bons antignes pour ragir
contre la tumeur
Le processus d'auto-slection a t dclench lorsque le vaccin a t inject dans le
sang, une approche vaccinale beaucoup plus pratique quune injection dans la tumeur

Source: Nature Medicine 19 June 2011. DOI 10.1038/nm.2390 Broad Antigenic Coverage Induced by Viral
cDNA Library-based Vaccination Cures Established Tumors.

Bibliographie

http://lara.inist.fr/bitstream/handle/2332/1427/INSERM_cancer
envir2008_chap1-3.pdf?sequence=2

Angiogense tumorale Tumor angiogenesis

Andras BIKFALVI. Bull Cancer 2006 ; hors srie : 154-64

Perspective davenir. De la recherche fondamentale au

dveloppement de nouvelles thrapeutiques visant inhiber
les diffrentes tapes de la transduction du signal : application
au cancer du sein. Bull Cancer 2003 ; 90 (10) : 851-64

PERSPECTIVES THERAPEUTIQUES

Thrapie Gnique
Quelques exemples

17 patients atteints de mlanome avanc avec deux traitements.

1/Dcouverte de quelques lymphocytes T anti-cancer (en petit nombre)
Extraction de ces lymphocytes T tumoraux particuliers
Mise en culture
Rintroduction dans le systme immunitaire des patients
2/Modification de lymphocytes T normaux en lymphocytes anti-cancer
Ces nouvelles cellules ont t gntiquement modifies pour permettre
le transport du rcepteur qui reconnat les cellules du mlanome, elles
taient donc capables de combattre les tumeurs. Les rsultats ont t
encourageant sur 15 des 17 patients de l'tude.