“AÑO DE LA UNIDAD, LA PAZ Y EL
DESARROLLO”
TEMA : TECNICAS INDIRECTAS
DOCENTE : EVER MANUEL JIMENEZ VIVANCO
CARRERA : LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA
ESTUDIANTES:
CRUZ INOQUIO KIARA
NECIOSUP DIOS EDUARDO
OLAYA INFANTE LESTHER
PALMA ARCAYA PAOLA
TINOCO CARRILLO LEISY
VASQUEZ GARCIA JOSSELYN
ZARATE URBINA YESSICA
Introducción
La citogenética es una rama de la genética que se enfoca en el estudio de
los cromosomas, sus estructuras y alteraciones, se basan en la detección y
análisis de marcadores moleculares, secuencias específicas de ADN o
cambios en la estructura cromosómica.
Cariotipo Espectral (SKY)
SKY permite la visualización de cromosomas individuales en células
metafásicas o interfásicas y la detección de aberraciones
cromosómicas sutiles, incluidos cromosomas marcadores, pequeñas
translocaciones, reordenamientos complejos y anormalidades
estructurales diminutas, con sensibilidad y especificidad mejoradas.
PRUEBAS FISH
Las técnicas de hibridación in situ fluorescencia (FISH),se basan en la
hibridación de una sonda de ADN marcada por una sustancia
fluorescente sobre su secuencia complementaria del genoma, bien en la
metafase cromosómica o en el nivel interfase.
La alta sensibilidad del FISH y la rapidez de los ensayos han hecho de
esta técnica una importante estrategia diagnostica con diferentes
aplicaciones.
Además puede aplicarse directamente sobre células extendidas de
sangre periférica o medula ósea.
HIBRIDACION IN SITU
MULTICOLOR
El cariotipo espectral (SKY-FISH)38 y el multi-FISH (M-FISH)30 son técnicas
de citogenética molecular desarrolladas recientemente, y de momento solo se
utilizan en el campo de investigación.
Consiste en marcar el ADN de cada cromosoma con uno o varios fluorocromos,
de manera que el espectro de emisión de cada cromosoma sea único y
diferenciable de los demás, esta técnica, por tanto, pinta a cada cromosoma de un
color.
Estas técnicas han supuesto una verdadera revolución en el análisis de los
cariotipos complejos y de los enfermos que presentan alteraciones que no pueden
se descifradas por métodos convencionales.
REACCION DE LA CADENA DE POLIMERAS
(PCR)
Una de las aplicaciones mas frecuentes empleadas de la PCR en
neoplasias es detectar translocaciones.
La caracterización molecular de las translocaciones cromosómicas
observadas en el cariotipo y asociadas a determinados tipos de tumor,
ha permitido la identificación de los genes responsables.
La posterior clonación y secuenciación de dichos oncogenes permiten
el estudio de las translocaciones a nivel molecular, mediante el
análisis de ADN o fundamentalmente ARN con la técnica de la RT-
PCR (PCR-reserva).
HIBRIDACIÓN GENOMICA COMPARADA
Es una técnica derivada del FISH se basa en la hibridación competitiva
de dos ADN (tumoral y control normal) marcados por distintos
fluorocromos , sobre cromosomas normales.
En resumen: se marca el ADN del tumor con fluorocromo verde y ADN
normal (control) con fluorocromo rojo, ambos ADN se mezcla en
cantidades equimolares y se realiza una hibridación in situ sobre
cromosomas metafásicos normales .
Ambos ADN compiten par hibridar en los mismos lugares
cromosómicos.
ANALISIS DE BANDAS
El análisis de bandas es una técnica que
implica la tinción de los cromosomas con
colorantes específicos para generar
patrones de bandas únicos. Estas bandas
permiten identificar alteraciones
cromosómicas como deleciones,
duplicaciones, inversiones o traslocaciones.
GRACIAS”
