CROMATOGRAFIA LIQUIDA HPLC
(HIGH-PERFORMANCE LIQUID
CHROMATOGRAPHY)
¿Qué es un Caracteristicas
HPLC? del HPLC
Es una técnica analítica
1. Alta resolución: Permite la
fundamental utilizada para
separación de componentes
separar, identificar y
con diferencias mínimas en
cuantificar compuestos
sus propiedades
individuales en mezclas
fisicoquímicas.
complejas. Los diferentes
compuestos de la muestra se 2. Sensibilidad: Capaz de
mueven a diferentes detectar y cuantificar
velocidades debido a sus compuestos presentes en
interacciones con la fase concentraciones muy bajas.
móvil y estacionaria. 3. Rapidez: Proceso analítico
rápido en comparación con
otras técnicas de separación.
4. Versatilidad: Puede
Fundamento del analizar una amplia gama de
compuestos.
HPLC
Un disolvente líquido que contiene la
mezcla de las moléculas a identificar
se hace pasar a través de una columna
densamente empaquetada con
pequeñas esferas de resina insoluble.
Es necesario emplear bombas de alta
presión de precisión, ya que la resina
esta densamente empaquetada que el
líquido debe ser bombeado a través de
la columna a elevada presión.
Físicamente, una columna de HPLC es Aplicaciones del
un tubo de acero inoxidable con un HPLC
diámetro interno uniforme y dentro del - Análisis farmacéutico: Control de
cual se encuentra la fase estacionaria. calidad de medicamentos,
identificación y cuantificación de
metabolitos de fármacos.
- Análisis ambiental: Detección y
cuantificación de contaminantes en
agua, suelo y aire.
- Análisis de alimentos:
Determinación de nutrientes, aditivos
y contaminantes en alimentos y
bebidas.
- Bioquímica: Purificación de
proteínas, péptidos y otras
biomoléculas.
- Química analítica: Identificación y
cuantificación de compuestos en
mezclas complejas.
Partes de un
HPLC
1. Inicio de la fase móvil: La bomba
empuja los eluyentes o disolventes a
través del sistema a un caudal
específico.
2. Inyección de la muestra: Una vez
se ha inyectado la muestra en la
trayectoria de flujo de la fase móvil,
esta se desplaza junto con la fase móvil
desde el punto de inyección hasta la
cabeza de la columna.
3. Separación de los compuestos:
La separación física de los compuestos
ocurre en la fase estacionaria de la
columna. Después de la elución de la
columna, los componentes separados
de la muestra viajan hasta el detector.
4. Detección de los analitos: Se
detectan los analitos de interés en
función de la señal eléctrica generada
por las propiedades específicas.
5. Generación del cromatograma:
La señal detectada del analito por el
CDS se traduce en un cromatograma
donde aparece la señal del analito en
relación al tiempo.
Estructura química (cromatograma obtenido mediante HPLC de
carotenoides del pseudo fruto de marañón).
El perfil de carotenoides del pseudo fruto
de marañón muestra una alta concentración
de β-caroteno, seguido de 1 luteína, 3 α-
criptoxantina y 2 violaxantina. Esta
composición indica que el pseudo fruto de
marañón es una buena fuente de
carotenoides con propiedades antioxidantes
y promotoras de la salud. La altura del pico
para cada compuesto es proporcional a su
concentración en la muestra.
Bibliografía
ResearchGate. (21 de Julio de 2022). Obtenido de ResearchGate: [Link]
INSTITUTO TECNOLOGICO SUPERIOR
obtenido-mediante-HPLC-de-carotenoides-del-pseudo-fruto-de_fig3_317275062 DE ACAYUCAN
Solinsa . (29 de Diciembre de 2021). Obtenido de Solinsa : [Link] ROXANA PEÑA SANCHEZ
industria-farmaceutica
BIOTECNOLOGIA Y BIOINGENIERIA
ThermoFisher Scientific. (03 de Agosto de 2019). Obtenido de ThermoFisher Scientific:
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APLICADA
[Link]
02/07/2024
