CINETICA Y REGULACION

ENZIMATICA
LICDA. NERKYS LORENA DOÑE
 ENZIMAS:
ESTRUCTURA,
CLASIFICACIÓN, FUNCIÓN

FACTORES CINETICOS ENZIMATICOS

• Temperatura

• pH

• Concentración de la enzima

• Concentración de sustrato

• Concentración de cofactores

• Inhibidores

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 ENZIMAS:
ESTRUCTURA,
CLASIFICACIÓN, FUNCIÓN

FACTORES CINETICOS
ENZIMATICOS
• Temperatura

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 ENZIMAS:
ESTRUCTURA,
CLASIFICACIÓN, FUNCIÓN

FACTORES CINETICOS
ENZIMATICOS
• pH
ENZIMA pH OPTIMO

Pepsina 1,5

Tripsina 7,7

Arginasa 9,7

Fumarasa 7,8

Ribonucleasa 7,8

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 FACTORES CINETICOS
CATALIZADORES
ENZIMATICOS

• pH

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CATALIZADORES
FACTORES CINETICOS
ENZIMATICOS

 Los enzimas poseen grupos químicos ionizables (carboxilos -

• pH COOH; amino -NH2; tiol -SH; imidazol, etc.) en las cadenas
laterales de sus aminoácidos.

 Según el pH del medio, estos grupos pueden tener carga eléctrica

positiva, negativa o neutra.

 Como la conformación de las proteínas depende, en parte, de sus

cargas eléctricas, habrá un pH en el cual la conformación será la más
adecuada para la actividad catalítica. Este es el llamado pH óptimo.

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CATALIZADORES

FACTORES CINETICOS
ENZIMATICOS
• Concentración de la enzima

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CATALIZADORES

FACTORES CINETICOS
ENZIMATICOS
• Concentración de sustrato

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CATALIZADORES

FACTORES CINETICOS
ENZIMATICOS

• Cofactores

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La actividad de las enzimas puede verse modificada por
moléculas o sustancias que aumentan o disminuyen su
actividad catalítica.
Aquellas moléculas que se unen a la enzima y aumentan su
actividad catalítica se conocen como activadores o efectores
positivos

Aquellas que son capaces de disminuir o frenar

completamente la actividad catalítica se conocen como
inhibidores o efectores negativos.
 Inhibidores
Enzimáticos:
Muchos tipos diferentes de moléculas inhiben las enzimas y
suelen actuar de diferentes formas.

Cabe distinguir dos tipos de inhibiciones:

Reversible e Irreversible
Inhibición Reversible
• El inhibidor se une a la enzima de forma no covalente.

• Este tipo de unión puede ser competitiva, no competitiva y

acompetitiva
Inhibición Competitiva:
• El inhibidor se parece estructuralmente al sustrato y
ocupa el sitio activo de la enzima, de este modo
impide la actividad catalítica

• Un inhibidor competitivo compite con el sustrato por

el sitio activo
 FACTORES CINETICOS
ENZIMATICOS
• Inhibidores

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Inhibición no competitiva
• Este tipo de inhibición se produce cuando una molécula o un ion
pueden unirse a un segundo lugar de la superficie enzimática (no al
sitio activo).

• El inhibidor no competitivo puede ser una molécula que no se parezca

en absoluto al sustrato, pero tiene una fuerte afinidad por un segundo
lugar de unión e inhibe de igual forma el fenómeno catalítico
 FACTORES CINETICOS ENZIMATICOS
• Inhibidores

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Inhibición Acompetitiva

• El inhibidor solo se une al complejo enzima sustrato y no a la enzima

libre
Inhibición Irreversible
• Algunas sustancias se combinan de forma covalente con las enzimas y
las inactivan de manera irreversible.

• Casi todos los inhibidores enzimáticos irreversibles son sustancias

toxicas naturales o sintéticas.
Un ejemplo típico de inhibidores irreversibles es el
diisopropil fluorofosfato (DFP), que inhibe
irreversiblemente a la acetilcolinesterasa que, una
enzima esencial para la conducción nerviosa y su
inhibición causa parálisis rápida de las funciones
vitales.

Muchos insecticidas y gases nerviosos se parecen DFP

y son potentes inhibidores de la colinesterasa.
CATALIZADORES

FACTORES CINETICOS ENZIMATICOS

• Inhibidores

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PAPEL REGULADOR DE LAS
ENZIMAS
NIVELES DE REGULACIÓN
ENZIMÁTICA
 Modificación Covalente
 Modificación Alostérica
 Proenzimas o Zimógenos
 Compartimentalización
 Control Genético
 MODIFICACIÓN COVALENTE

• Mecanismo que controla la enzima al unirle de manera covalente un

grupo fosfato (P).

• Este se une a restos o residuos de Ser – Tir – Tre presentes en la enzima.

• La enzima puede tomar 2 formas:

• Fosforilada (Fosforilación)
• No Fosforilada (Desfosforilación)

• Así, con las reacciones de Fosforilación y Desfosforilación se modifica la

actividad de la enzima: Aumentándola o disminuyéndola.

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 MODIFICACIÓN COVALENTE

• Cada enzima presenta su propio patrón de actividad, no hay una

regla general.

• Ej.: 1- Glucógeno Fosforilasa

• GF a (Fosforilada)  Activa
• GF b (No Fosforilada)  Inactiva

2- Glucógeno Sintetasa
• GS a (Fosforilada)  Inactiva
• GS b (No Fosforilada)  Activa

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 MODIFICACIÓN COVALENTE

• Otros mecanismos de modificación

covalente presentes en organismos
inferiores:
• Metilación y Acetilación

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Modificación Alostérica
 MODIFICACIÓN ALOSTÉRICA

• Enzimas Alostéricas  Estructura Cuaternaria (2 o más Sub-

unidades o monómeros).

• Son las principales enzimas reguladoras y usualmente

catalizan el paso limitante en una serie de reacciones
bioquímicas o un paso donde la ramificación de 2 vías puede
ocurrir.

• Estas enzimas poseen un lugar diferente al centro activo (Sitio

Alostérico) donde se unen ligandos que van a modificar su
actividad.

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 MODIFICACIÓN ALOSTÉRICA

• Los ligandos alostéricos o Efectores:

• Positivos  Si aumentan la Actividad de la
Enzima.
• Negativos  Si disminuyen la Actividad de la
Enzima.
• Ej.: Aspartato Transcarbamilasa (ATCasa)
• - CTP (efector negativo)
• + ATP (efector positivo)

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 MODIFICACIÓN ALOSTÉRICA

• Acción de los Activador

efectores + y – Efector +
sobre las
enzimas
alostéricas.
Inhibidor
Efector -

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 MODIFICACIÓN ALOSTÉRICA

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MODIFICACIÓN ALOSTÉRICA

• 2 Modelos:
• Concertado
• Secuencial
• Ambos se combinan para explicar este
mecanismo.
• Ninguno de los modelos explica totalmente la
actividad de las enzimas alostéricas.

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MODELO ALOSTÉRICO CONCERTADO

• Asume que la enzima tiene 2 estados o formas:

• T (tensa) y R (relajada).
• Los Sustratos y Activadores se unen fácilmente a la forma R.
• Los Inhibidores se unen más fácilmente a la forma T.

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MODELO ALOSTÉRICO CONCERTADO

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MODELO ALOSTÉRICO SECUENCIAL

• En este modelo el 1er. Ligando se asume que induce

cambios conformacionales que son transmitidos
secuencialmente a los otros monómeros en la
enzima favoreciendo así la activación o la
inhibición.

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 MODELOS ALOSTÉRICOS

Concertado

5/20/2008
Secuencial
Dra. Genoveva Martín Sánchez M.Sc. 2007-2008 35
 MODIFICACIÓN ALOSTÉRICA

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PROENZIMAS O ZIMÓGENOS
 PROENZIMAS O ZIMÓGENOS

• Son proteínas simples inactivas que se convierten en

activas por un proceso de hidrólisis.

• Enzimas en su mayoría y son sintetizadas como

precursores inactivos.

• Se activan en el momento y lugar en que deben actuar.

• Suelen ser muy agresivas.

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 Presencia de proteínas

ESTÓMAGO Gastrina

HCl

Pepsinógeno

Pepsina

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 Contenidos ácidos Síntesis de Secretina

Tripsinógeno
Quimotripsinógeno
Procarboxipeptidasa Bicarbonato

Aminoácidos
Enzimas
Colecistocinina
pancreáticas

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5/20/2008 41
MPARTIMENTALIZACIÓN
• La existencia de diferentes compartimentos en las células
eucariotas le permite controlar los procesos metabólicos
permitiendo o no el paso de los metabolitos de un espacio al otro.
Permite la separación de procesos opuestos.

• Ej.: La degradación de AG ocurre en la mitocondria mientras que

la síntesis de novo de AG ocurre en el citosol pero su principal
materia prima es el Acetil-CoA que se forma en la mitocondria.

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CONTROL GENÉTICO

 Inducción  Aumenta la [E] al estimular

su síntesis.
• Ej.: Insulina  Glucoquinasa
(Glucosa  Glucosa 6 P)
 Represión  Disminuye la [E] al inhibir
su síntesis.
• Ej.: Insulina  Fructosa 1,6 di
Fosfatasa
(Fructosa 1,6diP  fructosa 6 P + Pi)

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 Enzimas en el diagnóstico clínico
Los principios de la enzimología encuentran aplicación práctica en el laboratorio
clínico en la medición de los niveles enzimáticos y de las concentraciones de
sustrato en plasma y tejidos de los individuos enfermos.

El fundamento racional de la medición de actividades enzimáticas en plasma se

basa en la premisa de que los cambios en los niveles de enzimas plasmáticas
reflejan cambios que han tenido lugar en un tejido u órgano específico
Las enzimas plasmáticas son de dos tipos:

Enzimas Plasmáticas funcionales: están presente en

más alta concentración, son específicas del plasma, y
tienen un papel funcional en éste.

Enzimas Plasmáticas no funcionales: se encuentra

presente normalmente a niveles muy bajos en el plasma
y no llevan a cabo función alguna conocida en la sangre.
 Enzimas funcionales
Se incluyen en este grupo las enzimas asociadas con la
coagulación de la sangre (por ej. trombina), disolución del
coágulo de fibrina (plasmina) y modificación de quilomicrones
(lipoproteína lipasa).

Generalmente son sintetizadas en el hígado, pero también se

encuentran en la sangre en concentraciones equivalentes o
mayores que en los tejidos
 Enzimas No funcionales

• Las enzimas específicas no plasmáticas son más importantes en las

enfermedades de tejidos y órganos. Normalmente, los niveles
plasmáticos son muy bajos o nulos.

• Una agresión en forma de cualquier proceso patológico puede provocar

cambios en la permeabilidad de la membrana celular o incrementar la
muerte celular, dando lugar a la liberación de enzimas intracelulares en
el plasma.
Los valores bajos de enzimas no funcionales que se encuentran por lo general en
el plasma, aparentemente tienen su origen en la destrucción rutinaria normal de
los eritrocitos, leucocitos y otras células.
Con la muerte acelerada de éstas células, las enzimas solubles entran en la
circulación.
Aunque los valores elevados de enzimas plasmáticas se interpretan
generalmente como prueba de necrosis celular, el ejercicio intenso también da
por resultado la liberación de cantidades importantes de enzimas musculares.
 Creatin Fosfo Quinasa o CPK
Cataliza la formación de creatina en fosfo creatina, que funciona como un almacén de energía

• La CPK se encuentra en el músculo, cerebro y corazón

Aparece en forma de dímero con dos tipos de subunidades,

la M (tipo músculo) y la B (tipo cerebro).

• En el cerebro, subunidades BB (CPK1)

• En el corazón, la subunidad MB (CPK 2)

• En el músculo esquelético, subunidades MM (CPK 3)

• Su actividad aumenta en miopatías congénitas, infarto de miocardio, enfermedad cerebro vascular,

hipotiroidismo, grandes quemaduras, etc. y disminuye en la artritis reumatoide y otros procesos reumáticos
inflamatorios.
Lactato Deshidrogenasa (LDH)

• Cataliza la conversión de piruvato a lactato en condiciones

anaerobias

• la deshidrogenasa en exceso pasa a la sangre en toda destrucción

hística, traumática, infecciosa o neoplásica, especialmente del
miocardio, pero también de otros músculos estriados, del
hígado, de riñón, de cerebro y de tumores malignos.
Transaminasas (TGO y TGP)
• Aumentos patológicos de las transaminasas séricas ocurren en infarto de miocardio

• hepatitis aguda, (la GPT suele elevarse muy por encima de la GOT) esto estaría en
relación con una lesión superficial o difusa de los hepatocitos.

• Las transaminasas se elevan no solo en las hepatitis víricas (A, B, C o D) sino

también en las tóxicas o medicamentosas, y en las isquemias y/o estasis hepática.

• La cirrosis hepática da también ligeros aumentos.

• En las pancreatitis agudas

• Embolia o trombosis con infarto y necrosis hística de cualquier localización,

Fosfatasa Alcalina (ALP)

• Se encuentra ampliamente distribuida en los tejidos humanos. Su fuente de

importancia clínica incluye hígado, hueso, placenta, intestino, bazo y riñón.

• Posee varias isoenzimas no bien definidas:

• Ósea

• Placentaria

• Hígado
El aumento de la actividad de la fosfatasa alcalina en
suero so observa en diversas afecciones, sin embargo
su significado clínico se relaciona principalmente con
la detección de enfermedades óseas y hepáticas
 Fosfatasa acida (ACP)

• Es un grupo heterogéneo inespecífico de fosfatasas que pertenece a la

clase de las enzimas hidrolasas. Cataliza las mismas reacciones que la
fosfatasa alcalina, pero funciona en medio ácido. (4.5-7.0)
El diagnostico diferencial de la elevación de ACP se
utiliza principalmente para enfermedades malignas
de la próstata u otras enfermedades malignas que
afectan los tejidos óseos.
La actividad de fosfatasa acida se eleva con mayor
frecuencia en casos de carcinoma de próstata, en
particular cuando es maligno y se ha diseminado
más allá de la capsula de esta glándula.
 Amilasa

• Es una metaloenzima que requiere calcio y pertenece a

la clase de hidrolasas.

• La actividad de amilasa se eleva en varias

enfermedades, no obstante, se relaciona
principalmente con el diagnostico de laboratorio de
pancreatitis aguda.
Lipasa

• Es una enzima que pertenece a las hidrolasas, hidroliza

los esteres de glicerol de triglicéridos de ácidos grasos de
cadena larga.

• Su utilidad clínica se relaciona casi exclusivamente con

el diagnostico de laboratorio de pancreatitis aguda
 Aldolasa (ALS)
Pertenece a las liasas. Su principal función consiste en
romper el enlace 1,6 de la fructosa di fosfato para dar
lugar a dos compuestos: Hidroxiacetona P y
gliceraldehido 3 P.

• Su utilidad clínica se relaciona principalmente con

afecciones del músculo esquelético.

• Su elevación constituye un marcador adecuado para

afecciones hepáticas benignas y malignas.
Próximos temas:

• Nucleosidos y nucleótidos.

• Ácidos nucleicos.

• Replicación.