FACTORES DE PATOGENICIDAD

BACTERIANA
 CLASIFICACIÓN DE LOS FACTORES DE
PATOGENICIDAD

• Factores que promueven la colonización e invasión al hospedero

• Factores que causan daño al hospedero

 FACTORES QUE PROMUEVEN LA COLONIZACIÓN E INVASIÓN AL
HOSPEDERO

• Fibrias
• Apéndices → subunidades de proteinas
• Membrana externa → Bacterias gramnegativas
• Pared celular → Bacterias grampositiva
• Rígidas o flexibles
• Soporte de adhesinas
• Adhesinas
• Lectinas
• Adherencia
• Adhesinas fimbriales, adhesinas afimbriales
• Unión e internalización en celular M
• Absorcion de partículas de luz gastrointestinal – región vasolateral rica en
linfocitos → células inmunes
• Bajo contenido lisozima
• Endociticas
• Puerta de entrada a tejidos profundos
• Invasion bacteriana
• M.O. penetra al citoplasma de células no fagociticas (endoteliales o epiteliales)
• Se replica
• Se propaga
• Destruye células
• Patógeno intracelular
• Movilidad bacteriana
• Desplazamiento de bacteria por flagelo
• Flagelos:
• Apéndices largos, fijos de un extremo y libres por el otro
• Flagelina
• Quimiotaxis
• Movimiento de célula hacia fuente de nutrimientos
• Proteasa contra sIgA
• Viscosidad mucina → moléculas sIgA → antígenos bacterianos
• Estrategia bacteriana
• evita ser atrapada por mucosa
• producción de enzima extracelular
• rompe IgA región bisagra
• Separa la parte de sIgA que une a la bacteria de la parte que interactua con mucina
• Produccion de proteasa sIga → bacterias colonizan con mayor facilidad
mucina
• Mecanismos de captación de Fierro
• Factor de crecimiento
• Sideforos
• Catecoles
• Hidroxomatos
• Catecoles e hidroxomatos
• Complejo sideforo fierro
• Capsula
• Red de polímeros que cubre bacteria
• Protege bacteria de respuesta inflamatoria
• Polisacarido → capa homogenea y uniforme = Capsula
• Polisacarido → red de trabéculas = Glucocalix
• Antigeno K (capsular)
• Variación en los antígenos de superficie
• Evadir acción de anticuerpos
• Cambia tipo de fimbria
• Cambia proteínas de superficie
• Algunas Bacterias encapsuladas se parecen a carbohidratos obicuos en tejidos
del hospedero

Factor Comentario
Adhesinas fimbriales Se encuentran en bacterias gramnegativas y grampositivas y sirve
para la adherencia
Adhesinas no fimbriales En bacterias gramnegativas y grampositivass, su función es la
adherencia
Internalización en células M Invasividad
Movilidad y quimiotaxis Colonizacion y permanencia en el hospedero
IgA proteasa Disminuye la viscosidad del moco
Sideforos Ayuda a sobrevivir a la bacteria
Cápsula Antifagocítica y factor de diseminación
Variación antigénica Evasion de la respuesta inmune
FACTORES QUE CAUSAN DAÑO AL HOSPEDERO

• Exotoxinas
• Proteinas de alto peso molecular
• Elaborada por ciertas bacteria que se excretan al medio donde se desarrolla la bacteria
• Dañan gran variedad de tipos celulares → citotoxina
• Dañan tipo especifico → se designan de acuerdo al tipo de célula afectada
• También de acuerdo a las especies que las produce o enfermedad asociadas
• Toxina colérica → Vibrio Cholerae → cólera
• Toxina shiga → shigella → disentería bacteriana
• Toxina diftérica → Corynebacterium diptheriae → difteria
• Toxina tetánica → Clostridum tetani →tetanos
 • Se divide en tres grupos de acuerdo a su estructura y función
• Toxinas A-B
• Toxina colérica, tetánica, diftérica y shiga
• Sin porciones separables A-B
• Desorganización de la membrana de células hospederas
• Superantigeno
• Estimula células B para liberar citosinas
• Endotoxinas o lipopolisacaridos
• Membrana externa → bacterias gramnegativas
• Porción lipídica A
• Porción toxica, cuando bacteria es lisa
• Embebido en membrana externa con el core
• Antígeno O
• Hacia afuera de la sup. de bacteria
• Lisis
• Otros componentes tóxicos de la pared celular
• Bacterias Gram (+) → sin endotoxinas → su presencia en tejido provoca una
respuesta inflamatoria idéntica a la desencadenada por LPS → en torrente
sanguíneo causan mismos síntomas de choque séptico como bacterias Gram (-)
• Responsables:
• Peptidoglucano
• Acido teicico
• Lipoteicoicos
• Enzimas hidrolíticas
• Algunas proveen a bacteria fuentes de carbono y energía, rompiendo polímeros
del hospedero en azúcares y aa de bajo peso molecular
• No son clasificadas como toxinas
• Hialuronidasa →degrada componentes de la matriz extracelular, lesiona la estructura de
tejidos del hospedero
• Dnasa → reduce viscosidad de los residuos de cel muertas (pus) → ayuda propagación
de la bac a un área mas extensa de daño.
• Principales enzimas metabólicas metabólicas relacionadas con la
virulencia de bacterias patógenas:
• Colagenasa
• Cuagulasa
• Hialuronidasa Factor Comentario
• Exotoxinas
Leucocidinas
• Activa la adenilato ciclasa y aumenta el cAMP intracelular
Hemolisinas Colérica
• Lecitinasa Tetánica Inhibe los neurotransmisores en la placa neuromuscular
• Fibrinolisina Diftérica ADP-ribosila el factor de elongación, causan muerte celular

Shiga Inactiva los ribosomas produciendo muerte celular

Endotoxinas Pirogenicas e inducen la producción de citosinas

proinflamatorias
Peptidoglucano Forman la pared de bacteria Gram(+) y Gram(-)

Acido teicoico Solo en bacterias Gram(+) y funciona como adhesina

• Sistemas de secreciones de las bacterias
• Diferentes bacterias Gram (-) patógenas han desarrollado complejas maquinarias para
transferir proteínas codificadas en su cromosoma a células eucariontes → Sistemas de
secreción de proteínas
• Sistema de secreción tipo II (TTSS II)
• Sistema de secreción tipo III (TTSS III)
• Sistema de secreción tipo IV (TTSS IV)
• Sistema de secreción tipo V (TTSS V)
• Sistema de secreción tipo VI (T6SS)

• Los sistemas de secreción se expresan en especies bacterianas como

→ Salmonella entérica, Shigella, Chlamydia, Yersinia y Escherichia Coli.

• Proteína efectora→ Proteínas bacterianas modulan varias funciones celulares

AGRUPACIONES BACTERIANAS
• Las bacterias normalmente se multiplican por fisión transversal binaria. En
muchas especies, las células hijas resultantes de un evento de división por fisión
tienden a dispersarse por separado al medio, debido a la actuación de fuerzas físicas
Esto hace que al observar al microscopio una población de estas bacterias veamos
mayoritariamente células aisladas.
• Si la tendencia a permanecer unidas es baja, tendremos
agrupaciones de dos células, que dependiendo que sean de
morfología esférica o alargada, se denominan como:

• Diplococos
• diplobacilos
• Si la tendencia a permanecer unidas es mayor (por más tiempo), nos encontramos con varias
posibilidades, dependiendo del número de planos de división y de la relación entre ellos:

• Si los tabiques son paralelos entre sí (o sea, existe un solo plano de división):
• estreptococos (cadenetas arrosariadas de cocos)
• estreptobacilos (cadenetas de bacilos).
FORMA
 COCOS

forma esférica u ovoide

Micrococus luteus
Los cocos se dividen en:
•Diplococos: Son pares.
•Estreptococos: En cadena.
•Estafilococos: En racimo.
•Tetradas: En número de 4.
Bacilos
forma cilíndrica
• Lactobacillus

Los bacilos se dividen en:

• Fusiformes: bacilos que tienen extremos afinados
• Estreptobacilos
• Cocobacilos: Los bacilos de corto tamaño que pueden confundirse con un coco
• Bacterias Filamentosas
Que forman células largas y delgadas o cadenas de células

• Bacterias con yemas y apendices

Aquellas que presentan protuberancias celulares en forma de largos tubos o tallos

• Espiroquetas
Son bacterias con forma de sacacorchos

• Espirilos
Son bacilos que se curvan en forma de espiral
 MORFOLOGÍA COLONIAL BACTERIANA
*GENERALIDADES
-M E D I O S Ó L I D O
-- U F C ( E S TA F I L O C O C O S O S T R E P TO C O C O S )
-- C O L O R
-* D E S A R R O L L O
-- A G A R
-- C A L D O
 MORFORLOGIA COLONIAL
BACTERIANA
*CARACTERÍSTICAS
 - E L E VA C I O N E S -TRANSMISIÓN DE LUZ
 -BORDES -REFLEXIÓN DE LUZ
 -SUPERFICIES -ASPECTO
 -FORMA -PIGMENTO
 TA M A Ñ O -CONSISTENCIA
 TINCIÓN
-¿QUE ES? TEÑIR (TINTURA),
DAR COLOR A ALGO.

-¿DONDE SE REALIZA? EN LABORATORIOS,

APLICADO EN MUESTRAS CLINICAS.

-¿PARA QUE? PARA OPTIMIZAR LA VISION

DE LO QUE DESEA VER A TRAVES DE UN
MICROSCOPIO Y SEA MAS SIMPLE DETECTARLO
Y ANALIZARLO.
 TIPOS

 SIMPLE
 GRAM
 ACIDO RESISTENTE
 CORPUSCULOS METACROMATICOS
 ESPORAS
 CAPSULAS
 FLAGELOS
 TINCION DE GRAM

CHRISTIAN GRAM

MICROBIOLOGO Y MEDICO
BACTERIOLOGO

DINAMARCA

COPENHAGUE

1883 – 1886*

METODO PARA DIVIDAR A

LAS BACTERIAS EN 2 GRUPOS
GRAM POSITIVAS +
GRAM NEGATIVAS -
 ¿QUE OCUPAMOS?

 Muestra de tejido
 Portaobjetos de vidrio
 Pipeta
 Una fuente de llamas, un calentador de portaobjetos o metanol
 Agua
 Cristal violeta
 Yodo
 Agente decolorante, como alcohol o acetona
 Safranina
¿ COMO SE HACE?
DIFERENCIAS
 ALGUNAS

GRAM + GRAM –
-STAPHYLOCOCCUS AUREUS -NEISSERIA MENINGITIDIS
-STAPHYLOCOCCUS PYOGENES -NEISSERIA GONORRHOEAE
-STREPTOCOCCUS AGALACTIAE -ESCHERICHIA COLI
-STREPTOCOCCUS FAECALIS -SALMONELLA TYPHI
-STREPTOCCOCUS PNEUMONIAE -HAEMOPHILUS INFLUENZAE
(NEUMOCOCO) -BRUCELLA
-GRUPO VIRIDIANS
-SANGUIS-MUTANS
-CONSTRIDIUM TETANI
Tinción de capsula

• Capsula bacteriana
• Glucocalix
 COMPOSICION

POLISACARIDOS Y POLIPEPTIDOS

- CAPSULAS POLISACARIDAS:
- HETEROPOLISACARIDOS: AZUCARES, AMINOAZUCARES, ACIDOS
URONICOS, POLIOLES

- HOMOPOLISACARIDOS: LEVANOS, DEXTRANOS, CELULOSA,

ALGINATOS.

- CAPSULAS POLIPEPTIDAS: (BACILOS) GLUTAMIL-POLIPEPTIDOS

FUNCIONES

- PROTEGER LA DESECACION
- PROTEGE CONTRA ANTICUERPOS Y DE LA FAGOCITOSIS (GLOBULOS
BLANCOS)
- AL PROTEGER LA BACTERIA, AUMENTA LA VIRULENCIA.
- AYUDA EN LA ADHESION DE CELULAS HERMANAS (COLONIZAR)
 TINCIONES

TINCION NEGATIVA: APLICADA PARA PONER EN EVIDENCIA

LA CAPSULA UTILIZANDO TINTA CHINA PARA TEÑIR EL FONDO
Y AZUL DE METILENO PARA TEÑIR EL SOMA BACTERIANO

TINCION DE HISS: UTILIZA UNA REACCION DE EXPANSION

DE LA CAPSULA CON ALBUMIA Y EL CONTRASTE CON EL
FONDO DE SULFATO DE COBRE, TIÑENDO EL SOMA CON
VIOLETA CRISTAL.
TINCION NEGATIVA:

1) LAVAR Y FLAMEAR EL PORTAOBJETOS

2) INCINERAR EL ASA BACTERIOLOGICA

3) SE COLOCA UNA GOTA DE TINTA CHINA EN EL PORTAOBJETOS

4) SE COLOCA LA MUESTRA EN EL PORTAOBJETOS Y SE DISUELVE

CON LA GOTA DE TINTA CHINA, DISPERSANDOLA OBTENIENDO
UNA CAPA DELGADA

5) DEJAR SECAR

6) SE CUBRE CON AZUL DE METILENO POR 60 SEG.

7) SE ENJUAGA POR UN SEGUNDO, SE DEJA ESCURRIR, SE DEJA SECAR

Y SE OBSERVA EN EL MICROSCOPIO CON ACEITE DE INMERSION.
TINCION HISS:

1) EN UN PORTAOBJETOS LIMPIO, SECO Y FLAMEADO SE COLOCA UNA

GOTA DE SUERO O DE ALBUMIA.

2) SE COLOCA LA MUESTRA, SE DISUELVE Y SE DISPERSA

3) SE DEJA SECAR AL AIRE LIBRE

4) SE FIJA CON CALOR

5) SE CUBRE EL FROTIS CON VIOLETA CRISTAL Y SE FLAMEA APROX.

2 MIN.

6) SE LAVA LA PLACA CON SULFATO DE COBRE

7) SE DEJA SECAR AL AIRE LIBRE Y SE OBSERVA EN EL MICROSCOPIO

8) CON ACEITE DE INMERSION
 PRUEBAS BIOQUÍMICAS

• Test
• Identificación
• características metabólicas
 PRUEBA BIOQUÍMICA DE INDOL
- D E G R A D A C I Ó N A A T R I P O FA N O
- B A C T E R I A S T R I P O FA N A S A : H I D R O L I Z A Y D E S A M I N A
-IDENTIFICACIÓN DE M.O.
-A L D E H I D O P - D I M E TA M I L O M I N A B E N Z A L D E H I D O
-- K O VA C S
-- M E D I O D E C U LT I V O
 PRUEBA BIOQUÍMICA INDOL
PROCEDIMIENTO:
• - Inocula caldo tripofano
• - Temperatura y tiempo
• - Al terminar añadir reactivo
• -Cantidad
INTERPRETACIÓN:
• -Color
• -Presencia de indol
• -Resultado
• Escherichia colli: Neg. Y Klebsiella Pneu: Pos.
• Ureasa
• Determina capacidad de un organismo de desdoblar la urea formando dos moléculas de amoniaco
por acción de la enzima ureasa.
 PRUEBA LIA
LISINA, HIERRO, AGAR

MEDIO DE CULTIVO UTILIZADO PARA DIFERENCIAR ORGANISMOS,

BASADO EN LA DESCARBOXILACION / DESAMINACION DE LA LISINA
Y EN LA PRODUCCION DE ACIDO SULFHIDRICO. ESPECIALMENTE EN LA
IDENTIFICACION DE SALMONELLA Y PROTEUS.
 Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones

Peptona de gelatina 5.0

Extracto de levadura 3.0

Glucosa 1.0
Lisina 10.0
Citrato de hierro y amonio 0.5 Suspender 35 g del medio deshidratado en un litro de agua
destilada. Dejar embeber unos 15 minutos. Calentar
cuidadosamente, agitando con frecuencia y hervir durante un
Tiosulfato de sodio 0.04
minuto hasta la disolución completa. Distribuir y esterilizar a
121°C durante 15 minutos. Enfriar en pico de flauta dejando un
Púrpura de bromocresol 0.02 fondo vertical apto para la punción.

Agar 15.0

pH final: 6.7 ± 0.2

INCUBACION: 24 HRS A 35*-37*C

1- Decarboxilación de la lisina:

-Prueba Positiva: Pico violeta/fondo

violeta.
-Prueba Negativa: Pico violeta/fondo
amarillo.

2-Desaminación de la lisina:

Pico rojizo/fondo amarillo.

3-Producción de ácido sulfhídrico:

-Prueba positiva: negro

 Color en el pico de flauta
Color en la base del Ennegrecimiento del
Microorganismos
tubo medio

Proteus mirabilis ATCC 43071 Rojo Amarillo Negativo

Salmonella typhimurium ATCC 14028 Púrpura Púrpura Positivo

Salmonella enteritidis ATCC 13076 Púrpura Púrpura Positivo

Providencia spp. Rojo Amarillo Negativo

Citrobacter freundii Púrpura Amarillo Positivo
Morganella spp.* Rojo Amarillo Negativo
Edwarsiella spp. Púrpura Púrpura Positivo

Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Púrpura Púrpura Negativo

Escherichia coli ATCC 25922 Púrpura Púrpura Negativo

 PRUEBA BIOQUÍMICA MIO
(MOVILIDAD, INDOL Y ORNITINA)
* M O V: P R E S E N C I A D E T U R B I D E Z
*FORMACIÓN DE INDOL
*DESDOBLAR
*DESCARBOXILACIÓN DE ORNITINA
*COLOR
*FORMA DE INACULACIÓN
 CATALASA
• Detectar la presencia de la enzima catalasa
catalasa
2H2O2 -------> 2 H2O + O2
• Catalasa positivo: • Catalasa negativo:
• Staphylococcus • Streptococcus
• Micrococcus • Enterococcus
• Plancoccus • aerococcus
• Stomacoccus • planococcus
 COAGULASA
• Producida por staphylococcus (S.aureus)
• F en F  Coagulo
• Virulencia y patogenicidad
• Coagulasa placa—>endocoágulasa estafilocoagulasa
• Coagulasa en tubo—> exocoágulasa proteina de staphylococo
 VP
• detección de acetoínaglucosa
• Escherichia coli es VP –
• E. aerogenes es VP +
• KIA / TSI
TIPO DE ENDOBACTERIAS
• AC. SH2 Y GAS
• L Y G  HC

𝐴 𝑅 𝑅
NEGRO
𝐴 𝐴 𝑅