VALUATION PAR SPECTROPHOTOMTRIE

DES TENEURS EN CHLOROPHYLLE fta " FONCTIONNELLE

ET EN PHOPIGMENTS
DES SUBSTRATS MEUBLES MARINS
omaDE LA RECHERCHE stlENTIROUE ET TECHNIOUE OUTRE-MER
DOCUMENTS SWNTlFlOUES BE LA MISSION Of L'D.I.S.T.O.M. ANOSY-BE
1loeumen. 0'45 1
M.-I. PLANTE-CUNY
;uill.t 1914
OFFICE DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE ET TECHNIQUE OUTRE-MER
MISSION ORSTOM DE NOSY-BE (MADAGASCAR).

EVALUATION PAR SPECTROPHOTOMETRIE
DES EN CHLOROPHYLLE FONCTIONNELLE ET EN
DES SUBSTRATS MEUBLES MARINS.
par

M.-
Document nO 45 Juillet 1974.
biologiste de l'O.R.S.T.O.M., Centre Ocanographique
de Nosy-B, B.P. 68, NOSY-BE. et Station Marine d'Endoume,
13007 Marseille (France).
- 2 -
SOMMAIRE.
::1-=_=_=_=
Introduction.................................................. 4
Abstract. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
PREVIIERE PARTIE.............................................. 6
l - But de l'tude et problmes soulevs ...... 6
1-1- But des tudes sur substrats meubles ., 6
1-1-1- Objectifs biologiques........................ 6
1-1-2- Objectifs gochimiques....................... 7
1-2- Les tapes principales de la progression des
techniques. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8
II - Protocole utilis Nosy-B sur des sables ou des vases. 12
11-1- Rcolte du sdiment 12
11-1-1- Deux types de collecte pour quatre objectifs
diffrents .................. 12
11-1-2- Quantit de sdiment et traitement avant
l'extraction des pigments
11-2- Extraction des pigments
11-2-1- Broyage et pese
1I-2-2- Solvant ............
11-2-3- Rfrigration
11-2-4- Centrifugation
11-3- Mesures spectrophotomtriques
11-3-1- Matriel utilis
11-3-2- Lectures des densits optiques
11-3-3- Oprations finales
14
16
16
17
17
17
17
17
18
19
. . 1...
- .3 -
11-4- Calouls............................................. 19
11-4-1- Formules originelles 19
11-4-2- Formules du programme utilisant les dix
variables cites dans le texte 21
III - Programme de calcul en FORTRAN IV 22
DEtlXIE:f4E PARTIE............................................... 28
Discussion et critiques.
1 Rcolte du sdiment
1-1- Colleot e. . 29
1-2-Dimensions des chantillons 31
2 - Traitement de l'chantillon avant l'extraction 33
2-1- Le stockage 33
2-2- Le sohage 34
2-3- Le troyage a-a ."............................ 39
Solvant 2-4- .............................. 40
3 - Extraction, leotures, expression des rsultats 41
3-1- Extraction 41
3-2- Leotures "....... 42
3-3- Expression des rsultats 44
CONCLUSION. 44
TABLEAU CHRONOLOGIQUE: Evolution des mthodes d'extraotion et
de mesures par spectrophotomtrie, des pigments vgtaux
photosynthtiques et da leurs produits de dgradation sur
des substrats meubles marins ou laOUL\tres 46
BIBLIOGRAPHIE'. 63
- 4 -
nTTRODUCTION.
=========:::::===
Une premire partie traite des applications actuelles de l'tude
des pigments dans les sdiments et analyse les problmes majeurs soule-
vs par cette tude en relation avec les objectifs poursuivis. Ensuite,
on expose une manire de procder pour valuer les teneurs en chloro-
phylle non dgrade (considre comme fonctionnelle) et en phopig-
ments drivs de la chlorophylle Cette mthode a t utilise pour
traiter 947 chantillons en 1969 et 1970. Les mesures sont faites par
spectrophotomtrie avant et aprs acidification. On donne en annexe un
programme de calcul (1) qui, partir de 10 variables, aboutit:
- l'expression des teneurs pigmentaires en microgr&mmes
par gramme de sdiment sec ot on milligrammes par m
2
de sdiment en
place.
l'expression de certains rappports pigmentaires,
aux moyennes; variances, carts-type, erreurs standard
de la moyenne et coefficients de variation, au terme d'une srie de
rsultats.
Dans la deuxime partie on donne des alternatives mthodologi-
ques de dtail en fonction des connaissances actuelles, des critiques
relatives des points prcis de la succession des oprations, les jus-
tifications des choix effectus et des explications
Enfin, un tableau chronologique partant de 1955 rcapitule les
travaux faisant tat de l'extraction de la chlorophylle et de ses dri-
vs dans les sdiments pour dos motifs essentiellement biologiques. Les
diverses phases opratoires tant rsumes, le tableau montre les per-
fectionnements apports ct pout servir orienter do fUDures recherches.
(1) Prcgramme ralis par R. PLANTE, Ocanogr<lphe biologiste,
Mission O.R.S.T.O.M. NosJ-B (Rpublique Malgache).
- 5 -
ABSTRACT.
The first part of this paper deals about present uses of pigments
study in sediments. The author analyses the main problems arising from
this study in oonnection with its required aims. A procedure is desoribed
for the evaluation of non degradated chlorophyll contents (considered
as funotional) and chlorophyll derived pheopigments contents.
This method has been used for the treatment of 941 samples in 1969
& 1910. Measurements were made spectrophotometrioally before and after
aoidification. A FORTRAN IV programm using 10 variables gives
- values of pigment oontents expressed as Fg of pigments
per g of dry sediment or as mg per m
2
of original bottom sediment.
values of sorne standard pigment ratios.
means, error, and variation
ooefficient alter each results sequenoy.
In the second part, peculiar methodological alternatives are given
for the present state of knowledge. Some special points of the
method are critioized and arguments are given to justify the adopted
solutions.
As a third part, a ohronologioal table beginning in 1955 liste
down the published worka which deal (from a biologioal point of view)
with ohlorophyll and derived compounds extraction from sediments. The dif-
ferent prooedure steps are summarized, the table shows the progressive
improvements and may be used for future researohes.
- 6 -
PREIUI PilTIE
l - BUT DE L' EillDE__:Q.T_E ,GBLENfES SOULEVES
L'intrt de l'exvraction et de la mesure des pigments photosyn-
thtiques comme indicateurs de "qunn"Li ts vgtales" dans l' tude
chanes trophiques n'est plus dmontrer. Depuis fort longtemps et
justo titre, on a, sous cet angle, tudi les mLlieux et les organismes
les plus divers.
Pour le domaine benthique, les travaux effectus sur des substrats
solides, artificiels ou non, sur des "mattes" algales, sur des rcifs
d'algues calcaires, sur des macrophytes, sont nombreux et cits par
WETZEL (1964), MOSS (1968), (1970).
Une application introssante de cette technique a t l'tude de
l'importance des symbiontes vgtaux des rcifs de coraux
(ODUM et ODUN (1955), MARGALEF (1959), BURKHOLDER et al. (1959), QASD1
et al. (1972)).
1-1. But des tudes sur substrats meubles:
L'tude des substrats meubles sous l'angle des teneurs en pigments
chlorophylliens ou apparents peut avoir des objectifs trs varis que
j'examine brivement, la mthodologie ayant progress grce la divor-
sit de ces objectifs.
La teneur en pigments est considre comme :
a) Production primaire passe (planctonique ou
benthique) due des pigments maintenant fossiles (fossiles biochimiques 1
VALLENTYNE (1954,1955), VALLE,'JlTTnill et [Link] (1957), VALLENTYNE (1960),
BROWN et coU-U'.N (1963)) ; ce point rejoint les objectifs gochimiques
( 1-2) .
b) - Production primaire actuelle duo
des pigments actifs, ou biomasse vgtale dcele par ces pigments :
.../ ...
- 7 -
- dont la quantit est considre comme indice du "standing crap" 1
ODUM et ODUM (1955), MOUL et (1957), TAYLOR ct OEBELELN (1966),
EATON et [Link] (1966), MOSS et noUNJ) (1967), rmss (1968, 1969), PAMA'rHli.T
(1968), STEELE et BAIRD (1968), TIETJEN (1968,1970), [Link] (1969),
et ROUND (1970), RIZNTIC et PHINNEY (1972), OLAH (1972),
- dont la prsence indique une capacit potentielle de fixer le
CO
2
si la lumire intervient (capacit de production primaire: ODUM ct
aL (1958), POMEROY (1959), HETZEL (1963, 1964), GOLDMAN et aL (1963),
BURKHOLDER et al. (1965), L&lCH (1970), FENCHEL et ST1JJRUP (1971),
BOUCHER (1972), BUNT et al. (1972), COLOCOLOFF (1972), PLANTE-CUNY (1973))
- dont la quantit est considre comme un indice de la pro-
duction d'une biocoenose en gnral (FlOUERAS (1955, 1956), SANDERS et
aL (1962)).
c) - Production primaire actuelle planctonique :
Il existe des relations diroctes entre les
teneurs en chlorophylles dtritiques des sdiments et la fertilit ac-
tuelle de l'eau de certains lacs (GORllilM (1960)).
- indice de surpeuplement ou de limite d'ge
dans des parcs hutres perlires ; indice obtenu par mesures des dri-
vs de la chlorophylle dans les foes de$ hu!treset dans les
(phopigments comme indicateurs d'accumulation de substances organiques 1
SAWADA et UYENO (1966)).
- indice de la quantit de sdiment filtre par
certains poissons herbivoros : rapport entre les teneurs en pigments
chlorophylliens des contenus stomacaux et celles dos sdiments en place
(ODUM 1970).
1-1.2.1. : tude dos conditions passes de la sdimenta-
tion g granulomtrie, conditions arobies ou anarobies (OORSCHKOVA 1938,
JASTREBOVA 1938, KLENOVA et Jl$J:':::BOVA 1938, ALDERSHOFF 1951, LAEVASTU
1958)
... / ...
- 8 -
1-1.2.2. : tude des processus biochimiques passs ou prsents
de dgradation des chlorophylles (LUBIMENKO et RAUSER-CERNOOUSSOVA (1930);
"sedimentary chlorophyll degradation products" : TRASK et WU (1930) cit
par FOX et (1941), FOX (1944), FOX et al. (1944), VALLENTYNE
(1954, 1955, 19j6), VALLENTYNE et CRASTON (1951)), aspects de la forma-
tion des ptroles (ORR et GRADY (1957), ORR et al. (1958), VALLENTYNE
__ __.._.....<;ot""......... "._.-'l. ....;:.
(1960), BROWN (1969)).
datation (FOGG et BELCHER (1961), BELCHER et FOGG
(1964), SANGER et GORHAM (1912)).
1-2. - Les tapes principales de la progression des techniques 1
Les premiers travaux effectus partir de 1921 par
LUBIMENKO (LUBIMENKO et RAUSER-CERNOOUSSOVA 1930) et poureuivis jusqu'
VALLENTYNE (1954, 1955) ont vu avant tout dans la chlorophylle extraite
des sdiments marins ou lacustres, un fossile biochimique.
A partir des travaux de FIGUERAS (1955) et de ceux de ODUM et ODUM
(1955), les pigments ohlorophylliens de la surfaoe des sdiments sont
oonsidrs comme des indices biologiques actuels, mais, jusqu'en 1963,
on dplore l'impossibilit d'valuer vraiment par ce moyen une quantit
de matire vivante : on ne parvient pas encore faire des mesures dis-
tinctives entre la chlorophylle dite "active" ou "fonotionnelle" ("fono-
tional chlorophyll" WETZEL 1963) et ses produits de dgradation partiou-
lirement abondants dans les sdiments (ODUM et al. 1958).
La chlorophylle souvent seule considre oause de son importance
prpondrante dans la photosynthse et, il faut bien le dire, oause
des difficults renoontres pour valuer les autres chlorophylles, se d-
grade principalement en chlorophyllide (perte du groupement phytol) ou
en phophytine (perte de magnsium) puis en phophorbide partir
des deux corps prcdents (aRR et al. (1958), VALLENTYNE (1960),
YENTSCH (1965a, 1966), SEELY (1966)).
Les spectres d'absorption de ces pigments dans divers solvants ont un
pic oaractristique aux environs de 665 nm (fig. 1 et 2). Le pio de la
chloropbylle 665 nm subit un lger glissement vers les plus grandes
1
... 9 -
longueurs d'onde quand cette chlorophylle est transforme en phophytine
glissement trop faible cependant pour servir pratiquement des mesures
diffrentielles (ODUM et al. 1958, WETZEL 1964). Cette bande commune de
forte absorption est situe entre 660 et 670 nm, mais la capacit d'absorp-
tion de la phophytine est dans l'aotone infrieure d'environ 40 %
oelle de la chlorophylle a. En consquence, il existe dans cette zone une
diffrence notable entre coefficients d'absorption spcifiques (0( ou
-, t: -1 -1 )
k en l.g om , [Link] cm de ces deux catgories de pigments dans
les diffrents solvants (1,6 1,7 dans l'actone). Cette observation
semble remonter au moins 1936 (STERN et WENDELEIN (1936) oits par aRR
et GRADY (1957, (1).
Pour des informations plus dtailles sur cette importante question
des pigments photosynthtiques, des produits de dgradation et de leurs
qualits spectrophotomtriques, on pourra consulter les travaux de
ARONOFF (1950, 1953), ill1ITH et (1954, 1955), BOGORAD (1962),
TALLING et DilIVER (1963), BARRETT et JEFFREY (1964), HOLT (1965), HOLDEN
(1965), CHICHESTER et NAKAYAMA (1965), YENTSCH (1965a et b;, ,1966),
VERNON et SEELY (1966).
Les spectres d'absorption des chlorophylles et pho-
phytines dans l'ther et les valeurs aux absorptions maxima
des coefficients d'absorption spoifiques sont donns dans SMITH et
BENITEZ (1954, 1955), souvent repris notamment par BOGORAD (1962), HOLT
(1965), et confirms par GOEDREER (1966).
...1...
2,22
2,12
1,54
1,58
1 ,64
1,90
rapport
coef. abs.
1,52
667
661
666-67
661,5
667
667
660,6
662
665
662,0
665
665,7
mthanol
A partir de donnes assez disperses, j'ai valu le rapport entre les ooef-
fioients d'absorption spcifiques de la chlorophylle et de la phophytine
dans les solvants suivants 1

pic pic
SEELY et JENSEN, ORR et GRADY chloroforme 665,3 668
(19
6
5) (1957)
_"- _"- thyl ther
SHITH et BENITEZ (1955) ther
VERNON (1960) actone 80 %
SEELY et JENSEN, ORR et GRADY dioxane
(1965) (1957)
MACKINNEY, LIVINGSTl
(1941) et al. (1953)
SEELY et [Link], LIVDmSTON mthanol
(1965) et al. (1953)
GOEDHEER (1966)
- 10 -
Pour deux pigments importants du microphytobenthos, la chlorophyl-
le et la chlorophylle 2, je donne quelques exemples significatifs 1
Pics importants: longueurs d'onde en nm
( ) Coefficients d'absorption spcifiques 1
-1 -1
l.g om

; Chlorophylle (ther)! ! ! i ! 1
i SMITH et (1955) 1 410 ! ! 430! 1 662 !
! ! (85 , 2) 1( 131 , 5) 1 ! ( 100, 9) 1
1 ! !!! 1
1! 1
Phophytine (ther) 1 J
SMITH et (1955) ! 408,5 661 J
! (132) (63,7) !
! 408 661 1
1(-) (-) 1
! 1 1 J J
Chlorophylle (ther)
SMITH et BENITEZ (1955)
GOEDHEER (1966)
! 1 1 1 1 1
Il! r 1
! ! 1 443,6 1 1
! 1 ( 447, 1 J
1 1 227) J 1
J ! ! 441 1 1
! 1 1 1 1
! Phophytine 2 (ther) 1 :
1 ffi1ITH et (1955) 1 ! 421,5 1 Il!

ChI. : Pho. ; du pic de 662 nm vers 667 nm avec
de l'absorption. - disparition du pic 430 nm,
de l'absorption aux environs de 410 nm.
ChI. Pho. c glissement du pic principal vers les plus faibles lon-
gueurs d'onde, mme absorption.
L'important travail de VEfu70N (1960) sur des vgtaux alimentaires
semble avoir ouvert oertains ooanographes des voies nouvelles. Cet au-
teur dtermine, par spectrophotomtrie, des quantits de chlorophylle et
phophytine et extraites par l'actone de vgtaux les plus divers
(pois, haricots, brocolis, pinards), congels, cuits ou en conserves. Les
quations de oaloul sont obtenues aprs dtermination de coefficients
.../ ...
- 11 -
d'absoprtion spcifique de solutions actoniques des longueurs d'ondes cs-
raotristiques. On trouvera chez cet auteur les spectres d'absorption des
pigments en solution dans l'actone 80 %(reproduits fig. 2) et de
../ ( -1 -1 )
nombreuses valeurs de 1.g .cm
Par exemple 1 ChI. actone 100 %pic 663 nma(= 92,6
actone 90 %pic 664 nm b(a 91,1
actone 80 %pic 665 nm 0<= 90,8
Phophytine.! actone 80 %_"_ 666-667 nm 0(= 55,2
L'ide de transformer totalement en phopigments les extraits chlo-
rophylliens par acidification a t utilise en 1954 par HOGETSU et ICHI-
MURA pour des algues de substrats durs et par ORR et GRADY (1957) pour des
sdiments marins.
WETZEL (1962, 1963, 1964) tente pour la premire fois ( ma connaio-
sanoe) d'estimer, sur des sdiments lacustres, la quantit de "chlorophylle
fonctionnelle
tl
par conversion diffrentielle en phophytine (extraits aci-
difis et non acidifis tudis en parallle).
C'est vers la poque que YENTSCH et MENZEL (1963) donnent,
pour le phytoplancton, une mthode d'estimation de la chlorophylle et de la
phophytine par fluorescence et par lectures avant et aprs acidification
des extraits.
En 1967, simultanment MOSS, utilisant les pics 410 et 430 nm, et
LORENZEN, utilisant le pic 665 nm, publient des formules de calcul de la
oh1orophy1le (y compris la chlorophyllide que l'on ne peut distinguer)
et des phopigments (phophytine et phophorbide partir de mesures
spectrophotomtriques. Les formules de LORENZEN utilisant le pia oaract-
;istigue de la chlorophylle semblent plus usites (STRICKLAND et P4RSONS
.. (1968, 1972), VOLLENWEIDER (1969. Une mesure la seule longueur d'onde
de 665 nm d'un extrait actonique avant et aprs acidification permet ainsi
une valuation trs rapide de la teneur en pigments (Ch1. et drivs).
Il est clair que ces estimations ne sont pas suffisantes pour donner une
image complte et nuance des vritables teneurs en pigments
et pigments dgrads. Mais la rapidit et.1a simplicit permettent de mul-
tiplier le nombre des chantillons dans l'espace et dans le temps
. .1...
- 12 -
Les corrlations obtenues entre ces estimations et les mesures
d'assimilation photosynthtique du C02 (mthode du 14C) dans nos exp-.
riences sur la surface des sdiments (PLANTE-CUNY 1973) montrent que lion
peut slapprocher dlune image du potentiel de production primaire dans
quelques zones caractristiques, cates sableuses, vasires. D'autre part,
les mesures stratifies, sur des tranches de carottes, donnent des r-
sultats cohrents par rapport aux observations de populations vgtales.
Il est vident qulun grand champ dltude reste ouvert pour amliorer les
extraits et apprcier llimportance et le rele dlautres pigments vgtaux
dans ces cosystmes o abondent les organismes photosynthtiques micros-
copiques les plus varis.
II - PROTOCOLE UTILISE A NOSY-BE SUR DES SABLES OU DES VASES.
Le parti pris de traiter un nombre important dl chantillons n rentu
ncessaire une mise au point technique. Parmi les travaux publis jus-
qulen 1969, au moment du dbut de cette tude, les donnes mthodologiques
relatives aux sdiments sont assez disparates et la standardisation
inexistante (cf. tableau chronologique).
Les chantillons ont t prlevs sur des fonds de vases et de
sables calcaires marins situs entre 0 et 65 m. Quelques chantillons
proviennent d'un fond sableux de rivire et d'estuaire et quelques autres
d'un fond sableux situ 83 m de profondeur.
11-1. - Rcolte du sdiment 1
En plonge libre ou en scaphandre autonome, ou pied pour les
niveaux superfioiels.
11-1.1.- 1
a)- "crmage" de la surface du sdiment sur 1/2 1 cm
d'paisseur. l'aide dlune petite pelle de 5 cm de bord d'attaque;
remplissage effectu dlicatement dlune botte de 200 300 cm3 environ,
de 7 cm de couvercle hermtique.
- petits coups au hasard
...1..
- 13 -
sur 1 2 m
2
de la surface du sdiment (dans le programme MOCO = EC)
- ~ b ~ e ~ t ! f ~ : - tude des variations saisonnires
des teneurs pigmentaires 1 collecte tous les 15 jours 3 semaines dans
la plupart des cas, tous les mois pour les stations les plus difficiles
d'accs.
- comparaisons entre diffrents bio-
topes 1 collecte des profondeurs diffrentes, dans des sdiments de
granulomtries diffrentes.
- mode de collecte a 2 1 prparation sur le fond
- - - - - - - - - - -
d'un quadrillage (programme MOCO = QU) par exemple grille mtallique de
1 m de cOt avec 16 cases. Le contenu d'un coup de pelle par oase est
plac immdiatement dans une botte numrote.
- ~ b ~ e ~ t ! f ~ 1 tude de la rpartition des pigments
en surface 1 microdistribution qui, en particulier, donne une ide de la
validit des mesures obtenues en ~ et permet de dterminer la surface
"crmer".
b)- carottage 1 (MOCO = CA)
Tube en plexiglas bord d'attaque tnil16 en biseau. ~ in-
trieur 2,7 cm (8 - 5,7 cm
2
, longueur 30 cm au moins). Deux bouchons sont
attachs au tube par des liens t on enfonce trs dlicatement le tube dans
le sdiment, on bouche la partie suprieure, on retire le tube, on bouche
la partie infrieure tout en relevant le bouchon suprieure et en le re-
plaant ensuite. Les tubes sont toujours ensuite maintenus verticalement,
rassembls dans un sac en plastique pour la remonte.
Note 1 Ces prcautions, qui peuvent parattre excessives, sont ncessaires
pour obtenir en fin de manipulation une authentique "tranche" de ce qui
existe in situ. Il est incontestable que la couche superficielle est la
plus fragile du point de vue de la collecte, c'est pourquoi la manipula-
tion en plonge est recommande autant que faire se peut.
Les carottes sont congeles immdiatement bord du bateau ou le
plus tOt possible. L'tude des pigments se fera sur des tranches de ca-
rottes de 1/2 ou 1 cm d'paisseur.
- objectifs 1 tude de la rpartition des pigments dans
- - - - ~
l'paisseur du sdiment.
. ..1...
II-1 .2.
pigments
- 14 -
Quantit de sdiment et traitement avant l'extraction des
11-1.2.1 - Cas de ll"crmage" 1
Compte-tenu des ralits biologiques
d'utilisation de la lumire par les organismes chlorophylliens), j'ai choisi
de prlever la pelle sur une paisseur faible (0,5 1 cm =
EPSED du programme). J'ai choisi (cf. 2me partie) de rapporter les teneurs
un poids sec sdiment (/Ug.g-1) puis une surface (mg.m-
2
)
de sdiment en place. L'extraction tant effectue sur du sable humide pra-
lablement pes (ordre de grandeur 3 g), ici intervient un essorage.
11-[Link] - Essorage 1 terre ou sur le bateau.
Le rcipient de colleote est renvers dans un en-
tonnoir garni de plusieurs paisseurs de papier filtre trs absorbant. En
dernier lieu, en contact avec le sdiment on plaoe un filtre Whatman nO 6,
15 om, choisi pour son pouvoir de rtention lev (90), un peu infrieur
celui des filtres de verre GF/C 100) mais alli une vitesse de fil-
tration rapide et une rsistance forte sans noessiter d'appareil de filtra-
tion. Il s'agit d'absorber vite l'excs d'eau collect invitablement, qui
ne fait pas partie du "milieu" que reprsente le "sdiment en place". Si le
roipient de collecte est bien rempli de sable au cours de la plonge, il y
a peu d'eau susceptible de s'couler lors de l'essorage.
Note 1) : Une partie du sable essor servira pour les mesures d'assimila-
tion du 140 (PLANI'E-GUNY 1971).
Note 2) 1 A oe stade peut intervenir une conglation (-20
0
0) si la suite
du traitement n'est pas immdiatement possible.
11-1.2.1-2 - Oprations s;eciales pour chaque station nouvel-
le non suivie rgqlirement
a) - on value (par ex. par peses du
sable dans de petites prouvettes gradues) sur du sdiment essor, le
spcifique approximatif du sdiment humide (variable PS, en
du programme), afin de pouvoir rapporter les rsultats de l'extraotion
.../ ...
- 15 -
et des calculs une surface.
b) - on rserve une coupelle de sable essor (30
50 g environ) pour valuer aprs schage l'tuve (80 100C pendant
24 h.) la teneur en eau du sable humide essor afin de choisir la oonoen-
tration actoniqua pour l'extraction (of. 2me partie discussion). Cette
manipulation simple est ncessaire chaque fois que les conditions de l'es-
sorage ne sont pas identiques entre elles (par exemple 1 dure de l'esso-
rage, variations de 9 22 %d'eau pour un sable grossier). Des essais
pour uniformiser les conditions de l'essorage ont t effectus avec une
essoreuse de mnage : les rsultats ne furent pas plus reproductibles que
par de plus, les organismes risquaient
abtms, l'appareil tait peu rsistant l'eau de mer et la ncessit
d'utiliser l'lectricit pouvait un handicap dans oertains cas.
: Cette valuation grossire de la teneur en eau ne peut servir la
dtermination exacte du volume d'eau de chaque chantillon - dono du volu-
me de l'extrait actonique - car le broyage ultrieur de l'chantillon
(of. 2.1.1.) affeote trs sensiblement cette teneur en eau (vaporation).
1I-1.2.2. : Cas du carDttage 1
L'axprience m'a montr que dans de nombreux cas,
les tranches de 1 cm d'paisseur taient trop importantes pour une extrac-
tion dans un volume de 6 90m
3
d'actone, les teneurs en pigments tant
trop fortes dans les premiers centimtres. J'ai adopt par la suite des
tranches de 1/2 cm d'paisseur, pesant entre 2 et 5 g environ. Il ne me
semble gure possible de dcouper plus finement et plus prcisment la
main une carotte congele. Un essorage sur papier peut 6tre noes-
saire pour le premier centimtre dcoup: en principe l'eau surnageante
est limine (glace) mais l'interface eau-sdiment il faut prendre gar-
de de ne pas altrer une zone particulirement riche en organismes et de
ne pas perdre le matriel superficiel ; dono en garde un peu de glace
qu'il faut nanmoins liminer lorsqu'elle est fondue pour viter une dilu-
tion trop grande de l'actone.
... / ...
- 16 -
11-2. - Extraction des pigments 1
11-2.1. : et pese
Oprations raliser sur le sdiment humide, le plus
rapidement possible, la semi-obscurit (salle de balances non claire),
et, en pays tropical, dans une pice climatise.
11-2.1.1. : : dans les deux cas (crmage carottage)
- un sous-chantillon de 10 12 g environ de
sdiment essor est broy dans un mortier de porcelaine pendant quelques
minutes (sable calcaire; pour un sable siliceux, prvoir un mortier
d'agate).
- : broyage de chaque tranche de carotte. Pour
les vases, l'exprience a prouv que le broyage tait inutile (extraction
de quanti ts quivalentes de pigmellts avec ou Sans broyage).
numrot,
11-2.1.2.
a)
Peses 1
dans une phase prparatoire, on aura lav, sch,
- des tubes en plastique de diffrentes
marques se sont tous imprgns de chlorophylle au bout d'un certain temps.
- pour leur rsistance, leurs dimensions
en rapport avec la centrifugeuse dont je disposais, et les quantits de
sdiment traiter, j'avais choisi les tubes "Jena Glass, Schott Mainz
G 20" de 12 13 ml environ.
des en tflon pour ces tubes
les tubes, contenant chacun une pince de C0
3
Mg
(pour prvenir la dgradation possible in vitro de la chlorophylle en
alcalinisant le milieu), et les bouchons sjournent plusieurs jours dans
les dessicateurs "silicagel".
- les tubes secs avec C0
3
Mg sont pess l'avance
au mg prs en g du programme de calcul)
on prvoit gnralement 3 chantillons de sable
par station "crme".
.1....
-17-
b) - pese de l'chantillon de sable humide (essor, broy,
introduit la spatule dans le tube adquat).
En gnral, pour les stations entre 5 et 30 m, riches en pigments,
l'exprience m'a conduite adopter le poids approximatif de 3 g de sable
humide, l'extrait actonique devant conduire des densits optiques
665 nm infrieures 0,6 dans une cuve de 1 cm de trajet (cf. 2me
partie 1-2). Les 10 12 g de dpart donnent 3 sous-chantillons. Cette
pese donne la en g, du programme de calcul : tube sec + sable
humide.
11-2.2. Solvant :
- introduction immdiate de l'actone par une burette au-
tomatique Metrohm qui dlivre 9 ml d'actone 90 % du pro-
gramme). Cette quantit est diminue si le sable semble peu riche.
Dans la 2me partie (2-2 fin du paragraphe) on explique oomment il
a t tenu compte de la teneur en eau du sdiment pour ohoisir une conoen-
tration de dpart de l'actone entre 100 %et 90 %.
- on bouohe immdiatement et on agite vigoureusement.
le tube est plac dans une botte tanohe la lumire
(prcautions prendre quand on introduit les tubes successivement).
11-2.3. Rfrigration 1
_ f
- bote obscure au rfrigrateur (5C environ) durant 20
24 h. Agiter plusieurs fois. On s'arrange pour bien caler les tubes et
on agite toute la bote sans l'ouvrir.
11-2.4. : 1
- 4 5000 rv/min, 10 15 min, jusqu' obtention d'un
liquide limpide.
11-3. - Mesures spectrophotomtriques 1
11-3.1. : Matriel utilis:
- spectrophotomtre Beokman DU.
.. 1 ..
- 18 -
- cuves de de 2,5 ml, trajet optique 1 cm
ble L en cm du programme de
- bouchons pour cuves.
- ouve tmoin aveo actone 90 %.
11-3.2. : des optiques:
- 750, 665, puis 430 nm : reoommandations gnrales
STRICKLAND et PARSONS (1968, 1972).
DO 750 : pour corrections de turbidit; dans le
programme, les DO 665 nm - DO 750 nm (avant acidifi-
cation)
= DO 430 nm - 3 DO 750 nm
- on acidifie les extraits: dans les ouves, y compris
la cuve tmoin, on ajoute 1 2 gouttes de rIel 1 N.
- on bouche la cuve, on agite vigoureusement.
- au bout de 3 5 mu on relit 750 nm et 665 nm.
DO 665 nm - DO 750 nm (aprs acidifica-
tion)
Note 1. L'exactitude est amliore si la densit optique de la premire
lecture 665 nm est suprieuro 0,200 (WETZEL et WESTLAKE (1969)
voir 2me partie 1-2).
Note 2. : J'ai quelquefois effectu des lectures 665 nm, 645 nm, 630 nm
pour appliquer les quations trichromatiques de STR1CKLAND et PARSONS
(1968) mais les rsultats sont incertains car les pigments surnumraires
sont probablement plus importants dans le que dans le phytoplanc-
ton. Ce type de calcul n'a donc pas t inclus dans le programme.
Note 3. : La lecture 430 nm sert valuer le rapport DO 430/DO 665 oon-
sidr comme indice d8 diversit pigmentaire (MARGALEF 1961). Des prci-
sions sont apportes dans la 2me partie (3-2).
Note 4. : Quelques lectures 410 nm ont permis da vrifier le point de
vue de MOSS (1967) sur l'utilisation diffrentielle des pics 410 et
. 1
- 19
430 nm en prsence ou absence de phopigments (cf. fig. 1 at 2). La mtho-
de LORRfZEN, plus simple et plus sre ( mon avis), a saule t rotenue.
11-3.3. : 2prations 1
Les tubes et leurs rsidus sont placs l'tuve 80C
pour schage jusqu' poids constant.
Une pese donne alors la TS = tube + sdiment sec.
TH - T = poids humide; c'est la quatit relle de sdi-
ment sur laquelle a t faite
TS - T = poids sec ; la quantit de pigments lui est rap-
porte. Par diffrence (TH - TS) on dtermine la t0neur relle en eau de
l'chantillon ce qui permet d'valuer exactement le volume de l'extrait
actonique soit ACE + (TH - TS) (actone vers + eau de l'chantillon).
11-4. - Calculs 1
11-4.1. : Formules originolles 1
Les quations de (1967) conoernent des volumes
d'eau filtre (phytoplancton) 1
ChI mg.m-
3
= A K ! (665 0 - 665 a)
Vf l
v
CR [665aJ - 6650)
Vf 1
v
A = coefficient d'absorption de la chlorophylle a = 11.0
(11.0 correspond en ralit .1Q3, 0( tant le coefficient d'
spcifique de la ChI en 1. par 1960, soit
90,8 dans l'actone 80 %ou 91,1 dans l'actone 90 %; cf. A -2).
K = facteur destin rtablir la concentration initiale
en chlorophylle partir de la rduction d'absorption observe:
(1,7/1,7-1) soit 2,43.
R = maximum du rapport 665o/665a en absence de phopig-
ments = 1,7
Rappelons que cette valeur du rapport: 1,7, comparable au rsul-
tat Fo/Fa 1,6 1,8 valu par YENTSCH et ME1ZEL (1963) (fluoromtrie),
... / ...
- 20 -
a t trouv exprim8ntaloment par en tudiant des mlanges de
chlorophylle a et de phopigmdnts (gradients croissants) : s'il n'y a pas
de Chl. le rapport = 1, s'il n'y a dG la Chl. a il est de 1,7.
La valeur exprime'ltalo Gst confirme par la valeur du rapport
entre les coefficients d'absorption spcifiques 665 nm de la chlorophyl-
le et de la phophytine dans l'actone (1,64 dans l'actone 80
d'aprs ls donnes de (1960) ; 1,60 si l'on corrige le ooeffioient
d'absorption spcifique de la phophytine pour perte de l'atome de Mg).
6650 "absorbance" avant acidification (densits optiques)
665a " absorbance
ll
aprs acidification
v = volume d'actone utilis pour l'extraction
Vi = litres d'eau filtre
l = largeur de la cuvette (cm).
CGS quations sont reprises en 1968 et 1972 dans les manuels
de SrRICKLAND et PARSONS (A x K = 26,7).
WETZEL et WESTLAKE in VOLLENWEIDER (1969) donnent une quation
gnrale pour la chlorophylle en /ug par "chantillon" (eau filtre ou
tout autre chantillon). Le coefficient 1,7 est adopt "neglecting the
small change in molecular weight when chlorophyll is changed ta
La valeur du coefficient d'absorption spcifique de la chlorophylle
665 nm par contre est choisie comme gale 84 : "a value of 84 may be
preferred" par rapport la valeur de VERlWN reprise par LORENZEN. Cette
valeur de 84 est issue de TALLING et DRIVER (1963) et a t calcule em-
piriquement. La justification des divers auteurs n'tant, mon avis, pas
trs convaincante et la valeur de VERNON (90,8) tant actuellement la plus
usite, o'est cette dernire qui a t retenue.
GOLTERMAN et CLYMO (1969) soulignent nouveau qu'il existe des
diffrences pouvant atteindre 25 %dans les coefficients d'extinotion don-
ns par les divers auteurs (cf. 2me partie 2-2 notG infrapaginale) et
recommandent d'utiliser 89 et 56 (1.g-1. cm-1) respectivement pour la chlo-
rophylle et la phophytine (ce qui donne un rapport de 1,58) alors que
le rapport correspondant R est comme gal 1,7.
Comme on le voit, il reste eucore affiner des points de dtail.
Il n'est pas inutile de rappeler comme le font STRICKLAND et PARSONS (1968
et 1972) que "par cette mthode, il est possible d'obtenir une mesure
... / ...
- 21
de la quantit totale de chlorophylle et des phaeophytine et phaeo-
phorbide a, mais non de la chlorophyllide a ou des phaeophytines et phaeo-
- -
phorbides des autres chlorophylles. Pour une analyse complte de toutes
les chlorophylles et de leurs produits de dgradations il n'est probable-
ment pas d'autre alternative les mthodes chromatogra)hiques qui sont
gnralement trop fastidieuses (tedious) pour une analyse de routine d'un
grand nombre d'chantillons. Pour une observation de routine, toutefois,
il est souvent suffisant d'obtenir une mesure de la quantit de chloro-
phylle a non-active en termes de quantits de
II -4-2.
dans le texte :
Ch!.
-1
jU
g

g
CHLAP CI
sdiment sec
26,7 (DO 665 - DO 665 A) ((TH-TS) + ACE)
(TS - T) L
ChI
-2 'do t 1
a mg.m se en pace 1
,'..",5,;:, MI ';ro, ...
CHLAS == CRAF (TS - T) x PS x 10 x EPSED
(TH - T)
'\- ,
. r'i; ......" (..., - "'\. ,,3,)(,.' ....
-1
Pho jUg g sdiment sec :
PHEOP == 26,7 (1,7 (DO 66
f
A-DO 6650U.J(TH-TS)+ACE)
TS - T) L
Ph
' -2 'd' t 1
eo mg.m se en pace :
PHEOS == PHEOP (TS - T) x PS x 10 x EPSED
(TH - T)
Les autres exprims sont :
P. HUM == poids de sdiment humide sur lequel a lieu
l'extraction
P. SEC poids de sdiment sec recueilli en fin
d'[Link]
.../ ...
- 22 -
PROP. EAU l
proportions respectives d'eau et de sdiment
PROP. SED
dans l'chantillon.
665 O/A = DO 665 O/DO 665 A domne une indication immdiate
de la proportion de produits dgrads
(1,7 en absence de pheo-pigments).
DELTA = DO 430/DO 665 0 (cf. 3-2 et 2me partie)
CHLA/PHE = rapport entre la Chl. a fonctionnelle et les
phopigments.
CHL/P.T. = rapport entre la quantit de Chl. fonction-
nelle et le total des quantits Chl. +
Pho.
Pour un groupe d'chantillons d'une station (en pratique
lorsque dans la suite des donnes le nO de la station ohange) on obtient
pour les 8 colonnes de rsultats concernant les pigments: moyenne,
variance, cart-type, erreur standard de la moyenne, coefficient de varia-
tion.
hemples : - dans le cas d'''crmage'' pour l'tude des variations saison-
nires en une station, nous avons extrait les pigments sur 3
tillons.
- dans le cas d'une carotte nous avons plusieurs demi-centim-
tres successifs.
- pour l'tude de la microdistribution nous avons trait 16
chantillons par station.
Quelques exemples numriques sont donns en annexe avec le pro-
gramme en FORTRAN IV qui constitue le pointmde la premire partie (3
sous-chantillons dans 4 stations diffrentes, une carotte de six 1/2 cm).
III - PROGRAMME Dg CALCUL z EN FORTRAN IV
ralis par R. PLANTE
avec la collaboration de M.-R. PLANTE-CUNY
140r--------------------------,
120
100
132

, ,
, 1
1 1
. ,
, ,
, 1
,
1
1
1
,
1
,
,
,

1
131,5
chi orophylle !
'-..
... ,
100,9
85,2
65 1
1
1
662667
550
,
,
,
1
.
,
1
,
,
,
,
,
,

1
,
,
"
, 63,7
600
phophytine ! ....
500
,,.....
. ,
,. \
..- ....;1" \.: \...
,
,
,
,
,
f
1
,
,
,
1
,
,
1
f
,
,
,
,
,
,
,
1
,
,
,
,
1
,
,
,
,
,
\
'.
.
40
60
80
Fig.l- Spectre d'absorption de la chlorophylle! et de
la pheophytlne!! dans '-ether.
(d'aprs SMITH et BENITEZ 1954)
chlorophylle!
\
,
"',
600
phophytine ! ......
550 500
...
o .
400
1
409'
20
longeur d'onde en nanomtres
Fi9.2. Spectre d'absorption de la chlorophylle! et de
la phophytlne! dans l'actone 80%.
(d'aprs. VERNON 1960)
*4 t * * * 4 *
DES TENEURS EN A FONCTIONNELLE,EH PHEOPIGMEHTS
ET DE RArpoRTS -PRES A
SUR CES ET MESURES AV
CFORMULES Of 1967 AUX sEDINfNTS)
* t.t * 4
11
21
31
41
51
61
71
SI
91
101
111
121
131
141
151
161
171
1S1
191
201
211
22:
231
HI
25:
261
271
UI
291
301
311
321
331
341
351
361
371
381
39:
401
411
HI
431
441
451
461
471
481
491
501
511
521
531
541
551
56:
571
581
591
601
611
621
631
(,41
65:
661
671
t81
691
101
711
721
731
141
751
761
771
'181
791
801
C
C
r.
C
c
C
C
r
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
C
DES PARANETRES
NPASS E NOM8RE O'OBSERVATIONS Que L'ON VEUT TRAITER
NOST NijMERO DE LA STAT:ON
DATE. OATi oU PRELEVEMENT
MOCOE oE COLLECTEICAROTTAGECCA),fCAEKAGE(EC),
QUAORILLASECQU)
NUEC NUMERO DE L'ECHANTILLON
T POIDS OU Tu8E SECHECG)
TH POlOS OU TuaE CONTENANT L'ECHANTILLON HUMIDECG)
TS _ POlOS DU TUSE CONTENANT Le SEDIMENT APRES SECHAGECG)
AcE = VOLUME O'ACETONE VERSE ("L)
L=LONGUEUR oU TRAJET EN CM (POUR CETTE SEAIE,L=1)
PS = POIDS SPECIFIQUE APPRCXIMATIF DU HUMIOE(G PAA CM3J
EPSED EPAISSEUR OU (CM)
DO 665 0 =VALEUR CORRIGEE POUR LA TURslDITE DE LA OFTIQUE
DE L'EXTRAIT ACETONIQUE A 665 AVANT ACIDIFICATION
DO 665 A CORRIGEE POUR LA TUROIOITE Df LA DENSITE OPTIQUE
DE L'EXTRAIT ACETONIOUE A 665 APAES ACIDIFICATION
00 430 VALEUA CORRIGEE POUR LA TUABIOITE DE LA DENSITE OPTIQUE
DE L'EXTRAIT ACETONIQUE A 430 HM,
DIMENSION D=NV*N MAX'N
DIMENSION NoST(2),DATE(2), MOCO(2),o(aOO),X(SOO,
DIMENS!ON AHCS),VC8),ETC8),EAM(S),CV(81

VRITE <,08,2)
IIUTE (108,22)
IIRITE C108,2)
INITIALISATION DES INDICES
N=O 1 U=K"1

LECTURE DES VAAIABLES
DO 999 .

SEPSEO,D06650,D0665A,D0430
CALCUL OES
IF(I,EQ,,)NOST(I+1,"NOST(I),DATE(I+1)=DATE(IJ,HOCOCI+1)"MOCO(I),
$GO TO 10
IF GO TO 1515
IF CDATE(1),NE,DATE(2 GO TO 1514
IF CMOCO(1),NE.MOCOC2 GO TO 1513
GO TO 10
1000 lZ"II+1
1515
1514 OATE(2)=OATEC1)
1513 MOCO(1)
CALL
CALL VAR CD,AH,V,ET,ERM,CV,8,N)
PAINT [Link]
PAINT 1518,v
PRINT 1519,ET
PR INT1 520, ERH
1521,CV
IIAIT(C108,1517), N=O
GO TOC10,'010),I%
10 L.1
CHLAP=C26,7.(006650-D0665A)*CTH-TS+ACE/ITS-T)L


PHEOS=CpHEOP*CTS-T)*pS*10*EPSEo)/(TH-T)
RAPAC=oo6650/00665A
OELTA=00430/006650
CHLApH=CHlAP/PHEOP
RApCLO-CHLAP/CCHLAP+PHEOP)
POIHU=TH-T
POISEC=TS-T
pROEAU=CTH-TSI/CTH-T)
pROS[o=CTS-T)/CTH-T)
N"N+'


PIGOE005
P168E006
PIG8E007
PIG8E008
P168(009
PIGBE010
PIGBE011
PIG8EOH
PIG8EC13
PIGBEOH
PI GaE015
PIGBE016
PIGBE017
PIGBE018
PIG8E019
PIG8E020
PIGOE021
PIG8E022
PIGBE023
PIG8E024
l'IGBE025
PIGBE026
PIGOE027
PIGOE028
PIGOE029
PIGBE030
PIGBE031
PIUE032
PIGBEOn
PI GBE034
PI G6E035
PIG8E036
PI GOE037
PIGSE038
PIGBE039
PIGOE040
PIGBE041
PIG8E042
PIGCE043
P!C8EQ44
PIG8E045
P168E046
PIGH047
PIG8t048
P I6BE049
PIG8EC50
PIGSEC51
PIGBE052
PIGBE053
PI GBEC54
PUBE055
PIG8E056
PIGSE057
l'IGU058
PIGBE059
PIGBE060
PIG8E061
PIG8E062
PIG8E063
PIUE064
PIGeE065
PIGSE066
PIG8E067
PIG8E06B
PI GSE069
PI GBE070
PIG8E071
PIGBEOn
PICHon
PIG8E074
PIGBE075
l'IG8E076
PI GBEOH
"IG8E078
111 C PIUE07V
all c IMPRESSION DES RESULTATS PIGIl080
a!1 WRITEC108.100) PIGREC81
a41 PIGli082
UI 999 pun083
a61 10'0 WRITEC108.Z) PIGaEOa4
ala [Link])
aal 1516 PI,IE085
a9a 151a FORMATC7X...[Link].19X..'.8CF7.2.X,.) PIGBE086
901 1519 FORMATC7X...[Link].RT5-TYPE.19X..'.8('7.2.X.. PIGIE087
911 1520 PI,.E088
92a 1521 FORMATC7X...[Link] DE VA
R
IATION.19X...aCF6.1.1. PIGIE089
931 IX. '.') p!GBE090
94a 1517 PIGIE091
9s, 100 FORMATC7X..,A4.16,A2,12,..lCF7.l.X..').2eF7.4,x.'"). PIGIE092
961 IIH7.l.X. '.- PIGUO?!
971 1 'OIIMATCU) PIGIl094
9111 2 FORIIAT(U.124') PIGU095
99a 22 FORII.TC7X...[Link].4X..,X,[Link].'.X...[Link].2X.PIGIE096
100a ..[Link]...[Link]'..[Link]/G.x...[Link]/MZ.'. PI61E091
101a [Link]/G.X...X.'PHEOI"2'.. 665 0/A...[Link] ..PI6.EC98
1021 SCKLA/PHE...CHL/P.T:..) PIGBE099
10S1 222 fORHAT(7X.P,HUMPOIOS OU SEDIMENT HUMIDE EN G,'I PIGIE100
1041 S7X.p,[Link] DU SEDIMENT S(CHE EN 6,'1 PIG8E101
1051 [Link]. ,ROPdRTIOM 0 EAU'I PI61E102
1061 [Link],SEO PROPORTIoN DE SEDIMENT sec'I 'IG11103
1071 [Link]./Ga A EN HICROGRAMMES [Link] SEDIMENT SEC'/pIGtE104
10al [Link]/H2
a
CHLOROPHYLLE EN PAR Ml DI SEDIMENT'I PIG6E105
109a [Link]/G. EN "ICROGRAMMES PAR G. DE SEDIMENT SEC'I PIG8E106
1101 [Link]/M2
c
'HEOPIGM[NTS EN l!lLLIGRA"MES PAR M2 OE SEDIMENT'I P1G.E107
1'11 S7X.665 O/AcRAPPORT DES OENSITES OPTIOUES A 665 HM AVANT ET ApRES '168E108
1121 S ACIDifICATION' 1 PIGBE109
1131 [Link]-RAPPORT DES DENSITES OPTIOUES A 430 ET 665 NM'I PI61E110
1141 '[Link]./PKlaRAPPORT DES QUANTITIS DE CHLOROPHYLLE A AUX QUANTITESPI'IE111
1UI 5 DE PHEOPUHEHTS'I PUBE112
1161 [Link]/P.T.-RAPPORT DES QUAHTITES DE A AU TOTAL C"LOPIG8E1'3
1111 SROPHYLLE A PLUS PHEOP1GMENTS') PI'11114
11al l [Link].9CF7.4 PI611115
1191 END PI Gnooo
11 SU8R9UTI"E [Link].S) VAR 0000
Il C " , l" V.R 0010
:Sa e aUT 1 [Link] DEs [Link]"[Link] , VAR 0020
41 e STAND. RD. COEFFICIENT DE YARIATION O'UNE "ATRICI VAR OOSO
SI C DE DONNEES, VAR 0040
6, C f , VAR 0050
71 C VAR 0060
al C , ( OlSCRIPTION DES PARAMETRES 1 VAR 0070
91 C NV NOMBRES DE CAXlS) VAR ooao
10a C NOIS - NOMIRE CPOINTS) VAR 0090
111 C o MATRICE DiS DONNEES CNV [Link] . VAR 0100
12. e STOCkEE SOUS FORME DI VECTIUR -CSUtTE DES COLONNES) VAR 0120
Ut C AM VECTEUR DES MOYENNES VAR. 0130
14. e ET VECTEUR DES ECARTSTYPES VAR 0140
Ua C y VECTEUR DES [Link] CNV) VAR 0150
16a C IRM- A LA MOYENNE VAR 0155
171 C CV VECTEUR COIFFICIENT DE VARIATION VAR 0160
111 C ......................................................., .... VAR 0170
191 c
:DIMENIION OCNV-N08S).AHCNV).VCNV).ETCNV).ERHCNV).CVCNV)
VAR 0180
201 e VAR 0180
211 C VAR 0190
Ua c DEMANDES 1 AUCUN VAR 0200
n. c ............................................................ VAR 0210
UI C VAR 02ze
25. e RIS e Il V A T ION VAR ono
26. C VAR OU5
na OIHENSION O(1).ve1).AMC1),ETC1).ERH(1).cve1) VAR 0240
Ua L.D'DO 1 2 [Link],LaL+1 VAR 0250
29. X2-0(L)-2,aOMX2
a
$OMX2+Xl YAR 0260
:SOa a YU 0270
31. C
YAR 0280
321 C CALCUL [Link] '[Link],VARIATION VAR 0290
ni e VU osoo
34. 2/'NO.S/CFNO.S1.)'eT(I).SQRTCVCI VAR 0310
SSa .100 VAR 0320
36. 1 CONTINUE VAR ono
37. C VAR 0340
!II RnURN VU 0360
S\ll
END
11
ZI
SI
"SI
61
"1
81
tl
101
111

X(1,.X1(1)
UaOINT"NV.J
0010 Ih" tJV
eo 10 IZ"11,NT,NV
zSaI3"X(IS).X1(IZ)
10 CONTINU!
00 12 Z.,.NT
12 XHU"X(I)
IIETUU
END
LIGCOL01
LtGCOLOl
LHCOLOS
LIGCOL04
LIGCOL05
LIGCOL06
LIGtOL07
LIGCOLOS
LIGCOL09
LUC001 0
*
*
$lATteN * P.H:!/ol. * [Link] [Link]*[Link]* CHLA/' * CIlLA/M2* PHEO/C * PHEO/M2r 665 0/1.* DELTA *CHLA/PHE*CHL/P.T.*
* * *
*':'(01 20270H 1* 3.00 *
. 2. *
.2217 * 7183 * [Link] " 33.63 * 1.11
*
7.31
* 1.57 * 2:75 * 4.60 * .62 *
*He1 20HOEC 2 [Link] * 2.34 * .l205 * .7795 * S.30 * * .81
* S.34 * 1.61 * 2:69 * 6.5& * .67
*U01 20270e 3 3.00 * 2.35 * .l169 * .711)1 * S.49 * 36. S1 * 'Il, * 4.89 * 1,62 * 2.65
7.46
.1I1!


* 5.29 *
35.08
.18 * 5.115 * 1.60 * 2.70 * 6.21
*
.86 *
VU1U:CES
* 04 * 2.07 * ,Dl, * 1.66 .00 * :00 * 2.,5 * .00
ECARTS- TV PE

20 * 1.44 * .20 1.29 * 02 * :05 * 1.47 * .03

ERREL:R STANDAU
* ,12 .83 *
.'1 *
.74
.C1 * :03 .85
.02 *

OE VARIATION
J.U *
4.,X
ZZ,3% * 22.0% * 1.4% * 1:8% * 23. 6% * ). n *
:T'02 2027DEC 1* 3,OC 2.18 * .2731 * ,7269 * 8.90 * S1,75 * 4,23 * 24.61
...
1.47 * 2:57 *
2.'0 *
,68 :
*nO! 20270ec 2* [Link] 2.22 * ,2612 *
,7388 * 8.61
*
50.66
4,27 * 25.22 *
1.47 2:55 *
2.02
.67 *
3*

2.21
* .2617 * ,7383 * 8.97 S2.96 * 4.50 * 26.;5 *
1,47
2:59 * 1.99 * .67
*
PIGMEIIITS

8.82 * 51.86 * 4.33 25.46 1,47
2.57
2.04 * ,07 *

VAR:UCU
* 04 * 1.11
.02 * .98 * 00 * :00 .00 .00
*
EC"arS-TYPE
* .19 * 1.0S * .14 * .99 *
.00
:02 * .06 * ,01
*
*
ERllfUI! STAflDUO
.11 * .61
08 * .57 ,CO *
:0' * .03 * .00 r

COEffICIENTS DE
* 2,a *
2,0%
3.3% * 3,9%
.3% * :8% * 2.1I% .9% *
lc270ec 1* 3.00 * 2,03 * ,323 .6161 20,35 * 110.05 * 12.00 * 64.89 * '.44 * 2:91

*
* 1.70 * .63
*"03 20270EC 2* 3.00 * 2.04 *
"184
,6116 * 21.06 * 114.84 * 11.88 * 64,79 * 1.45 * 2:80 * '.77 *
,04
*TK03 20270E S.
3.00
2.04 * .3195 .6805 * 20.S8 * 112.03 * 12.70 * 69.13 * 1.43 * 2.83 * 1.62 * ,62 *
*
PIGMENTS * 20.66 * 112.;)1 * '2,19 * 66.27 * 1.44 2' 8S * 10
VARIAI;CES
* .13 * 5.80 * .19 * 6,13 * .00 * * .01
*
.00

ECARTS-TYPE
* .36 * 2.41 * .44 * 2.48 * .01 *
:06
.08 * .01 *
*
EIlREU. STANDARO * .21 *
1.39 * .25 * 1.43 * ,00 * :03 * .04 .01

COEFFICIENTS DE VARIATION
* 1.n * 2.1% * 3.6% * * .51: * 2:0% * 4.51 * '.7X ..
:TK04 202TOEC 1* 3,00
2.06 * .3131 .6869 *
.5' *
2.48 * 11,56 * 55.61 * *
*
* .04 * .04 *
*TK04 20270EC Z* 3.00 * Z.07 *
3097
.6903 .26 * 1.24 * 13.45 * 65.01
*
1.01 * 3'S5 * .02 * .02 *
*TK04 20270EC S. 3.00 * 2.08 * ,S059 * .694,
* .S,
* 2.47 * 12.67 * 61.54 * 1.03 * * .04 * .C
4
*

PIGHEuTS
* .43 * 2.06 12.56 * 60.72 * 1.02 * 3:84 * .03 * .03 *
*
VARIANCES
* .OZ * .51 * .90 * 22.62 * 00 :00
.00
.00 *
*
eCARTS-TYPE
* .15 * .71 * ,95 * 4.76 * .01 * :01 * .01 * .01

ERREUR STANDARD
* .09 *. .41 * .55 * 2.75 * .01 * :01
.
.01 * .01
*
COEFFICIENTS DE VARIATION
* 34.6% * 34.6X * 7.6l: * 7.8% * .9% * :3% * 39.5% * 18,51 *
*
4.32 * .78 * .82010 ,1796 * 8.74 * 11.77 31.87
':96 *
*
*3A02230470CA11*
42.92 * 1.15 * .27 * .22 *
*8A02230470CA12* 3.07 * 88 * .71 loS * 211SS * 6.S2 13.96 31,08 66.S5 *
1.12
3.96 * .21 * .1" *
3.06 * .94 * .6946 * .3054 * 3.76 * 8.61 * 25.59 * S8.61

1.09 * 4:61 *
.15
.13 *
.aA0223047 CA 22* 3,32 * 1.12 .6621 * .3379 * 2.67 *
6.76
20.41

S1.13 * 1.08 * 4;52 .13 * ,12 *
.aAC223047eCA31 3.72 * 1.27 * 6S
9
0 * .3410 * 2.42 * 6.19 * 18.54 * 47.41
* 1,08
4: 53 * .13 * .12
*8A02230470C"32* 4,17 * 1.39 * .6674 * .3326 * 2.70 * 6.73 * 17.07 * 42.57 * 1.10 * 4:70 * .16 .H *
*

* 4,47 * 9,00 * 24.09 * S1 b3 * 1.10 * 4.38 * .18 .15
*
VARIANCES
* 6.71 * 10.10 * 41'.06 * 89.39 * .00 * :'1 *
.00 * .00 *
*
ECARTS-TYPE
* 2.59 3.18 * 6.41 * 9.45 03 * :33 * .06 .04 *
*
ERREUR STAliOARO
* 1.06 * 1.30 * 2.62 * 3.86 * .01 * "11 * .02 .C2 *
*
COEfFICIENTS De VARIATION
* 58.01: * 1',)% * 26.6% * 18,3% * [Link] * 32.[Link] * 26.8: *
*
*
* ** **
OU HUMIDE EN Gi .
OU SECHE EH G.
PROPORTION 0 EAU
PRQPORTICN DE SEDIMENT SEC
C",OaOPHYLLE A EN 'AR [Link] SEDIMENT SEC
A EN 'AR M2 Di
PHEO/G= Eij HICROGRAMHES PAR G. DE SEDIMENT SEC
EH MILL:GRAMMES PAR H2 DE SEDIMENT
665 O/AaRlPPORT DES OPTIQUES A 665 HM AVANT ET APRES ACIDIFICATION
DELTAaRAPPORT DES DENSITES OPTIQUES A 430 ET 665 NM
APPOR' DES QUANTITES DE CHLOROPHYLLE A AUX QUANTITES DE PHEOPIGHENTS
CHL/P.T;-RAPPORY DES QUANTIT;S DE CHLOROPHYLLE A AU TOTAL CHLOROPHYLLE A PLUS PKEOPI'MENTS
*STOP* 0
- 28 -
DEUXIEME PARTIE.
Jusque vers 1962, l'important travail de ODUM et al. (1958) mis
part, l'valuation des teneurs pigmentaires dans les sdiments sou-
vent un mode accessoire d'approche de la biomaEse microphytobenthique
laquelle on attache assez peu d'importance.
Les travaux de IfETZEL (1962, 1963, 1964) sont le premier exemple
ma connaissance o l'tude des pigments chlorophylliens fonctionnels en
tant qu'indicateurs des possibilits de photosynthse, assortie de mesu-
res de la production primaire par le 14C devient, pour les sdiments, un
but en soi. Le tableau chronologique donn plus loin montre l'vidence
que la mthodologie s'affine dans le sens d'une meilleure disorimination
entre pigments fonctionnels et pigments dgrads : partir de 1967-68,
quelques exceptions prs, le procd d'acidifioation des extraits
s'impose.
donc prsent 1
1) - d'intensifier le nombre des mesures, qui sont en-
core actuellement trs ponctuelles, groe la mthodologie simple et
rapide qui permet d'estimer la chlorophylle fonotionnelle et ses dri-
vs.
2) d'exploiter statistiquement les rsultats.
3) de dvelopper aussi les mthodes dans le sens d'une
meilleure oonnaissance des autres pigments prsents (chromatographie:
CORCORAN (1957) cit par VALLENTYNE (1960), TAYLOR et GEBELEIN (1966),
DALEY et al. (1973. Le protooole expos en II dans la premire partie
et le programme de caloulInm'ont permis d'augmenter le nombre des mesu-
res Nosy-B.
Trois points principaux me paraissent devoir discuts et
critiqus.
- Comment rcolter le sdiment et en quelle quantit?
- Doit-on ou non scher l'ohantillon avant l'addition
du solvant ?
- Comment exprimer les rsultats?
dtails, videmment, au oours de l'extraotion, mritent
approfondie ou justifis.
1 ..
- 29 -
1 - Rcolte du sdiment :
1.1. - Collecte:
Pour explorer un sectour ctier comprenant divers types
de sdiments, le carottage, souvent seul utilis, m'a paru insuffisant,
surtout lorsqu'il consiste en quelques prises isoles comme c'est encore
souvent le cas. Par l'observation visuelle du fond, on peroit les rper-
cussions que peuvent avoir la prsence d'un petit invertbr, l'ouverture
d'un terrier, la prsence de ripple marks, un gros foraminifre riche en
symbiontes vgtaux, un dbris de phanrogame. sur l'valuation quantita-
tive des pigments, fonctionnels ou non, faite sur une surface de quelques
cm
2
seulement.
a) - l'Jtcrmage" ou rclage "in situ" sur une faible paisseur
mais une surface importante (de l'ordre du mtre carr) est ncessaire
pour donner une ide des teneurs moyennes. Pour apprcier l'htrognit
de la rpartition (microdistribution), on peut aussi utiliser l'crmage
dans les cases d'un quadrillage prtabli (PLANTE-CUNY, en prparation).
b) - les carottages sur une radiale intervalles rguliers
(BUNT et al. (1912), RIZNYK et PHYNNEY (1912)) peuvent galement servir
une tude sur l'htrognit en surface. Cette htrognit est sou-
vent considre comme trs importante. Par exemple, ODUM et al. (1958)
la soulignent tout particulirement (horizontal p. 68) :
pour des "chantillons rptis" sur des "fonds vaseux adjacents" de la
Laguna Madre (Texas), on donne 16 valeurs de teneurs en chlorophylle
(g.m-
2
) correspondant 16 prlvements effectus 3 dates diffrentes
(dcembre 10 valeurs, janvier 3 valeurs, fvrier 3 valeurs). Bien que
les valeurs trouves un mme jour paraissent trs htrognes premire
vue, on s'aperoit, par une analyse que la variabilit due
___, ._...."...,.,.,.....r<:'l"1t'i--....
au jour du prlvement est nettement suprieure la variabilit due
..---"''''".r <,,,, ,.. .. ,', ..,-,." . ' '., _, "" , _ .- _. - -'".-: , -. ,.. - _ " ""'!'''C_''l,,,,,ql,;. ,S;\ .. ...:,,..
aux diffrents points de, prlvements L'homognit des
pour une srie
de prlvements aussi,si l'on prend seulement 3 rsultats au hasard sur
10 dans la premire srie de prlvements.
0) - l'tude des diffrentes tranches d'une carotte (1/2 ou 1 cm
d'paisseur suivant le diamtre du carottier et la consistance du sdi-
ment) est indispensable. Elle est rvlatrice de la rpartition des di-
vers pigments, aussi bien chlorophylle que phopigments, en paisseur
.../ ...
- 30 -
A titre d'exemple, voici des teneurs de chlorophylle ~ dans des carottes
de sables coralliens tudies -.oentiotre_ par osntit:ltre :
sable assez grossier, agit par les vagues, profondeur
5 m
1
Cbl. a
.
en gnral dcroissanoe rgulire .
10-1969
1er 138
-2
om mg.m
2me 126
-2
cm mg.m
8me 50
-2
cm mg.m
3-1970 1er 80
-2
cm mg.m
8me 8
-2
cm mg.m
6-1970 1er 30
-2
cm mg.m
12me 16
-2
cm mg.m
8-1970 1er
45
-2
cm mg.m
10me 1("\
-2
cm mg.m
au 16me cm encore des traces de chlorophylle a fonctionnel-
-
le.
sable plus fin, mode plus calme, profondeur 25 m :
3-1970 1er cm 20 mg.m-
2
6me cm
- sable fin, profondeur 38 m
6-1970
- sable de couloir corallien
4-1970 1er om
2me om
quelques mg seulement
-2
2 mg.m sur 2 cm d'paisseur
assez grossier, profondeur 83 m 1
-2
10 mg.m
-2
4 mg.m
ohlorophylle ~ prsente jusque 2,5 om d'paisseur.
vases : teneurs en chlorophylle a en gnral beaucoup plus fai-
bles que s u ~ e; sables (toujours infrieur:s 100 mg.m-
2
en surface),
et sur une paisseur moindre (de 1,5 3 om seulement). Beauooup plus de
phopigments en surface et en profondeur que dans les sables (PLANTE-CUNY,
en prparation).
La prsenoe de ohlorophylle ~ [Link] en paisseur dans
les sables s'explique assez bien par les remaniements frquents que su-
bissent de tels sdiments (vagues, courants) qui permettent aux organis-
mes pigmentbde se trouver frquemment en prsence de lumire. De plus
.../ ...
- 31 -
oomme l'ont montr certains auteurs (FENCHEL et STRAARUP (1971)), la,lu-
mire pntre plus profondment au sein d'un sdiment grossier que d'un
sdiment
A l'inverse, les endroits vaseux sont assez rarement perturbs,
donc les organismes vgtaux sont plus concentrs en surface. Quand une
agitation a lieu, elle trouble la couche d'eau sus-jacente de faon telle
lumire pntre encore beaucoup moins bien jusqu'aux organismes
photo synthtiques. Les sdiments sont le sige de la dcomposition de la
matire organique et (cf. par ex. CALLAME, 1960, 1961), la remobilisation
des sels nutritifs est meilleure dans des sdiments grossiers et agits
que dans les vases pratiquement impermables par temps calme.
Donc pour l'valuation d'un "potentiel photosynthtique", il est
essentiel, mon avis, d'avoir une ide de la rpartition de la chloro-
phylle a au sein m@me des sdiments, particulirement ceux qui sont gros-
siers et agits.
Nanmoins, pour l'expression gnrale des rsultats, il est pr-
frable de ne tenir compte que de la couche superficielle (1 om dans de
nombreux travaux) dont les organismes sont susceptibles de profiter de la
lumire un moment donn, surtout si des mesures d'assimilation du 14C
sont effectues en parallle.
1.2.- Dimensions des chantillons 1
- la dimension peut trs
variable suivant les engins utiliss (cf. tableau). Il n'y a pas de pro-
blme de limites suprieures comparables celles du phytoplancton (trop
d'eau filtrer pour recueillir des quantits suffisantes). Dans les sdi-
ments fins, vase ou sable fin, il est essentiel de perturber 10 moins pos-
sible le superficiel, que ce soit par carottage ou par raolage. C'est
pourquoi j'ai pratiqu tous mes prlvements la main.
- 1
Dans le cas d'une tude exploratoire, on ne sait
pas, priori, quelle est la densit des microphytes, il faut souvent t-
tonner. A l'oeil nu, on voit dans certains cas sur le fond les taches co-
lores en vert ou en brun des populations de diatomes, cyanophyoes,
...1...
- 32 -
flagells verts, etc Cette rpartition frquente en taches peut avoir,
videmment, des rpercussions sur les rsultats c'est pourquoi j'effectue
des pelletages au hasard quand il s'agit des valuations moyennes.
L'intensit de coloration de l'extrait chlorophyllien est trs
souvent imprvisible (exemple le 11-11-1969, zone d' eaux ocani.-
ques, fond de 67 m, sable du prcontinent : chlorophylle : 37 mg.m-
2
;
phopigments : 3 mg.m-
2
). C'est avec surprise que l'on voit parfois des
sables dits "trs propr8s" et brasss par les courants de mares, dont
les extraits actoniques sont trs nettement colors en vert5 On sait que
les diatomes pauplant Ce type de sdiment sont trs petites et intime-
ment colles aux grains de sable (ROUND (1965) ; PLANTE-CUNY, sous-presse).
La proportion de pigments dgrads dans oes sables est presque
nulle. Cette proportion est prvisible avec une oertaine habitude des
gradations de oouleur du au brun dans les extraits aotoniques. Dans
le cas d'extraits bruns, la prsence d'autres pigments que les produits
de dgradation de la chlorophylle est, bien sr, envisager.
La rgle gnrale devrait une extraction sur une quantit
donnant des densits optiques d'extraits actoniques entrant dans des
marges connues.
D'aprs WETZEL et WESTLAKE (1969), il serait souhaitable, pour
amliorer l'exaotitude des rsultats, que les extraits actoniques, dans
une ouve de 1 cm de trajet optique, donn8nt des densits optiques lues
entre 0,2 et 0,6. LORENZEN (1967) conseille 0,2 0,5. Pour RICHARDS et
THOMPSON (1952) la limite suprieure indique est 0,8 de que pour
ORR et GRADY, 0,2 0,8 (1957). D'aprs VALLENTYNE (1955), les solutions
obissent la loi de Lambert-Beer dans les marges de densits optiques
de 0,03 0,6 et pour SUITH et BElH'l'EZ (1955) entre 0,1 ou 0,2 et 0,8,
"lYes limites dpendant de la prcision de l'appareil utilis".
On pourra voir dans le tableau chronologique toutes sortes
de tailles d'chantillons, en poids, en volumes.
de quantits de solvants ajoutes.
On peut aussi ohoisir d'autres cuves (trajets optiques plus longs)
en cas de trop faibles conoentrations, mais cela m'a paru rarement nces-
saire. Pour ma part dans des tudes rgulires, au long des saisons par
exemple, j'ai prfr fixer 3 g la quantit de sable humide broy ou
1 ..
- 33 -
fois
4
g dans 6
fois 6 g
_11-
6
fois 8 g _"-
6
Remarques 1 En principe les tranches de 1/2 ou 1 cm coupes sur la carotte
congele sont traites entirement dans un tube avec une quantit convena-
ble d'actone. il arrive, suivant la nature du sdiment, que
l'on ne puisse faire des tranches bien rgulires (sables trs grossiers)
en paisseur ; dans de "tls cas, je prlevais un poids prcis (par ex.
3 g) dans le 1er, le 2me, le 3me centimtre etc pour rendre les
comparaisons plus exactes.
2 - de l'chantillon avant l'extraction 1
2.1. - Le stockage:
Le stockage est Bouvent noessaire. Les auteurs
utilisent en gnral unG conservation au froid et l'obscurit, la moins
.../ ...
- 34 -
longue possible (12 h cf. tableau) ou la conglation qui est hautement sou-
haitable (HOLDEN (1965) - 20, _30).
2 2 - Le s chage :
Le schage ou le non schage des chantillons avant l'ac-
tion du solvant est un point qui ne fait pas l'unanimit (cf. tableau, co-
lonne 8).
La discussion de ce point me parait essentielle pour des travaux
visant identifier la chlorophylle ~ fonctionnelle. L'extraction sur du
sdiment frais parait de loin prfrable. En effet, on trouvera chez de
nombreux auteurs et notamment dans les traits sur la biochimie des vg-
taux ou les chlorophylles (LEWIN (1962), GOODWIN (1965), VERNON et SEELY
(1966) parmi les plus rcents), une revue des dgradations que peuvent
subir les pigments chlorophylliens. Le problme est complexe : la tempra-
ture, la lumire, le pH, la tension d'oxygne, la 'dure d'action de ces
diffrents facteurs et sans doute bien d'autres lments encore, ont une
influence sur les modifications de structure des molcules de chlorophylle,
et l'on comprend qu'il soit ncessaire de prendre des prcautions pour
valuer des teneurs en chlorophylle ~ rellement fonctionnelle.
Le schage, qu'il ait lieu l'air ou l'tuve (sous vide ou non),
ne manque pas de provoquer des altrations varies, par voie enzymatique
(chlorophyllase prsente notamment dans certaines diatomes cf. BARRETT et
JEFFREY 1964) ou par voie physico-chimique (STERN (1938) cit par ARONOFF
(1953), VALLENTYNE (1960), HOLDEN (1965), CHICHESTER et NAKAYAMA (1965)).
Un autre point me parat aussi trs important souligner 1 les pho-
pigments galement sont transforms, surtout par oxydation, au cours du
schage, (ARONOFF (1953), CHICHESTER et NAKAYAMA (1965), of. f2 p. 446
schma de dgradation). Ayant pour ma part effectu les premiers essais
sur des chantillons schs l'tuve, j'ai fait ensuite diverses exp-
riences comparatives sur du sdiment frais ou sch.
Les rsultats suivants concernent 48 chantillons provenant de 3 sta-
tions 1 St. 1, 5 m, sable grossier; st. 2, 15 m, sable plus fin st. 3,
25 m, sable fin. Chaque partie aliquote a t traite comme suit 1
SHCB = sable humide congel puis broy immdiatement
.../ ...
- 35 -
avant action du solvant.
SSB = sable humide sch (tuve ordinaire 45 24 h) puis
broy immdiatement avant aotion du solvant.
Les rsultats sont exprims en pourcentage dos pigments extraits
sur sable humide congel broy, les teneurs en pigments proprement dites
ayant t ramenes au poids sec.
St. 1
SRCB
SSB
St. 2
SRCB
SSB
St. 3
SRCB
SSB
Chl. a
100
43,8(:t 10,9)
100
62,8(:t 9,9)
100
64,2(:!: 7)
Phopigments
100
20,9(:t 16)
100
40,6(:t 14)
100
2 8 , 9 C ~ : 4,7)
Le schage (chaleur + air) semble avoir une influence plus nfas-
te dans la premire station que dans les autres, du moins sur la ohloro-
phylle ~ . Un exprienoe effeotue une date ultrieure a oonfirm cette
observation, exprience dans laquelle j'ai fait intervenir de plus un
broyage avant le schage. Les 3 stations sont les mmes que prcdemment.
Les rsultats sont galement exprims en %des pigments extraits sur sable
humide broy (SRCB). Les deux autres traitements sont les suivants 1
SSB = sable sch en vrac pendant 14 h, tuve ordinaire 70,
broy immdiatement avant action du solvant.
SBS = sable broy humide puis sch 70 pendant 9 h, ensuite,
action du solvant.
St. 1 Chl. a
SSB 64,6
SBS
37,1
St. 2
SSB
75,6
SBS
35,7
Phopigments
62,9
32
60,2
28,5
. ..1
St. 3
SSB
SBS
95,6
39,2
75,4
44,1
- 36 -
Si l'on hasarde une comparaison entre les deux expriences, bien
que le nombre d1chantillons ne soit pas le m@me, on peut penser que,
plus que la (45 au lieu de 70) Q'est la dure du schage (24 h
contre 14 h) et l'oxydation qui accentuent la dgradation de la chlOro-
phylle et des phopigments. La deuxime exprience prouve bien qu'un
broyage avant schage a un effet sur les pigments, donc que le
schage de cellules non dtruites, s'il ne peut vit, est un moindre
mal.
Par ailleurs on sait, bien que ce sujet demande encore des -
tudes plus approfondies, que les microphytes sont de plus grande taille
sur les sables fins que sur les sables grossiers. Ceci pourrait expliquer
que la dgradation de la chlorophylle en particulier, soit plus forte
dans les hauts niveaux par schage (cellules plus petites, plus fra-
giles 1) alors que l'action sur les phopigments semble plus anarchique,
ceux-ci tant en majorit localiss, pense-t-on, dans les cellules
ou l'extrieur des cellules. L encore,lm.e voie de recherche intres-
sante est ouverte.
HOLDEN (1965) crit l "Beaucoup de dterminations de chloro-
phylle ont t faites sur du matriel sch l'air des tempratures
entre 40 et 70 Le schage l'air comme prliminaire l'extraction
de la chlorophylle n'est pas recommand car cela donne une perte consid-
rable de chlorophylle grce la conversion en phophorbides
et en autres composs bruns de nature inconnue. De plus, les pigments
sont plus difficiles extraire gue st du matriel frais. Si, pour une
raison quelconque, le doit sch, le schage sous-vide 70
est plut8t meilleur qu' l'air et si le prix est raisonnablement bas, la
lyophilisation est une alternative possible" "L'bullition aussi
cause la dtrioration des chlorophylles en phophytines".
GQLTERMAN et CLYMO (1969) conseillent, si le schage est obli-
gatoire, l'Obscurit OC dans un dessicateur. VALLENTYNE (1955) pour
amliorer l'extraction des "chlorophylles sdimentaires
ll
rhumidifie ls
chantillons schs quelques heures avant l'acidifioation. FOGG et
.. .1...
.. 37 ..
BELCHER (1961) notent la diminution dus pigments (produits da dgradation
de la chlorophylle et carotnodes) dans du matriel humide conserv
l'air la temprature de la pice.
ODUM et ODUM (1955) pensent que la chlorophylle doit tre extrai-
te sur sdiment frais et "de prfrence pas plus de 12 heures aprs la
colleote. Du mQtriel sch au four montrait invariablement des valeurs
plus faibles que celles du matriel frais". Pourtant les mesures sont
faites 670 nm sans acidification donc il s'agit de chlorophylle a
"totale". Des expriences d'extractions sur des morceaux de Codium, schs
ou non, ont montr une "perte de 20 %de chlorophylle aprs schage
1000 pendant 6 h".
EATON et MOSS (1966) ont trouv, au contraire, que le schage
(obscurit, l'air, 3 h) des papiers au travers desquels avaient migr
les microphytes mobiles pendant une journe n'affectait pas les spectres
des extraits actoniques [Link] le sens d'une dgradation ("similar to those
obtained for extracts of frash plant material"). Le spectre des [Link]
de vases sches l'air, au contraire, tait comparable celui des pro-
duits da dgradation. "Thus, it appears that contamination of the pigment
extracted from the cells by degradation produots in the mud is negligible".
Il est vident cependant que la mthode du captage des cllules au tra-
vers d'un papier ou tissu n'8st utilisable que dans quelques cas particu-
liers.
Quant moi, il me parat capital de souligner que les formules
de LORElfZEN utilisant le facteur 1,1, rapport entre les densits optiques
665 nm lues avant et aprs acidification, sont valables pour des
"extraits frais" comme le prcise lui-mme l'auteur (LORENZEN' 1961). Les
coefficients d'absorption spcifiques ayant servi de base ces formules
ont t valus par VERNON (1960) dans l'actone partir des donnes de
SMITH et BENITEZ (1955) dans l'ther, mais sur des extraits frais et nous
verrons plus loin (2-4) que ce point a une grande importanoe.
Pourquoi tous les auteurs n'utilisent-ils pas systmatiquement
l'extraction des chantillons frais? J'y vois deux raisons prLlCipales 1
1) - pour rarnGner la quantit de pigments trouve un
poids sec de sdiment ; le poids Bec est considr, juste titre, oomme
une base de rfrence plus valable que toute autre (poids humide, surfaoe),
",
... / ....
- 38 -
surtout pour des comparaisons.
2) - pour ne pas diluer le solvant utilis pour l'extrac-
tion.
Le premier point est facilement rsolu si, lorsqu'on fait agir le
solvant sur du sable humide on prend soin de passer l'tuve une partie
aliquote comme le font de nombreux auteurs (cf. tableau). Dans le proto-
cole que je propose, on peut voir dans le point
3-3
que le contenu des
tubes schs est pes aprs extraction des pigments; donc on sait exacte-
ment quel poids de sable sec on doit rapporter la quantit de pigments
obtenue ; de plus la teneur en eau de chaque chantillon tant obtenue
trs prcisment, on a exactement le volume de l'extrait actonique (eau +
actone ajout).
Le second point ncessite un examen critique. De nombreux auteurs
laissent de cOt la de la teneur pralable du sdiment en eau.
Cela me semble quelquefois abusif. Si on tente de ne pas la ngliger, il
faut, comme le recommandent et CLYMO (1969) et WESTLAKE (1969)
"calculer cette teneur en eau" et "ajuster la dilution de l'actone en
consquence".
un sdiment qu'on manipule pour la premire fois il est bon,
en effet, d'valuer au pralable la teneur en eau du sdiment essor un
temps donn sur papier (cf. I-1-2.1.1. et I-1-2.1.2.). L'exprience montre
que pour des sdiments rtudis priodiquement, les teneurs en eau sont
comparables, d'une sortie l'autre, si les temps d'essorage sont voisins.
J'ai trouv de 15 35 %d'eau pour les sables et jusque 56 %d'eau pour
les vases. Si l'on veut parvenir une concentration finale de l'actone
voisine de 90 %, il est facile d'tablir des abaques partir d'actone
100 %, tenant compte du poids approximatif de l'chantillon frais (2 g,
3 g, 4 g, ) et de la quantit d'actone verser. Tout ceci ne doit pas
forcment avoir un caractre trs rigoureux. Les solvants en effet sont
utiliss de manire dilue pour diffrentes raisons.
ARONOFF (1953) signale que "l'alcool et l'actone sont gnrale-
ment dilus avec 15 20 %d'eau pour prvenir l'excessive absorption de
la chlorophylle sur la matrice. De l'eau supplmentaire provoque la for-
mation de chlorophylle colloidale ; en fait la teneur en eau du systme ne
doit pas excder 22 %du volume".
.../ ...
et al. (1958) ont expriment sur des feuilles fraches de
diverses plantes terrestres en aboutissant des extraits actoniques
80 et 90 %. 663 nm ils constatent une diminution de 6 %entre l'absor-
tion dans l'actone 90 %et l'actone 80 %.
TALLING et DRIVhlR (1963) de leur ot ont fait des comparaisons
similaires 660 et 665 nm d'extraits actoniques 80 et 90 %d'actone
d'gales quantits d'une oulture de diatomes planotoniques & "We were
unable to show an appreciable difference (5 %) between the oorresponding
absorbances". La comparaison des coefficients d'absorption spcifiques
chez les divers aut8urs dans l'actone 100 %, 90 %, 80 %, conduit TALLING
et DRIVER conclure 665 nm, les variations sont infrieures 6
Pour ma part, quelques excraits effectus sur des parties aliquo-
tes d'un mme sdiment avec de l'actone 100 %, 90 %, 80 %, 10 %m'ont
montr un grand cart entre les deux valeurs extrmes et une diffrence
presque nulle entre les chantillons 80 ou 90 %. Il ne faudrait donc pas
descendre en dessous d'une dilution actonique de 80 %. Aussi, pour la
partie superficielle de certaines carottes de vase, il est noessaire
d'ponger la tranche sur du papier par le dessous (pour ne pas perturber
le film superficiel). "Une concentration finale d'au moins 80 %d'aotone
(ou 90 %de mthanol) est ncessaire pour assurer l'extraction efficaoe
des pigments et prvenir l'action de la chlorophyllase
ll
(HOLDEN 1965).
Ma conolusion au deuxime point sera qu'il faut faire agir le
solvant en oonoentration convenable, le plus vite possible, sur du sdi-
ment non soh.
2-3. Le :
Pour le sable,le broyage est noessaire. En outre, il peut
diminuer le temps d'extraotion. J'ai dj parl plus haut p.32 des peti-
tes cellules aocroches dans les interstices des grains. Des manipulations
.1.
A oe propos, dans la retransoript10n des valeurs de ooefficients d'absorption
spoifiques de MAC KINNEY (1941) et VEIDlON (1960), deux erreurs se sont
glisses dans le tableau de YENTSCH et MilllZEL (1963), reproduites galement
dans GOLTERMAN et (1969).
MAC KI1rNEY (1941) 665 nm K = 80,91 au lieu de 76,0 dans l'aotone 80 %
(1960) 665 nm K 90,8 dans l'actone 80 %et non
dans l'actone 100 %.
- 40 -
sur des parties aliquotes ont montr deSdiffrencos de teneurs en chloro-
phylle fonctionnelle de 20 30 %suivant que le sdiment est broy ou
non. Pour les phopigments par contre, le broyage ne semble pas accrotre
le rendement. Mais,dans tous les cas, les rsultats se sont montrs
plus roproductibles aprs broyage. FENCHEL et STRAARUP (1971) soulignent
de l'extraction par le broyage, galement sur des sables.
J'ai remarqu que pour les vases, par contre, les diffrences sont de
quelques %seulement.
YENTSCH et (1963) ont soulign aussi l'importance du
broyage des filtres pour les pigments phytoplanctoniques tudis par
fluorescence. Ils dconseillent l'utilisation des ultra-sone car elle
s'accompagne d'une forte lvation de temprature.
HOLDEN (1955), pour les tissus vgtaux susceptibles de contenir
des lipoxydases, conseille le broyage le solvant. Mais j'ai trouv
pratique, pour effectuer une pese avant l'extraotion ([Link]-2-1.2.-b) de
broyer rapidement la main (quelques minutes) ce qui est ais aveo du
sable calcaire humide, de peser, d'ajouter une quantit oonnue d'actone
et de bien boucher le tube. Le tout doit tre pratiqu "quickly and in
dim light" (HOLDEN 1965). Quelques manipulations sur du sable quartzeux
ont montr qu'un mortier d'agate tait ncessaire. Les auteurs qui prati-
quent le broyage le font avec ou Sans solvant; j'ai trouv peu d'avis
sur oe point et n'ai pas expriment moi-mme.
Le mthanol est en gnral reconnu comme tant un meilleur
solvant de la chlorophylle que l'actone (CECCALDI et BERLAND (1964),
SCOR-UNESCO (1966), WETZEL et WESTLAKE (1969)). Mais, bien que dans 10
rapport de 1963, PARSONS (Annexe II p. 2) ait soulign l'urgenoe du pro-
blme de la dtermination des coefficients d'absorption spcifiques dans
le mthanol, il ne semble pas que cette voie ait t trs suivie.
Les coefficients de (1941) repris par HOLDEN (1965)
pour donner les quations de calcul de ohlorophylle et semblent con-
testables car ils ont t obtenus partir de chlorophylle cristallise
redissoute trs difficilement, comme le souligne l'auteur lui-mme.
Ces coefficient s '-'lont donc :.li ficiliJ,:halt "" ... pO\l1'
des extraits frais. Cette question de biochimie a t discute par
...1...
- 41 -
et BENITEZ (1955) et plus rcemment par SEELY et JENSEN (1965). GOLTERMAN
et CLYMO (1969) soulignent que les valeurs des absorptions spcifiques
dans le mthanol ne sont pas encore bien connuos et indiquent que des
changements dans la structure de la chlorophylle se produisent trs rapi-
ment dans le mthanol.
En 1966, le rapport des experts d ~ l'UNESCO sur l'tude des
pigments des eaux marines conclut que l'actone 90 %est en faveur
actuellement car
a) - la chlorophylle a y est plus stable.
b) la bande d'absorption dans le rouge y est plus aige.
c) - le coefficient d'extinction y est plus lev.
Le mthanol serait recommand pour les cas de pigments difficiles
extraire. Personnellement, j'ai opt pour l'actone. Facilement trouv
dans le commerce, il est trs utilis et de ce fait les rsultats peu-
vent mieux se comparer entre eux ; les coefficients d'extinction dif-
frentes concentrations sont connus et surtout en ce qui concerne les pro-
duits de dgradation ce qui n'est pas le cas du mthanol, quelques
exceptions prs (LIVINGSTON et al. 1953).
Les problmes annexes de l'addition de MgC0
3
, dimethyianiline
ou autres produits tels que Na li C0
3
, Na
2
C0
3
, Na OH, Ca C0
3
, ajouts au
moment de l'extraction pour prvenir une ventuelle aci4ification, ne se-
ront pas discuts ici (cf. VALLENTYNE (1955), PATTERSON et PARSONS (1963),
HOLDEN (1965), UNESCO (1966. Notons que OLAH (1912) juge inutile l'ad-
dition d'une base dans l'extrait car le sdiment en question est trs
riche en carbonate. VALLENT'tNE (1955) valuant que l'addition de C0
3
Mg
diminue de 20 %les teneurs en "Chlorophylles sdimentaires" alors que
la dimthylaniline les augmente de 10 %par brunissement de l'extrait,
le problme mriterait certainement un supplment d'exprimentation.
3 - Extraction, lectures, expression des rsultats 1
3.1. - Extraction:.
Obscurit et basse temprature ne sont pas contes-
tes. Par contre, la dure d'action du solvant est assez variable selon
les auteurs. Bien que WETZEL et WESTLAKE estiment qu'une dure de 30 60
minutes puisse tre suffisante, j'ai pu constater que, pour mes propres
chantillons, il n'en tait rien. Cela dpend videmment du poids de sdi-
.../ ...
- 42 -
ment trait, mais un systme aSsez pratique oonsiste agiter vigoureu-
sement les tubes bouchs ds qu'on vient d'ajouter l'actone, puis les
maintenir au froid et l'obscurit, les agiter de temps autre durant
la journe o a lieu une srie d'extractions sans ouvrir les botes qui
contiennent les tubes (cf. II 2-3), et faire les mesures au spectropho-
tomtre le lendemain matin. La centrifugation horizontale des tubes bouohs
est, mon avis, un trs bon moyen pour obtenir des extraits limpides
partir de sdiments broys. On peut reprendre le culot de centrifugation
par l'actone: j'ai pour ma part, trs rarement trouv des teneurs signi-
ficatives dans les rsidus.
3.2. - Leotures 1
La cuve tmoin contient de l'actone 90 %mais de-
vrait, en toute logique, contenir de l'actone dilu, partiellement au
moins, avec de l'eau de mer et non avec de l'eau douce.
Les corrections de turbidit sont faites 750 nm oomme le pra-
tiquent la plupart des auteurs. Cependant, VERNON (1960), TIETJEN (1968)
oomme VALLENTYNE et CRASTON (1957) prfrent la densit optique de 700 nm.
Le pic de bactriochlorophylles situ in-vivo 740-750 nm se dplace
dans l'actone ou l'ther de 80 nm vers les plus faibles longueurs d'ondes
(FENCHEL et STRAARUP 1971). La densit optique 750 nm comme indioe de
turbidit de l'extrait, mme dans le cas d'un sdiment riohe en bactries
photosynthtiques, ne semble dono pas un mauvais choix.
J'ai dj justifi dans la partie la seule lecture
665 nm avant et aprs acidification (1 - 2). Je n'insisterai pas non plus
ioi sur le choix de l'acide, oxalique ou chlorhydrique (YENTSCH (1965),
(1965)). L'acide chlorhydrique est le plus souvent utilis,
pour une cuvette spectrophotomtrique de 2,5 ml, l'exprienoe m'a prouv
que 1 2 gouttes de HCL 1N suffisaient la raction. Il faut bien agi-
ter les ouvettes bouches et surtout rincer plusieurs fois aprs acidifi-
Cation avec des restes d'extraits non acidifis ou de l'actone. Un excs
de concentration de l'acide augmente les densits optiques lues. Un temps
d'attente trop long pour la lecture (au-del de 10 mn) aprs l'addition
de l'aCide, fait varier les densits optiques de faon anarchique aveo
une gnrale la diminution. D'aprs PAMATMAT (1968) qui utili-
se les mesures en fluoresoence, le temps d'attente est de 1 mn pour HCl
0,5 N contre 3 mn pour l'acide oxalique. 1...
- 43 -
Aprs acidification, il m'est arriv dG trouver aSsez souvent
750 nm un certain trouble, DO = 0,06 par exemple, et toujours sur dos
extraits prov<3nant de substrats vaseux. J'ai toujours dduit ces "tubidi-
ts" de la lecture 665 nm mais il n'est pas certain quo ce soit . bon
escient. Je n'ai pas de rponse fournir actuellement CG problme,
l'analyse de divers rsultats devant encore me permettre d'approfondir
la question. Il se peut aussi que des ractions chimiques aient lieu dans
le cas des vases, provoquant la formation de collodes.
La lecture d'une densit 430 nm ne m'a pas paru super-
flu puisqu'elle correspond au pic 10 plus important de la chlorophylle
(absorption maximale dans 10 bleu = "Sor8t band", cf. 1re partie l - 2
et figurGs 1 et 2).,HOLT (1965) indique qu'une "mesure de la puret de la
chlorophylle est le entre los absorptions des maxima dans le bleu
et dans le rouge qui, dCLns 18 cas la [Link],jy.11o & est de 1,31 1,32"
le solvant tant ici l'ther. PERRINS et ROBERTS (1964) trouvent 1,11
1,20 dans l'ther oontenant un peu d'eau douce ou de mthanol et 1,31 dans
l'thyl ther. Si l'on calcule chez SMITH et (1955) le rapport
DO 430/00 662 dans l' Gther, toujours pour la chlorophylle ';)!l trouve
1,303. D'un tableau publi par SEELY et JELEN (1965) pour 40 solvants
diffrents, on peut dduire, pour l'actone qui nous intresse plus par-
ticulirement 00 430/nO 662 = 1,227. Cette donne est importante.
Il est bien vident que dans des extrai ts actoniques de pigme.1ts
issus des sdiments, la lecture 430 nm interfre avec beaucoup d'autres
pigments, carotnodes surtout. Je pense donc que l'ide de faire du rap-
port DO 430/00 665 "une expression approximative de la div8rsit des pig-
ments" (r.L'[Link] 1963) qa' on relie v"ntuellement la di t spcifi-
que, la biomasse, la production primaire, peut tr8 heureusement ex-
ploi te.
Elle l'a t dans les rcherches phytoplanctoniques ( titre dl
exomple citonsMARGALEF (1960 b, 1961 et travaux suivants), SOUffifIA (1968),
WAUTHY et LE BOURHIS (1966), TRAViillS (1971) qui signali3nt que IIZUKA et
al., ds 1960 galement, "onvisagGaient l'intrt du rapport des valeurs
des densits optiques +35 -:t 670 nmll)Dau",- 1.'3 [Link] bonthicrt"MiA-'lGALEF
(1960a) en fait galement tat et j'ai, pour ma part, effleur le sujet
(PLillfTE-CUNY (1973), valeurs voisines de 3, corrlations ngatives trs
hautement significatives avec la production primaire). Dans l'avenir,
...! ...
- 44 -
la signification possible de CG rapport ainsi que des rapports chlorophyl-
le !VfhoPigments seront approfondis.
Note 1. : Lo travail de KROUT, J.E. (1971) (Thse: Graduate School of
Oceanography. Uni versi ty of Rhode Island, Kingston) "Pigment and pil:,'inent
ratio 430 nm/665 nm. Distributions in several marine environments" ne
m'est actuellement pas parvenu.
Note 2. : La rapport DO 665 o/DQ 665 a est et peut trs ra-
pidement valu au cours mGme des lectur8s sp8ctrophotomtriq,ues. Il donne
une trs bonne ide prliminaire du rapport ChI. et prsente pra-
tiquement les mmes corrlations que ce dernier avec la production pri-
maire 19(3).
3-3. - des :
Le tableau chronologique montre l'vidence q,u'il
n'y a gure de standardisation dans l'e::pression des rsultats.
Compte-tenu des moyens do calcul actuels, il me semble int6res-
sant de ramener les teneurs pigmentairos un poids sec de sdiment, q,ui
est la manire la plus rigoureusG de faire, mais aussi une surface de
sdiment en place, donc humide, ce qui est une manire plus expressive.
En 111-2.1.2. de la Ire partie, j'ai expos comment j'valuais assez som-
mairement le poids spcifique d'un eA*Or eollDot6 par -armnge
u
sur 0,5 1 cm d'paisseur pour pouvoir rapporter les teneurs illle sur-
face. Pour des carottages videmment, la surface de sdiment humide tant
connue, le problme est facilement rsolu. L'expression en lug par g de
/
sdiment sec reste la meilleure pour faire des comparaisons entre des
sdiments de granulomtrie diffrente et des travaux diffrents.
CONCLUSION.
L'analyse pigmentaire par spectropijotomtrie, envisage d'une
manire intensive, constitue une mthode intressante d'apprciation de
la biomasse vgtale dans les sdiments marins.
On n'obtiendra cependant des rsultats dignes de confiance q,ue
si l'on se soumet certains imparatifs :
tenir compte des caractres du milieu tudi dans l'ap-
plication des techniques : distribution verticale et horizontale des
. . 1 ..
- 45 -
microphytes, non perturbation de l'interface
- viter, autant que l'altration des pigments
aprs prlvement par l'exposition des sdiments la lumire, la des-
sication, la chaleur, etc
- tenir toujours compte des produits de dgradation dans
l'expression des rsultats.
REMERCIEMENTS.
Je suis trs reconnaissante M. TRAVERS qui a bien voulu cor-
riger le manuscrit de ce document, ainsi qu' M. STEQUERT de la mission
ORSTOM de Nosy-B qui a assur la mise en page et la correction des
stencils. R. PLANTE et remercions sincrement [Link] d'avoir
le programme de calcul.
... 46 -
TABLEAU CHRONOLOGIQUE :
Evolution des mthodes d'extraction et dG mesuxes par
des pigments vgtaux et de leurs prodtts de
dgradatien sur des substrats meubles marins ou lacustres.
- 47 -
,
,
,
, AUTEURS
, Date de publication des travaux
BU DE L'ETUDE DES PIGMENTS
-pigments chlorophylliens totaux
-chlorophylle fonctionnelle
-Indice de biomasse vgtale
-Indice de production primaire
LOCAL ISAT ION
Etude des pigments
ou non des sdimen ts
vases l acus
(Connecticut)
VALLENTYNE J.R.
Chlorophylle comme fossile
1954- seulement: m-thodol og ie de rfrence ,
1955 pour de nombreux auteurs. !
. VALLENTYNE et CRASTON 1957 chlorophyll degradatlon pro- !
! VALLENTYNE J.R. 1960. ducts" (SCDP) a pigments chlorophyll'ens !
! , totaux. t

! ! ! blocoenotlque d'un rl1cH coral-
! roUH. H. T. et roUH. E.P. 1955! Indice de production primaire , lien, les passes sableuses en
! , 1 partbuller.
! ! ! (atoll En Illetok)
,---------------------------------,-------------------------------------------,---------------------------------
! FIGUERAS, A. 1955 ; "pigments des plages comme Indice de pro- ; partie superficielle des sables
, 1956; duction" tians des tudes pralables marins
! 1960 ! ("standing crop") ! (ria de VIgo) Espagne
!---------------------------------!-------------------;:----------------------!-sabfs-t-vasirs-marins-------
! HOUL. E.T. et H4S0N. O. 1957' ddansdl'te de l etude des populations! (Barnstable harbor)
, 1 e a omees , (W d Hl)
. 00 s 0 e
,---------------------------------,-------------------------------------------,---------------------------------
; OOR, W.L. et J.R. GRADY 1957: comme 'ndlce de : sdiments marins
; ORR. W.L EHERY. K.O. ; preservatton de la matlere organique dMs; de 0 .. de 3500 m
! et GRADY 1958! les sdiments. i ( cOte Callfol'lle sol

, , , mar1nes
, roUH, H.T W. Hc CONNELL , "chlorophylle ail de diverses communauts t vast; molle de la Laguna Madre
! et W. ABBOn 1958 t rOl e dans la production primaire 1 (TEXAS)
! , ! vase dE! surface, Aransas Bay
! ! ! (TEXAS)
,---------------------------------,-------------------------------------------!-sdlffints-marins-d1vrs--------
, , "p!gments ln sediments" produits de d- ! + cu - grossiers
! UiEVASTU, T. 1958! gradation des chlorophylles COlilme Indtces' archipel San Juan
! ! cologiques. , de Washington (USA)
, ,
,---------------------------------,-------------------------------------------,--------------------------------
! POHEROY, L.R. 1959 ! algues ;
! ,San lilg crop , Cl:.e Ile Barg.e -,
,---------------------------------,-------------------------------------------,--------------------------------
! GORHAH, E. 1959 ! "chlorophyll derlvatives" des sdiments , f d 1
! 1960' en rapport avec fertilit actuelle de ,sur ace e [Link]
1 1961 ! l'eau ! lacs (G.B.J
, ! !
,---------------------------------,-------------------------------------------,--------------------------------
- 4-8 -
! !
! 1- COLLECTE DES ECH ANTILLONS '2-EXTRACT ION DES PI GHENTS
, , ! 'sur' .2"!Y!g! sa1vants
! 1 , Schage ! chantillon 'ou -j'---
'-carottage , -paisseur 'pour valu;tlon de , humIde 'non addition d'un
!-raclage de surface '-surface 'teneur en eau en vue! ou 'obscurH lment basIque
!-autres types , -volume 'de rsultats/pds sec' sec !c1 imatlsa-
!-stockage , -poIds 'partIe alIquote, temp.' , Uon
! drague d'Eckman ou , , , ,
'"Llvtngstone pIston 2g envIron de ; moiti " non ,+ ml
'sampler
n
modifI vase humIde ,une moiti pese ,p(ehsee,dau) m
g
1
,(recommand,cdotnetnhan1 e
'
au mg prs ,um e p acee 1 1 b1 ,m y anl lne
!ch. mlang, parUe homognIsatIon s sa e (
l 1
; 100C 20 heures ;dans tubes 25mm 1); 0,2% si extraH
'a tquote conserve a spatule , '150 h t ,gross er 't l t )
'li b t t' tOC , , , mm au eur , , rop car
0 scur e"t. , . "

! n bl dl , 2! ,sd
ur
e:
f
: um a !b !lavages successtfs
! sa e sur- ! 1 If. cm! ! e pre erence ! royage !
1 face mes uree" , , ,pas plus de 12 h ,mortlr !20 ml actone
! ! ! !aprs collecte; ,
,----------------------,------------2------,----------------------,-----------------,-----------,----------------------
;carottage, tubes verre; S 9,6 cm
3
; , ;;actone. volume
;sur 1 cm paIsseur ; V 9,6 cm 3 ; ,sable humIde; ; gal au volume
3.5 cm GU 1,8 cm i ou 2,54 cm , , ,;de sable
,----------------------,-------------------,----------------------,-----------------,-----------,----------------------
;carottage ; 2.5 cm; ;sur tranches; ! actone
,conglation , paIsseur 6 cm , ,dcoupes;,

!s5:C e um e s oc a, a
t
h ,gd e se -, ouI ,sable humtde ,com
,
P
t
etx,e 'mlre
, ,men um e! , ,a
g
a on +' la fin 100 ml chlo-
, , , , ,s01 vantif
, . . , ro orme
,----------------------,-------------------,----------------------,-----------------,-----------,----------------------
, , 'paisseur 1 cm ! ! " ,
,non dta"le ,( d l" . , l 'b ,acetone 90 %
'tt 'l' mesure e . h Id . royage re-,t 80 t1/
,caro age + conge a- t dl' ,vase um. e , d' ,ace one fo
'Hon ,seur e a zone eu-. . .comman e '+ CO fol
, !phot 1que)' , !, 3 g
, , , , !,
---t----------------- ------------------- ---------------------- ----------------- ----------- ----------------------
;c(aro ; : : : ,!O,5 1 g de sdtment
caro 1er par gra- . , , h Id . h' , 11 1
,
tt
') ,n tt t n ,sec age sous YI e sur, h '11" ,S c e a a r
Y e . caro es cour es 'SO H dll ' .s c age a a r . . 5' 10 1 t
, ' bl' , t 2 ue, ,,+ a m ac one
conservees en. , "t . .,90 %
'fermes , , , ,!
,----------------------,-------------------,----------------------!-----------------,-----------!----------------------
!rfrence quasI totale la mthode de Val1entyne 1955' "
, ! , , "
---------------------- ---------------------- ----------------- ---------r----l-------
surface: ; ; ;agHatlon 30 m ac one
,. sampler' ; 1 2 g de vase; 100 1100C ; h Id ;mcanlque;. 100 l
l 5
' 'f. h' . vase um 1 e '3 T d 5 . J us que III
, rac age sur cm ralc e , , ,e, b t b 1
dl' , ,. "10 .su s. aslque
, epa sseur l , , ,mn,. , 1 t'l
. . . ..Jugee nu. e
!----------------_.----,-------------------,----------------------,-----------------,-----------,----------------------
non
non
non
-4-9 -
,
, 3- SPECTROPHOTOMETRIE
'dure 'filtration ou , 1
'temprature !centrifugatlon' ! !lecture des densHs optiques!dterm'naHon des plg-
'b t 'd' 1 t 'd' '1 ,cuves, , t d't It
l
(
.0 scurl . e a so u Ion. onnees sur ap- 't . t t' . .men s e r Iques rno-
( )
raJe op 1que 1
! ! vitesse 'parelllage ft, 1 !longueurs d ondes !dalHs, acidiflca-
! , , ! erno ns !correctlons de turbidit "tlon, Hel?, non a-
! ! ! ,! !cid.)
,- , , " ,--.-.._-----
jdlun jour ; ,. (1955) j t '6'" ,
.11 t fllt t B k 0 U .cuves quar z . VI nm .
,aureaveca-, ral0n ,ecman.. 'T01 '(DO t 0030 t06) ,
,gltatlons occa-,'papler IIhatman,'(1957) ,. C t ~ 1 . en re, e, . pas acidification
1 11 ' 0 50 'B k OK2 .lllW9 emo n !1957 700 nm comme background!
,s onne es r -, n , ec man '1 t' 1 b tl 663 1 ,
Id ., .( t 1 Ibl ) .avec so van .max a sorp on que que- .
,SI U re
p
rls, ! spec re v se! !fols ,
,---------------,--------------,------------------,--------------,-----------------------------,-----------------------
, , , " ,
, iflltratlon ,Col,emBan k
6
porotautlfi ; 670 nm ; pas acidification
! , ,P u s ec man,! ,
, , , " ,
,---------------,--------------,------------------!--------------,-----------------------------,-----------------------
, " , ,
, 12 h, ico10rlmtrle i ,pas acidification
, " , ,
,---------------,--------------,------------------ --------------,-----------------------------,-----------------------
, , 'col orlmtrl e , ,
, " , ,
,---------------,--------------1------------------ --------------,-----------------------------,-----------------------
'4 extratlons " 'spectre de 600 700 ;comparalson des ex-
'seml-obscurH 'filtration 'Beckman DU , TO 1 cm 'maxl 668 nm ;traHs avec phophy-
! , , , !DO de 0,2 0,8 jtlne ! fabr'que
, , , " ;partir de chl! + HCl
,---------------,--------------,------------------!--------------,-----------------------------,-----------------------
, , 'Beckman DU" !
'24 h SoC 'filtration - !Bausch et Lomb' ;665 nm (0.0. 0,08 0,95) !
!obscurlt !ventuelle '"Spectronlc 20" , TO 1 cm jquelquefoh 665, 645, 630 nm ,
, , !(bandes larges) , j("but tlme consum'ng") ,
, , , " !
,---------------,--------------,------------------,--------------,-----------------------------,-----------------------
118 h , 'Beckman DU' ,
'secou plu- 'centrifugat'on'+ chromatograph'e , '665, 645, 630 nm
'sieurs fo's' !sur colonne' ,
, , ! " 1
, , , M , , , _
, , , " 'non
, , , " ,
,---------------,--------------,------------------,--------------,-----------------------------,-----------------------
. . . cuves verre ( .
! 'filtration , , 'spectre mesures tous les 10 ,
, 'rextraction !Un'cam SP 500 ,1
t
,cm, l t'nm) ,
! 'sur rsidu , , emo n so van !p'c vers 667 nm ,
, , , ! pur 'correction "back ground" ,
,---------------,--------------,------------------,--------------,-----------------------------,-----------------------
-50-
4- RESULTATS

rapports au m
2
formul es de cal cul
1 1
! exp ress i on des 1
! chlorophylles seules! teneurs plg. ! _r_ap __p_o_rts
des teneurs pIgmentaIres
, ou avec produits de , lIltts, poIds !
! dgradation 1 sec, hWII., S ,
1 1 1 1
lO-OO-a-o;foo--f-fongr-'----------------------ln;{s-rlb':-----,----------------!----------------------------}
!d'onde du maxl. d'absorption lp'gments chlorophyl- !tralres! 1 !
1(dans le rouge), dans Ille cuve Il lens totaux !SC par g de !! 1
Ide TO 1 cm, pour 10 ml de sol-!chlorophylles + pro- !polds sec ou par'! ,
'vant 1 SCDP. 1 SCOP env. !dults de dgradation Ig d matire com-' l ,
!27 ...g ph''O'PhYtine a! lbust. 1! !

Il le dIrectement biomasse l,t hl h 11 1 1 "blomass' ! l ,
!vgtale (poldc sec de Codlum)!P gmen s c orop y -tg de matIre vl- , .. ! 1
!standards chImIques de !ens totaux !vante sche par !! !
!rence de Harvey , !m
2
" ,

1rfrence aux standards de 1 l , ! 13 91 mg.m-
2
1
IHarvey 1934- (HPPU) !plgments totaux ,Harve
y
..
2
! - !sl 1HPPU 0,B8 fJgChl on a 1
II!U.P.H cm- , ! 88 616 m.m-2 ,
____________________________________________________________________________________________________2 ..
II! !, ,
Iptgments totaux , chlorophylle 1 948 mg.m-
2
,
1 ! 'g.m-
2
1! ,

'h ht' d 1 hl ,phy11eetdesderlve"d t d 'd' ,
,p op y lne! ans e c oro- "quI ont une forte ab- ' e par s e se ' ,
lfonne. [Link]-1 'sorptton dans le 'sec (p.p.m.)!' ,

IRtchards et Thompson 1952 !fonctlonnelle ("all 1 l , vases de la !
, modifIe ou Ichlorophyll A and re- , g.m-
2
1 1 10 120 mg.m-
!dans actone 90 % !1ated substances that ! , ! Jusque 500 mg
'-1 laffect the 665 nm! , !
!Chla mg.l 13,4d665 'spectrum" if they occur "Hhln the euphotlc zone") 1 !
,------------------------------,----------------------,-----------------,----------------,----------------------------j
j jchlorophylle! j nIt It " j j j
'Rt h d h 952' 1 d H ' P gmen s un s .' .
, c ar sl et Tt COOlhPlson 1 protud/h '(PUIg sd. sec , !
1
seu emen a , oxy a on e y- I1PU. 1 l , ,
. d t t d Chl tJg p g. . .
l , ra a Ion e ! , !, 1
,------------------------------!----------------------'safmntary-fiTo:'----------------!----------------------------i
'cf. Vallentyne 1955' 'rophyll Unlts/g l' ,
1 , 'pds sec'! !
,------------------------------,----------------------,-----------------,----------------,----------------------------,
jrfrence Vallentyne 1955 j ;Chlorophyll derl-joo 410/00 350 , j
j(erreur dans publIcation 1960 ; jvatlves Unlts/g ;, dt cl fertl-; j
" fOl d 1 t . d 1ds . n ce e . "
larectiler:1 m esovan, ,epa sec Illt" ,
,au 11eu de 100 m1)! i i e i i
------------------------------ ---------------------- ----------------- ----------------,-----------------------------
l , 1 !. r
1 2 3
- 51 -
vase, lacs (G.B.)
T---------------------------------I-------------------------------------------r---------------------------------
1 l''actone-soluble plgments"{"ch1orophyll de-'
, FOGG, G.E. et BElCHER, J.H.1961 , gradatIon products + carotenolds
D
) ,
, , hIstoIre cologIque du lac 1
, , ,
1---------------------------------,-------------------------------------------,---------------------------------
, SANDERS, H.l., GOUDSMIT, E.M., l'tudeglobale du benthos
, MlllS, E.l. et HAHPSON, 1 valuation de la bIomasse vgtale 1 flaques Intertlda1es
, G.E. 1962 , , (Bamstab1e Harbor, Mass. USA)
1 1 1
--------------------------------- ------------------------------------------- ---------------------------------
l ,
1 !
1 WETZEl, R.G. 1962 DFuncttona1 chlorophyl1" dans des mesures 'sd'ment + macrophytes + phyto-
1 1963 de productIon prtmatre du Dpertphyton" Ip1ancton
19fi1t (standIng crop) 'Grand lac BORAX (Cal Hornle)
,
!
:
1 WOOD BJ B 1963 I{productton prlmatre} 1 (Antarcttque)
, ,. ,"chlorophylle" et carotno1des ,
,---------------------------------,-------------------------------------------I-vaS-TTttoraT-rcinaaJ---------
1 . 1 , 1 1 + eau de mer
1
PATrERSON, J. et PARSON, Idlstrtbuttons comparees de chlorophy1 e a, 1t dl fl 11
, - + cu ures no age s
1
J.R.. 1963 let produIts de degradatlon , dt t '
. a omees
Il!+ plancton total

, ' Ibenthos dans 1a cha1ne altmenta're 1 d'Aral
,---------------------------------,-------------------------------------------,-- -----------------------
1 TAYLOR, W.R. et GEBElEIN, I
t
dt d t' t 1 't 1 r t d ' sables et vases
1 C.D. 19611- I,n cet' u ma er e v ge a p sen ans un , sdtments 1nterttdaux
1 1966 !ecosys eme 1 (Bamstab1e Harbor, Mass.)
Il!
1---------------------------------,-------------------------------------------,---------------------------------
1 BliRKHOlDER, R., REPAK, A. jdans cadre de l'tude totale d'une com- j sables et vases, zone tntertt-
, t SIBERT J 1965 ,rnunaute de mtcroorganlsmes , da1e
i e , i (productton pr'ma1 rel i long Island Sound (N-Y, USA)
! SAWADA,
J UYENO, F. et al. 1970 1, ,
! UYENO, F., FUNAHASHI, S. ,etude des relat'ons entre fces cfIhlrttres 1 vases d'estuatres
1 et TSLDA A 1970 1perlt res et cond tHons du fond ! Ago Bay (Japon)
1 ' 1 1 + phytoplancton
I-rxTON,
: HOSS, B. :tude des popu1at'ons d'algues Bptp- : sdtments submergs dtvers
; MOSS B t ROUND F E ;1 'quos et ptpsammlques" , surtout vases, mara's
i MOSS: B: e ,.. 1968 i (ustandlng crop") i prs de BrIstol (G.B.)
1 MOSS, B. 1969 , 1
1---------------------------------,-------------------------------------------1---------------------------------
, , ,
i PAHATMAT M. 1968 i"stand'ng stock" dans ooe communaut ben- i sable Intertldal
" ,tbtque de sable 1 Falsa Bay (Washington, USA)
J 1 1
1---------------------------------, . ----------------------------------1---------------------------------
5 6 7 8
- 52 -
9

'carottages + "Jenk'n! , 1 d ! ! !!
'surface sampler
R
'fenv,rohn g e vase! !vase hum'de! '9 10 ml actooe
ra c e
'stockage -2QOC' , , "
, , , , "
,----------------------,-------------------,----------------------,-----------------,-----------,----------------------
, , , , "
; "crmage" surface ; pa'sseur 1 cm 0 ; bl h 'd; ; 't
o 'd' t ' "V 1 3 .sa e wu e. . ace one
,se men , : cm '"
, , , , "
,----------------------,-------------------,----------------------,-----------------I-----------lir-6fi:-acton------
, , , , "aqueux 90 %alcal 'n
'tt , '1er cm de surface , 800C l '1 pH 9,5
,caro ages par pa res '1/'EJ 2 ,]ousQu' po'ds 'sdIment hum'de , '2" h 't
au hasard . lA 2 . . . eIDe ec ace one
, , (400 cm ) , constant! "aqueux 90 %ac'de
, , , 'pH6
, , , l "

!carottages ;2,4 cm
2
; ;essor' ,8 ml actone 90 :t
, . i ,hum'de ,
,---------------------- ------------------- ----------------------,----------------- -----------,----------------------
, ,
;h ,d ;actone 90 %
i um e i+ dll1thy1an 11 'na
! ! , , l'
,---------------------- ------------------- ---------------------- ----------------- ----------- ----------------------
i la publ'cat'on nia pu ttre consulte ma's seulement une analyse succlnte dans "Raferatlvny' Zhurnal"
,----------------------,-------------------,----------------------,----------------- -----------,----------------------
3 5 cm 0
'carottages , ' , , ,
; ( d 't ;1
e
r mm de surface ; ;h ,d ;20 ml mthanol 3fots
+ mesures e p ne ra-. 0 5 t h d' . um e . 'th t 1
't, l' ) ,p"!9 ranc es e, , ,+ e er e propano
" on umaneuse"1 0
, , cm , , "

,carottage ,epa'sseur 3 a 4 mm , , , , 'CO M d t b
o( 1 ' '"t t b -t oh fd .mg ms en .+ 3 g ans u es
, ou rac age a maree ,ranspor en 01 e , non ,lIl1 el, ' t,f
ob) ., 1 . . . suspens on. cen r uger
, asse la 9 ace, , !dans 'bouchs

, tt ty K K 'tranches 0 0,5 cml , ! '10 1 t
,caro age pe , 0 5 ' 2 5 , 600C 'h 'd , ,Dl ac one
(1) ., a , cm . . um e 0 90 %
, ., 2,5 4,5 cm , , !,
! , 4,5 6,5 cm Il! ,
,----------------------,-------------------,----------------------'shag--Y'alr--'-----------!----------------------
1 ., 2 '"tissue trapp'ng me- '(3 h) des morceauxlbroyage ,
,carottage + sueclon ,S a 61 cm ou 'th d" t 1 'd t, 'b ,t' lenviron 25 ml ac-
IF BAt t\ " . 45 2 . 0 ; cap e es . e ss u .0 scur e t 90 %
,+ d 1 orna c !2 " cm lalgues vIvantes mo- 1 ou ,nson'ca-' CnaO H
,mu samp er , cm epa sseur ou Ibll , bl 't1" ,+ 3 g
"5' es . sa e ou vase . on 0
l ,mm, 'sch l'a'r! ,

, 'tranches de 1 mm , Iconserv 36 h '100 I1Ig C03Hg
Icarottage !pub de 1 cm d'- , non !max' ! tID,ID 1+ 10 ml actone
mor er
, lpa'sseur Jusque , 'temprature de laI 1 \' 90,.
, '10 cm' 'p'ce dans le no\'prce a ne ,
,----------------------,-------------------,----------------------,-----------------1-----------,----------------------
- 53 -
10 11 12 13 15
nOll
non
non
non
non
HCl 5 %
,---------------r--------------j------------------r--------------r-----------------------------r-----------------------
l
t
t d'extraction surlUntcam SP 500 lcuve 1 cm 1 t d 380' 700 1
emp ra ure e , d ' spec re e a
"a 'resl u non ne-'. chromatographte Itmotn, so'- ! tc 667 '
1 p !cessalre 'sur papter 'vant pur 1 p ,
1 1 l " 1
1---------------,--------------,------------------,--------------,-----------------------------,-----------------------
l , , l' ,
l , 1 l , , eeture des DO 660 nm ,
, , , 1 l ,
, 1 l " ,
,---------------,--------------1------------------1--------------
! , 1 l , 750 (turbtdH) 'actdlftcaHon
'obscurite ta- lcentrtfugatlonl ! 665 1 t f
!tale , 2500 r.p.m. lBeckman DU lcuves 10 cm f)l;.5 l
P
h
o,ur rhansllormer
!,,"0C , 10 15 mn ! '630 ,C orop y ?!
l , , '510 l
en
phophyhne !
l , l '1+80 1
,---------------,--------------,------------------,--------------,-----------------------------,-----------------------
;obscurit; ; ; ; 665 ;
; 24 h ; ; ; ; 630 ;
. 4-C . . .. .
, , ! 1! ,

lCrettz et Richards 1955 l ,
1 chromatographIe l ,
, Smtih et Bentiez 1955' ,
Stratn 1958 , ,
--------------- -------------- ------------------ --------------,-----------------------------,-----------------------
, ,
---- --------------,------------------ --------------,-----------------------------,-----------------------
;Beckman DU , ,
;aprs extractton , 657, 1+72, 470, 440 nm ,
;chromatographJe " ;
l , ,sur papier (Jeffrej), (1961) , ,
,---------------,--------------,------------------,--------------,-----------------------------,-----------------------
. . . . . 665 .
, 24 h' 'spectro. mthode " ,
, 100C ,centrtfugatton'CreUz et Rlchards' - , 6"-5 ,non
, , '1955 , , 630 nm ,
,----------------,--------------,------------------,--------------,-----------------------------,-----------------------
, , ! , 'spectre de 350 700 nm '
l , 'speetrophotomtre ,ro 1 cm " t '665 ,. 0,1 ml Hel 8N
, '" ecurea ,
, , , l' ,
,---------------,--------------,------------------,--------------,-----------------------------1-----------------------
, , , " ,
i20 h icentr1fugait 0lI i ; ; 665 ;
,3-'+C ; 10 mn ispeetrophotomtre iro 1 cm ; 430 i
iobscurH ! 3000 g, , ; 1+10 nm ,
, , , l' !

i i} t t ispeetrophotomtre ;ro 1 cm ; 750 pour correctIon ;
1
rptltton des ,a lUS em
5
e
O
n 1 , ; l' 665, 6"-5, 630 "
b vo ume m . .
1 royages 'obscurit 'f1uortmtre' , 'actde oxaltque
! ! , " 'puis 0,5N HCl
,---------------,--------------,------------------,--------------,-----------------------------,-----------------------
- 54 -
16 17 18 19 20
y------------------------------y----------------------aop-n;ts,-------y----------------,-----------------------------r
! 1 Ig poids sec 1 l ,
'V 11 t 1955 ,chlorophylle et d- , " ,
a en yne 1 t'.d' ou .. .
, 1r v s + caro eno 1 es, d t l' " ,
.par 9 e na ere .. .
l , 'combustlbl e" 1
,------------------------------IChT;-;-ar;v$--------,-----------------,----------------,-----------------------------,
, I(chi. fonctlonnelle l , 1 hl Dttl n 1
, 1 '1 l t 1 2 I
C
0 a e
.car er Clll seu emen mg.m- de 147 770 Il m-2
! 'et potentiel redox po-! 1 g.
l 's lUf) , l' ,
1------------------------------,---------------------- -----------------,----------------,-----------------------------1
, 'Ch1orophylle a fonc- 1 l ,
,Richards et ThOlllpson 1952 1 tlonnel1elf - - 1 !f.!!l! fonctionnelle
du 1. total dont est d- mg.m-2 1 1100 580 mg.m-2
,d extlnctton de pheophytlne a 1 dit 1 hl ,,(, 1 1)
d 't 90 <f - U e a c a non . . epa sseur cm
, ans ace one,. , fonctlonnelle- 1 1
II!' 1

, 'avec phycobtl Ines de ,IIRsultats seml- " ,
, Icyanophyces trs a- !quantltatlfs
ll
,
l 'bondantes' 1 l ,
,------------------------------1----------------------,-----------------,----------------,-----------------------------1
j ,chlorophylle! et ;chl!, en %du to- ;, 1
,rfrence mthode de Creltz ;chlorophylltde! ital Chl! + pro- ;; ,
jet Richards 1955 iphophytine! ,duits de dgra- ;; 1
, ,phophorb'de! i
daUon
i i 1
,------------------------------1----------------------,-----------------,----------------,-----------------------------1
, l 'l' 1

, 'Chl ... , , 'Chl a fonctlonnelle ,
I
nombreuses formules pour les 'd' t- th. 'mg.m-2, , 227-' 530 -2 ,
diffrents 1 ments . a oxan ne. . . a mg.m, .
, p g Ifucoxanthtne' , '(dans 1.1 cm d1epalsseur)
, 'carotnes!" ,
,------------------------------,----------------------,-----------------1----------------,-----------------------------,
'formules'AB'SIIS et Strlckl and IChl a (y compris pro- '[Link]-
1
de sd'- " ,
! 1963 !dults de dgradatton) 'ment humide! l ,
l , ! , ,
I------------------------------,----------------------!----------------- ----------------,-----------------------------
, '-chlorophylle (y com- , 1 1 l'
;comparalson avec spectre de lai 1 d"') ;619.g- de vase , ,1 300 i19.g- vase seche
l
'phophyttne seule , Phr
s
,er Vtses 1 t'humlde et de vase; ; (phophytlne)
.-P op gmen seu s h . .
1 ! .ce l' ,
1-- --------------------,----------------------!-----------------,----------------1-----------------------------,
IMoss 1961 ,% entre chl orophyll es !1961 units arbl-' 'Chl f tl 11 '
! 'et phoplgments !trairas' '2 '-2
a
29
onc
e ,
, , '1968 ,a mg. III ,
;Vemon 1960 ;-Chl ! seule ;1969 -2 ;palsseur 2 cm ;
. h' h t 1 1 . mg. m
, !-p eop y ne seu e ! l' 1

jStrlckland et Parsons 1960 i II'g. 2 ml-
1
de s-' IChl a 'btale
l
j
, ,Chl!y compris les 'd' t f" '100- -2 ,
. dits d d' d . men ra s . mg. ID
Y ts t
"
1
pro u e egra a- /F'( 1 2) ,
'en ch e 8I'lze 1963 , tlon ' , Fo a pa sseur IBIB
'pu's en 1965 rapport Fa/Fa ! , !, ,
, ---------------,----- _, __0- -l' -,
1 2 3
- 55 -
r-------------------------------------------------------------------------------------------------------------
! STEELE J.H. et BAIRD I.E.1968 !tude de production primaire d'une plage de' sables 0 13 m
,. , Isab1e , loch Eve (Ecosse)
, , ,

. T1ETJEN J.H. 1968 Ich1orophylle et pheoplgments comme Ind,ce. (Connecticut et Rhode Island)
:. 1970 :de source de nourriture Est USA

, HARGRAVE B.T. 1969 'production a1ga1e d'une communaut Vase du Lac Harlon
l' , ("standlng crop") (Colombie britannique)
l , ,

; WETZEL, R.G. et WESTLAKE, i IBP Hanbook nO 12, ch. 2.32 cl, chloro- ,vgtaux, sauf macrophytes,
; o.F. 1969 ,phyl1e ! . mesure Indirecte de la biomasse i vivant dans l'eau sur des subs-
; ln VOLLENWE 10ER, R.A. i 1 trats Immergs
,---------------------------------,-------------------------------------------,---------------------------------
'LEACH J H 1970 'dans une tude de la production alga1e 1 vase d'estuaire
1 ,. 'd'une vase Intertlda1e ktandlng crop)! N-E Ecosse
, , 1
,---------------------------------,-------------------------------------------,---------------------------------
i F
H
ICEKMAN, H. et ROUND, 1970 'dans une tude de 1a production primai re i t b1 1 ..). d
1
Id' 1 ' lIt ' 1 ll 1 vases e sa es, ac e
ROUND. F.E. et HICKMAN. a gues :p psamm ques: ep p ques , Bristol (GoB.)
: M. 1971 : ( standing crop ) i
,---------------------------------1-------------------------------------------,---------------------------------
. " 1 1 ; sable ou vase en place. et s-
1 roUH W.E 1970 .etude de a s ectlon des particules de . dlment dans l'estomac du ols-
, 'nourriture chez cephalus 1 p
! 1 1 son
,---------------------------------,-------------------------------------------1---------------------------------
: FENCHEL. T. et STRAARUP, ;dlstrlbutlon verticale des pigments photo- : sables et vases peu
1 B.J. 1971 jsynthtlques ; relation avec la pn&tratlon, (Danemark)
! !1umlneuse i
,---------------------------------,-------------------------------------------!---------------------------------
1
1972 l'dans une tude de production prImaire (biO-II sables (2,5 12 m)
, CQlOCOLOFF. H.} ( )
, ,masse vgtal e ! rgion de Marsenl e France
! ! 1

." ( sdiments tropicaux divers
, BUNT. J.S., LEE, C.C. !productlvlte primaire des sediments plg- , (3-60 m)
, et LEE, E. 1972 Iments photosynthtlques) 1" d C 1b
l , 1 er es ara es
,---------------------------------,-------------------------------------------1---------------------------------
J BOUCHER 0 1972 Idans une tude de production primaire , sables fins envass (5-18 m)
, ,. '(biomasse) , Coocameau (France)
l , !
,---------------------------------,-------------------------------------------1---------------------------------
i [Link] J 1972 :plgments photosynthtlques et pigments d- : sdiments du Lac Balaton
1 jgrads ! (Hongrie)
l , !
1 ----------------------1-------------------------------------------,---------------------------------
4 5 6 7 8
- 56 -
9

tsur la plage ou dans ,(S' 3
cm
8 2) ! , h ,d !sd'ment sch 'broys au' 't 90 d/
, t1t b ,. , cm .sec age e , ,d 't, ,. ace one ,.
.une pe 1 e enne ." 2: .sous-v e .mor er .
, ,epa sseur cm , , 'dl t 1
0 . . . aga e .
,----------------------,-------------------,----------------------,-----------------'o;S-ffi3-pri.-----------------------
; tt ;" 5 '1 ' h dOS 3 ; ;1 d'10 ml actone 90 %
.caro age "epa sseur cm sec age e , cm . 'd' t f' . ev ans "0 1 CO M
!. cong1aHon {tranches de 1 cm !jusqu1 po'ds constant,se men ra s ,[Link] de !' mg 3 9
,. , , , ,1 cm mo.... ,dans mort'er
" " . - _
, , , , "
;carottage dans 1e s- ; 5 cm 20 cm
2
; SOOC; ; 2 ,;. 15 ID1 aCIHone 90 %
;d'ment rcolt par 11'1 ;hauteur 12,5 cm; 24 h ;sd'ment fra's id 9 0,5 %d'mthy1an'-
jco11ecteur sp itranches 1 cm ; j ,ans u e ;"ne. ac'de
I----------------------,-------------------!----------------------,-----------------,-----------1-----------------------
1 ! , !, h t,11 Ibroyage ou !actone 90 %
, "ecan on 1n, 'CO Il 1 tt
". f' son ca- . 311g ou gou e
, 1 ra s !t'on
ll
:NaOH
, ,! l'

; 2,2 cm 'au four sooC 1 1) oy' d ns 1 20 111 actone 90 %
jcarottage ;S.3,8cm
2
, 16h ,sd'mentsch a ,.0,1gdepoudrede
, i20 cm de long 9e;es j C0311g
1----------------------,------------------- ----------------------Ischag-alr;-----I-----------I-----------------------
Icarottage et raclage ',60,7 cm
2
lobscUrU ','15 ml actone 90 %
Ide la surface de la. cf. Moss 12-3 h des moi"- 1 '.03 CO 1'1
'carotte 15 mm pa'sseur 'ceaux de tIssu ou, l' 9 '3 9
l , l 'des fntres l ,

1 1 ' .1 ' 1 h "d' t f, 1broyage 1 't 90 d/
,.rac aga , cm pa sseur ,sec age Ise III en ra s 1 t, ,. ace one Jo
" Mor er .
l , l , 1 1

I
Garottage ------------1 2) -' L_ 1 1 ,'h 'b' ,sous-ech. ,15 ml acetone 90 %
-011 )1__ a sec age sem -0 scu- " 'b"
1 IZ-n fpa\saeur '. 'rU, sous vIde en 'sd\ment sch "th ou b t'
'raclage --------------'25 aaZ, 1--3 1111 '- Idess'cateur' ,mor er ,e er pour ac r 0-
l
, 1__' , IPorcela'ne ,chlorophylle
.lIa_-ur.. " .

\2 tt 1 2 6 1 , h b H' l '2 g C03Hg1
' c
1
:ro
b
es,ctonserv es, ' cm 0 scur e 'sd'ment sec 'broyage 1. 12 ml actone 90 %
, o scur au ;(S,3cm
2
), , '2'
;fro'd ,1er cm j36 h , j mn ;
,----------------------,-------------------,----------------------,-----------------,-----------,-----------------------
;carottage ; 0 3,S cm; 1 d' t f'; ;'t 90 d/
'12 tt 1 . 2 5 l' s men ra s 0 .ace one ,.
'[Link]
aro
es
11
am, ,ouf' ,cm
1
! - 'essor sur pap'er' - '6 extractIons
, 10 erva a , super ce, , , ,
t----------------------,-------------------,----------------------,-----------------,-----------,-----------------------
; ;dans1ercm12g; .;
; carottage '20' d
CM
l l'schage rap'de ;sd'ment sch 1015 ml actone 90 %
0 cm e ong 400C 0
! , l , '1
,----------------------,-------------------1----------------------,-----------------1-----------,-----------------------
, tt t 1 ! , ,\.30 ml actone 90 %
,cbaro Eagk
e
e 'tranches de 2 cm l 'vase hum'de 5 g I
CO
H J
,enne c man, l , , 3 9 ug non n ces-
i ; 1 i 1 jsa're

-57-
ouI
HC1
non
. .
10 11 12 13 14 15

, , 11'...,' 1
; ; 'fi T; ; 750 et 663 ,
, , . uo'" _ ,umer" ,
, , , ap rs 1965" ,

! ,
mn
't tf tl' Lamb 505! , 340 700 ! 9
pu s cen r uga on
'12 h ' 'ou Beckman OB-G , , 665 aprs acldlflcatton ,
, , !f1uort. Tumer 110" 'acIde oxalique
,---------------,--------------,------------------'ve-qrti---'-----------------------------,-----------------------
,12 h ,centrifugatIon, t h t t ITO l' ,
'
50C ;rextractton P['lo OlU
o
ra 't' ,
cm
't ,601 aprs actdlflcatlon ,1 goutte de 1N HC1
b It
" t 11 e mer , emo n ace one. ,
,0 scur ,even ue e , , dl 'th 1 11' ,
, .+ me y an '

'ombre , ! , 1750 et 665 nm nlre avant et aprs
'ou 'centrlfugattQl!spectrophotomtrleITO 1 cm ! en prIncIpe avoIr des DO 'acldlflcatton
'obscurit' , , , entre 0,2 et 0,6 '1 2 gouttes 1N HC1
'basse tempo l , " ,
,---------------,--------------,------------------!--------------,-----------------------------,-----------------------
'16 h , , , , 750, 663 ,
,
b It
' ;centrlfugatlon,'spectrophotomtre " 't t r Id'fl tl ,2 gouttes HC1 10 %
o scur e, , , , avan e ap s ac ca on ,
, , , " ,
,---------------,--------------,------------------,--------------,-----------------------------,-----------------------
'24 h 1centrifugatIon! !, ,
1-- . 3-4-C ! 10 mn 'spectrophotomtre , , 430, 410, 665 nm 'HC1 5 %
!obscurit '3000 g, !, ,
, , , , ,
,---------------,--------------,------------------,--------------,----------------------------- -----------------------
, , , , ,
l ,flltratlon !Beckman DU i i 665, 64-5, 630 nm
l' !,
, -------,--------------,------------------,--------------1-----------------------------,-----------------------
'50C 'centrlfugat!on!S h t Lb' !spectres complets ,
, '2' ausc e om 'TO 1 cm !. 740-750 nm 'pas acIdifIcation
iobscurit i 4000 iSpectrontc 20, '665 nm ,
, , , !, ,
, '60oOlt7;n-----'------------------,--------------,-----------------------------t-----------------------
,
'050bCscurlte' t t ','spectrophotomtre ',TO 4 cm :spectres 750, 665 avant et ;HCI1N 18 tt
, reaJus emen, 1 t '(8 1) , r Idlfl tl . gou es
'6
h
'1' ,enre
g
s reur ,m ,ap s ac ca on ,
,vo ume ace- " ,
, 'tone}' " ,
, ----------,--------------,------------------,--------------,-----------------------------,-----------------------
;que1ques heures; i i i ,
;obscurlt; ,spectrophotomtre , , 665 nm ; out
irfrlgr. i i i i i
,---------------,- ,------------------,--------------,-----------------------------,-----------------------
ibasse tempr. ; ; ; '750 665 ;
;obscurlt ;centrlfugatlon;spectrophotol8tre ; ; 't t ' 'dlfl tl ;
'12 h . , . , avan e apres ac ca on.
1 l , " ,

'obscurit 'ft ltratlon! ," !
'14 16 h' ,spectrophotometre , ,spectres 750 et 665 avant et 'Hel N 3 tt
,
. 1 1 fI' tOU,f tl ;nSpectromom 360" ; t'aprs acldUlcatlon ; gou es
.p LIS eurs 0 s ,cen r uga on.. ,
!secous' , '1 ,
,---------------,--------------,------------------1--------------1-----------------------------,-----------------------
16
17 18 19
- 58 -
20
rO1fTTent-a'itlnt;on-----r----------------------r-----------------r----------------,-----------------------------r
!663 nm Ch1 ! (SCOR-UNESCO) 'Ch1 ! + produits de + pho/pho'Ch1 ! "totale" 0 20 f19.g-
1
,
1 Idgradatton Isec ! !sdtlent sec !
!Yentsch et Henze1 1963! 1 1 Fo/Fa ! !
,------------------------------,----------------------,-----------------,----------------,-----------------------------,
! !Ch1 ! + produits de !J1g.g-1 de sdl- ! iCh1 ! "tota1ei7 21 f19.g-1 i
! lcU9rUon riDent sec' Isdlment sec !
'Yentsch et Menze1 1963! , ! Fo/Fa ! ,
!------------------------------!----------------------!'saTmentary-----,----------------,-----------------------------,
! 'f ' V 11 t 1955 !Chl ! + produ,ts de !Ch10rophy11!' !
Ire a a en yne 1dgradation lUn'ts"/g potds ,! !
, ! !sec sdiment!! ,
----------------- ---------------- -----------------------------,
Ch1 ! par chantt11on - 11,9 x 2,43 (OOo-oOa) xr '
! absorp. Ch1 a 665 nm - 84- [Link]-1) ,
1 - 1
,i'9 phoptgments par cho B 11,9(,/1).(1,700a)-Gh1a cf. Ta111ng et Oftver 1963 i
,----------------------...-----,----------------------,-----------------,----------------,-----------------------------1
,. ."" "'COT a + pho. !pg.(}1 sTment !. !Ctll ! fonctTMneltc ,
,Lorenzen 1967 !Chl ! fonct'onnelle ! sec , ,25 J4. t'g.g. -1 de sdiment 1
, , ! ! 1sec 1
,------------------------------,----------------------,-----------------,----------------,-----------------------------,
i i% entre Ch1 ! et i i, i
phopigments', tt' bt 1" h' / h' ., ;
'Moss 1967 a et b 1 Ch1 .unl es ar - .p eo p eo +
! , h'!h tt 'tralres 1 Ch1 a , !
, 1 P cop y Ine!, , - , ,
j-----.-.
i ;Ch1 ! y compris ,-1 'dl ent , , 24 4JCJ g-1 s1d sec ,
,Rtchards et Thompson 1952 iproduits de dgrada- se m i - icontenu stomacal; j

!coeff'c'ent absorption spclf. 'Ch1 ! y compris !E [Link]-
3
de s-' !Ch1 a "tota1e
ll
,
lCh1 a 'produits de dgrada- !ment ou! '1 5 93 2 -2 !
1_ 91-1. [Link]-1 Itton 'mg.m-2, ! , mg.m ,
, 1 l " ,
j------------------------------!fif-a-:-hlorophyT:---'-----------------,----------------,-----------------------------,
, Il ide-a 1 1 b1! !Ch1 a foncttonne11 e ,
- g- sa e sec -
ILarenzen 1967 'phoplgments' -2 'Ch1 ypho. '24 f4 mg.m-
2
(moyennes) !
! !(phophytine a + ,mg.m , , 1 cm paisseur !
! ! phophorblde-a)' !, !

jStrick1and et Pvtens 1Q68 i '-2 'Ch1 a/Ch1 a + '3,2 22,4 mg.m-2 !
, ,Ch1 ! et phophyt'ne ,mg.m 'ph07 - ICh1 a total e ,
1et Lorenzen 1967 l'!20 -2QO mg.m-2

;Lorenzen 1967 !phoPlgments ;mg.m-
2
j ; 27 900 mg.m-
2
1
", " paisseur 1 cm !
! ! ! . .
,------------------------------!----------------------,-----------------,----------------!-----------------------------,
. t'9.g-
1
, ,Ch1 a fonctionnelle
IStrtck1and et Parsons 1968 !Ch1 a 'ehl/lll,de . '29 -71 mg.m-
2
'
IMoss 1967 1carotno1des ! vas 0 34 ! , (moyennes)!
'Lorenzen 1967 !phopigments! 1 gV.h

-
h
, g, '(couche superftctelle) ,
! ! ! vase s ce" !
!------------------------------!----------------------,-----------------!----------------,-----------------------------I
1 2 3
- 59 -

r H.K. 1972 , (b'omasse vgtale) 'Oregon (USA)
,----------------------------------1-------------------------------------------!---------------------------------
1 ! , sables et vases, mil' eu trop'cal
, PLANTE-eUNY. M.R. 1973 Idans une tude de productton pr'matre' (5 83 m)
I! Nosy..B (Madagascar)
! l ,
1----------------------------------1-------------------------------------------,---------------------------------
, Ichlorophyl1e algale et dr'vs sdtmen- 1
,. DAlEYt R.J., GRAYt C.B.J. 1 'd
t BROWN S R 1973 !tatres de la chlorophylle 1 phytop ancton et se tments
1 e Imthode quantttat've de sellli-routtne 1
1 ! ,
a za a z == =a
5 6 7 B
-60-
9
Tarottag-{oS-Ys----r-------------------r----------------------r-----------------r-----------j--:--------------------
!30 DI !tranches de 1,3 cm ! - ! - ! - ,acetone

. . ranc es e cm . . bl h td . b . 3 'dt t
, . , '80' 1000C ,sa e urn e es- 1 royage 1+ 9 se men
;-raclage ou Dcrmage
R
, sur f , 1 cm d1- ; .a ;sor sur papter ,mortter 1+ 9 ml actone 90 %
, conglatton ,patsseur; i ;obscurIt i+ bouchon

i . ilyophn'satton! isontcatton i mthanol
! !! 1 1 eau
t t r trI
10 11 12 13
61 -
15
--------------------------------------------.--------------------------------------------------T------------------------
1 l 'B k OB-G 1 1 665, 645, 630 nm . 1
1 - , - 1 ec man 1 ! 430. 410 nm 1 ou

lobscurlt lcentrlfugat'onl !clNe quartz 1 665 avant et aprs acldlfl- 1
124 h 14 5000 t/mn IBeckman DU !TO 1 cm ! cation lHel 1N 2 gouttes
Iplusleurs fols 110 15 mn 1 Itmoin actonel 430 1
Isacous II! 1 1

; ; ; chromatographie ;; ;
;__JOe... ;f'lt t, ;couches m'nces;; .
. """ . ra on. , . .
l , ,pus, ,
1 i ift uor'mtrfe i i
a===c=
- 62 -
16 17 18 19 20

Il'arsons et Stdckland 1963 lChl a totale 1 fig cm e !Chl a/ ho !. .
lHoss 1967 ! - ! sd'ment 1 ! - p. ! !
,------------------------------'hT-a-;-fiTorophyT:---'-----------------,Do-6650100-665a-'----------------------------,
ILorenzen 1961 de sdi- 100430/00 665 !Chl! fonct'onnel1e !
!cf. dans ce document 'phop'gments , ment sec IChl a/pho. ! 2 280 mg.m-
2
!
!A-2 adaptat'on au sd'ment l(phophyt,ne a + ! mg.m-
2
!Chl ;/Chl a + !pa'sseur 1 1.5 cm 1
! ! phophorbtde-a)! ! - ph;. ! !

! lChl abc! ,! 1
! ! -' -' - ! 6JllIoles de! !Chl a fonct'onnelle !
, let 18 dr'vs ! p'gments!! ,
! , ! ,! !

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gascar - Mthodes utilises dans l'tude de la pcherie. 15 p., an-
nexes 10 p.
N15 - FRONTIER-ABOU (D.) - Juin 1970.
Dosage de l'azote sur 60 chantillons de sdiments superficiels de
la Baie d'Ambaro. 16 p.
N16 - DANIEL (J.), DUPONT (J.), JOUANNIC (C.) - Juin 1970.
Etude de la relation entre le carbone organique et l'azote dans les
sdiments de la baie d'Ambaro. 11 p., 9 fig. ht.
N17 - MAGNIER (y.), PITON (B.), TERAY (A.), AH-KAM (D.) - Juillet 1970.
Rsultats des observations physico-chimiques en baies d'Ambaro et
d'Ampasindava de Juin 1969 Fvrier 1970. 66 p., 3 fig. ht.
N18 - ANONYME - Aot 1970.
Organisation de la Bibliothque de Nosy-B. 15 p., 2 p. ht.
N19 - PITON (B.), MAGNIER (y.) - Octobre 1970.
Distributions horizontales et verticales de quelques proprits phy-
siques et chimiques en baie dlAmbaro. 3 p., 26 p. ht.
N20 - PITON (B.), MAGNIER (y.) - Fvrier 1971.
Sur la dtermination de la chlorophylle "a" dans l'eau de mer c-
tire tropicale. 14 p., 9 fig. ht.
N21 - MAGNIER (y.), PITON (B.) - Avril 1971.
Observations physico-chimiques faites par le "VAUBAN" le long de la
cte nord-ouest de Madagascar de janvier septembre 1970. 8 p.,
118 p. ht.
N22 - CHABANrJE (J.), PRADO (J.) - Juillet 1971.
Etude des concentrations de poissons obtenues par la lumire dans
la rgion de Nosy-B - Madagascar. 19 p.
N23 - CHABANNE (J.), PLANTE (R.) - Octobre 1971.
Etude des rendements de la pche au chalut des crevettes Penaeides
sur la cte N.W. de Madagascar de 1966 1970. 19 p., 10 fig. ht.,
4 annexes ht., 6 table ht.
N24 - BOUR (W.), FRONTIER (S.), PETIT (D.) - Novembre 1971.
Zooplancton d'wle baie eutrophique tropicale.
- 1. Indications prliminaires par FRONTIER (S.).
- 2. Mthodologie des prlvements par PETIT (D.) et BOlm (W.).
- 3. Situation cologique de la baie d'Ambaro : Etude d'une radiale
cte-ocan par FRONTIER (S.), BOUR (W.), PETIT (D.).
- 4. Cycle annuel des poids secs par PETIT (D.) et FRONTIER (S.).
- 5. Etude statistique de la dispersion du plancton par FRONTIER (S.).
95 p., 67 p. ht.
- 3 -
N25 - MARCILLE (J.) - Fvrier 1972.
Les stocks de crevettes Pnides ctires malgaches. 14 p., 10 fig.
N26 - MAGNIER (Y.), PITON (B.), CITEAU (J.) Avril 1972.
Observations physico-chimiques faites par le "VAUBAN dans l'Ocan
Indien de novembre 1970 mars 1971. 1 fig. ht., 127 p. ht.
N27 - CHABANNE (J.) - Mai 1972.
Etude sur la biologie des Caranx ignobilis, Caranx sexfasciatus
et Caranx melampygus de la rgion de Nosy-B. 42 p., 8 fig., 2 p. ht.
N28 - FRONTIER (S.)- Juin 1972 (Suite du Doc. nO 24).
Zooplancton d'une baie eutrophique tropicale.
- 6. Rpartition spatiale et annuelle de quelques taxons.
Premire partie :
Cladocres, Euphausiacs, Mollusques.
14 p., 50 fig.
N29 - CITEAU (J.) - Juillet 1972.
Analyse du molybdne dissous dans l'eau de mer. 14 p., 4 fig.
N30 - MAGNIER (Y.), PITON (B.), CITEAU (J.) - Janvier 1973.
Bathythermogrammes recueillis par le "VAUBAN" de 1968 1972 dans
l'ouest de l'Ocan Indien sud-quatorial. En avant-propos: aperu
thermique de la rgion et remarques sur la thermocline. 16 p.,
14 fig., 61 p. ht.
N31 - CITEAU (J.), PITON (B.), (Y.) -Mars 1973.
Sur la circulation gostrophique dans l'ouest de l'Ocan Indien
sud-quatorial. 29 PQ, 17 fig.
N32 - LE RESTE (L.) - Mars 1973.
Zones de ponte et nurseries de la crevette "Penaeus indicus"
H. Milne Edwards le long de la cOte nord-ouest de Madagascar.
11 p., 16 fig. ht.
N33 - ANONYME - 1973.
Publications du Centre O.R.S.T.O.M. de Nosy-B. Liste mise jour
au 31 dcembre 1971. 104 p..
N34 - CITEAU (J.), PITON (B.), MAGNIER (Y.) - Avril 1973.
Observations physico-chimiques faites par le "VAUBAN" dans l'Ocan
Indien au large du Cap d'Ambre et de Juan de Nova, de mai 1971
mars 1972. 154 po, 2 fig. ht.
N35 - MARCILLE (J.), VEILLON (P.) - Avril 1973.
La crevettire Madagascar. Evolution des stocks. 28 p.,
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N36 - MARCILLE (J.), VEILLON (P.) - Mai 1973.
Prospections et thonires au nord et l'ouest de Madagas-
car en 1972. 31 pn, 16 fig..
-4-
N37 - VEILLON (P.) - Septembre 1973.
Analyse des effets de la fermeture de la pche crevettire dcide
dans certaines zones de Madagascar, du 17 dcembre 1972 au 15 f-
vrier 1973.16 p., 8 fig.
N38 - IBANEZ (F.) - Aot 1973.
Un programme FOR'rRN IV d'tude des structures cologiques marines
par un modle driv de l'analyse factorielle. 91 P.9 23 fig.
N39 - FRONrIER-ABOU (D.) - Dcembre 1973.
Note prliminaire sur un essai de fabrication artisanale de nuoc-
mam partir des rsidus de l'industrie orevettire. 21 p., 3 fig.
N40 - POULAIN (J.-F.), PITON (B.), MAGNIER (Y.) - Dcembre 1973.
Compte-rnd.u de la campagne "GLORIEUSBS" du N.O. "[Link]", du 2
au 12 mai 1973. 12 p., 12 pl. h.t. + annexe.
N41 - (B.), POULAIN (J.-F.) - Dcembre 1973.
Rsultats d'essais de pGche d'appt vivaat aux Comores effectus
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N42 - CROSNIER (A.), (C.) - Dcembre 1973.
Note d'information sur les prospections de la pente continentale
malgache "Ifectues par le 1'i.0. "VAUBAN". Bathymtrie - Sdimento-
logie - Pche au chalut. 18 p., 1 fig., 2 table + 13 pl. h.t.
N43 - MARCILLE (J.), STEQUERT (B.) - Avril 1974.
La pche crevettire Madagascar en 1973 - Evolution des stocks
et des pourcentages des diffrentes espces dans les captures.
40 p., 14 fig., 6 tabla
N44 - LAVAL (Ph.) - Juin 1974.
Un programme FORTRAN IV de reprsentation pdrspective d'un modle
trois dimensions pour les analyses multiva!'iables. 24 p., 4 fig.