Fosforilación oxidativa
Laura Emilia Cerón
Departamento de Química. Facultad de Ciencias Básicas y Aplicadas
Universidad Militar Nueva Granada
El flavin nucleótido oxidadado puede
aceptar un electrón (semiquinona) o dos
(FADH2 o FMNH2).
Las deshidrogenasas ligadas a NAD+ remueven dos átomos de hidrógeno de sus sustratos.
Uno se transfiere como un ion hidruro (: H-) a NAD+, el otro se libera como H+
(1) Flujo de electrones a través de una cadena de portadores
unidos a la membrana.
(2) La energía libre puesta a disposición por este flujo de
electrones, se acopla al transporte de protones a través de
una membrana impermeable a protones, conservando la
energía libre de la oxidación del combustibles, como
potencial electroquímico transmembranal
(3) El flujo transmembranal de los protones a través de canales
de proteicos específicos, proporciona la energía libre para la
síntesis de ATP, catalizada por un complejo proteico de
membrana (ATP sintasa) que acopla el flujo de protones a la
fosforilación de ADP.
(a) En la mitocondria,
los electrones se
mueven
espontáneamente a
través de una cadena de
portadores unidos a la
membrana (la cadena
respiratoria), impulsados
por el alto potencial de
reducción de oxígeno y
los potenciales de
reducción relativamente
bajos de los diversos
sustratos reducidos que
sufren oxidación
El movimiento de los electrones
a través de una cadena de
transportadores es impulsado
por la energía de los fotones
absorbidos por la clorofila. El
flujo de electrones proporciona
un potencial electroquímico por
el movimiento transmembranal
de los protones y la carga
positiva. En ambos casos, este
potencial electroquímico impulsa
la síntesis de ATP mediante una
enzima unida a membrana
(ATP sintetasa), que es similar
tanto en mitocondrias como en
cloroplastos, y también en
bacterias y arqueas.
Musculo cardiaco
Hígado
M: mitocondria
C: citosol
La cadena respiratoria mitocondrial
consiste en una serie de portadores de
electrones que actúan secuencialmente, la
mayoría son proteínas integrales y poseen
grupos prostéticos capaces de aceptar y
donar uno o dos electrones
En la fosforilación oxidativa se producen tres tipos de
transferencias de electrones: (1) transferencia directa
de electrones, como en la reducción de Fe3+ a Fe2+,
(2) transferencia como átomo de hidrógeno (H+ + e-)
y (3) transferencia como ion hidruro (:H-), que lleva
dos electrones.
El término equivalente de reducción se usa para
designar un único electrón equivalente transferido en
una reacción de óxido reducción
La reducción
completa de
ubiquinona requiere
dos electrones y dos
protones, y se
produce en dos
pasos a través del
intermedio radical de
la semiquinona
Citocromos,
hemoglobina
y mioglobina
citocromo c (cyt c)
oxidado (azul) y
reducido (rojo)
La membrana mitocondrial externa se elimina
primero mediante el tratamiento con detergente
digitonina. Los fragmentos de la membrana interna
se obtienen luego por ruptura osmótica de la
mitocondria, y los fragmentos se disuelven
suavemente en un segundo detergente. La mezcla
resultante de membrana interna:
Las proteínas se resuelven mediante cromatografía
de intercambio iónico en diferentes complejos (I a IV)
de la cadena respiratoria, cada uno con su proteína
única composición y la enzima ATP sintasa
(Complejo V).
Los complejos aislados I a IV catalizan las
transferencias entre donantes (NADH y succinato),
transportadores intermedios (Q y citocromo c) y O2.
In vitro, la ATP sintasa aislada solo tiene actividad
hidrolítica (ATPasa), no tiene actividad sintetizadora
de ATP.
Cataliza dos procesos
simultáneos y
obligadamente acoplados:
(1)
la transferencia
exergónica a ubiquinona
de un ion hidruro
de NADH y un protón de
la matriz, expresado por
(1) NADH + H+ + Q → NAD+ + QH2 (2) la transferencia
endergónica de cuatro
protones desde la matriz
al espacio intermembranal
(2) NADH + 5H+N + Q → NAD+ + QH2 + 5H+P
Complejo II implica la transferencia de
electrones desde el
sustrato al FAD de la
deshidrogenasa, luego a
la (ETF) electrón –
transferasas
flavoproteína, que a su
vez pasa sus electrones a
ETF: ubiquinona
oxidorreductasa
El efecto de cada una de estas
enzimas electrón – transferasas
contribuyen al conjunto de
ubiquinona reducida QH2
Complejo III
La reducción de
cyt c1 pasa
electrones uno a
la vez a cyt c, que
se disocia y
transporta
electrones al
Complejo IV.
QH2 + 2 cyt c1 (oxi) + 2H+N → Q + 2cyt c1 (red) + 4H+P
Complejo IV
4 cyt c (reduc) + 8H+N + O2 →
4 cyt c (oxid) + 4H+P + 2H2O
https://www.youtube.com/watch?v=LQmTKxI4Wn4
Síntesis de ATP
ADP + Pi + nH+P → ATP + H2O + nH+N
Constantes de unión muestran que
FoF1 se une al ATP con muy alta
afinidad (Kd ≤ 10-12 M) y ADP con una
afinidad mucho menor (Kd <10 -5 M).
La diferencia en Kd corresponde a una
diferencia de aproximadamente 40 kJ /
mol en la energía de enlace, y esta
energía de enlace impulsa el equilibrio
hacia la formación del producto ATP.
https://www.youtube.com/watch?v=kXpzp4RDGJI
La subunidad comienza en la
conformación β -ADP, que une
ADP y Pi.
La subunidad ahora cambia de
conformación, a la forma β -ATP
que se une fuertemente y
estabiliza el ATP, produciendo el
equilibrio de ADP + Pi con ATP
en la superficie de la enzima.
Finalmente, la subunidad cambia
a la conformación β -empty, que
tiene una afinidad muy baja por
ATP, y el ATP recién sintetizado
abandona la superficie de la
enzima.
Los cambios conformacionales centrales de este mecanismo son impulsados
por el paso de protones a través de la porción Fo de ATP sintasa.
El movimiento de protones a
través del poro Fo causa que el
cilindro de las subunidades c y el
unido a la γ gire alrededor del eje
y a lo largo de γ, que es
perpendicular al plano de la
membrana.
