Cinética

enzimática
DR. Q.F. RODRIGUEZ LICHTENHELDT JOSE EDWIN
 OBJETIVO

 Comprender el concepto y la importancia de la

Cinética Enzimática.

 Comprender el modelo de Michaelis-Menten.

 PREGUNTAS

 ¿Qué es la Cinética Enzimática? Importancia.

 Modelo de Michaelis -Menten

 ¿Cómo son Inhibidores?

 ¿Cómo se clasifican los Inhibidores?

 PREGUNTAS

 ¿Qué es la Cinética Enzimática? Importancia.

 Modelo de Michaelis -Menten

 ¿Cómo son Inhibidores?

 ¿Cómo se clasifican los Inhibidores?

 Cinética Enzimática
Las Enzimas son proteínas capaces de acelerar reacciones químicas con un menor gasto de
Energía.

Las Enzimas ocupan un lugar primordial en todos los procesos bioquímicos de las células. Sin
enzimas las reacciones químicas serían muy lentas, o nunca podrían tener lugar, y por lo
tanto la vida tal como la conocemos no sería posible.

La Cinética Enzimática estudia la Velocidad de las reacciones químicas y los factores

que afectan la actividad enzimática.

La Cinética Enzimática es la medida de la formación de producto o la degradación de

sustrato por unidad de tiempo.
E S ES E P
Enzima Sustrato Producto
 Cinética Enzimática
Las enzimas aceleran las reacciones disminuyendo la Energía de Activación y el Estado de
Transición.
Sin Enzima

S P

Con Enzima

Velocidad de Energía libre de

Reacción Activación
Estado de
Transición
k1 k2
E S ES P E
k-1
 Cinética Enzimática
La Enzima y el Sustrato forman un Complejo Transitorio.
Las reacciones enzimáticas se basan en medidas de la Velocidad de reacción
que es directamente proporcional a la Concentración del reactivo. Sin Enzima

A B S P
La velocidad de la reacción de : V = k[A]
Con Enzima
A medida que la reacción se procesa, A se transforma en B. k1 k3
E S ES P E
La Reacción catalizada enzimáticamente se procesa en dos k2
etapas:
V1 = k1[E][S]
1.- La enzima se une reversiblemente al sustrato, formando un V3 = k3[ES]
Complejo ES.
Keq = [ES]
2.- El Producto es liberado y la Enzima vuelve a estar en forma libre. [E][S]
 Cinética Enzimática
En las reacciones enzimáticas la concentración de la Enzima es mucho E < S
menor que la del Sustrato.

Si la concentración de Sustrato fuera muy grande, la concentración de la Enzima seria

prácticamente nula, encontrándose toda la enzima disponible sobre la forma de ES:
k1
E S ES
k2
0% 100%

Luego de esto, nuevos aumentos de concentración de Sustrato no tendrán efecto

perceptible sobre la Velocidad de reacción, que alcanza su valor máximo a la Velocidad
Máxima (Vmax) de reacción.
 Cinética Enzimática

Cuando la concentración de la Enzima

permanece constante, la reacción alcanza un
valor máximo en su velocidad inicial cuando
todos los centros específicos del Sustrato
están saturados por la Enzima.

La concentración de Producto va aumentando de

forma lineal hasta que el Sustrato va
desapareciendo en el transcurso del tiempo, y la
reacción alcanza el equilibrio.
50%[E], 50% [ES]
 Cinética Enzimática
En la curva obtenida se pueden identificar 2 regiones:
1.-Una región en que la Velocidad aumenta linearmente
con el aumento de Sustrato, indica que durante la
reacción había Enzimas libres.
2.-Una región en que la Velocidad permanece constante,
igual a la Vmax, a pesar del aumento de [S], indica que
todas las Enzimas estuvieron ligadas al Sustrato.
Para conocer la afinidad que tiene el Sustrato con la
Enzimas se debe hallar el Km.
En estas condiciones:
50%[E], 50% [ES] Vo= Vmáx = Km= [ES]
2
 PREGUNTAS

 ¿Qué es la Cinética Enzimática? Importancia.

 Modelo de Michaelis -Menten

 ¿Cómo son Inhibidores?

 ¿Cómo se clasifican los inhibidores?

 Cinética de Michaelis-Menten
Michaelis y Menten de Hill propusieron una teoría para explicar la Velocidad inicial de una
reacción catalizada por una Enzima, en función a la [ ] de Sustrato.

La hipérbola característica de la curva de

saturación de la Enzima por el Sustrato. Se La [ ] de Sustrato que produce la mitad
expresa matemáticamente por la ecuación: de la Velocidad máxima, llamada valor Km
o Constante de Michaelis, se puede
------------------------------------------------------- Vo= Vmax [S] determinar experimentalmente graficando
Km + [S]
Vo (velocidad inicial) como función de [S].
Vo 1/2 Vmax
La Velocidad máxima (Vmax) se alcanza
cuando una Enzima está saturada con el

KM Sustrato (alta [S]).

Sustrato (S)
 Cinética de Michaelis-Menten
Ecuación de Michaelis -Menten
Vo= Vmax [S]

Km + [S]
Cuando la [ ] de Sustrato es tal que la Velocidad de Reacción es la mitad de la Velocidad máxima,
tendremos:
Reemplazamos: La constante de Michaelis-Menten (Km) es
Vo = Vmax Vmax = Vmax [S] numéricamente igual a la [ ] de Sustrato
2
2 Km + [S] que determina la mitad de la Velocidad
Km + [S] = 2 [S]
máxima.
Km = [S] Km Afinidad

Km es el grado de afinidad de la Enzima por el Sustrato.

 Cinética de Michaelis-Menten
La Velocidad de Reacción sólo es directamente proporcional a bajas concentraciones de Sustrato.
[S] < Km
Vo = Vmax [S]
Km + [S]
Km + [S] = Km
K = Vmax Vo = Vmax [S]
K = Constante
Km
Km Vo = K [S]

La Velocidad de Reacción es constant y máxima, independiente de la [ ] del Sustrato.

[S] > Km Vo = Vmax [S]
Km + [S]

Km + [S] = [S] Vo = Vmax [S]

[S]
Vo = Vmax
 Representación de Lineweaver-Burk
La forma lineal de la ecuación de Michaelis-Menten se conoce 1/vo versus 1/[S]
como gráfica de los dobles recíprocos o de Linneweaver-Burk
y se utiliza para el cálculo de los parámetros cinéticos Km y
Vmáx.
La ecuación de la recta es: y=a*x+b
Donde:
y = 1 y x = 1
Vo [S]

El valor de Km puede ser hallado a partir de la gráfica de

Lineweaver-Burk o del doble reciproco usando la pendiente y la
intersección negativa de x.
 PREGUNTAS

 ¿Qué es la Cinética Enzimática? Importancia.

 Modelo de Michaelis -Menten

 ¿Cómo son Inhibidores?

 ¿Cómo se clasifican los inhibidores?

 ¿Qué son Inhibidores ?

Son sustancias que impiden que la enzima desarrolle su

actividad catalítica, ralentizando o paralizando la
reacción enzimática.

Los Inhibidores se pueden diferenciar dependiendo la

acción que ejercen en Isostéricos y Alostéricos.

Isostéricos: Ejercen su acción sobre el Centro activo.

Alostéricos: Ejercen su acción sobre otra parte de la

molécula causando un cambio conformacional con
repercusión negativa en la actividad enzimática
 PREGUNTAS

 ¿Qué es la Cinética Enzimática? Importancia.

 Modelo de Michaelis -Menten

 ¿Cómo son Inhibidores?

 ¿Cómo se clasifican los inhibidores?

 Clasificación de los Inhibidores

Los mecanismos de Inhibición pueden agrupar a los Inhibidores en dos grandes categorías:

Irreversibles
Competitiva
Inhibidores

Reversibles No Competitiva

Acompetitiva
 Inhibición Irreversible

El Inhibidor Irreversible reaccionan con un grupo químico de la enzima , modificándola

covalentemente.
El efecto de los Inhibidores Irreversibles depende del tiempo de actuación del inhibidor.
Por lo general, los Inhibidores Irreversibles son altamente tóxicos.

E + I E´

Se impide la
Reacción
 Inhibición Competitiva
El Inhibidor compite con el Sustrato para fijarse en el centro activo de la Enzima, impidiendo
la fijación del Sustrato.

E + S ES EP E +P
+
I
Ki

EI No Hay
+ Reacción

S
 Inhibición No Competitiva
El Inhibidor se puede unir al Complejo Enzima-Sustrato o a la enzima libre.

E + S ES EP E +P
+ +
I I
Ki’
Ki

EI ESI

No Hay
Reacción
 Inhibición Acompetitiva
El Inhibidor se fija directamente al Complejo Enzima-Sustrato , pero no a la enzima libre.

ES E +P
E +S
+
I

Ki’

ESI

No Hay
Reacción
 Regulación Enzimática
Un organismo debe ser capaz de regular la actividad catalítica de sus componentes
enzimáticos de manera que pueda coordinar los diferentes procesos metabólicos.

Mecanismos de la regulación enzimática

Disponibilidad Modificación Modulación

Inducción o
del sustrato covalente Alostérica
Represión de la
síntesis de la enzima