INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

Unidad Profesional Interdisciplinaria de Ingeniería

Campus Guanajuato
Ingeniería Biotecnológica
Tópicos Selectos de Diseño | 3er departamental

Docente: María Lourdes Mejía Farfán

Diseño de un Cuarto Limpio

EQUIPO 6:
• Aquino Morales Aislin Ixchel
• García Amaro Zyanya Sofia
• Gonzalez Preciado Rosa Isela
• Medina Durán Jessica
• Lopez Cervantes Franciso
INTRODUCCI
ÓN
El presente proyecto trata del diseño de un cuarto limpio en donde se encuentre el bioproceso a
realizar en este caso la producción de ficocianina a partir de Spirulina a partir de las normas
establecidas como la ISO 14644 es una serie de normas internacionales que establecen las
clases de limpieza del aire en entornos controlados, como salas y cuartos limpios. La Norma
Federal 209E establece estándares para la clasificación de cuartos limpios en términos de la
cantidad de partículas en el aire.

De tal modo para ejemplificar e integrar los conceptos referidos a un cuarto limpio y el sistema
de aireación se diseña un diagrama de proceso en el cual se incluyen las variables involucradas
como las dimensiones, la temperatura, flujo de aire, humedad relativa, aire acondicionado,
presurización y sistema de filtración, y los requerimientos de los sistemas HVAC.
De igual manera se propone una validación de salas limpias para bioprocesos en donde es
crucial asegurar que las condiciones ambientales sean compatibles con los requisitos del
proceso biológico y que se minimice el riesgo de contaminación microbiológica. Aquí hay
algunos aspectos específicos que deben tomarse en cuenta desde un punto de vista general y
dado que nuestro diseño de cuarto limpio está enfocado en la inoculación para un bioproceso,
las pruebas necesarias para verificar la confiabilidad de nuestro diseño, una vez implementado
entre ellas son la evaluación microbiológica en aire ya sea por métodos pasivos o activos y
evaluación microbiológica en superficies inertes y vivas. También se hace referencia que el
método o técnica de sedimentación de Koch es la forma más sencilla de evaluar la población
microbiana viable del aire por medio de la exposición de placas que contienen agar nutritivo
sólido para después ser incubadas.
Objetivos
General
 Diseñar un cuarto limpio a partir de las normas establecidas en donde se cumpla con
las características especificadas.

Específicos
 Comprender las normas asociadas con el diseño de un cuarto limpio.
 Conocer las variables involucradas en el diseño de un cuarto limpio y
la importancia de cada una de ellas.
 Diseñar un sistema de aireación.
 Reconocer las diferentes técnicas para validar la limpieza del cuarto
limpio.
 Aprender cuál es la vestimenta adecuada y los accesorios que lleva un
cuarto limpio.
Necesidad
Se requiere diseñar un cuarto limpio cuando nosotros necesitamos un entorno
controlado y libre de contaminantes para realizar procesos específicos, por ejemplo, en
el área de la biotecnología, donde se llevan a cabo procesos que requieren evitar la
contaminación y con ello garantizar la calidad del producto final. Los cuartos limpios
están diseñados para minimizar la presencia de partículas y garantizar la pureza del aire,
esta necesidad se logra satisfacer cuando se controlan algunas variables ambientales
como la temperatura, la humedad y la presión del aire. El diseño de un cuarto limpio
permite mantener estas variables dentro de rangos específicos para garantizar la
estabilidad del proceso y que el proceso sea eficiente.
Normativas
El cumplimiento de normativas y estándares es esencial en el diseño sanitario para asegurar la calidad
y seguridad de las instalaciones. Esto incluye códigos de construcción, regulaciones de calidad de agua
y estándares de gestión de residuos (American Society of Civil Engineers, 2016).

ISO 14644 es una serie de normas internacionales que establecen las clases de limpieza del aire en
entornos controlados, como salas y cuartos limpios. La norma más conocida dentro de esta serie es
la ISO 14644-1
Las clasificaciones de limpieza del aire en términos de
concentración de partículas en el aire limpio.

El número asignado a la clase es la

clasificación a la que debe diseñarse la sala. La clase 3 es la más limpia.
La Norma Federal 209E establece estándares para la clasificación de cuartos limpios en
términos de la cantidad de partículas en el aire.
Fue emitida por el Instituto Nacional de Estándares y Tecnología (NIST) de los Estados
Unidos y fue ampliamente utilizada en la industria.
Se establecen clases de limpieza del aire en función de la cantidad máxima permitida de
partículas por pie cúbico (ft³) o metro cúbico (m³) de aire. Las clases iban desde Clase 1 (el
entorno más limpio) hasta Clase 100,000.
Las clasificaciones de la Norma Federal 209E son las siguientes:
Sostenibilidad y
Resilencia
El diseño sanitario sostenible busca:
• Reducir el impacto ambiental.
• Mejorar la eficiencia en el uso de recursos.
La resiliencia en el diseño implica considerar la adaptabilidad frente a eventos extremos, como
desastres naturales y crisis sanitarias (Andersson & Joelsson, 2013).
El diseño sanitario es esencial para:
• Prevención de enfermedades.
• Preservación del medio ambiente y el bienestar general de la sociedad.

Integrar enfoques sostenibles, normativas actualizadas y consideraciones de resiliencia en el

diseño sanitario contribuye a la construcción de comunidades más saludables y sostenibles a
largo plazo.
 Requerimientos
de un área limpia
 Clasificación y Normativas: Vestimenta y Protocolos de Ingreso:
Las áreas limpias se clasifican según la cantidad Uso de trajes especiales, como batas y
de partículas permitidas por metro cúbico, de cubrezapatos, para reducir la contaminación por
acuerdo con normativas como ISO 14644-1. partículas.
La clasificación varía según la industria y el tipo Protocolos estrictos para el ingreso y salida de
de proceso llevado a cabo en el cuarto limpio. personal.

Materiales de Construcción: Iluminación y Control Ambiental:

Superficies lisas y no porosas para facilitar la Iluminación uniforme que minimiza las sombras y
limpieza. facilita la inspección.
Uso de materiales resistentes a desinfectantes y Control estricto de la iluminación para reducir la
que no generen partículas. generación de partículas.

Control de Contaminantes: Diseño Arquitectónico:

Sistemas de filtración de aire de alta eficiencia Diseño arquitectónico que facilite la limpieza y
para la remoción de partículas. minimice las áreas de difícil acceso.
Control de temperatura y humedad para evitar la Evitar rincones y grietas que puedan acumular
condensación y el crecimiento microbiano. contaminantes.
Clasificación de
áreas limpias
Normativas y Estándares: La clasificación de áreas limpias se rige por normativas internacionales,
como ISO 14644-1.

Partículas en el Aire: Se basa en la cantidad máxima permitida de partículas por metro cúbico a un
tamaño especificado. Las clases van desde ISO Clase 1 (la más estricta) hasta ISO Clase 9 (menos
estricta).

Tamaño de Partículas: Dividiendolas en micrómetros (µm). Las clasificaciones ISO establecen

límites para partículas de tamaños específicos.

Clasificación por Industria: Diferentes industrias tienen requisitos específicos para la clasificación
de áreas limpias. Por ejemplo, la FDA establece estándares para la industria farmacéutica, y el
estándar Federal Standard 209E define clasificaciones para aplicaciones generales.

Consideraciones de Contaminación: Además de partículas, la clasificación puede abordar la

contaminación microbiológica. La cantidad de microorganismos permitidos en el aire se especifica en
algunas clasificaciones.
Actualizaciones y Revisiones: Las normativas y estándares se actualizan regularmente para reflejar
avances tecnológicos y mejores prácticas. El diseño de cuartos limpios debe basarse en las versiones más
recientes de estas normativas.

Zonificación y Áreas Adyacentes: La clasificación considera la zonificación de áreas limpias, definiendo

cuándo se requieren diferentes niveles de limpieza. Áreas adyacentes, como vestíbulos y áreas de
transición, también se clasifican según su función.

Cumplimiento con Buenas Prácticas de Manufactura (GMP): Las clasificaciones deben cumplir con
los principios de Buenas Prácticas de Manufactura, especialmente en la industria farmacéutica. Se requiere
documentación y validación para demostrar el cumplimiento.
Diseño y tipo de
acabados
 Superficies Lisas y No Porosas: Zonas de Transición:
Las paredes, techos y pisos deben tener acabados lisos Áreas de transición, como vestíbulos, deben tener
y no porosos para facilitar la limpieza y prevenir la acabados que minimicen la transferencia de
acumulación de partículas. partículas entre áreas limpias y exteriores.

Paneles de Paredes Modulares: Techos Suspendidos:

Facilita la construcción y permite una fácil Permiten el acceso fácil para mantenimiento y la
desmontabilidad para realizar mantenimiento o instalación de servicios.
modificaciones. Los techos deben ser diseñados para evitar la
Estos paneles suelen tener superficies lisas y acumulación de partículas y deben ser resistentes a
resistentes a desinfectantes. la limpieza frecuente.

Juntas y Sellados: Pisos Sellados y Resistentes:

Las juntas entre paneles y conexiones deben ser Para soportar limpiezas frecuentes con
mínimas y selladas herméticamente para evitar la desinfectantes fuertes.
acumulación de partículas. Materiales como epóxicos y resinas autonivelantes
son comunes.
DIAGRAMA DE PROCESO
 Usando ISO 7 es clase (100,000) con
un tipo de flujo N/M con una velocidad
FLUJO DE AIRE
10-15 fpm en cambios de hora desde
60-90
Teniendo en cuenta la recomendación
se usa un diferencial de 0.05 in WC
PRESURIZACION
(12.5 Pa) a través de puertas en los
cuartos
TIEMPO DE RECUPERACION DE Tiene al menos el doble de cambios de
AIRE aire estimándose que es de 100,000
Con temperatura de 72°F a 75°F,en
TEMPERATURA Y HUMEDAD cuanto a la humedad debe de ser de
30% a 70% de humedad relativa
Puede considerarse prácticamente libre
de partículas S=0.0009 siendo la
FILTRACION HEPA
cuenta real de partículas mejoradas de
6000
Validación
 ¿Para qué?
Verificar que las instalaciones funcionan en acorde a
los estándares internacionales y especificaciones
especiales del cliente.
 EN GENERAL
• Pruebas de Hermeticidad en ductos HVAC
• Pruebas de integridad-PAO a filtros HEPA
• Clasificación de áreas
• Muestreo de patrón de flujo de aire
• Muestreo de temperatura y humedad relativa
• Muestreo de caudal de aire
• Volumen de aire de inyección
• Muestreo de velocidad de aire
• Determinación de cambios de aire por hora
• Muestreo de nivel de luminosidad
• Muestreo de presiones diferenciales
(Luftechnik, 2023)
EN ESPECIFICO
• Evaluación Microbiológica en aire ya sea por métodos pasivos o
activos.
• Evaluación Microbiológica en superficies inertes y vivas.
• Volumen de Flujo de Aire/Velocidad:
• Prueba de Integridad del filtro HEPA: Determinando su correcto
funcionamiento y su integridad.
• Conteo de Partículas no viables: Informa la cantidad de partículas en el
aire de un tamaño específico en la zona limpia.
• Pruebas de Humedad Relativa/Temperatura.
• Monitoreo de presión en cascada (presión diferencial).
(Alfa Laboratorio, 2023)
METODO DE KOCH

Consiste en la capacidad de los microorganismos bajo la influencia de la

gravedad y el movimiento del aire (junto con partículas de polvo y
aerosol) para asentarse en la superficie del medio nutriente en placas de
Petri abiertas (Borisovich, 2018). Es un método microbiológico
cuantitativo de investigación del aire (Boiko, 2016) y se basa en la
precipitación natural de microorganismos bajo la influencia de la fuerza
de gravedad (Grechaninova et al., 2016)
Biocarga
La prueba de carga biológica determina el número total de
microorganismos viables en o sobre un dispositivo médico,
envase o componente. Se lleva a cabo en cualquier producto
que requiera control y / o monitorización de los recuentos de
biocarga, por lo general como parte de un programa de
esterilización. Esta prueba actúa como un sistema de alerta
temprana de posibles problemas de producción que podrían
conducir a una esterilización inadecuada. (Alfa Laboratorio, 2023)
Conclusión
Gracias a esta investigación podemos concluir que para diseñar un cuarto
limpio es necesario conocer las normas como la ISO 14644 que nos
permiten conocer las características específicas que deben considerarse
para garantizar la creación de un entorno controlado y libre de
contaminantes. También pudimos apreciar que las variables que influyen
para mantener un ambiente estable es la temperatura, el flujo de aire, la
humedad relativa, la presurización, sistema de filtración, así como
también los equipos necesarios y el tipo de material que lleva un cuarto
limpio. Finalmente, conocimos algunas técnicas para la validación que se
requiere para la certificación de un cuarto limpio como el hisopado de
superficies o las placas de conteo.
 REFERENCIAS
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● Boiko, I. (2016). Методические указания к лабораторному практикуму по дисциплине Микробиология и
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● Castaño, J. C., & Hincapié, C. A. O. (2008). Metodología para el diseño de cuartos limpios. Scientia et technica, 1(38).
● Fedotov, A. (2018). Getting rid of 95% UCL calculations in ISO 14644-1: 2015 standard: New weaknesses and possible
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● Grechaninova, T., Grigorieva, N., Kosyakova, K., & Puchenko, O. (2016). теория и практика исследования
микробиоты воздуха замкнутых помещений [Theory and practice of indoor air microbiota research]. Clinical and
Preventive Medicine, 18-22.
• ISO, I. (1999). 14644-1. Cleanrooms and Associated Controlled Environments—
Part 1: Classification of Air Cleanliness Cleanroom Standards.
• Jiménez-Méndez, A. (2018). Control de calidad de los procesos constructivos de los cuartos limpios del
Proyecto Edwards.
• Lamkharbach, Y., Bazi, F., Haji, L., Bennani, L., Mourran, A., & Bouamrani, M. L.
(2019). Study of changing statistics model’s influence on the exploitation and conformity of results in the new
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• Luftechnik. (2023, 11 agosto). Validación y clasificación de cuartos limpios | Luftechnik. Aire acondicionado.
[Link]
• Puertos, C. L., & Vega, C. G. L. (2021). V. CUARTOS LIMPIOS Y LOS SECTORES PRODUCTIVOS QUE
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ITEES, 6(6), 1-31.