ENZIMAS
Enzimas
Las enzimas son sustancias de naturaleza
proteica que catalizan reacciones químicas,
siempre que sea termodinámicamente posible.
Todas las enzimas son proteínas, sin embargo,
pueden estar formadas únicamente por cadenas
polipeptídicas o contener, además, otro grupo no
proteico. En este último caso, la parte proteica
recibe el nombre de apoenzima, mientras que la
parte no proteica se denomina grupo prostético o
cofactor.
La estructura de una enzima es similar a la de
una proteína y se describe en cuatro niveles
diferentes: estructura primaria, secundaria,
terciaria y cuaternaria.
Enzimas
REACCIONES ENZIMÁTICAS:
Las moléculas sobre las que actúa la enzima en el
comienzo del proceso son llamadas sustratos, y
las convierte en moléculas diferentes, los
productos.
Se realizan en tres etapas:
1) Se forma el complejo enzima-sustrato:
E+S<->ES
2) Se lleva a cabo la reacción: ES<->EP
3) Se libera el producto y la enzima: EP<->E+P
Las enzimas catalizan alrededor de 4000
reacciones bioquímicas distintas.
Enzimas
CARACTERÍSTICAS:
Las enzimas poseen las mismas
propiedades que las proteínas: se
desnaturalizan al ser sometidas a cambios
de pH, a variaciones de temperatura y a
elevadas concentraciones salinas y
presentan un alto grado de especificidad,
tanto en la selección de los sustratos como
en la reacción que catalizan sobre ellos.
Clasificación
Se conocen alrededor de 2000 enzimas.
Existen varias formas de nombrar a una
enzima: nombres sistemáticos o el
código de la Comisión Internacional de
Enzimas (IEC).
Según el tipo de reacción que catalizan,
las enzimas se clasifican en seis clases:
1) Oxidorreductasas
2) Transferasas
3) Hidrolasas
4) Liasas
5) Isómerasas
6) Ligasas
Dogma central de la biología
molecular
Fue enunciado por Francis Crick en 1970
Fue modificado posteriormente por el
descubrimiento de la transcripción inversa
por parte de H. Temin en 1975
Dogma central de la biología
molecular
MECANISMOS DE REPLICACIÓN Y FORMACIÓN DEL ADN:
Helicasa y topoisomerasas, separan y desespiralizan las
dos hebras de ADN
Polimerasa III, realiza la síntesis de las hebras
complementarias sobre cada una de las originales
Primasa, sintetiza ARN complementario del ADN
MECANISMOS DE CORRECCIÓN DE ERRORES:
Endonucleasas, que detectan errores y cortan la cadena
anómala
Exonucleasas, que eliminan el fragmento incorrecto
ADN Polimerasas, que sintetizan la parte correspondiente al
segmento eliminado.
ADN Ligasas, que unen el nuevo segmento al resto de la
cadena.
Dogma central de la biología
molecular
TRANSCRIPCIÓN:
ARN polimerasa ADN dependiente, produce la
síntesis de ADN
TRADUCCIÓN:
Aminoacil-ARNt sintetasas, activa los aminoácidos
uniéndolos a una molécula específica de ARNt
Peptidil transferasa, une los aminoácidos para
formar el enlace peptídico
TRANSCRIPCIÓN INVERSA:
Transcriptasa inversa, obtiene ADN
complementario a partir de ARN mensajero
Enzimas de restricción
El Premio Nobel de Medicina de 1978 fue concedido a
los Microbiólogos Werner Arber, Daniel Nathans y
Hamilton Smith por el descubrimiento de las
endonucleasas de restricción, conduciendo al
desarrollo de la tecnología de ADN recombinante.
El primer uso práctico fue la manipulación de la
bacteria E. coli para producir insulina humana para los
diabéticos.
Las enzimas de restricción son unas enzimas
bacterianas cuya finalidad es destruir el ADN
procedente de bacteriófagos, y que tienen la
propiedad de cortar el ADN sólo en ciertas secuencias
de nucleótidos (palindrómicas).
Existen 3 tipos de enzimas de restricción y se asigna
un nombre a cada una de ellas según el origen
bacteriano del que provengan.
Enzimas de restricción
Las enzimas de restricción cortan las dos cadenas del ADN
en lugares específicos, llamados sitios o diana de
restricción.
Algunas endonucleasas cortan las cadenas en el mismo
lugar, originando extremos romos. Otras cortan las dos
cadenas en lugares diferentes, originando extremos
cohesivos o “pegajosos”.
Las enzimas de restricción que tienen la misma secuencia
de reconocimiento y dejan el mismo extremo cohesivo,
pero no cortan en el mismo sitio, son llamadas
Isoesquizómeros.
Los fragmentos originados al cortar una molécula de ADN
se separan mediante electroforesis en gel, y se unen
mediante la enzima ADN ligasa a otra molécula de ADN
transportadora, llamada vector.
Se llama ADN recombinante, a las moléculas de ADN que
resultan de la unión del gen escogido y el vector.
