Agentes Biológicos

Blgo. Mariela Ramos

 Definición e Importancia
La mayoría de las actividades que realiza el hombre transcurren en
entornos cerrados, los cuales son domésticos o laborales, siendo este
último un ambiente que puede implicar un riesgo para la salud, ya
sea por la naturaleza del trabajo o por que este espacio no cuente con
las condiciones óptimas respecto a calidad del aire que se respira, es
decir los factores físicos, químicos y/o biológicos que interaccionan
entre sí.
Diversos estudios realizados por la Agencia de Protección
Medio-ambiental de los Estados Unidos (EPA) sobre la
exposición de humanos a contaminantes del aire, indican que
en el aire del interior de recintos cerrados los niveles de
contaminación son de entre 2 a 5 y en algunos casos 100 veces
más concentrados que los niveles presentes en el aire exterior.
 Agentes biológicos
Aunque existe una amplia variedad
de partículas de origen biológico
(biopartículas) en el aire interior, en
la mayoría de los ambientes de
trabajo de interior los
microorganismos tienen gran
importancia para la salud.

Además de microorganismos (como

virus, bacterias, hongos y
protozoos), el aire interior puede
contener granos de polen, detritus
animal y fragmentos de insectos y
ácaros y sus productos de excreción.
Los contaminantes biológicos pueden causar tres tipos básicos de enfermedades entre los ocupantes de un
edificio:

 Enfermedades infecciosas: Implica la invasión de las células por microbios para reproducirse.
Ejemplo: legionelosis, gripe…

 Enfermedades alérgicas: Se presentan cuando los individuos entran en contacto con sustancias
capaces de generar la alergia o Alérgenos. Ejemplo: asma, rinitis alérgica…

 Enfermedades tóxicas: Originadas por las toxinas que producen algunos tipos de bacterias
(endotoxinas) y hongos (micotoxinas) y que pueden dar lugar a reacciones inflamatorias o tener
efectos tóxicos en humanos.
  Polen

Los granos de polen contienen sustancias (alérgenos) que pueden causar respuestas alérgicas en personas susceptibles o
atópicas, que se manifiestan generalmente como “fiebre del heno” o rinitis.

La alergia se asocia principalmente al medio ambiente exterior; en el aire interior, las concentraciones de polen suelen
ser considerablemente menores que en el aire atmosférico La diferencia en la concentración de polen entre el aire
exterior y el interior es mayor en el caso de los edificios en los que los sistemas de calefacción, ventilación y aire
acondicionado (CVAA) tienen una filtración eficaz en la entrada del aire externo. Las unidades de aire acondicionado
de ventana también producen niveles de polen en el interior más bajos que los existentes en edificios con ventilación
natural..
  Acaros

Son arácnidos que se asocian en particular al polvo, pero puede haber fragmentos de estos parientes
microscópicos de las arañas y de sus productos de excreción (heces) en el aire interior. El ácaro del polvo de
casa, Dermatophagoides pteronyssinus, es la especie más importante. Junto a sus parientes cercanos, es una
causa importante de alergia respiratoria. Se asocia principalmente a los hogares, donde abunda en las ropas de
cama, pero también están presentes en los muebles tapizados. Existen algunas pruebas que indican que estos
muebles pueden constituir nichos de ácaros en las oficinas. Los ácaros de almacén asociados a los alimentos y a
los piensos para animales almacenados, como Acarus, Glyciphagus y Tyrophagus, también pueden aportar
fragmentos alergénicos al aire interior. Aunque es más probable que afecten a los granjeros y a trabajadores que
manipulan género alimentario a granel, como D. pteronyssinus, puede haber ácaros de almacén en el polvo de
los edificios, en particular en condiciones calurosas y húmedas.
  Virus

Los virus son microorganismos muy importantes en términos del nivel total de problemas de
salud que causan, pero no pueden vivir de forma independiente fuera de células y tejidos vivos.

Aunque existen pruebas que indican que algunos de ellos se desplazan en el aire recirculante de
los sistemas CVAA, el principal medio de transmisión es el contacto entre personas.

La inhalación a corta distancia de aerosoles generados al toser o estornudar, como en el caso de

los virus del resfriado y de la gripe, también es importante. Por consiguiente, es probable que
las tasas de infección sean mayores en situaciones de aglomeración humana. No existen
cambios evidentes en el diseño o gestión de los edificios que puedan modificar esta situación.
  Bacterias

Se dividen en dos categorías principales, dependiendo de su reacción a la tinción de Gram. Los

tipos gram positivos más frecuentes se originan en la boca, la nariz, la nasofaringe y la piel, y son
Staphylococcus epidermidis, S. aureus y especies de Aerococcus, Micrococcus y Streptococcus.

Las bacterias gram negativas no suelen ser abundantes, pero en ocasiones especies de
Actinetobacter, Aeromonas, Flavobacterium y especialmente Pseudomonas pueden ser
importantes. El agente causal de la enfermedad del legionario, Legionella pneumophila, puede
estar presente en suministros de agua caliente y en humidificadores de aire acondicionado, así
como en equipos de terapia respiratoria, jacuzzis, saunas y duchas. Se propaga desde estas
instalaciones en aerosoles acuosos, pero también puede entrar en los edificios en el aire procedente
de torres de refrigeración próximas.
  Hongos

Los hongos se dividen en dos grupos: levaduras y mohos.

Existen esporas de muchos mohos diferentes en el aire de las casas y de los lugares de trabajo no industriales, pero probablemente los
más frecuentes sean las especies de Cladosporium, Penicillium, Aspergillus y Eurotium. Algunos mohos presentes en el aire interior,
como las especies de Cladosporium, son abundantes en las superficies de las hojas y de otras partes de las plantas del exterior, en
particular en verano. En cualquier caso, aunque las esporas presentes en el aire interior pueden originarse en el exterior, la Cladosporium
también es capaz de crecer y producir esporas sobre superficies húmedas en el interior.
Los edificios proporcionan numerosos nichos o rincones que contienen el material
orgánico muerto que sirve como nutriente a la mayoría de los hongos y bacterias para
su crecimiento y producción de esporas. Los nutrientes están presentes en materiales
como los siguientes: madera; papel, pintura y otros revestimientos de superficies;
mobiliario como alfombras y muebles tapizados; tierra de macetas; polvo; escamas de
piel y secreciones de seres humanos y de otros animales; y en alimentos cocinados y
sus ingredientes crudos.

El hecho de que tenga lugar o no el crecimiento de estos microorganismos depende del

nivel de humedad. Las bacterias sólo son capaces de crecer en superficies saturadas, o
en el agua de las bandejas de drenaje, reservorios y similares de los equipos CVAA.
Algunos mohos también requieren condiciones de casi saturación, pero otros son
menos exigentes y pueden proliferar en materiales húmedos aunque no estén
totalmente saturados. El polvo puede ser un lugar de depósito y, si está suficientemente
húmedo, un lugar de cultivo para los mohos. Por consiguiente, una cantidad
importante de esporas entran en suspensión en el aire cuando se mueve el polvo.
 Protozoos

Los protozoos, como Acanthamoeba y Naegleri son animales

unicelulares microscópicos que se alimentan de bacterias y otras
partículas orgánicas presentes en humidificadores, reservorios y
bandejas de drenaje de sistemas CVAA. Pueden formarse
aerosoles de partículas de estos protozoos, que se han citado
como causas posibles de fiebre por humidificadores.
 Métodos para evaluar la calidad del
aire interior
 Muestreo de microorganismos en el aire
Al investigar la flora microbiana del aire en un edificio, por
ejemplo, para intentar establecer la causa de problemas de
salud entre sus ocupantes, es necesario obtener datos
objetivos detallados y fiables. Dado que la idea más
extendida considera que el estado microbiológico del aire
interior debe reflejar el estado en el aire atmosférico, deben
identificarse de forma exacta los organismos y compararse
con los existentes en el aire atmosférico en ese momento.
  Muestreadores de aire

Los métodos de muestreo que permiten, bien de forma directa o bien de forma indirecta, el cultivo de
bacterias y hongos de transmisión aérea viables en agar gel nutritivo proporcionan la mejor oportunidad de
identificar las especies, motivo por el cual se utilizan con gran frecuencia.

El medio agar se incuba hasta que se desarrollan colonias a partir de las partículas biológicas atrapadas y se
recuentan e identifican, o se subcultivan en otro medio para un nuevo examen.

Los medios agar necesarios para bacterias son diferentes de los necesarios para hongos, y algunas bacterias,
como Legionella pneumophila, sólo pueden aislarse en medios selectivos especiales. Para los hongos, se
recomienda el uso de dos medios: un medio de objetivo general y un medio más selectivo para el aislamiento
de hongos xerófilos. La identificación se basa en las características macroscópicas de las colonias y en sus
características microscópicas o bioquímicas, y requiere unos conocimientos y una experiencia considerables.
Los sistemas más utilizados son por gravedad e impacto.

[Link] por Gravedad:

Se recoge de forma pasiva los microorganismos que gravitan fuera del aire en
placas de Petri abiertas que contienen medio agar. Los resultados obtenidos
utilizando estas placas de asentamiento no son volumétricos, están influidos
intensamente por la turbulencia atmosférica y favorecen la recogida de esporas
grandes (pesadas) o grupos de esporas o células.
2. Muestreo por impacto:
Las partículas de transmisión aérea impactan
sobre una superficie de agar, por lo que es un
muestreador de aire volumétrico, el cual es un
tipo muy utilizado.
a). Muestreadores por impacto de tipo hendidura
Se hace pasar aire a través de una hendidura sobre una placa agar en rotación.

b). Muestreador por impacto de tipo criba

El aire pasa a través de un disco perforado sobre la placa agar. Aunque a menudo se utiliza el
muestreador de criba de una fase, algunos investigadores prefieren el muestreador Andersen
de seis fases. A medida que el aire pasa en cascada a través de agujeros cada vez más
pequeños en sus seis secciones apiladas de aluminio, las partículas se clasifican en diferentes
placas agar de acuerdo con su tamaño aerodinámico.
Por tanto, este muestreador revela el tamaño de las partículas a partir de las cuales se
desarrollarán colonias cuando se incuben posteriormente las placas agar, e indica el lugar del
sistema respiratorio en el que es más probable que se depositen los diferentes organismos.
c). Impactor líquido

En el que las partículas en suspensión en el aire (el cual se hace pasar a través de
chorros capilares), impactan y se acumulan en el líquido. A continuación, se tratan
porciones del líquido recogido y de las diluciones preparadas a partir de él en
diversos medios agar, incubarse y hacer recuentos de microorganismos viables.
 d). Muestreador
centrífugo Reuter
Es un muestreador popular
que funciona por un
principio diferente. La
aceleración centrífuga del
aire a través de un
ventilador produce el
impacto de las partículas a
alta velocidad en un medio
agar colocado en una tira de
plástico que recubre el
cilindro de muestreo.
Las muestras deben llegar al laboratorio en un
soporte, sólido o líquido, y se introducen en una
incubadora en la que con una temperatura
óptima de crecimiento en un tiempo
determinado crecen los microorganismos
pasando de ser microscópicos a formar colonias
visibles a simple vista. El análisis consistirá en
la cuantificación mediante recuento de colonias
de forma visual determinando las u.f.c/m3 de
aire analizado o u.f.c./cm2 de superficie.
Valoración de la exposición.
Problemática.
Según lo indicado hasta ahora, el muestreo de microorganismos presentes en el
medio ambiente laboral es complicado, además ni la American Conference of
Governmental Industrial Hygienists (ACGIH), ni el Comité de Normalización
Europeo o INSHT han establecido valores límites ambientales (TLV o VLA) para
los agentes biológicos, a diferencia con los agentes químicos debido
fundamentalmente a que la respuesta de un trabajador a un microorganismo será
muy diferente dependiendo del agente biológico, de la susceptibilidad individual
del trabajador o de la concentración del microorganismo. Además, la mayoría de
las ocasiones, es necesario utilizar más de un método de muestreo o de técnica de
análisis en el laboratorio, aconsejándose su utilización para casos concretos.

No existe un método estandarizado para todos los tipos de microorganismos, la

elección del método de muestreo depende del agente biológico que se quiere
muestrear. Por otro lado, es necesario garantizar que las mediciones sean
representativas de las condiciones del lugar de trabajo, se incluyan las actividades
poco frecuentes y valorar el elevado coste y la baja eficacia del muestreo.
El Grupo de trabajo de Agentes Biológicos del Comité Técnico del Comité
Europeo de Normalización (CEN) únicamente ha realizado una
normalización de mediciones de bioaerosoles. Las normas EN elaboradas
por este grupo son útiles para especificar los principios y requisitos del
muestreo, pero no dan preferencia a un método en exclusiva, salvo para la
determinación de endotoxinas transportadas por el aire. Al igual que para el
procedimiento de muestreo, hay también diversos métodos para la detección
de los agentes biológicos en las muestras de los lugares de trabajo, todos
ellos con sus ventajas e inconvenientes

Douwes J, Thorne P, Pearce N, Heederik D. 2003. Bioaerosol health effects and exposure assessment: progress and prospects. Institute for Risk Assessment Sciences

(IRAS), Division of Environmental and Occupational Health, Utrecht University, The Netherlands.