PROTEINOGRAMA
ELECTROFORETICO E
INMUNOFIJACIÓN
MR2 : Ticse Tovar Jackeline
PROTEINOGRAMA ELECTROFORÉTICO
Es un método semicuantitativo de
análisis que mediante la electroforesis
capilar, permite la separación de las
VSG (VN: 0 a 22 mm/h para los
proteínas en distintas bandas.
hombres y de 0 a 29 mm/h
para las mujeres
PRINCIPALES
Alteraciones
INDICACIONES Valores de proteínas totales
(VN: 6.a 8.0 g/dL)
Ganmapatía
monoclonales
Valoración del proteinograma
En el proteinograma realizado por electroforesis capilar se definen las siguientes
bandas:
Banda de la prealbúmina: Banda difusa, por delante de la albúmina.
Prealbúmina Proteína fijadora del retinol
Banda de la albúmina Banda de la α1-globulina
α1-antitripsina, α1-glucoproteína, transcortina, α1-
Representando >50% del mismo en condiciones normales. lipoproteína, y la α-fetoproteína.
AUMENTA DISMINUYE
DISMINUYE AUMENTA
Procesos inflamatorios Déficit de α1-antitripsina,
Cirrosis Deshidratación agudos sobre todo en la deficiencia
Síndrome nefrótico Prolongación del tiempo homocigota (PiZZ) en
del torniquete. donde la concentración
plasmática de esta proteína
Una alteración cualitativa sin significado patológico que se está por debajo del 10-15%
de su concentración en los
puede presentar es la bisalbuminemia, que puede tener un sujetos sanos (MM).
origen genético o adquirido (generalmente debido a la toma
de medicamentos).
Banda de la α2-globulina Banda de las β- globulinas
Ceruloplasmina : transportadora del
cobre, siendo sus concentraciones bajas
en la enfermedad de Wilson
Haptoglobina: se une a la
hemoglobina en los procesos α-2 macroglobulina :
hemolíticos intravasculares donde función de anti proteasa
está disminuida. sérica.
Banda de la y- globulina
Muestras para análisis
Método del gel de agarosa (electroforesis
en gel de agarosa).
Metodologías electroforéticas: las
proteínas se clasifican: albúmina,
alfa-1, alfa-2, beta y gamma( IgG,
IgA, IgM, IgD e IgE).
INDICACIONES
• Mieloma múltiple.
• Macroglobulinemia de
Waldenström.
• Amiloidosis primaria
Patrones electroforéticos
DEFINICIÓN DE UNA PROTEÍNA M
Inmunoglobulina monoclonal secretada
por un clon de células plasmáticas
anormalmente.
Esta proteína M se detecta mediante
inmunofijación de suero y/u orina, o
(rara vez) de otros fluidos corporales (p.
ej., líquido yeyunal en la enfermedad de
cadenas pesadas alfa), o mediante el
ensayo de cadenas ligeras libres en
suero.
Inmunofijación sérica
Inmunofijación sérica para comprobar la presencia de una
proteína M y determinar su tipo.
Es fundamental para diferenciar un aumento monoclonal
de uno policlonal de inmunoglobulinas.
En la inmunofijación tradicional, el suero del paciente se
somete a electroforesis en al menos 5 carriles separados.
Se deja que se produzca la precipitación de proteínas (es
decir, el complejo antígeno-anticuerpo),
Sigue el lavado (las proteínas no precipitadas se eliminan) y
tinción de los inmunoprecipitados restantes.
Inmunofijación sérica
Proteína M se caracteriza en la
inmunofijación por la presencia combinada
de una banda nítida y bien definida
asociada con una única clase de cadena
pesada y una banda nítida y bien definida
con características de movilidad similares
que reacciona con antisueros de cadena
ligera kappa o lambda, pero no ambos
Indicaciones
• Inmunofijación sérica es más sensible que la SPEP.
• Inmunofijación no proporciona una estimación del tamaño de la proteína , por
tanto, debe realizarse junto con la electroforesis.
• La inmunofijación sérica debe realizarse cuando se encuentra una banda o un pico
agudo en el gel de agarosa ( proteína monoclonal en SPEP) o cuando se sospecha
mieloma múltiple, macroglobulinemia, amiloidosis primaria, plasmocitoma solitario
o extramedular o un trastorno relacionado, a pesar de una patrón SPEP normal
Proteína M sérica en una concentración de al menos
0,02 g/dL (0,2 g/L).
Proteína M en orina en una concentración de ≥0,04
g/L.
Gammapatía monoclonal
Gammapatía biclonal
Dos proteínas monoclonales diferentes.
Se detectan dos clases diferentes de
cadenas pesadas o ligeras de proteínas
M en la inmunofijación
Mieloma múltiple o simplemente tener
una enfermedad premaligna
Gammapatía policlonal
• Se identifica como un pico o banda de base amplia,
típicamente de movilidad gamma.
• Las gammapatías policlonales suelen deberse a procesos
infecciosos, inflamatorios o reactivos.
• En la hepatitis crónica, por ejemplo, el componente
gamma puede alcanzar 6 o 7 g/dL (60 o 70 g/L).
A) El rastreo del densitómetro de estos hallazgos revela un
Enfermedad hepática pico amplio de movilidad gamma. Este patrón suele deberse
Enfermedad del tejido a la presencia de un proceso inflamatorio o reactivo, como
una enfermedad hepática crónica, una enfermedad del
conectivo tejido conectivo, una infección crónica o un trastorno
Infección crónica linfoproliferativo.
Trastornos hematológicos y (B) Se observa un patrón policlonal en la electroforesis de
proteínas séricas en gel de agarosa (ánodo a la izquierda). La
neoplasias malignas no banda de la derecha (asterisco rojo) es ancha y se extiende
hematológicas por toda el área de movilidad gamma.
Hipogammaglobulinemia
• (<0,6 g/dL [6 g/L]) se caracteriza por una
disminución en el tamaño del componente de
movilidad gamma .
• Puede ser congénita, ligada al sexo y/o parte
de un estado de inmunodeficiencia
combinada, mieloma múltiple, la amiloidosis ,
la leucemia linfocítica crónica, el linfoma o el
síndrome nefrótico .
Resultados falsos negativos
Puede haber una pequeña proteína M, incluso cuando las concentraciones de
proteína sérica total están dentro de los límites normales.
Sospecha un trastorno clonal de Inmunofijación en suero y
células plasmáticas, las pruebas orina.
más sensibles para son: Espectrometría de masas
Ensayo de cadenas ligeras
libres en suero
Advertencia Enfermedad de cadenas pesadas alfa (HCD), que ocurre en
pacientes con una forma de linfoma del intestino delgado
Resultados falsos positivos
Los elementos proteicos séricos distintos de las inmunoglobulinas pueden
sugerir falsamente la presencia de una proteína M
El fibrinógeno (en plasma) se ve
como una banda discreta entre
Transferrina (pacientes con Síndrome nefrótico a menudo
las regiones de movilidad beta
anemia por deficiencia de se asocia con un bandas alfa-
y gamma
hierro) pueden producir una 2 y beta que pueden
banda localizada en la región confundirse con una proteína
beta. M
GRACIAS
