Proteínas séricas

Puntos a tratar

■ Albúmina y proteínas reactantes de fase aguda.

■ Electroforesis de proteínas como herramienta diagóstica.
■ Pruebas de función hepática, estudio del paciente con enfermedad hepática y biliar.
Caso clínico

■ Ficha de identificación:
– Femenina
– Edad: 55 años
– Ocupación: hogar

■ Motivo de consulta: dolor abdominal

■ Antecedentes heredofamiliares: madre con Diabetes mellitus tipo 2

■ Antecedentes personales patológicos: negados
■ Antecedentes personales no patológicos: negados
■ Antecedentes ginecológicos: G3 P2 C1
Caso clínico

■ Femenina de 55 años de edad que inicia padecimiento 24 horas

previas a su ingreso con dolor abdominal tipo cólico de intensidad
7/10 localizado en hipocondrio derecho con irradiación a epigastrio y
región escapular derecha, acompañado de distensión abdominal y
náusea sin llegar a vómito, niega fiebre u otros síntomas
acompañantes. Acude para manejo de su patología.
Caso clínico
■ Exploración física
■ Signos vitales:
■ FC 110 lpm
■ FR 16 rpm
■ TA 110/70 mmHg
■ Temperatura 36.5º C
■ SatO2 100%

■ Peso: 95 kg
■ Talla: 165 cm
Caso clínico

■ Paciente alerta, consciente, orientada en las tres esferas. Mucosas

subhidratadas. Cuello simétrico, tráquea central, no se palpan
adenomegalias, no soplos carotídeos. Ruidos cardíacos rítmicos, sin
soplos ni ruidos agregados. Tórax con amplexión y amplexación
adecuada, sin presencia de ruidos agregados. Abdomen globoso a
expensas de panículo adiposo, depresible, peristalsis presente,
doloroso a la palpación media y profunda en hipocondrio derecho y
epigastrio, signo de Murphy positivo. No se palpan visceromegalias.
Miembros pélvicos con pulsos presentes, de buena intensidad, sin
edema.
Exámenes de laboratorio

BIOMETRÍA RESULTADO
HEMÁTICA
HEMOGLOBINA 13.5 g/dL

HEMATOCRITO 40.8 %

VCM 89.7 fL QUÍMICA CLÍNICA RESULTADO

MCH 29.7 pg GLUCOSA EN SANGRE 120 mg/dL

RDW-CV 14.5 % CREATININA SÉRICA 0.7 mg/dL

BUN 14.8 mg/dL
LEUCOCITOS 9.58 K/uL
UREA 31.7 mg/dL
NEUTROFILOS 91.3%
COLESTEROL TOTAL 210 mg/dL
LINFOCITOS 9.8% TRIGLICERIDOS 189 mg/dL
PLAQUETAS 196 K/uL BILIRRUBINA TOTAL 2.7 mg/dL

VPM 10.3 FL BILIRRUBINA DIRECTA 2.1 mg/dL

BILIRRUBINA INDIRECTA 0.6 mg/dL

TGO/AST 132 U/L

TGP/ALT 138 U/L
FOSFATASA ALCALINA 126 U/L
SERICA
GAMAGLUTAMIL 72 U/L
TRANSPEPTIDASA
PRUEBAS DE FUNCIÓN HEPÁTICA
 Hígado
■ Órgano más grande y complejo del tracto gastrointestinal
■ Tejido hepático, capacidad de regenerarse. Para abolir la función del tejido hepático, se
debe destruir más del 80% del hígado.

Tres
Hepatocítico sistemas Reticuloendotel
bioquímico ial
Hepatobiliar

• Actividades metabólicas (síntesis de • Sistema de transporte de • Células de Kupffer,

proteínas) bilirrubina hacia hepatocito macrófago del sistema
• Metabolismo glucosa • Conjugación a ácido glucurónico inmune
• Metabolismo de ácidos nucleicos
• Síntesis y metabolismo lipoproteínas
• Metabolismo xenobióticos
• Almacenaje hierro y vitaminas (A, D y
B12)
• Metabolismo amonio y urea
• Síntesis de albúmina y factores de la
coagulación
Funciones metabólicas
■ Bilirrubina

■ Principal metabolito del grupo hemo, el

anillo de tetrapirrol unido al hierro que
se encuentra en la hemoglobina, la
mioglobina y los citocromos.
■ Aproximadamente 250 a 350 mg de
bilirrubina se producen diariamente en
adultos sanos, aproximadamente 85%
de los cuales se obtienen del recambio
de glóbulos rojos senescentes.
■ Bilirrubina
■ En su forma isomérica (trans-) más común, la bilirrubina es altamente insoluble en
agua, y la mayor parte se transporta unida a la albúmina, con solo una pequeña
fracción de bilirrubina libre.
■ La luz puede causar la fotoisomerización de la bilirrubina, desde una forma
transformada a una forma cis más compacta, lo que la hace mucho más soluble en
agua y permite su excreción en la orina (base de la fototerapia en el tratamiento de la
hiperbilirrubinemia neonatal (no conjugada)).
Transtornos del metabolismo de la bilirrubina

■ En cada paso del procesamiento de la bilirrubina, una posible lesión conduce a niveles
séricos elevados de bilirrubina no conjugada o conjugada.

■ Causas de niveles elevados de suero de bilirrubina no conjugada

■ Hemólisis
– En las anemias hemolíticas, la bilirrubina no conjugada aumenta como resultado de niveles
anormalmente altos de hemoglobina liberada por los eritrocitos. Aumento en el nivel de
bilirrubina en el suero.
– Diagnóstico de anemia hemolítica: determinación, en adultos, de niveles elevados de
bilirrubina indirecta en el suero.
■ Niveles ligeramente elevados (rango de 1.5 a 3.0 mg / dL)
■ Síndrome de Gilbert y el síndrome de Crigler-Najjar
■ Caracterizado por una hiperbilirrubinemia no conjugada leve,
■ Lesión genética más común: inserción de dos bases en la región promotora del gen
UGT1A1 que codifica la glucuronil transferasa, lo que resulta en tasas transcripcionales
más bajas y una actividad enzimática global más baja (reducida a aproximadamente el
30% de lo normal).
■ Forma más grave: caracterizado por niveles séricos elevados de bilirrubina no
conjugada, con mutaciones múltiples en este gen, incluidos cambios en los marcos de
lectura y sustituciones críticas de aminoácidos, todo lo cual da lugar a a un espectro de
proteínas disfuncionales.
■ Causas de niveles elevados de suero de bilirrubina conjugada
■ Excreción deficiente: síndrome de Dubin-Johnson
■ Error innato del metabolismo
– Bloqueo de la excreción de bilirrubina en los canalículos (defectos en el anión
orgánico multiespecífico canalicular de unión de adenosin trifosfato (ATP)
transportador, MRP2 / cMOAT / ABCC2)
■ Se asocia con aumento de la bilirrubina conjugada en plasma, con ictericia leve
(bilirrubina total, 2 a 5 mg / dl) y pigmentación oscura intensa del hígado debido a la
acumulación de pigmento lipofuscínico, degradación de lípidos.
■ Obstrucción biliar
■ En adultos, la colelitiasis es la causa más común de hiperbilirrubinemia.
■ Esta afección es el resultado de la presencia de cálculos biliares (que se componen de
bilirrubina o colesterol), más comúnmente en el conducto biliar común (coledocolitiasis).
– Con mayor frecuencia, ocurre en mujeres en la madurez temprana (“fair, fecund,
fortyish female”).
■ La obstrucción biliar por colelitiasis da como resultado una elevación de la bilirrubina
total, con más del 90% de bilirrubina directa.
■ En más del 90% de estos pacientes, se produce un aumento concomitante de la
fosfatasa alcalina. Frecuentemente superan las 300 UI/L. El aumento en la bilirrubina
directa a menudo excede los 5 mg / dL.
■ Hepatitis
■ Destrucción de los hepatocitos por causas virales, químicas o traumáticas, la
necrosis focal y/o la lesión celular resultan tanto en el bloqueo de la conjugación de
bilirrubina como en la excreción de bilirrubina conjugada. Por lo tanto, se produce la
elevación de la bilirrubina tanto directa como indirecta. Los niveles séricos de
bilirrubina son variables, según la gravedad de la infección y el alcance de la
enfermedad.
■ En la hepatitis viral, como la hepatitis B, los niveles séricos de bilirrubina a menudo
alcanzan niveles de 5 a 10 mg/dL o más.
Otras pruebas metabólicas

■ Amonio
■ Compuesto crítico y tóxico, se metaboliza exclusivamente
en el hígado.
■ El amonio se deriva principalmente del metabolismo de
aminoácidos y ácidos nucleicos, también se produce a
partir de reacciones metabólicas, como la acción de la
enzima glutaminasa sobre la glutamina, que da como
resultado la producción de ácido glutámico y amonio.
■ Puede metabolizarse solo en el hígado ya que este
contiene las enzimas para el ciclo de Krebs-Henseleit o
urea, en el que el amonio, una sustancia tóxica, se
convierte finalmente en urea, un compuesto no tóxico que
fácilmente excretado
■ En insuficiencia hepática, las enzimas del ciclo de la urea ya no están presentes, lo
que resulta en la acumulación tóxica de amonio y algunos de los intermediarios de
aminoácidos en el ciclo de la urea, como la arginina, que tiene efectos neurotóxicos.
■ El resultado es un aumento del amonio en la circulación y en el sistema nervioso central
(SNC), lo que da lugar a encefalopatía hepática.
■ Un mecanismo importante por el cual el amonio puede causar toxicidad al SNC es su
capacidad para disminuir la concentración de ácido γ-aminobutírico (GABA), un
neurotransmisor, al reaccionar con el ácido glutámico para formar glutamina a través de
la inversión del reacción catalizada por glutaminasa.
– Esto agota el ácido glutámico en el SNC.
■ Sin embargo, GABA se forma directamente a partir de la descarboxilación del ácido
glutámico, por lo que los niveles de GABA disminuyen, con efectos potencialmente
graves sobre la neurotransmisión.
■ Lípidos
■ Colesterol y otros lípidos.
■ Debido a que el hígado es vital para la síntesis de lipoproteínas, los trastornos hepáticos
a menudo causan trastornos en el metabolismo de las lipoproteínas.
■ Importante reconocer que estas anomalías pueden ser el resultado de una enfermedad
hepática.
■ En la lesión hepática grave, incluida la cirrosis, estas anomalías incluyen
– Disminución de las lipoproteínas de alta densidad (HDL), y en otras distribuciones de
lipoproteínas alteradas, lo que resulta en
■ Niveles elevados de colesterol no esterificado e hipertrigliceridemia (niveles que varían
de 250 a 500 mg / dl).
– Aumento de fosfolípidos, incluidas lecitinas, en la sangre y en la fracción de VLDL.

■ Lesión hepática inducida por el alcohol,

– Alcohol induce una mayor expresión de la apolipoproteína (apo) A-I
■ HDL, especialmente HDL3, puede elevarse si continúa la ingestión de alcohol.
■ Sales biliares
■ Productos del metabolismo del colesterol, facilitan la
absorción de la grasa del intestino.
– Se almacenan en la vesícula biliar
■ se liberan al intestino por ingestión de alimento a través
de la contracción de la vesícula biliar mediada por
colecistocinina.
– La recirculación de sales biliares al hígado ocurre por la
reabsorción del íleon terminal,
■ En la colestasis aumenta la excreción renal de sales
biliares, principalmente en forma de sulfatos y
glucurónidos.

■ Análisis:
– suero
– ayunas o,
– suero tomado en un tiempo específico después de las
comidas
■ Técnicas para medición:
– (métodos cromatográficos), cromatografía líquida de
alta resolución
Síntesis de proteínas

■ El hígado es el sitio de síntesis para la mayoría de las proteínas plasmáticas.

– Las principales excepciones incluyen inmunoglobulinas (Igs) y factor de von
Willebrand.
– Síntesis de más del 90% de todas las proteínas y el 100% de la albúmina.
■ Destrucción extensa: niveles séricos bajos de proteína total y albúmina
■ Mediciones de la función hepática:
– Niveles totales de proteína y albúmina en el suero.
■ Enfermedad renal, desnutrición, enteropatía con pérdida de proteínas, y enfermedad
inflamatoria crónica. Estas causas alternativas siempre se deben considerar cuando se
evalúa el estado de la función hepática.
■ La albúmina tiene una vida media de aproximadamente 20 días, por lo que las
disminuciones en sus niveles séricos ocurren más lentamente que las de las proteínas
con semividas más cortas.
– Entre las proteínas producidas por el hígado con semividas más cortas se
encuentran el factor VII (4 a 6 horas), la transtiretina (1 a 2 días) y la transferrina
(6 días).
■ Determinación de los niveles de proteína en suero
■ El rango de referencia para los niveles de proteína sérica total generalmente está en el
rango de 6 a 7.8 g / dL.
– Al menos el 60% de esto debería ser albúmina, cuyo rango normal es de
aproximadamente 3.5 a 5 g / dL.
■ La electroforesis de proteínas séricas y el Igs cuantitativo pueden revelar cambios
característicos en la enfermedad hepática.
– Típicamente, en la cirrosis, la albúmina disminuye significativamente, al igual que
la α-1, α-2 y β (principalmente la transferrina).
– En la hepatitis autoinmune, la albúmina suele estar disminuida; esto se acompaña
de un marcado aumento policlonal en IgG.
– La cirrosis biliar primaria se acompaña de un aumento policlonal de IgM.
 Pruebas de daño hepático

■ Los hepatocitos contienen altos niveles de varias

enzimas.
■ Lesión hepática: enzimas pueden filtrarse al plasma y
pueden ser útiles para el diagnóstico y la
monitorización de la lesión hepática.
■ Dentro del hepatocito, las enzimas comúnmente
medidas se encuentran en ubicaciones específicas; el
tipo de lesión hepática determinará el patrón de
cambio enzimático.
– Las enzimas citoplásmicas incluyen lactato
deshidrogenasa (LD), aspartato aminotransferasa
(AST) y alanina aminotransferasa (ALT). Las
enzimas mitocondriales, como la isoenzima
mitocondrial de AST, se liberan con daño
mitocondrial. Las enzimas canaliculares, como
la fosfatasa alcalina y la γ-glutamil transferasa
(GGT), se incrementan por procesos obstructivos.
■ Aminotransferasas (transaminasas)
1. AST o aspartato aminotransferasa, también conocida como glutamato-oxalacetato
transaminasa (TGO)
2. ALT o alanina amino transferasa, anteriormente llamada glutamato-piruvato
transaminasa (TGP).
■ Catalizan reversiblemente la transferencia de un grupo amino de AST o ALT a α-
cetoglutarato para producir glutamato más el correspondiente cetoácido del aminoácido
de partida (es decir, oxaloacetato o piruvato, respectivamente).
■ Ambas enzimas requieren fosfato de piridoxal (vitamina B6) como cofactor. Usando
ALT como ejemplo, la alanina reacciona con el fosfato de piridoxal para producir
piruvato más piridoxina. La piridoxina luego reacciona con α-cetoglutarato para producir
glutamato más fosfato de piridoxal regenerado.
■ AST y ALT tienen una vida media en sangre de 17 y 47 horas, respectivamente
■ Tienen límites de rango de referencia superior de alrededor de 40 UI / L
■ AST es tanto intramitocondrial como extramitocondrial
■ ALT es completamente extramitocondrial.
■ La AST se distribuye de forma ubicua en los tejidos corporales, incluidos el corazón y el
músculo
■ ALT se encuentra principalmente en el hígado, aunque también hay cantidades
significativas en el riñón.
■ La AST citoplásmica total está presente en la actividad más alta en los hepatocitos, con
un nivel de AST celular aproximadamente 7000 veces mayor que en el plasma.
ALT también está presente en la actividad más alta en hepatocitos, con un nivel de ALT
celular aproximadamente 3000 veces mayor que en el plasma.
■ Con la mayoría de las formas de lesión hepatocelular aguda, como la hepatitis, la
AST será mayor que la ALT inicialmente debido a la mayor actividad de la AST en
los hepatocitos. Dentro de las 24 a 48 horas, particularmente si ocurre un daño
continuo, la ALT será más alta que la AST, en función de su vida media más larga.
■ Hepatitis inducida por alcohol
■ Alcohol induce daño mitocondrial, lo que resulta en la liberación de AST
mitocondrial, que, además de ser la forma predominante de AST en los hepatocitos,
tiene una vida media significativamente más larga que la AST y ALT
extramitocondriales.
■ Esto frecuentemente resulta en la elevación desproporcionada de AST sobre ALT,
produciendo un cociente AST / ALT, también llamado cociente DeRitis, de 3 a 4: 1 en la
enfermedad hepática inducida por alcohol.
■ La actividad de ALT es más específica para detectar la enfermedad
hepática en pacientes no alcohólicos y asintomáticos. A menudo se
observan elevaciones leves en la infección de hepatitis C.
■ AST se utiliza para controlar la terapia con fármacos potencialmente
hepatotóxicos;
– un resultado más de tres veces el límite superior de lo normal debería
indicar la interrupción de la terapia
■ Lactato deshidrogenasa
■ Esta enzima glucolítica citosólica cataliza la oxidación reversible de lactato a
piruvato. Existen varias isoenzimas LDH, que consisten en tetrámeros de
dos formas, H y M, la primera tiene alta afinidad por el lactato y la segunda
por el piruvato. Progresando de HHHH a MMMM, las isoenzimas posibles son
etiquetadas de LDH1 a LDH5.
– LDH1 y LDH2 predominan en el músculo cardíaco, el riñón y los
eritrocitos.
– LDH4 y LDH5 son las principales isoenzimas en el hígado y el músculo
esquelético.
■ El límite superior del rango de referencia para la actividad total de LDH en el
suero es de alrededor de 150 IU / L.
■ Enzimas que principalmente reflejan la lesión canalicular
■ Estas enzimas están localizadas predominantemente en la membrana
canalicular del hepatocito e incluyen:
– Fosfatasa alcalina
– γ-glutamil transferasa
– 5'-nucleotidasa
■ Fosfatasa alcalina
■ ALP presente:
– hígado
– hueso
– riñón
– intestino
– placenta
■ La ALP total en el suero está presente principalmente en la forma no unida
■ La ALP en el hígado, que tiene una vida media de aproximadamente 3 días, es
una enzima hepatocítica que se encuentra en la superficie canalicular y, por lo tanto, es
un marcador de disfunción biliar.
■ En la obstrucción del tracto biliar por cálculos en los conductos, o por procesos
infecciosos que provocan colangitis ascendente, o por lesiones que ocupan espacio, la
ALP del tracto biliar aumenta rápidamente a valores que a veces exceden 10 veces
el límite superior de la normalidad.
– Combinación de aumento de la síntesis y disminución de la excreción de ALP
■ γ-Glutamil Transferasa
■ Regula el transporte de aminoácidos a través de las membranas celulares al catalizar la
transferencia de un grupo glutamil del glutatión a un aminoácido libre.
– Su principal uso es discriminar la fuente de ALP elevada (es decir, si la ALP está
elevada y la GGT es correspondientemente elevada, entonces la fuente de la ALP
elevada es muy probablemente la vía biliar).
■ Esta enzima está elevada en alrededor del 60% al 70% de quienes abusan del alcohol de
forma crónica.
– Los niveles a menudo disminuyen lentamente con la abstención del alcohol y
permanecen elevados durante al menos 1 mes después de que comienza la
abstinencia.
■ Tiene una vida media de 10 días, pero, en la recuperación del abuso de alcohol, la vida
media puede ser de hasta 28 días. Tiende a ser más alta en los trastornos obstructivos y en
las lesiones ocupantes de espacio en el hígado que en las lesiones de los hepatocitos.
■ Otras enzimas
■ La actividad 5 '-Nucleotidasa se incrementa en los trastornos colestásicos
prácticamente sin aumento de la actividad en pacientes con enfermedad
ósea.
■ La medición de 5'-nucleotidasa puede corroborar la elevación de ALP de una
fuente hepática.
■ α-FETOPROTEINA (AFP)
■ Sintetizada por los hepatocitos embrionarios y las células del saco vitelino fetal en el
segundo trimestre del embarazo, alcanzando niveles que constituyen hasta un tercio de
las proteínas séricas fetales.
– La función de AFP no se conoce.
– Inmunosupresora, evitando la destrucción fetal por circulación de anticuerpos
maternos.
■ La AFP se eleva a niveles anormales en los defectos del tubo neural fetal.
■ Es importante tener en cuenta que los niveles normales de AFP varían
considerablemente con la edad gestacional.
– Nivel sérico anormalmente alto, depende del intervalo de referencia para la edad
gestacional del paciente.
■ Poco después del nacimiento, los niveles de AFP disminuyen, alcanzando el
rango normal adulto alrededor de 1 año de edad.
■ Se ha encontrado que la AFP es un marcador importante para el carcinoma
hepatocelular (HCC).
– En más del 90% de los pacientes
■ Como se señaló anteriormente, los niveles elevados también pueden ocurrir después de
la enfermedad hepática aguda y la fibrosis, lo que hace que este marcador sea algo
inespecífico.
■ Sin embargo, a niveles superiores a 400 ng / dL, existe una alta probabilidad de HCC,
pero a estos niveles de AFP, el tumor está diseminado, por lo que su uso como detector
temprano de HCC es limitado.
Diagnóstico de enfermedad hepática

■ Es importante recordar que en la hepatitis aguda, los cambios principales incluyen

elevaciones significativas de aminotransferasas; en la cirrosis, estos tienden a
permanecer normales o se elevan levemente, mientras que las proteínas totales y la
albúmina están deprimidas, y las concentraciones de amoniaco en el suero son
elevadas.
■ En la obstrucción biliar poshepática, la bilirrubina y la fosfatasa alcalina se elevan;
en las enfermedades del hígado ocupantes de espacio, la fosfatasa alcalina y la
lactato deshidrogenasa están elevadas. En la insuficiencia hepática fulminante, las
aminotransferasas y el amoníaco están elevados, pero la proteína total y la albúmina
están deprimidas.
■ Sistema MELD

■ Objetivo: estimar la probabilidad de supervivencia de los pacientes con enfermedad

hepática.
– El puntaje usa bilirrubina sérica, INR y creatinina sérica para calcular un puntaje
basado en estos valores.
■ La interpretación de los puntajes varía con la condición particular. Se predice que los
pacientes con insuficiencia hepática, que requieren un trasplante de hígado y que
tienen puntajes MELD altos tienen menores tiempos de supervivencia previstos y, por lo
tanto, se les debe dar una alta prioridad.
■ La siguiente ecuación se usa para calcular la puntuación MELD:

■ Los mejores resultados para este procedimiento son para pacientes con puntajes
MELD menores de 14. Para puntuaciones entre 14 y 24, se requiere una evaluación
clínica de los riesgos y beneficios.
■ Puntaje Child-Turcotte-Pugh
■ Clasifica a los pacientes con enfermedad hepática en tres etapas: A, B y C
según el número de puntos asignados a resultados específicos.
■ La supervivencia a 2 años para la categoría A es del 85%; para la categoría B,
57%; y para la categoría C, 35%.
Proteínas/electroforesis de proteínas
Proteínas séricas

■ La determinación de proteínas en plasma provee información acerca del estado de una

enfermedad en diferentes órganos.
■ Usualmente se hace en suero porque esta libre de fibrinógeno y anticoagulantes que
podrían diluirlas.
■ Aunque la determinación de proteínas totales proveé al médico de información sobre el
estado del paciente, el fraccionamiento de las mismas arroja datos clinicos de suma
importancia.
– La cuantificación de albúmina en sangre informa acerca del estatus nutricional, la
capacidad de síntesis del hígado o pérdidad de proteínas por nefropatía o
enteropatía.
– La electroforesis de proteinas separa las globulinas de la albumina y determina
las principales proteínas en patrones altamente especificos para ciertas
enfermedades.
■ La electroforesis puede utilizarse para monitorear pacientes por periodos largos de
tiempo cuando existen marcadas alteraciones en proteinas en particular (mielomas,
sindrome nefrotico, cirrosis, quemaduras, etc).
Estructura de las proteínas

■ La estructura principal de las proteínas es una cadena lineal continua de átomos de

carbono y nitrógeno unidas por enlaces peptídicos entre aminoácidos adyacentes. Al
inicio de la cadena se encuentra la porción n-terminal (grupo amino) y al final la c-
terminal (grupo carboxilo).
■ Existen 4 tipos de estructuras:
1. Primaria
2. Secundaria
3. Terciaria
4. Cuanternaria
Estructura primaria
■ Es la secuencia lineal de aminoácidos en una proteína

Estructura secundaria

■ Se refiere a una conformacion tridimensional en la cual las cadenas polipeptídicas

adquieren una forma de doble hélice.
■ Dentro de esta se divide en tres tipos:
– α-hélice
■ La cadena forma una hélice en la cual el grupo carboxilo de un aminoácido “n” forma
un puente de hidrógeno con un grupo amino “n”+ 4 de la misma cadena,
otorgándole estabilidad a la molecula.

– β o de lámina plegada
■ En esta conformación las cadenas forman una estructura plana tal que las cadenas
laterales de los aminoácidos adyacentes apuntan en direcciones opuestas.
Estructura terciaria
■ Esta conformación tridimensional viene dada por la distribución de los átomos en la molécula
de la proteína.
■ Generalmente los grupos hidrófobos están al interior de la molécula, mientras que los grupos
hidrofílicos están situados hacia el exterior para interactuar con el agua circundante.

Estructura cuaternaria

■ Esta conformación viene dada cuando proteínas individuales o subunidades monoméricas

forman complejos estables como dímeros, trímeros o tetrámeros.
Técnicas de separación de proteínas
Precipitación

■ Para determinar albúmina y globulinas, con la adición de sulfato de sodio, sulfito de

sodio, sulfato de amonio o metanol para
– Se precipitan las globulinas, dejando la albúmina en solución
■ La relación A / G ha sido usado ampliamente porque acentúa anormalidades en la
proteína del suero
– La albúmina puede estar deprimida debido a la disminución de la síntesis
(malnutrición, malabsorción, insuficiencia hepática, derivación a la síntesis de
otras proteínas) o aumento de la pérdida (proteinuria, acumulación de líquido de
ascitis, enteropatía).
– Las globulinas pueden estar elevadas debido a la mayor síntesis de muchas
proteínas diferentes como resultado de reacciones agudas o crónicas de la
enfermedad.
Separación por columnas

■ Los medios de filtración en gel como el Sephadex o las perlas de agarosa se clasifican
de acuerdo al tamaño del poro
– A su vez determina qué tamaño de moléculas pueden pasar a través del interior de
partícula de la columna.
■ Las moléculas muy grandes tienden a fluir a través de los intersticios de la columna y
salir primero de la parte inferior de la columna en el volumen vacío.
– Por lo tanto, en la filtración, el orden de proteínas es por peso molecular o tamaño,
desde el más grande hasta el último más pequeño.
■ La filtración en gel requiere que el medio sea inerte y no interactúe químicamente o
por carga con las proteínas. No es un método para ser empleado para la separación de
alta resolución.
 Cromatografía por intercambio iónico
■ Este método toma ventaja de la carga de las proteínas para unirse a las cuentas del
soporte con carga positiva como el dietilaminoetilo o el aminoetilo cuaternario.
– Proteínas pasan en un medio básico en el cual se cargarían negativamente o no tendrían
carga.
■ Las de carga neutra pasarian libremente mientras que las aniónicas quedarían
adheridas a la pared de la columna con carga positiva.
■ Después se lavaría la columna con un buffer con una alta concentración de sales para
que de este modo los iones de sales desplazaran por carga a las proteínas aniónicas de
carga negativa débil.
– El orden de elusion seria: beta, alfa 1, alfa 2,-globulinas y albumina
Cromatografía hidrofóbica

■ Las proteínas con una naturaleza hidrofóbica interaccionan con una columna de igual
naturaleza. A altas concentraciones de sal se unen a la columna y a bajas
concentraciones se eluyen en el buffer.
Cromatografía de afinidad

■ Este método se basa en la afinidad de las proteínas a separarse con otra proteína que
ha sido covelentemente unida a la columna.
Electroforesis por capilaridad

■ El flujo pasa a través del tubo capilar que puede ser adaptado para separar diferentes
moléculas dependiendo de su tamaño, hidrofobicidad y estereoespecificidad.
– Se pueden separar tanto moléculas grandes (ADN) como pequeñas (hormonas).
■ Se bombea un solvente a través del capilar que deja pasar solutos de acuerdo a sus
interacciones químicas.
Proteínas específicas del plasma (componentes principales)

■ Prealbúmina
■ Albúmina
■ Alfa antitripsina
■ Alfa macroglobulina
■ Haptoglobina
■ Beta lipoproteina
■ Transferrina
■ Complementos C3, C4
■ Fibrinogeno
Proteínas específicas
Proteína Características

Prealbúmina Estructura teramérica

Se une a tiroxina y transporta vitamina A
Vida media corta
Sensible a nutrición y alteraciones hepáticas
Marcador nutricional
Filtración a LCR
Detección por nefelometría
Tratamiento con heparina muestra bandas de prealbúmina
Albúmina La más abundante (2/3 de las proteínas totales)
Mantiene la presión oncótica, transporta moléculas pequeñas, reservorio de aminoácidos
Vida media 17 días
Para la interpretación de niveles de calcio y magnesio (circulan unidos)
Aumento en deshidratación
Disminución en nutrición parenteral, pérdida urinaria, ascitis, cirrosis, enteropatías
Alfa 1-antitripsina Proteasa inhibidora de alfa 1-antitripsina, principal componente, incativa la tripsina
Modula la proteólisis endógena (evita respuesta severa a la inflamación)
Alfa 2-macroglobulina Es la proteína no inmunoglobulina más grande
En las mujeres la concentración es mayor debido a los estrógenos
Aumenta en síndrome nefrótico (es mayor o igual a la albúmina)
Haptoglobina Se une a hemoglobina que proviene de la lisis de eritrocitos para preservar los depósitos de
proteínas y hierro
Circula libre en sangre por 4 días
Forma complejo hemoglobina-haptoglobina que se une al receptor monocito/macrófago
CD163 para ser removido de circulación por endocitosis
Puede ser cuantificada por métodos turbidimétricos (nefelometría)
Proteína Características

β-lipoproteína Lipoproteína de baja densidad (LDL)

Sensible a la ingestión reciente de alimentos grasos
Elevaciones en la hipercolesterolemia
Transferrina Principal beta-globulina
Transporta los iones férricos de las reservas de hierro de la ferritina intracelular o mucosa
a la médula ósea
Transcripción de ARNm para la síntesis de transferrina en el hígado es regulada por la
concentración de hierro en la circulación y alrededor de los hepatocitos
Concentración 200 a 400 mg/dL (capacidad de fijación al hierro)
Deficiencia de hierro a corto plazo: transferrina aumenta a niveles dos veces el normal o
más
Complemento C3 se escinde para formar C3c, que migra anódicamente a C3 nativo como una banda no
diferenciada de otras β-globulinas
Por lo tanto, la concentración de C3 (y C4) es un marcador para evaluar la actividad de la
enfermedad en trastornos reumáticos tales como el lupus eritematoso y la artritis
reumatoide.
C4 no se aprecia en electroforesis de proteínas, corresponde a una quinta parte de C3
Fibrinógeno El más abundante de los factores de la coagulación
100 a 400 mg/dL
Disfibrinogenemias: molécula de fibrinógeno funcionalmente anormal, deterioro de la
coagulación y diátesis hemorrágica, tendencia a trombosis
Aumento de los niveles en el embarazo y con medicamentos anticonceptivos
Componentes menores
■ Aquellas que generalmente no se detectan mediante electroforesis de proteínas
estándar debido a los bajos niveles en suero. Su cuantificación se realiza típicamente
por métodos inmunológicos.

■ Ceruloplasmina
– Sintetizado en el hígado
– Consiste en una sola cadena polipeptídica.
– Niveles séricos son de 20 a 40 mg / dL en adultos
– Cada molécula de ceruloplasmina puede unir seis átomos de cobre, lo que imparte
un color azul a la proteína. La combinación de este azul con el amarillo de otros
cromógenos de plasma imparte un color verdoso al plasma con concentraciones
elevadas de ceruloplasmina.
■ Enfermedad de Wilson (degeneración hepatolenticular)
■ Es consecuencia del metabolismo del cobre alterado, en el que la excreción hepática de cobre a la bilis
se ve afectada, lo que conduce al depósito tóxico de cobre en los tejidos.
– La excreción normal de cobre a través de la bilis se ve disminuida, con un aumento general en los
depósitos de cobre del cuerpo que son tóxicos para el hígado, el cerebro, la córnea, los riñones,
los huesos y las paratiroides.
■ Diagnóstico: infancia o la adolescencia. Cambios neurológicos. Signos de enfermedad
hepática, signos neurológicos, anillo de Kayser-Fleischer en córnea, nivel bajo de
ceruloplasmina en suero, aumento nivel de cobre en orina y biopsia hepática
■ Tratamiento: es la quelación a largo plazo con penicilamina o, en casos graves, trasplante de
hígado
■ Proteína C-reactiva
■ Se encontró que la PCR está presente en el suero de pacientes con trastornos distintos
de la infección y que aumenta notablemente cuando hay necrosis tisular.
– Las concentraciones séricas normales son aproximadamente 100 ng / ml al
nacer, 170 ng / ml en niños y 470 a 1340 ng / ml en adultos.
■ Gran importancia como un reactante de fase aguda altamente sensible
■ Generalmente se mide por su capacidad para precipitar la sustancia C o por métodos
inmunológicos, incluyendo nefelometría, precipitaciones, RIA e inmunoensayo
enzimático.
– Los niveles de PCR a veces se usan como prueba rápida para el diagnóstico
presuntivo de infección bacteriana (PCR alta) versus infección viral (PCR baja)
– Reumatología: control de progresión o la remisión de la enfermedad autoinmune.
■ Reactantes de fase aguda
■ Elevaciones en respuesta a los estados estresantes que ocurren con infección, lesión,
cirugía, trauma u otra necrosis tisular
■ Incluyen AAT, α1-ácido glicoproteína, haptoglobina, ceruloplasmina, fibrinógeno, suero
amiloide A proteína y CRP. Otros son factor VIII, ferritina, lipoproteínas, proteínas del
complemento e inmunoglobulinas.
■ La elevación de los reactantes de fase aguda, respuesta a las citoquinas
■ La respuesta fisiológica total incluye la inducción de fiebre, el reclutamiento de
leucocitos, el catabolismo muscular y un cambio en los patrones de síntesis de proteínas
con una reducción en la producción de albúmina.
Electroforesis de proteínas
Electroforesis de proteínas

■ La electroforesis de las proteínas del suero o proteinograma es un método

semicuantitativo de análisis de las proteínas, frecuentemente solicitado a muchos
laboratorios clínicos.
■ Para la separación de las proteínas del suero se han utilizado a lo largo del tiempo
diferentes soportes (papel, acetato de celulosa, agarosa) que han ido mejorando la
calidad de la separación.
■ En estos métodos se depositaba la muestra sobre el soporte y se sometía a éste a una
corriente eléctrica de tal manera que las proteínas se separaban en función de su
carga eléctrica; posteriormente, se sumergía el soporte en un colorante (negro amido,
rojo Congo) para que éste se fijase a las diferentes fracciones electroforéticas y,
posteriormente, se cuantificaban de forma semicuantitativa en un densitómetro.
■ Electroforesis capilar
■ La muestra se hace pasar por un capilar y las proteínas se separan debido a un fuerte
voltaje electroosmótico y las bandas se estiman mediante la medición a 214 nm del
enlace peptídico.
■ Proporciona la información correspondiente a las proteínas mayoritarias de cada banda
y, por tanto, la información que parece aportar sobre una proteína específica puede
estar distorsionada en presencia de concentraciones aumentadas de las otras proteínas
que comparten la zona de migración.
Bandas

■ Prealbúmina
■ Es una banda difusa, por delante de la albúmina, poco visible y que está constituida
por dos proteínas con un gran interés para la valoración nutricional como son la
prealbúmina y la proteína fijadora del retinol. Por sus bajas concentraciones, se
requieren técnicas inmunológicas para valorar su cuantía.
■ Albúmina
■ Banda más importante del proteinograma, representa más del 50% del mismo en
condiciones normales.
■ Integrada por la proteína más abundante del plasma.
■ Su interés se centra en las hepatopatías (cirrosis) y nefropatías (síndrome nefrótico),
donde está disminuida. Se eleva en situaciones de deshidratación y por prolongación
del tiempo del torniquete a la hora de la extracción de la muestra. Una alteración
cualitativa sin significado patológico que se puede presentar es la bisalbuminemia, que
puede tener un origen genético o adquirido (generalmente debido a la ingesta de
medicamentos).
■ Conjunto de proteínas como la α1-antitripsina, la α1-glucoproteína, la
transcortina, la α1-lipoproteína, y la α-fetoproteína, siendo las dos primeras las
que representan el mayor porcentaje de la misma.
■ Se eleva en los procesos inflamatorios agudos, por lo que las proteínas que la integran
se denominan reactantes de fase aguda.
■ Disminución: indica un déficit de α1-antitripsina, sobre todo en la deficiencia
homocigota (PiZZ) en donde la concentración plasmática de esta proteína está por
debajo del 10-15% de su concentración en los sujetos sanos (MM). En ausencia de
proceso inflamatorio agudo, los sujetos homocigotos SS y los heterocigotos MS, MZ y SZ
tienen alrededor del 50% de las concentraciones encontradas en los sujetos con el
fenotipo MM.
■ ⍺2-globulina
■ Las tres principales proteínas que la integran:
– α2- macroglobulina
– haptoglobina
– ceruloplasmina
■ Se comportan también como reactantes de la fase aguda positivos; la α-2
macroglobulina tiene una función de antiproteasa sérica; la haptoglobina se une a la
hemoglobina en los procesos hemolíticos intravasculares donde está disminuida y la
ceruloplasmina tiene una misión transportadora del cobre, siendo sus concentraciones
bajas en la enfermedad de Wilson.
■ Las proteínas más importantes:
– transferrina
– hemopexina
– β-lipoproteína
– c3 nativo
■ La transferrina se eleva en situaciones de déficit de hierro y desciende en el síndrome
nefrótico y las hepatopatías; la hemopexina desciende en las anemias hemolíticas y se
eleva en las reacciones agudas; el c3 desciende en el LES activo y se eleva como
reactante de fase aguda positivo.
■ En esta banda pueden aparecer otras extras correspondientes a la hemoglobina de los
sueros hemolizados, el fibrinógeno (cuando el proteinograma se realiza con plasma) y
las gammapatías monoclonales, sobre todo IgA.
■ Tres principales inmunoglobulinas: IgG, IgA e IgM; en ausencia de una gammapatía
monoclonal, su estimación electroforética solamente aportará información sobre la
concentración sérica, sobre todo de la IgG.
■ Elevación policlonal: todas las inmunoglobulinas se elevan dando lugar a una curva
simétrica, o bien monoclonal donde aparece un pico correspondiente a la síntesis de
una sola cadena de inmunoglobulinas.
– La elevación policlonal de la IgA da lugar a lo que se llama puente βγ-globulina.
– Elevaciones policlonales: activación de la inmunidad humoral, (infecciones, enfermedades
autoinmunes, hepatopatías y procesos inflamatorios agudos y crónicos).

■ Elevaciones monoclonales: mieloma múltiple, enfermedad de Waldeströn, enfermedad

de las cadenas pesadas y, con mucha frecuencia, a las denominadas gammapatías
monoclonales de significado incierto (GMSI).
■ La proteína C-reactiva, cuando su aumento es muy significativo, aparece como una
pequeña banda en la región gamma del proteinograma.
 ⍺1-globulina: ⍺2-globulina:
1) ⍺1-antitripsina 1) ⍺2-
2) ⍺1-glucoproteína macroglobulina
3) Transcortina 2) Haptoglobina
Albúmina 4) ⍺1-lipoproteína 3) Ceruloplasmina
5) ⍺-fetoproteína
-globulina:
Prealbúmina:
1) Transferrina
1) Prealbúmina
2) Hemopexina
2) Proteína
fijadora de
3) C3 nativo
retinol
-globulina:
1) IgG
2) IgA
3) IgM
Patrones electroforéticos

■ Surgieron de la asociación que se observó entre las diversas enfermedades y

determinadas alteraciones en el proteinograma.

Entidades productoras de gammapatia %

monoclonal
Gammapatia monoclonal de significado incierto 63

Mieloma 18

Amiloidosis 9

Linfoma y leucemias 8

Macroglobulinemias 2
■ Patrón asociado a cirrosis hepática

■ Disminución de todas la proteínas sintetizadas por el hígado (albúmina)

■ Aumento de la banda de las inmunoglobulinas como consecuencia de la falta de
degradación de la IgA de origen digestivo, unido a una síntesis importante de
inmunoglobulinas como consecuencia del material antigénico procedente del tubo
digestivo
■ Patrón del síndrome nefrótico

■ Disminución de la albúmina
■ Aumento de la α2-globulina
■ Disminución de las γ- globulinas como consecuencia de las pérdidas renales de las
proteínas de menor peso molecular y el aumento compensatorio de las de mayor peso
molecular a fin de mantener el poder oncótico del plasma
■ Patrón inflamatorio

■ Proteínas plasmáticas podrían comportarse como reactantes de fase aguda de la

inflamación
– Dos categorías:
– Reactantes de fase aguda positivos, que aumentan su concentración en respuesta
al estímulo inflamatorio
■ α1-antitripsina, la ceruloplasmina, la haptoglobina y el c3;
– Reactantes de fase aguda negativos, que disminuyen su concentración plasmática
en respuesta a la inflamación
■ prealbúmina, la albúmina y la transferrina
■ Aumento de las bandas de la α1-globulina, α2-globulina y si el proceso se cronifica, un
incremento de la banda de la γ-globulina.
■ Patrón de gammapatía monoclonal

■ Región gamma o en la región beta-gamma:

– Pico monoclonal correspondiente a la presencia en el suero de una
inmunoglobulina monoclonal completa o de una de sus cadenas
– La identificación de la para- proteína se efectúa por inmunoelectroforesis,
inmunofijación o inmunosustracción.
Utilidad clínica

■ Es el método de análisis con mayor sensibilidad clínica para la detección de una

gammapatía monoclonal, por lo que la sospecha de una gammapatía monoclonal es
la principal indicación a la hora de solicitar un proteinograma.
Bibliografía

■ Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 23rd edition, McPherson,
Richard A., MD, MSc; Pincus, Matthew R., MD, PhD
■ El proteinograma en la práctica clínica, A. Cidoncha Gallego, E. Pérez Lucena, A. Vinuesa López, M.J.
Zaro Bastanzuri, A. Zafra Mezcua y C. Valencia Roldán, Servicio de Análisis Clínicos. Servicio de
Medicina, 2016