ESTRUCTURA Y
ORGANIZACIÓN DEL NÚCLEO
Núcleo
La molécula de DNA
“ El DNA es una de las macromoléculas
de mayor longitud de la célula”
Ciclo celular
Núcleo interfásico
DNA descondensado
Eucarionte v/s Procarionte
DNA organizado en múltiples
cromosomas dentro del núcleo
Flujo de la Información Génica
Replicación
DNA
Transcripción y
Núcleo
procesamiento
RNAm (RNAt y RNAr)
Traducción Citoplasma
PROTEÍNAS
Estructura del núcleo
• Matriz nuclear
• Envoltura nuclear
• Nucleolos
• Cromatina
•Organización del material genético.
•Localización de funciones en sitios discretos.
Matriz nuclear o nucleoesqueleto
• DNAsa
•
detergentes
no iónicos
• soluciones
salinas
concentradas
Microscopia electrónica de matriz nuclear de células HeLa
• soporte físico para anclaje de dominios estructurales y
funcionales de la cromatina
Envoltura nuclear Retículo
endoplásmico
rugoso
• dos membranas que en Membrana
nuclear externa
algunos puntos se fusionan,
generando el poro nuclear. Poro
nuclear
•están separadas por espacio
perinuclear (aprox. 200 nm).
•la membrana externa se
Lámina nuclear Citoplasma
prolonga con el RER. Membrana
nuclear interna
Función: Núcleo
• permeable selectivamente.
Cromatina
• contiene a los elementos del
núcleo.
Espacio
perinuclear
Envoltura nuclear
• dos membranas que en
algunos puntos se fusionan,
generando el poro nuclear.
•están separadas por espacio
perinuclear (aprox. 200 nm).
•la membrana externa se
prolonga con el RER.
Función:
• permeable selectivamente.
• contiene a los elementos del
núcleo.
Envoltura
Nuclear:
•Doble membrana
•Poro nuclear
•Lamina nuclear
Lamina nuclear:
constituida de proteínas del filamento intermedio
Lamina A
Lamina B
Lamina C
Mantención de la forma del núcleo y sostén de algunos
sectores de la cromatina a la envoltura nuclear
Poro Nuclear
Poro Nuclear
negative staining Freeze-fracture/freeze-etch
oocyte
•La envoltura nuclear de un núcleo típico contiene entre 3000-4000 poros.
•Estructura cilíndrica simétrica octagonal.
Poro Nuclear
• Canal acuoso que permite difusión de moléculas pequeñas y proteínas hasta 20kDa.
• Proteínas de mayor tamaño requieren de transporte activo a través de los poros.
• Diámetro total del complejo de 120 nm / Diámetro de orificio 10 nm que puede abrirse
hasta 25 nm.
• Masa molecular de 125.000.000 daltons (mas de 50 proteínas diferentes, las
nucleoporinas).
Cara nucleoplásmica
ara citoplasmática Cara nucleoplásmica post remoción de la
membrana
Complejo de Poro Nuclear
• 8 pequeños canales de 10 nm de diámetro por donde difundirían las moléculas pequeñas.
• Transporte activo de moléculas de mayor tamaño. El poro se puede dilatar hasta 25 nm.
Transporte a través del poro nuclear
Transporte de proteínas desde el
citoplasma hacia el núcleo.
Transporte de partículas ribosomales
y mRNAs desde el núcleo hacia el
citoplasma.
Nucleoplasmin linked to colloidal gold,
electron microscopy.
Transporte de proteínas hacia el núcleo.
1. Reconocimiento :
· NLS: secuencia de localización nuclear: rica en Arginina y Lisina.
Secuencia lineal de ~ 7 aa, o 2 secuencias bipartita de 2 y 4 aa. Se
localizan en cualquier parte de la cadena polipeptídica.
· Receptor citoplasmático: Importina α y β
2. Translocación: GTP y ATP
Transporte de proteínas hacia el núcleo.
Transporte de RNAm
desde el núcleo
hacia citoplasma. Complejo de
unión de CAP
Envoltura
nuclear
• mRNAs acomplejados con
proteínas (20 diferentes): mRNP o
ribonucleoproteina mensajero.
• NES (señal de exportación
nuclear). Al menos 3 tipos de
secuencias.
• Receptor de exportación nuclear.
• Requiere GTP
Subunidades ribosomales
ensambladas en el núcleo
viajan al citoplasma.
Nucleolo
• Matriz no membranosa constituido por RNAs y proteínas
• Transcribe los RNAs ribosomales para la síntesis de proteínas
• El tamaño y número de nucleolos refleja la actividad celular .
Microscopía electrónica de nucleolo de fibroblastos humanos
Cariotipo de Pisum sativum que muestra las Regiones
Organizadoras del Nucleolo
Cromatina: Complejos DNA-proteínas
Heterocromatina: cromatina condensada transcripcionalmente inactiva,
replicación tardía con respecto a Eucromatina.
•H. Constitutiva: Secuencias repetidas (secuencias centroméricas).
•H. Facultativa: Cromosoma X
Eucromatina: cromatina descondensada transcripcionalmente activa
¿ Cómo cabe este DNA en el núcleo ?
Estructura del Genoma humano : 1,8 metros,
nucleosoma Núcleo: 5 a 10 µm de diámetro
Nucleosoma: 166 bp de DNA reducción en longitud en un núcleo en
Octámero de histonas: dos moléculas interfase
de las Histonas H2A, H2B, H3, H4
core 146bp
Linker o eslabón y una de histona H1
Microfotografía electrónica de la estructura de 11 nm de la cromatina
SOLENOIDE.
Estructura de 30 nm de la cromatina
Ciclo celular
Núcleo mitótico
Cromosomas metafásicos
DNA condensado
Plegamiento.
Forma asociada con andamiaje.
Estructura de 300 nm de la cromatina
Condensación de la forma asociada con
andamiaje.
Estructura de 700 nm de la cromatina
Grados de
Compactación
del DNA
Cariotipo humano teñido con Guiemsa corriente
“ Los cromosomas del cariotipo humano son
clasificados en 7 grupos “
“ A través de técnicas citogenéticas el cariotipo
de una especie puede ser bandeado”
Cariotipo humano que muestra patrón de bandeo G
Procarionte v/s Eucarionte
Splicing o
Procesamiento