UNIVERSIDAD DE ORIENTE
ESC. Ccs. DE LA SALUD
ASIGNATURA: HEMATOLOGÍA 2
CÓDIGO: 200-4483
FIBRINÓLISIS
MSc. CARMEN CUBA G.
Definición
Se activa en respuesta al inicio de la cascada de la
coagulación.
¿En qué consiste?
Plasminógeno Plasmina
La función más importante del sistema
fibrinolítico es degradar los depósitos de fibrina…
Plasminógeno y Plasmina
Glucoproteína – β globulinas (791 aa).
Peso molecular: 92 kD
Concentración plasmática: 100-200 mg/L
Vida media: 24-26 hrs.
Forma nativa: Glu-plasminógeno Forma activa: Lis-
plasminógeno
Fibrinógeno Fibrina, quedan libres unos residuos de lisina
Plasminógeno y Plasmina
En la región amino-terminal existen cinco estructuras denominadas
“kringles” -anillos- a cuyo nivel se sitúan los lugares de fijación de
lisina (LBS, “lysine binding sites”) que van a ser los lugares por los
que el plasminógeno va a unirse específicamente a la fibrina en el
momento de su polimerización.
También van a mediar la interacción del plasminógeno con la alfa2-
antiplasmina y, por tanto, van a jugar un papel fundamental en la
regulación de la fibrinólisis.
Plasminógeno + fibrina + activadores
Transforma a Plasmina
cadena pesada Porción
Kringles
aminoterminal
Plasmina
cadena ligera
Porción
carboxiterminal
La Plasmina englobada en el coagulo de fibrina inicia su
actividad proteolítica con la liberación de PDF
Activadores del Plasminógeno
INTRÍNSECOS
EXTRÍNSECOS
EXÓGENOS
ACTIVADORES INTRÍNSECOS
Denominado inicialmente activación por
contacto o XII-dependiente.
La activación del factor XII conduce a
generar calicreina
La calicreina va a ser un potente activador
de la fibrinólisis intrínseca.
ACTIVADORES EXTRÍNSECOS
La activación del plasminógeno se lleva a cabo bajo
dos esquemas:
La degradación de fibrina durante los procesos de
remoción de coágulos sanguíneos llevada a cabo por
el Activador Tisular del Plasminógeno (t-PA).
La degradación de la matriz extracelular en tejidos
sólidos llevada a cabo por u-PA.
ACTIVADORES EXTRÍNSECOS: t-PA
Tamaño: 59 kD.
Número de aminoácidos: 527.
Sitio de síntesis: Endotelio.
Concentración plasmática: 0,0005 – 0,01 mg/L.
Función: principal activador del PLG sobre la
superficie de fibrina.
ACTIVADORES EXTRÍNSECOS: t-PA
Elt-PA es una serinaproteasa catalíticamente inactiva hasta
que se expone a la fibrina.
Tienegran afinidad por la fibrina, lo cual se debe a que tiene
un dominio de unión específico a fibrina (uPA no lo tiene)...
t-PA forma un complejo con el plasminógeno en la
superficie de la fibrina.
Lo que favorece la formación local de plasmina y la
degradación de fibrina.
ACTIVADORES EXTRÍNSECOS: t-PA
Proteínas que aceleran la liberación de t-PA: factor Xa,
trombina, factor activador de plaquetas, bradicinina y
proteína C.
Elendotelio se estimula a liberar t-PA por: ejercicio,
choque hipotensor, estimuladores farmacológicos y estasis
venosa.
Lesión orgánica extensa, t-PA entra a la circulación,
activando al plasminógeno a plasmina y puede causar
fibrinogenólisis generalizada.
ACTIVADOR EXTRÍNSECO: u-PA
Sintetizada principalmente en pulmón y riñón como
proteína de una sola cadena (scu-PA), la cual tiene una
baja actividad enzimática.
Scu-PA forma complejo con receptor del activador del
plasminógeno tipo urocinasa.
Lo que permite que proteínas como plasmina, calicreina
y FXIIa cliven las cadenas de u-PA de una sola cadena
generando 2 moléculas de u-PA diferentes.
U-PA de alto PM y u-PA de bajo PM.
ACTIVADOR EXTRÍNSECO: u-PA
La conformación del complejo uPA – uPAR
permite que el plasminógeno se convierta en
plasmina.
El u-PAR modula la proteólisis pericelular…
La plasmina generada escinde componentes de
la matriz extracelular.
ACTIVADORES EXÓGENOS
Consiste en la activación por acción de
diversas sustancias exógenas administradas
con fines terapéuticos.
Estreptocinasa
Se emplea como agente terapéutico para
disolver coágulos
Fisiología de la lisis del coágulo
Cuando la fibrina se forma, se estimula a
las células endoteliales a secretar t-PA.
t-PA y PLG se unen a través de sus sitios
de unión a lisina.
Rápida transformación de PLG a
plasmina.
Fisiología…
Comienza la lisis del coágulo generando
Productos de Degradación de la fibrina (Dímero
D).
La fibrina parcialmente degradada potencia la
activación del PLG a plasmina por t-PA.
Una vez lisada la fibrina, la plasmina libre es
inhibida por α2-antiplasmina.
Digestión del Fibrinógeno y la Fibrina
La plasmina → metabolitos proteínicos (PDF
o FSP)
Son depurados por el hígado
Su identificación tiene valor en Dx de
trastornos hemostáticos
Los productos obtenidos de la digestión del
fibrinógeno se denominan X, Y, D, E
Digestión del Fibrinógeno
¿Cómo se produce?
Los fragmentos pueden ejercer efecto
anticoagulante:
Elfragmento X puede reaccionar con
trombina
Fragmentos Y y
D inhiben polimerización
de monómeros de fibrina
Fragmento E inhibe a la trombina
Digestión de la Fibrina por la Plasmina
La digestión de la fibrina por plasmina →
digestión lenta
Los monómeros de fibrina constituidos por
secuencias de aminoácidos denominadas D y E
(D-E-D).
La plasmina ataca la fibrina por lugares
específicos, libera dos dominio D, dando lugar al
producto denominado dímero D (YY/DXD,
DD/E, YD/DY)
Control Fisiológico de la Fibrinólisis
La plasmina y t-PA tienen inhibidores
específicos que regulan la fibrinólisis:
a) Evitan que la actividad proteolítica se
extienda a otros substratos
b) Modulan la actividad fibrinolítica de la
plasmina
Inhibidor del Activador del Plasminógeno
tipo 1 (PAI-1)
Se sintetiza en las células endoteliales
Principal inhibidor del t-PA y el u-PA
presentes en el plasma.
Regulador negativo de la fibrinólisis.
Este es inhibido a su vez por la proteína C
activada
Α2 - Antiplasmina
Glicoproteína sintetizada en el hígado
(hepatocitos).
Principal inhibidor fisiológico de la plasmina.
Modula la actividad fibrinolítica de plasmina.
Capaz de formar un complejo con el
plasminógeno
Inhibidor del Activador del Plasminógeno
tipo 2 (PAI-2)
Inhibe al t-PA y u-PA
Se sintetiza en la placenta, por lo que solo aparece en
el embarazo.
Se sugiere que participa en el mantenimiento del
desarrollo placentario o embrionario.
Papel fisiológico?
También influencia la diferenciación y proliferación
celular.
Macroglobulina α2
Proteína hepática, capaz de unirse a las
serinaproteasas
Actúa como inhibidor de productos activados de
la coagulación o fibrinólisis
Ocupa el segundo lugar en la neutralización de la
trombina y el primero en la inactivación de la
calicreína
Trastornos de la Fibrinólisis
Fibrinólisis Primaria o Sistémica:
Caracterizada por la exagerada generación de
plasmina en la circulación en respuesta a la
liberación de activador del plasminógeno.
Tienelugar cada vez que se activa de manera
patológica sin activación previa del sistema de
coagulación.
Laplasmina libre digiere, precipitando un
sangrado profuso
Cuadros relacionados con la Fibrinólisis
Sistémica
Administración farmacológica de activadores
fibrinolíticos
By pass cardiopulmonar
Golpe de calor
Hipotermia
Neoplasias malignas que secretan activador
tisular del plasminógeno
Trastornos de la Fibrinólisis
Fibrinólisis secundaria:
Se asocia con CID
¿Por qué suele llamarse secundaria?
Las hemorragias ocurren por el consumo de
los factores de coagulación y por la
presencia de los PDF...
Trastornos… Hipofibrinólisis:
Es generado cuando existe deficiencia de
plasminógeno y/o niveles elevados de PAI.
El estudio LETS ha demostrado que es un
riesgo independiente para trombosis venosa.
Niveles elevados de PAI-1 se asocian a un
aumento del riesgo de trombosis…
Pruebas que evalúan la Fibrinólisis
¿Cómo se mide la actividad fibrinolítica?
¿Cuándo se realizan?
¿Cómo se aclara el diagnóstico?
Condición de la muestra para análisis
Pruebas…
Lisis del coágulo de sangre total:
¿En qué consiste?
Resultados en condiciones normales
El tubo control
Lisis del coágulo de sangre total diluida:
Semejante a la anterior, se agrega una solución
amortiguada, para reducir la actividad del inhibidor
de la plasmina por dilución.
Después,se refrigera x 30’; para una reducción
mayor del inhibidor.
Luego se incubación a 37ºC
Resultado: ausencia de lisis en las dos primeras horas
Lisis de euglobulina:
¿Qué mide?
Las euglobulinas precipitan del plasma por
dilución y acidificación. ¿Qué contiene el
precipitado?
Resultado
Productos de degradación del
fibrinógeno (PDF) y monómeros de
fibrina:
Pruebas de uso común:
• aglutinación en látex
• paracoagulación con sulfato de
protamina
• gelación con etanol
PDF
Prueba de aglutinación en látex:
La muesta se extrae en tubos especiales que contienen IIa y
un inhibitorio de la tripsina.
Resultados
Semicuantificación:
- 1:5 = indica 10 μg/ml o más
- 1:20 = indica > 40 μg/ml
Interpretación: positiva en CID, fibrinólisis sistémica,
trombosis de venas profundas, embolia pulmonar y después
de tratamiento trombolítico
Monómeros de Fibrina
Prueba con sulfato de protamina:
La sal precipita los complejos monómeros de fibrina
y PDF
Resultado: aparición de tiras de fibrina en 24 hrs.
Prueba positiva sugiere desarrollo lento de IIa,
monómeros de fibrina y formación subsiguiente PDF;
conforme se degradan los monómeros.
Prueba de gelación con etanol:
Detecta monómeros de fibrina presentes en plasma →
etanol → gel o precipitado
Dímero D
Principio de la prueba:
El f. XIIIa cataliza los enlaces cruzados covalentes entre las
cadenas α y γ del polímero de fibrina.
A medida que la plasmina digiere el coágulo estabilizado, los
fragmentos D permanecen ligados en forma covalente a los
fragmentos D idénticos de las moléculas de fibrina vecinas.
Estosfragmentos D unidos se liberan de la fibrina como
dímeros D circulante
Laprueba se basa en un anticuerpo monoclonal que detecta
moléculas solubles del dímero D
Dímero D
Determinación semicuantitativa: emplea partículas de
látex poliestireno en solución fisiológica recubiertas con
anticuerpos monoclonales contra el Dímero D.
Utilidad clínica: positiva en CID, negativa en fibrinólisis
sistémica.
Determinación cuantitativa: los inmunoensayos
proporcionan sistemas de detección colorimétricos o
turbidimétricos sensibles para 10 μg/ml.
El nivel normal es de 0 – 0.5 μg/ml
