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Tuberculosis y Lepra Año 2022

El documento aborda la bioseguridad en laboratorios que diagnostican tuberculosis, destacando la importancia de minimizar riesgos asociados a aerosoles y el uso de equipos de protección. Se describen métodos de diagnóstico, incluyendo baciloscopia y pruebas moleculares, y se clasifican los laboratorios según el nivel de riesgo. Además, se enfatiza la necesidad de seguir protocolos específicos para el manejo de muestras y el tratamiento de la tuberculosis.

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Tuberculosis y Lepra Año 2022

El documento aborda la bioseguridad en laboratorios que diagnostican tuberculosis, destacando la importancia de minimizar riesgos asociados a aerosoles y el uso de equipos de protección. Se describen métodos de diagnóstico, incluyendo baciloscopia y pruebas moleculares, y se clasifican los laboratorios según el nivel de riesgo. Además, se enfatiza la necesidad de seguir protocolos específicos para el manejo de muestras y el tratamiento de la tuberculosis.

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TUBERCULOSIS Y

LEPRA
BIOSEGURIDAD
DEFINICION
Es la aplicación de los requisitos mínimos en laboratorios y
redes de laboratorios que realizan ensayos y procedimientos
asociados al diagnóstico de tuberculosis
Redefine los requisitos básicos, para disminuir los riesgo
asociados a la realización de un procedimiento, teniendo en
cuenta:
- Riesgo de generación de aerosoles
- Las instalaciones disponibles
- El equipamiento
- Las practicas y los procedimientos necesarios para limitar la
infección por tuberculosis.
¿¿¿“Es obligatorio usar la CBS para realizar la baciloscopia de esputo”???

No es obligatorio el uso de CBS para la realizar la baciloscopia de


esputo

No se necesitan respiradores siempre que las muestras se traten


dentro de una CSB (debidamente mantenida) y utilizando buenas
técnicas microbiológicas.
El procedimiento puede realizarse en una superficie de trabajo abierta,
siempre que pueda asegurarse una ventilación adecuada. Las
mascarillas no deben considerarse como una alternativa a las CBS
RESPIRADORES

 Deben filtrar> 95% de partículas


infecciosas de más de 0.2 μm de tamaño
(protección respiratoria para partículas de
M. tuberculosis).
 Los respiradores N95 y FFP2 cumplen con
los requisitos y son dispositivos livianos y
desechables que cubren la nariz y la boca.
 Los respiradores "con válvula" permiten
que el aire expirado se mueva fácilmente
de los pulmones al medio ambiente
 Se pueden reutilizar, almacenar siguiendo
Para un correcto ajuste use
las instrucciones del fabricante. siempre los dedos de ambas
manos al tiempo
CLASIFICACIÓN DE LOS
LABORATORIOS DE TB
Nivel de riesgo Actividades del laboratorio Evaluación del riesgo

Baciloscopia directa del esputo;


Bajo riesgo de generación de
preparación de muestras para utilizarlas
aerosoles infecciosos a partir
Bajo en un cartucho de prueba automatizada
de las muestras; baja
de amplificación de ácidos nucleicos
concentración
(ensayo Xpert MTB/RIF), Inoculación en
de partículas infecciosas
medio L.J.

Riesgo moderado de
Tratamiento y concentración de
generación de aerosoles
muestras para la inoculación en medios
Moderado infecciosos a partir de las
de cultivo primarios; PSF (ensayos de
muestras; baja concentración
sonda en línea en muestras)
de partículas infecciosas

Manipulación de cultivos para


Alto Alto riesgo de generación de
identificación; Prueba de Susceptibilidad a
(laboratorio de aerosoles infecciosos a partir
Fármacos
contención de de cultivos; alta concentración
o ensayos de sonda en línea a partir de
tuberculosis) de partículas infecciosas
aislamientos.
TUBERCULOSIS
MYCOBACTERIUM tuberculosis
GENERALIDADES
Es una enfermedad infecciosa, causada por diversas especies del
género Mycobacterium, todas ellas pertenecientes al complejo
Mycobacterium tuberculosis.
La especie más importante y representativa causante de
tuberculosis es el Mycobacterium tuberculosis o bacilo koch

CLASIFICACION:
Clínicamente la tuberculosis se puede manifestar por signos y
síntomas pulmonares o extrapulmonares. De acuerdo a esto se
clasifica en:
Tuberculosis pulmonar: sistema respiratorio
Tuberculosis extrapulmonar: T. meníngea, T. ocular, T.
cardiovascular, T. del sistema nervioso central, T. genitourinaria, T.
ganglionar, T. osteoarticular, T. milliar.
SIGNOS Y SÍNTOMAS:
Fiebre y sudoración nocturna
Pérdida de peso.
Tos con flema por mas de 15 días, a veces con sangre en el
esputo

TRANSMISION:
La transmisión de la tuberculosis solo puede realizarse por
personas que tengan activa la enfermedad
La TB se transmite a través de partículas expelidas por el
paciente bacilífero.

DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO DE LA TUBERCULOSIS

1. PCR (PRUEBA MOLECULAR)


2. CULTIVO LIQUIDO
3. BACILOSCOPIA
DIAGNOSTICO
POR PRUEBAS
MOLECULARE
S
PRUEBAS RÁPIDAS APROBADAS
POR LA OMS PARA EL
DIAGNÓSTICO DE
TUBERCULOSIS Y TB-DR

En Como ayuda En remplazo


En remplazo de las pruebas convencionales de baciloscopia, cultivo y PSF remplazo diagnóstica de la PSF
del BK en TB/VIH convencional
TECNICAS UTILIZADAS EN
COLOMBIA
Xpert MTB/RIF LIPA Anyplex MGIT

Fundamento PCR en tiempo real PCR de punto final (cualitativa) PCR en tiempo real, Cultivo en medio líquido
(cuantitativa) que detecta los productos de basada en el análisis de automatizado, que permite
amplificación mediante temperaturas de fusión detectar la viabilidad de M.
hibridación reversa tuberculosis expuesto a los
fármacos

Aplicación Detección del complejo M. Detección del complejo M. Detección del complejo M. Detección de todas las
tuberculosis y su tuberculosis y su resistencia a H, tuberculosis y su resistencia a H, micobacterias en cultivo y PSF de
resistencia a Rifampicina R, inyectables y FQN R, inyectables y FQN M. tuberculosis a fármacos de
Identificación de otras primera y segunda línea
micobacterias

Sensibilidad para detectar Mayor que la Bk y menor Alta con muestras Bk + y limitada
con muestras Bk- Alta con muestras de esputo, Máxima, detecta más casos que el
el bacilo de la TB que el cultivo
cultivo, tejido fresco, o lavados cultivo convencional en LJ
broncos alveolares de pacientes
sintomáticos

Tiempo de emisión de En el día (la prueba se


resultados 2 días 1 día Entre 4 y 6 semanas
demora 2 horas)

Nivel de bioseguridad Bajo Alto Alto Alto


MATRICES VALIDADAS PARA CADA
METODOLOGIA
Xpert GenoType Anyplex™ Abbott BD Max Elite Cobas® Truenat
MTB Rif® ® MTBDR II MTB/MD Realtime Ingenius Roche TB
plus R/XDR MTB
detection
and
RIF/INH

Esputo Esputo Esputo Esputos Esputo Esputos Esputos Esputos


LBA LBA Lavado LBA LBA LBA
Líquidos Aspirados bronquial Orina
estériles Cultivos Biopsias Aspirado
Biopsias positivos Cultivos gástrico
Ganglio positivos Biopsia
Hueso Líquidos
Secreciones estériles
Materia fecal Hemocultiv
Orina os
Líquido
pleural
Beneficio
 sAlgunas solo requieren un área para
poner el equipo
 Varias funcionan como sistemas
Xpert
MTB/Rif®- abiertos
Ultra  Capacidad de trabajo de altos
Anyplex™ II volúmenes de muestras en modo
Cobas MTB MTB/MDR/XDR
INH/RIF automatizado algunas hacen
extracción, amplificación y detección
(muestra a resultado).
 Los laboratorios que tienen estos
Abbott Realtime
MTB detection equipos cuentan con áreas de
MDR/MTB ELITe
MGB Kit and RIF/INH microbiología fortalecidas (CSB,
algunos presión negativa, personal
BD MAX entrenado)
MDR-TB  Es posible hacer otras pruebas como
carga viral VIH, VPH, paneles virales,
bacterianos, parasitarios, factores
Genotype® Solo para micobacterias, posiblemente a futuro sea remplazada
genéticos, COVID por
-19la
TBMDR / TBDRsl técnica de FluoroType MTB®
Desventaja
s 
Muchos de los estuches están en Xpert
tramite de ingreso al país MTB/Rif®-
 Algunas plataformas requieren Ultra
equipos complementarios para Cobas MTB Anyplex™ II
INH/RIF Verificación de MTB/MDR/XDR
hacer la extracción.
métodos
 Dificultades mundiales por
comparando con el
desabastecimiento de insumos de método de
RT-PCR (extracción, sondas, referencia
enzimas) cultivo en medio
 Su uso como plataforma líquido o PSF Abbott Realtime
MDR/MTB ELITe
MTB detection
diagnostica debe considerar los MGB Kit
and RIF/INH
algoritmos diagnósticos de
tuberculosis y de las otras BD MAX
enfermedades, la capacidad de la MDR-
red de laboratorios para TB
transporte de muestras, la
conectividad de resultados
PROCESAMIENTO DE PRUEBAS
MOLECULARES

1.Verificar la naturaleza 2.Inactivación de la 3.Ingreso al equipo 4.Detección


de muestra muestra para procesamiento

• Estéril: concentrar • Muestra directa • Visual


• Contaminada: • Muestra • Cartucho • Automatizado
descontaminar concentrada • Panel
• Muestra • Chip
descontaminada (N-
acetil L-cisteína
NaOH)
PROCESAMIENTO DE PRUEBAS
MOLECULARES
• Las muestras que se concentran o descontaminan requieren de
CSB para abrir
los contenedores de la centrífuga y decantar el sobrenadante.
• Concentrar las muestras extrapulmonares por centrifugación
proporciona mejores resultados en la prueba debido a que
muchas de estas son paucibacilares.
• Las muestras sometidas a pruebas moleculares se deben
someter a un proceso
de INACTIVACIÓN
• Si hay escasa cantidad de LCR dar prioridad a prueba molecular
o consultar con el médico tratante
• Las muestras de LCR teñidas con sangre y xantocrómicas
pueden producir resultados falsos negativos de las PCR
DIAGNOSTICO DE TUBERCULOSIS
POR CULTIVO LIQUIDO
El cultivo es el método de diagnóstico bacteriológico de mayor
sensibilidad, siendo en este momento el estándar de oro para detección,
puede evidenciar de 10 a 100 BAAR en una muestra, es el único método
válido para seguir la evolución de los casos y confirmar su curación. Para
tuberculosis extrapulmonar es el mejor método de diagnóstico.

En la actualidad el país adopta la recomendación de la OMS de uso del


medio líquido debido a que cultivos como el Ogawa no concentran la
muestra, su pH es ácido y puede inhibir el crecimiento de las
micobacterias; adicionalmente con la expansión e implementación de
técnicas moleculares de buena sensibilidad se debe fortalecer la
correlación clínica con estos métodos de laboratorio
MGIT

Esta metodología permite reducir el tiempo de recuperación de las


micobacterias, aumenta la sensibilidad con respecto a los medios de
cultivos sólidos y determina las unidades de crecimiento (UC) en el
tubo de cultivo líquido por medio de los instrumentos automáticos
BactecTM 320/960; su implementación como método de diagnóstico
debe complementarse con la identificación rápida del complejo M.
tuberculosis a través de técnicas como las de inmunocromatografía o
PCR.
Esta técnica siempre se realiza en conjunto con un medio de cultivo en
LJ que permite correlacionar los resultados obtenidos
INOCULACIÓN DE
LOS TUBOS MGIT
Etapa 3
Etapa1 Etapa 2 Añadir 0.5 ml de la suspensión
de muestra concentrada
Rotular el tubo con el número Añadir 0,8 ml de suplemento
preparada con NALC-NaOH.
de muestra OADC-PANTA Inocular también 1 o 2 medios
sólidos.

Etapa 6 Etapa 4
Etapa 5
Incubar los tubos LJ a 37°C Volver a tapar el tubo
Incubar los tubos MGIT a 37°C
durante 8 semanas con firmemente y mezclar bien y
en el instrumento BACTEC MGIT
un control semanal. limpiar el tubo
LINEAMIENTOS DEL LNR EN EL
MARCO DE LA RESOLUCIÓN 227 DE
2020
Algoritmos diagnósticos de tuberculosis
activa pulmonar
Cultivo para Mycobacterium tuberculosis
Todo cultivo positivo para BAAR debe tener una prueba de
identificación de especie que evidencie la presencia de complejo M.
tuberculosis
A todo cultivo positivo para complejo M. tuberculosis se le deberá
realizar inmediatamente una prueba molecular para determinar la
sensibilidad a fármacos de primera línea
Cuando existe resistencia a fármacos de primera línea, debe
realizarse una prueba de sensibilidad a medicamentos de segunda
línea
Personas que ya han recibido esquemas con medicamentos de
primera línea y fracasa no tienen una recaída temprana (antes de
cumplir dos años después de la curación)
3- BACILOSCOPIA
BACILOSCOPIA SERIADA DE
ESPUTO
Su sensibilidad depende de la calidad en la
muestra y la inmunidad de la persona
Para que la baciloscopia sea positiva es
necesario que la muestra tenga mínimo 5.000
a 10.000 BAAR por mililitro de muestra. Si una
muestra tiene 5000 BAAR por ml, se realiza el
extendido (0.01ml), solo quedan 50 BAAR en Se debe cultivar en medio
líquido cualquier muestra de
la lamina, la probabilidad de observarlos es baciloscopia que resulte
poca debido que hay 1 BAAR por cada positiva
200campos observados
Si las tres son negativas
cultivar preferiblemente la
muestra tomada de mejor
Si la primera muestra es positiva a la baciloscopia, no es
necesario procesar las otras y con este criterio debe iniciarse el
tratamiento; sin embargo, se deberán procesar las demás
muestras cuando la calidad de la primera no sea lo
suficientemente buena.
Es la técnica de elección para el control del tratamiento de la
tuberculosis pulmonar se realizará con una sola muestra al
finalizar la fase intensiva, al cuarto mes y al finalizar el
tratamiento, a menos que el diagnóstico se haya hecho por
cultivo
No se debe solicitar baciloscopia de esputo como requisito
de ingreso a una institución educativa o laboral, pues este
TOMA DE MUESTRAS DE ESPUTO
RECIPIENTE

De boca ancha (alrededor


de 5 cm de diámetro)
Cierre hermético con tapar
rosca.

Capacidad de 30 a 50 ml
De material plástico
desechable, transparente
y resistente

Paredes fáciles de rotular


RECOLECCION DE LA MUESTRA DE
ESPUTO
En el momento en que el paciente se
despierta, lo cual aumenta la
positividad del diagnóstico

Primera muestra cuando se detecta al SR, en


el momento de la consulta. Segunda al
despertar al día siguiente. Tercera en el
momento de entregar la segunda muestra.

A las personas que viven en áreas de difícil


acceso, se les debe recoger las tres
muestras de esputo el mismo día, tratando
que hayan intervalos de tiempo de por lo
menos treinta minutos.

En los laboratorios no debe haber horario


para la recepción
TOMA DE LA MUESTRA DE ESPUTO
Volumen de la muestra:
La persona debe expectorar tres veces en el
recipiente para lograr obtener un buen volumen y
una cantidad representativa
3- 5 mililitros, se deben tomar tres muestra
Conservación:
La muestra de esputo se debe procesar
inmediatamente
En caso contrario, ésta puede ser conservada a 4°C
hasta por 24 horas
Conserve las muestras protegidas de la luz directa
TOMA DE MUESTRAS
ESPUTO INDUCIDO

• El procedimiento se debe realizar en un sitio con buena


ventilación por personal entrenado para esto, se deben usar
respiradores 1860 N 95
Volumen de la muestra:
• Se deben obtener muestras seriadas durante tres días
consecutivos
Conservación:
• La muestra de esputo se debe procesar inmediatamente
• En caso contrario, ésta puede ser conservada a 4°C
hasta por 24 horas
• Conserve las muestras protegidas de la luz directa
TOMA DE MUESTRAS
LAVADO GASTRICO
El procedimiento se debe realizar en un sitio de
toma de muestras con buena ventilación por
personal entrenado para esto. Se debe hospitalizar
la persona de 24 a 72 horas.

La toma de la muestra se hace antes que el paciente


despierte (para que no inicie peristaltismo

Agregar a la muestra igual cantidad de bicarbonato de


sodio al 8% con el fin de neutralizar el ph de la muestra

Tubo de centrifuga, plástico de 50 mililitros y con


cierre hermético.
TOMA DE MUESTRAS
LAVADO GASTRICO

Volumen de la muestra:
La cantidad mínima recuperada debe ser de 20 ml.
Se debe obtener muestras seriadas durante tres días
consecutivos, con el fin de aumentar la posibilidad
diagnóstica
Conservación:
La muestra se debe procesar inmediatamente.
En caso contrario, ésta puede ser conservada a 4°C
hasta por 24 horas
Conserve las muestras protegidas de la luz directa
TOMA DE MUESTRAS
BIOPSIA PULMONAR

Recolección Muestras TB Pulmonar


Volumen de
Muestra Recipiente Recolección muestra Conservación
requerido

Recipiente estéril La biopsia debe ser


con tapa de cierre conservada a 4°C y
transportada en
hermético que Las biopsias deben ser
Biopsia solución salina o agua
contenga solución tomadas por médico No aplica
pulmonar destilada estéril
salina o agua especialista
fresca. Enviar al
destilada estéril
laboratorio protegidos
fresca
de la luz directa.
TOMA DE MUESTRAS
LAVADO O CEPILLADO BRONQUIAL

Obtenida mediante fibrobroncoscopia

Se utiliza xilocaina en aerosol en la


región faríngea sin instilar en el árbol
bronquial ya que puede afectar la
viabilidad de las micobacterias

Aplique 100 ml de solución salina


estéril en alicuotas de 20ml y recolecte
separadamente el lavado bronquial del
broncoalveolar, se espera obtener una
recuperación de 20 a 30 ml del lavado
LIQUIDOS ESTERILES

• LCR, PLEURAL, PERICARDICO, ASCITICO Y SINOVIAL


ENVASE: Tubo estéril con tapa de cierre hermético
TOMA DE MUESTRA:
• Recolecte la totalidad del liquido extraído
• Reciba la muestra sobre oxalato de sodio a una
concentración
de 1mg/ml, EXCEPTO EL LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO
CONSERVACION: Los líquidos destinados para cultivo se
deben procesar inmediatamente
CONSERVACION Y TRANSPORTE DE
MUESTRAS
CONSERVACION
• La muestra de esputo se debe procesar inmediatamente
• En caso contrario esta puede ser conservada a 4 °C hasta por 24 horas
• Conserve las muestras protegidas de la luz directa

TRANSPORTE DE MUESTRAS
• Las muestras para baciloscopia y cultivo y/o pruebas moleculares se
deben enviar refrigeradas a 4°C y en triple embalaje, protegidas de la
luz directa
• Los cultivos positivos dirigidos al INS se deben enviar a temperatura
ambiente, en triple embalaje y protegidos de la luz directa.
REALIZACION DEL EXTENDIDO
 Lavarse las manos
 Colocarse la bata (de manga larga y con botones) y
guantes (doble guante)
 Ubicar en la mesa, bandeja o papel humedecido con
hipoclorito de sodio al 1%
 Dejar sólo lo necesario para realizar el extendido
 Seleccionar la partícula útil (Mucoide, mucopurulenta)
 Extender homogéneamente suficiente cantidad de la
partícula útil, sin exceso en un pequeño ovalo centrado
2cm
en el portaobjetos
(2cm x 2cm o 2cm x 1 cm)
1cm
COLORACION DE ZIELH NEELSEN
PASOS ZIELH NEELSEN
Coloración principal Fuscina
5 min
Decoloración Alcohol acido
3 min
Coloración de contraste Azul de metileno
1 min
ASPECTOS A TENER EN CUENTA
 Durante la tinción con fucsina se debe flamear suavemente con la
llama de un mechero pasándolo por debajo de los portaobjetos, hasta
que se observe emisión de vapores, retirar la llama y en cuanto estos
desaparezcan, flamear nuevamente hasta completar 5 minutos,
evitando que hierva la fucsina, debido a que la pared de los bacilos
puede destruirse.
 Si ocurre evaporación o derrame del colorante, agregue nuevamente
la fucsina
 Dejar enfriar y lavar con agua suavemente y eliminar el exceso de
agua para evitar diluir el próximo reactivo a adicionar
 En la decoloración con alcohol acido puede ocurrir que el extendido
conserve el color rojo o rosado después del lavado con agua, por lo
cual se debe volver a decolorar con alcohol acido hasta obtener
completa decoloración.
 Los excesos de colorantes se deben recoger en un recipiente para
LECTURA DE LA BACILOSCOPIA

El objetivo es determinar si en el extendido hay BAAR y si


los hay cuantificar aproximadamente el numero de Bacilos
INFORME DE RESULTADOS
La siguiente es la escala adoptada internacionalmente para
el informe de los resultados de extendidos examinados por
la técnica de Ziehl Neelsen:
HALLAZGO DE MENOS DE 9 BAAR

Debido a que pueden ser artefactos de


coloración, se recomienda:
• Ampliar la lectura a 200 campos.
• Si con esa lectura no se encuentran más bacilos,
hacer otro extendido de la misma muestra, tratando
de elegir partículas purulentas.
• Si la lectura del segundo extendido no modifica el
resultado del anterior la muestra debe informarse
con el número exacto de bacilos observados y
solicitar una nueva muestra.
• Siempre se deben cultivar estas muestras
ERRORES EN LA COLORACION
CONTROL DE CALIDAD INTERNO
DE LA COLORACION
Utilizar muestras positivas y negativas inactivadas con 10
gotas de hipoclorito al 5% , Durante 3-4 para preparar con
ellas extendidos necesarios, para que puedan ser utilizados
durante dos meses
Controlar la calidad Si se realizan más Si se realizan menos
de cada nuevo lote de de 10 baciloscopias
de colorantes 10 baciloscopias por por día se debe
día, se debe hacer hacer el control
el diariamente.
Generar un registro interno
controlque
unacontenga
vez por la información de la
lectura obtenida en lasemana
muestra de esputo que se guardó como
control, esto con el fin de monitorear la calidad y conservación
de las láminas verificando que la cuantificación de bacilos
coincida con la inicialmente asignada
FORMATOS PROGRAMA
TUBERCULOSIS

FORMATO EEDI DE BACILOSCOPIA DE TUBERCULOSIS


LIBRO DE BK Y CULTIVO (VERSION 4)
LIBRO DE BK Y CULTIVO
Algoritmos diagnósticos
DEFINICIONES DEL SINTOMATICO
RESPIRATORIO
Definiciones programáticas de sintomático respiratorio

Personas con VIH o Niños y niñas menores de


Población General Poblaciones vulnerables
inmunosupresión 15 años
En población general se En personas que viven con el En privados de la libertad, En los niños y niñas , los
considera sintomático virus de VIH o que presenten grupos étnicos, habitantes de síntomas clínicos más
respiratorio a toda persona que patologías o tratamientos calle, migrantes, trabajadores relevantes para sospechar
presente tos y expectoración inmunosupresores se considera de la salud, población rural o tuberculosis son tos con o sin
por más de 15 días. sintomático respiratorio a quien rural dispersa el criterio será expectoración por más de 15
Las manifestaciones clínicas de presente tos con o sin tos y expectoración por más de días, fiebre de más de 8 días,
tuberculosis pueden variar expectoración, fiebre, pérdida 15 días, sin embargo, cuando pérdida o no ganancia de peso
según la edad, el estado de peso, o sudoración nocturna exista difícil acceso a la en los tres meses precedentes.
inmunológico, la presencia de de cualquier tiempo de atención en salud, podrá Disminución del nivel de
comorbilidades y el órgano duración. tomarse en tiempo menor a 15 actividad o juego, e historia de
afectado por lo cual, el días cuando exista presunción contacto con un adulto con
profesional de medicina podrá de la enfermedad. tuberculosis.
definir la presunción de la En contactos de personas
enfermedad frente a una tos afectadas por tuberculosis, se
persistente sin expectoración. tomará como criterio tos y
expectoración de 1 o más días
de duración.
Ministerio d e S a l u d y Protección S oci al d e
Colombia

Notas utilizadas en los algoritmos de diagnóstico (Anexos 1a, 1b, 1c, 1d):
a. Muestra de esputo, la primera de la mañana.
b.Preferiblemente pruebas avaladas por la OMS y bajo control de calidad por el INS, con un tiempo de respuesta menor a 48 horas. Toda prueba molecular debe proporcionar
un tamiz de resistencia a fármacos, mínimo a rifampicina y preferiblemente isoniacida y rifampicina. Se recomiendan pruebas con una alta sensibilidad para detección entre
16 a 130 Unidades Formadoras de Colonias-UFC/ml a partir de muestras de esputo positivas y/o negativas.
c. En caso de no conocer la sensibilidad a isoniacida por prueba molecular, debe obtenerse esa información realizando cultivo en medio líquido.
En caso de que se detecte resistencia a isoniacida, pero sensible a rifampicina, debe darse tratamiento de acuerdo con la norma del PNT.,.
d. Cultivo en el medio líquido recomendado por la OMS.
e.Todos los cultivos de muestras con resistencia a cualquier medicamento se deben enviar al Laboratorio Nacional de Referencia del INS para vigilancia.
f. Radiografía de tórax PA y lateral.

Siglas utilizadas en los algoritmos:


LNR= Laboratorio Nacional de Referencia
INS= Instituto Nacional de Salud,
MTB= Mycobacterium tuberculosis
PNT= Programa Nacional de Tuberculosis PPL= Persona privada de la
libertad PVV= Persona viviendo con VIH
RxTx= Radiografía de tórax PA
PA= Proyección posterior-anterior de la radiografía de tórax
TB= Tuberculosis
Fuente de los algoritmos de diagnóstico (Anexos 1a, 1b, 1c y 1d): Adaptados del Comité Nacional Asesor de Tuberculosis de Colombia (años 2018 y 2019) y de
Caminero 2017, con la colaboración del Laboratorio Supranacional de Chile durante la visita técnica a Colombia, en diciembre de 2017, OPS e IN

OMS/OPS. Diagnóstico de Tuberculosis Xpert MTB/Rif®. 2014. [

http://www.paho.org/hq/index.php?option=com_docman&task=doc_download&gid=24334&Ite
mid=

] Caminero. 2017 [http://www.archbronconeumol.org/es-pdf-S0300289617300509]


WHO 2015 Implementing tuberculosis diagnostics. Policy framework [
http://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/162712/9789241508612_eng.pdf?se
quence=1
]
Manual de algoritmos para el diagnóstico de tuberculosis/Programa “Fortalecimiento de la Red de Laboratorios de Tuberculosis en la
Lineamientos del LNR en el
marco de la Resolución 227
de de2020
Algoritmos diagnósticos tuberculosis activa pulmonar

Población general mayor de 15 años


Personas sin antecedentes de enfermedades o tratamientos inmunosupresores
Indague: Tos y expectoración ≥ 15 días.
Se incluye en este algoritmo la población migrante extranjera

Baciloscopia Radiografía de tórax

Si tiene pruebas negativas y


desaparecen los síntomas, Sin alteración Alterada
considerar otros diagnósticos

Tratamiento Evaluar al paciente No


clínicamente, Evaluar clínicamente al
de acuerdo ¿Presunción de TB Correlacione
Correlacionar con paciente. Si desaparecen
con la norma por RxTx y con la clínica y
resultados de RxTx los síntomas considerar
del PNT clínica? con las otras
Si otros diagnósticos
pruebas
diagnósticas
Definir conducta
terapéutica
Prueba molecular rápida Cultivo en medio liquido
3.3. Algoritmos diagnósticos de tuberculosis activa pulmonar

Población general mayor de 15 años

Prueba molecular rápida Cultivo en medio liquido

Sensible a Resistente a
Evaluar al paciente
Rifampicina Realice pruebas de Repetir prueba evaluando al Si se ha iniciado tratamiento,
clínicamente. Realice otras
Rifampicina identificación de paciente clínicamente y evaluar al paciente clínicamente y
pruebas diagnósticas como el
Tratamiento de Evaluar factores de riesgo para cultivo líquido especie correlacionar con correlacionar con resultados de
acuerdo con la resistencia y considerar repetir la Considerar otros diagnósticos resultados de otras pruebas otras pruebas diagnósticas
norma del PNT prueba en escenarios de bajo diagnósticas Considerar otros diagnósticos
riesgo iniciando el tratamiento de
acuerdo con la norma del PNT. Detección de
Evaluar siempre resistencia a M. tuberculosis
isoniacida Si existe mejoría clínica con el
tratamiento considerar su
Realice prueba molecular rápida para medicamentos de segunda línea continuidad, de lo contrario
y cultivo en medio líquido a partir de muestra de esputo positiva Iniciar tratamiento de acuerdo considerar otros diagnósticos
con la norma del PNT

Realice prueba de
sensibilidad a fármacos de
Ajustar tratamiento de Tratamiento de primera línea
Hacer del cultivo y una
prueba molecular y/o acuerdo con la norma acuerdo con la
fenotípica a fármacos de del PNT yenvío de norma del PNT
segunda línea cultivo positivo al LNR
del INS
Poblaciones vulnerables y de alto riesgo mayor de 15 años
PPL, población étnica, habitantes de calle, trabajadores de la salud, población rural o rural dispersa. Indague: tos y
expectoración ≥ 15 días, en contactos de personas afectadas por TB se tomará como criterio tos y expectoración de
1 o más días de duración

Prueba molecular rápida Cultivo en medio liquido Radiografía de tórax

Sensible a Resistente a
Rifampicina rifampicina Evaluar al paciente
Realice pruebas de Repetir prueba Si se ha iniciado Verificar resultado Correlacione con la
clínicamente. Realice
identificación de evaluando al tratamiento, evaluar al de la prueba clínica y con las otras
otras pruebas
especie paciente paciente clínicamente molecular y el pruebas diagnósticas
Tratamiento de Iniciar el tratamiento de diagnósticas como el
clínicamente y y correlacionar con cultivo. Definir conducta
acuerdo con la acuerdo a la norma del PNT cultivo líquido
correlacionar con resultados de otras Considerar inicio de terapéutica según sea
norma del PNT Evaluar siempre resistencia a Considerar otros
Detección de resultados de otras pruebas diagnósticas tratamiento de el caso
isoniacida diagnósticos
M. tuberculosis pruebas diagnósticas Considerar otros acuerdo con el
diagnósticos
Realice prueba molecular rápida para medicamentos de segunda línea
y cultivo en medio líquido a partir de muestra de esputo positiva Iniciar tratamiento de
acuerdo con la norma Si existe mejoría clínica con el
del PNT tratamiento considerar su
continuidad, de lo contrario
considerar otros diagnósticos
Realice prueba de
sensibilidad a fármacos
de primera línea
Hacer del cultivo positivo Ajustar tratamiento de Tratamiento de
una prueba molecular acuerdo con la norma acuerdo con la
y/o fenotípica a fármacos del PNT yenvío de norma del PNT
de segunda línea cultivo positivo al LNR Si desaparecen los síntomas,
del INS considerar otros diagnósticos
Personas viviendo con VIH/SIDA, personas con patologías o tratamientos
inmunosupresores
Indague: tos con o sin expectoración, fiebre, pérdida de peso o sudoración nocturna de
cualquier duración

Prueba molecular rápida Cultivo en medio liquido Radiografía de tórax

Sensible a Resistente a
Rifampicina rifampicina Evaluar al paciente
clínicamente. Realice
otras pruebas Realice pruebas de Repetir prueba evaluando Si se ha iniciado Verificar Correlacione con
Tratamiento de Iniciar el tratamiento de
diagnósticas como el identificación de al paciente clínicamente y tratamiento, evaluar al resultado de la la clínica y con las
acuerdo con la acuerdo a la norma del PNT
cultivo líquido especie correlacionar con paciente clínicamente prueba otras pruebas
norma del PNT Evaluar siempre resistencia a
isoniacida Considerar otros resultados de otras y correlacionar con molecular y el diagnósticas
diagnósticos pruebas diagnósticas resultados de otras cultivo. Definir conducta
En caso de personas pruebas diagnósticas terapéutica según
Considerar
con coinfección TB Realice prueba molecular Considerar otros sea el caso
Detección de Detección de inicio de
y VIH garantizar rápida para medicamentos de diagnósticos
M. tuberculosis Micobacteria No tratamiento de
acceso al programa segunda línea y cultivo en
Tuberculosa acuerdo con el
de atención integral medio líquido a partir de
para VIH muestra de esputo positiva PNT
Iniciar tratamiento de Si existe mejoría
acuerdo con la norma Remitir a valoración
por infectología o clínica con el
del PNT tratamiento
neumología para
ajuste en esquema de considerar su
tratamiento continuidad, de lo
Realice prueba de contrario considerar
sensibilidad a fármacos otros diagnósticos
Hacer del cultivo positivo Ajustar tratamiento de Tratamiento de de primera línea
una prueba molecular acuerdo con la norma acuerdo con la
y/o fenotípica a fármacos del PNT yenvío de norma del PNT
de segunda línea cultivo positivo al LNR Si desaparecen los síntomas,
del INS considerar otros diagnósticos
Niños o Niñas menores de 15
Indague: Tos con o sin expectoración ≥15 días, fiebre mayor de > 8 días, pérdida o no
ganancia de peso en los tres
meses precedentes, disminución del nivel de actividad o juego, e historia de
contacto con un adulto con tuberculosis
Niños o Niñas menores de 15
Indague: Tos con o sin expectoración ≥15 días, fiebre mayor de > 8 días, pérdida o no
ganancia de peso en los tres
meses precedentes, disminución del nivel de actividad o juego, e historia de
contacto con un adulto con tuberculosis
Niños o Niñas menores de 15
Indague: Tos con o sin expectoración ≥15 días, fiebre mayor de > 8 días, pérdida o no
ganancia de peso en los tres
meses precedentes, disminución del nivel de actividad o juego, e historia de
contacto con un adulto con tuberculosis
Niños o Niñas menores de 15
Indague: Tos con o sin expectoración ≥15 días, fiebre mayor de > 8 días, pérdida o no
ganancia de peso en los tres
meses precedentes, disminución del nivel de actividad o juego, e historia de
contacto con un adulto con tuberculosis
Niños o Niñas menores de 15
Indague: Tos con o sin expectoración ≥15 días, fiebre mayor de > 8 días, pérdida o no
ganancia de peso en los tres
meses precedentes, disminución del nivel de actividad o juego, e historia de
contacto con un adulto con tuberculosis
LEPRA
BACTERIOLOGÍA DE
HANSEN
Enfermedad de
Se manifiesta
Hansen
Es una de las Es una
enfermedades mas principalmente por enfermedad
antiguas que afecta signos y síntomas infecciosa
al hombre, dermatológicos y es la crónica, con
de interés en salud única bacteria que se probable
publica debido a la aloja en el SNP y susceptibilidad
discapacidad y produce daño neural
Producida por el genética y de
deformaciones Mycobacterium No cultivable
lenta in vitro
evolución
físicas leprae o bacilo Afinidad por las zonas
Mide 0,3 a 0,5 micras de diámetro mas frías del
y 4 a 5 micras de longitud,
de Hansen organismo
curvado ligeramente en los
extremos
Intracelular obligatorio
AAR se tiñe con la coloración de Con afinidad por la piel,
Ziehl Neelsen células de Schwann,
Se agrupa en globias mucosas, globo ocular,
Se divide cada 11 A 16 días órganos internos: hígado,
bazos, glándulas
suprarrenales, testículos,
etc.
BACTERIOLOGÍA DE
HANSEN
Transmisi
ón
Se transmite por contacto Las personas que
directo y prolongado con conviven por
pacientes baciliferos tiempo
Por gotículas nasales y Mycobacterium leprae prolongado, con
orales cuando hay un o bacilo de Hansen enfermos
contacto estrecho y multibacilares
frecuente con enfermos no no tratados
tratados
El periodo de
incubación es de 3 a
5 años pero puede
llegar a 20 años
DEFINICIÓN DE CASO DE
HANSEN
Paciente que no ha completado tratamiento para la enfermedad,
ya sea en sus formas paucibacilares o multibacilares o que reúne uno o
mas de los siguientes criterios:
• Lesiones cutáneas eritematosas o hipopigmentadas acompañadas de
disminución o perdida de la sensibilidad (térmica, dolorosa y/o táctil)
• Daño del nervio(s) periférico (s) con o sin engrosamiento asociado con
alteraciones sensitivas motoras de los territorios inervados
• Baciloscopia positiva en linfa

La baciloscopia negativa no descarta el diagnostico de Hansen


BACTERIOLOGÍA DE
HANSEN
Los signos y síntomas de la
lepra
 Manchas blancas o
rojas
Dermatológic  Pápulas
os  Infiltraciones
 Tubérculos
 Nódulos
 Engrosamiento de los nervios periféricos.
 Disminución y/o pérdida de la sensibilidad y la
Neurológic fuerza muscular, especialmente en los ojos, las
os manos y los pies.
 La neuritis puede ser aguda, crónica o
silenciosa.
 La forma lepromatosa es una enfermedad
sistémica con manifestaciones viscerales
Sistémic importantes (fiebre, malestar, dolor) y afecta a
os órganos como el ojo, la laringe, el hígado, el
bazo, las glándulas suprarrenales, sistema
vascular periférico, los ganglios linfáticos y los
testículos
DIAGNOSTICO
Historia clínica y examen físico completo

 Se debe realizar examen de lesiones: Dermatológicas, Oftalmológicas,


Otorrinolaringológicos, Osteoarticulares, Neurales

 Se debe realiza sensibilidad de  Palpación de los nervios


las periféricos:
lesiones:
Térmica: Frio -
calor Dolorosa:
Ej. aguja.
Táctil: Tocar con
gasa o algodón
CRITERIOS DE DIAGNOSTICO

CLINICO BACTERIOLOGICO HISTOPATOLOGICO


QUE HACER CON UN CASO
SOSPECHOSO
CASO SOSPECHOSO SINTOMATICO DE PIEL Y SISTEMA NERVIOSO PERIFERICO
EXAMEN CLINICO PARA LEPRA

NEGATIVO POSITIVO

DESCARTAR BK DE
CLASIFICACION

IB =0 IBC >0
BIOPSIA

NEGATIV POSITIVA
A

DECARTA CASO CONFIRMADO


R DE LEPRA
MULTIBACILAR

PQT
CONTROL AL
TERMINO DEL
TRATAMIENT
O
BACILOSCOPIA DE LEPRA
TOMA DE LA MUESTRA
MATERIALES
SOLICITUD DEL EXAMEN
Se toma raspado Lamina de vidrio limpio y
intradermico como muestra desengrasado
La solicitud del examen debe ir Porta laminas
acompañado del esquema corporal Bisturi desechable
donde el medico señala los sitios
Lapices para identificar la
de la toma de muestra
muestra
Alodon
Guantes
Tapabocas
Mechero de bunsen
Pinzas de Kelly
TOMA DE LA MUESTRA
• Seleccióne el lugar de recogida, desinfectar
con algodón humedecido con alcohol al 70%
• humedecido con alcohol al 70%
• Mantenga un pedazo seco de algodón entre el
cuarto y quinto dedo (parte dorsal de la mano.
De ser necesario, limpie la sangre
• Presione la piel en el sitio de toma de muestra
con la pinza de Kelly, presionando para hacer
isquemia. Mantenga la presión constante hasta
el final de la recogida
• Ponga la hoja de bisturí en ángulo recto. Hacer
un corte en la piel de 5 a 7 mm de diámetro
por 3 mm de profundidad. Realiza raspado
intradérmico el material adecuado y visible, de
 Con el lado no cortante de la hoja
del bisturí realizar el raspado
intradérmico de los bordes y del
fondo de la incisión
 Depositar el material en la lamina
con movimientos circulares desde
el centro hasta el borde del circulo
 Las laminas deben colocarse sobre
una superficie plana y secar a
temperatura ambiente
 Pasar dos o tres veces
rápidamente en la llama del
mechero de bunsen con el frotis
hacia arriaba
Cuando la lesión es nódulo
DISTRIBUCION DE LAS MUESTRAS
• La muestra obtenida se debe colocar en el sitio correspondiente en la
lamina según el esquema corporal, ocupando un área de mas o menos un
centímetro de diámetro
LOBULO DE LESION 1 ó LESION 3 ó
OREJA CODO CODO
IZQUIERDO IZQUIERDO IZQUIERDO

73

LOBULO LESION 2 ó LESION 4 ó


DE OREJA CODO CODO
DERECHA DERECHO DERECHO
TIEMPOS DE COLORACION
PASOS ZIELH NEELSEN
Coloración principal Fuscina
10 min
Decoloración Alcohol acido
5 min
Coloración de contraste Azul de metileno
10 min
BACILOSCOPIA
 Es la búsqueda microscópica de BAAR mediante la coloración
de ZN
 Se realiza en muestras de liquido intersticial y de lesiones.
Para:
Clasificación bacteriológica operativa
• MB: IB > 0
• PB: IB = 0
ESCALA SEMICUANTITATIVA
ESTABLECIDA EN COLOMBIA
INDICE BACILAR
 Es el promedio aritmético de las cruces
encontradas en cada una de las muestras
leídas.
 Totalizar el número de cruces.
 Dividir por el número de muestras leídas
IB= 2+2+2+2+1+1 = 1.67 + +
6
++ ++
El rango de IB cuando es > 0
está entre 0.16 y 3.0,
si se leen 6 muestras. ++ ++

Se informa en números 59
arábigos.
SEGUIMIENTO Y CONTROL

El paciente clasificado como multibacilar (MB)


deberá tener un examen de BH control semestral
durante el tiempo que dure el tratamiento y al
finalizar el mismo para sacarlo a vigilancia

Para los pacientes paucibacilares (PB) se debe


realizar el examen de control al completar el
esquema de tratamiento

Vigilancia post tratamiento de los pacientes MB se


recomienda realizar una BH cada año durante
cinco años y cuando se observen nuevas lesiones

Siempre los mismos sitios utilizados para el examen de


clasificación
FORMATOS DE LA EEDI
DE LEPRA
1. Formato de Evaluación Externa del desempeño indirecta (EEDI) de
baciloscopia de Lepra.
2. Esquema corporal con señalización de las lesiones

PARTICIPACION EN LA EEDI DE LEPRA


Enviar mensualmente el formato de la EEDI en ceros (0) cuando no haya
diagnostico de lepra
Enviar inmediatamente después de la lectura la baciloscopia de
clasificación y/o control al LSP, acompañada del formato de la EEDI y el
esquema corporal.

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