UNIDAD 2.
EXPRESIÓN
GÉNICA Y LA
INFLUENCIA
DEL AMBIENTE
2.1 GENÉTICA MOLECULAR: DNA Y RNA
A) REPLICACIÓN
B) TRANSCRIPCIÓN Y POST-TRANSCRIPCIÓN
C) TRADUCCIÓN Y POST-TRADUCCIÓN
Recordando…
■ ¿Qué es el ADN? ¿Cuál es su estructura? ¿Cuáles son sus funciones? ¿Dónde se
encuentra?
■ ¿Qué es el ARN? ¿Cuál es su estructura? ¿Cuáles son sus funciones? ¿Dónde se
encuentra?
A)
REPLICACIÓN
Videos
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Replicación del DNA
■ La replicación del ADN es el proceso mediante el cual se
duplica una molécula de ADN. Cuando una célula se divide, en
primer lugar, debe duplicar su genoma para que cada célula
hija contenga un juego completo de cromosomas
■ EL emparejamiento complementario de las bases nitrogenadas
es la base de este proceso
■ Los componentes esenciales son:
– Las hebras originales de DNA
– Nucleótidos libres
– Enzimas
Replicación del DNA
■ En los procariotas la replicación involucra
solamente a un cromosoma y un solo sitio de
iniciación
■ En los eucariotas, la replicación se realiza durante
la fase S del ciclo celular a través de multiples
sitios de iniciación
Replicación
del DNA
INICIACIÓN: Formación de la horquilla
de replicación
Una horquilla de replicación consta de cuatro componentes:
1. La DNA helicasa desenrolla un segmento corto del dsDNA madre
2. Una primasa inicia la síntesis de un primer (cebador) de RNA que es esencial para
preparar la síntesis del DNA
3. La DNA polimerasa inicia la síntesis de la cadena hija naciente
4. Las SSB se unen al ssDNA para evitar el retemplado prematuro del ssDNA hacia
dsDNA
Horquilla de replicación
Horquilla de replicación
La DNA polimerasa solo puede sintetizar hebras de
DNA en dirección 5’→3’ por lo tanto vamos a tener
variaciones en el proceso. Puesto que las cadenas de
DNA son antiparalelas, la polimerasa funciona de
modo asimétrico.
■ En la cadena adelantada/ líder/guía/conductora
el DNA se sintetiza de manera continua.
■ En la cadena retrasada/retrógrada
/rezagada/retardada, el DNA se sintetiza en
fragmentos cortos llamados fragmentos de
Okazaki
■ Varios fragmentos Okazaki deben sintetizarse
secuencialmente para cada horquilla de
replicación.
Fragmentos ■ La helicasa actúa sobre la cadena discontinua, esta se asocia
con la primasa para permitirle acceso apropiado al dsDNA,
de Okazaki permitiendo que sea formado el primer/cebador/ preparador
de RNA y, a su vez, que la polimerasa empiece a sintetizar el
DNA.
■ El complejo móvil entre helicasa y primasa se ha llamado un
primosoma.
ELONGACIÓN: Síntesis de DNA
■ Varias moléculas de DNA polimerasa diferentes se encargan de la replicación de DNA y
comparten tres propiedades importantes:
1. Alargamiento de cadena: explica el índice (nt/s) al cual ocurre la replicación
2. Procesividad: es una expresión del número de nucleótidos añadidos a la cadena
naciente antes de que la polimerasa se separe de la plantilla
3. Corrección de pruebas: identifica errores de copiado y los corrige
Síntesis de
DNA
■ El índice de replicación de los
mamíferos es de 3 x 109 bp/min
■ Para disminuir el tiempo
empleado se utilizan diversas
horquillas de replicación
simultáneamente
■ Para evitar el super enrollamiento
se hace uso de la enzima
Topoisomerasa
Topoisomerasa
■ Su acción es independiente de ATP porque la
energía para la reformación de enlaces fosfodiéster
de DNA es almacenada dentro de la unión covalente
de topoisomerasa a DNA
■ Evita el superenrollamiento del DNA aliviando la
tensión de la molécula
■ Los primers son fragmentos de RNA que tienen que
ser retirados de la hebra de DNA
■ Para ello se requiere de polimerasas con actividad
endo y exonucleasas
■ En la hebra rezagada, cuando la enzima hace
Síntesis de contacto con el extremo de otro fragmento de
Okazaki contiguo, el primer de ARN de este es
eliminado y los dos fragmentos de Okazaki de ADN
DNA recién sintetizado son unidos. Una vez se han
juntado todos se completa la doble hélice de ADN.
La eliminación de cebadores también se da en la
hebra lider, de síntesis continua, pero debido a que
en ésta hay un solo cebador es un proceso que solo
tiene lugar una vez, mientras que en la hebra
rezagada se dará tantas veces como fragmentos de
Okazaki haya.
Síntesis de DNA
■ Posterior a la eliminación de los primers una enzima ligasa procede a unir los
fragmentos de DNA
Elongación
Elongación
TERMINACIÓN
■ La terminación tiene lugar cuando las horquillas de replicación se encuentran una con
otra
■ En este punto los complejos enzimáticos encargados de la replicación se disocian
■ Esto da lugar a la compactación del DNA para la formación de cromosomas
B)
TRANSCRIPCIÓN
Y POST-
TRANSCRIPCIÓN
Tipos de RNA
Transcripción
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Transcripción
■ Transcripción es el proceso por el cual se genera una
copia de RNA a partir la secuencia de un gen.
■ Dicha copia se transcribe de manera complementaria
■ Esta copia, llamada molécula de RNA mensajero
(mRNA), deja el núcleo de la célula y entra en el
citoplasma, donde dirige la síntesis de la proteína, que
codifica.
Transcripción
Transcripción
■ Las enzimas responsables de la transcripción en células procariotas y eucariotas se
denominan RNA polimerasas dependientes de DNA, o simplemente RNA polimerasas
■ Son capaces de incorporar nucleótidos, uno a la vez, en una hebra de RNA cuya
secuencia es complementaria a una de las hebras del DNA que sirve como plantilla
TRANSCRIPCI
ÓN
Transcripción
Los procesos de síntesis de DNA y RNA son similares por cuanto
comprenden:
1. Los pasos generales del inicio, alargamiento y terminación con
polaridad 5’ → 3’
2. Complejos grandes de inicio de múltiples componentes
3. Apego a las reglas de apareamiento de pares de bases identificadas
por Watson y Crick.
Transcripción
Sin embargo, difieren en varios aspectos importantes:
1. En la síntesis de RNA se usan ribonucleótidos en lugar de
desoxirribonucleótidos
2. La U reemplaza a la T como la base complementaria para A en el RNA
3. La síntesis de RNA no incluye un primer, dado que las RNA polimerasas
tienen la capacidad para iniciar la síntesis de novo
4. Sólo porciones del genoma se transcriben o copian de modo vigoroso hacia
el RNA, mientras que todo el genoma debe copiarse, una vez y sólo una
vez, durante la replicación del DNA
5. No hay una función de corrección de pruebas eficiente en el transcurso de
la transcripción del RNA
Transcripción
Transcripción
Regiones de inicio y término
■ Aquella secuencia nucleotídica en el ADN a la que se unen inicialmente la ARN
polimerasa y las proteínas asociadas se le llama promotor. Como no está transcrito, la
ARN polimerasa se mueve más allá del promotor para empezar la transcripción de la
secuencia del ADN que codifica la proteína
■ La porción de terminación de la transcripción se conoce como cola de Poli A
■ Una vez transcrito el ARN sufre modificaciones que lo hacen una molécula funcional
Modificaciones
postranscripcionales:
Splicing
■ Proceso mediante el cual los
intrones, es decir, las regiones no
codificadoras de los genes, son
escindidos del transcrito de ARN
mensajero primario y los exones
(es decir, las regiones
codificadoras) se unen para
generar ARN mensajero maduro.
Modificaciones postranscripcionales:
Splicing
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Modificaciones postranscripcionales:
Splicing
Espliceosoma ■ En muchos casos, el splicing implica la asociación de varios
complejos de ribonucleoproteínas nucleares pequeñas
(snRNP) para formar un gran complejo de
ribonucleoproteína llamada espliceosoma. Son similares en
tamaño a los ribosomas, catalizan las reacciones que
eliminan intrones del preARNm.
C) TRADUCCIÓN Y
POST-TRADUCCIÓN
Traducción: Síntesis de proteínas
■ Es el proceso anabólico mediante el cual se forman las proteínas
■ El proceso consta de dos etapas:
– La traducción del ARN mensajero, mediante el cual los aminoácidos del
polipéptido son ordenados de manera precisa a partir de la información contenida
en la secuencia de nucleótidos del ADN (Llevada a cabo por los ribosomas)
– Las modificaciones postraduccionales que sufren los polipéptidos así formados
hasta alcanzar su estado funcional.
■ Dado que la traducción es la fase más importante, la biosíntesis de proteínas a menudo
se considera sinónimo de traducción
Síntesis de proteínas
■ Los ribosomas son los orgánulos citoplasmáticos
encargados de la biosíntesis proteica; se encargan de la
unión de los aminoácidos que transportan los ARNt
siguiendo la secuencia de codones del ARNm según las
equivalencias del código genético.
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Código genético
■ El código genético es el conjunto de reglas que define
cómo se traduce una secuencia de nucleótidos en el ARN
a una secuencia de aminoácidos en una proteína. La
secuencia del material genético se compone de la
combinación en grupos de 3 (codones) de las cuatro bases
nitrogenadas
■ El número de codones posibles es 64, de los cuales 61
codifican aminoácidos
■ Siendo además uno de ellos el codón de inicio, AUG y
tres son sitios de parada (UAA, UAG, UGA)
Código
genético
Modificaciones postraduccionales
■ Algunas proteínas experimentan diversas modificaciones postraduccionales, que pueden
conducir a la proteína a la adquisición de su forma funcional, a su traslado a un
compartimento subcelular determinado, a su secreción al exterior de la célula, etc.
– Plegamiento
– Glucosilación
– Proteólisis parcial
– Modificación de aminoácidos
