AGAR HIERRO LISINA (LIA)
FRMULA (g por L) USO: diferenciación de microorganismos entéricos CARACTERÍSTICAS
PEPTONA DE GELATINA ....................5.0 Capacidad de descarboxilar o desaminar de lisina Medio deshidratado: color beige.
EXTRACTO DE LEVADURA………..........3.0
Formación de acido sulfhídrico Medio preparado: color púrpura rojizo
GLUCOSA............................................1.0
LISINA...............................................10.0
CITRATO DE HIERRO Y AMONIO.......0.5 ALMACENAMIENTO PREPARACIÓN
TIOSULFATO DE SODIO....................0.04 Suspender 35 g del polvo en 1 litro de agua purificada.
Medio deshidratado a 10-35 ºC.
PÚRPURA DE BROMOCRESOL.........0.02 Reposar 5 min.
AGAR................................................15.0 Medio preparado a 2-8 ºC.
pH FINAL: 6.7 ± 0.2
Calentar con agitación frecuente y hervir durante 1
min.
Distribuir de tubos y esterilizar a 121°C durante 15
FUNDAMENTO
min.
Fermentadores de glucosa acidifican el medio y provocan el
Enfriar (45°-50°C) y solidificar en posición inclinada
viraje de púrpura a amarillo. La acidez favorece la actividad
(pico de flauta profundo)
de la decarboxilasa y se metaboliza la lisina a cadaverina
elevando el pH y tornándolo púrpura o violeta.
Fermentadores de glucosa que no tienen actividad lisina
decarboxilasa, producen un viraje total a amarillo. A las 24
horas se observa el fondo de amarillo y la superficie de
violeta debido al consumo de las peptonas que producen
alcalinidad.
La generación de sulfuro de hidrógeno, se visualiza por el
ennegrecimiento del medio debido a la formación de
sulfuro de hierro. SIEMBRA
Las cepas (Proteus, Providencia y algunas de Con una aguja de inoculación, picando el fondo y
Morganella) desaminan la lisina. Esto produce un ácido extendiendo sobre la superficie.
alfa-ceto-carbónico, el cual con la sal de hierro y bajo la INCUBACIÓN
influencia del oxígeno forma un color rojizo en la En aerobiosis, a 33-37 ° C durante 18-24 horas
superficie.
CRECIMIENTO BACTERIANO
Medio de cultivo utilizado para diferenciar
microorganismos, basado en la descarboxilación y
desaminación de la lisina y en la producción de ácido
sulfhídrico, como:
Enterobacterias:
Salmonella spp.: Salmonella entérica
Escherichia: E. coli
Shiguella: S. flexnerii, S. dysenteriae
Características:
-Oxidasa negativo
-Anaerobios facultativos
-Fermentadores de carbohidratos
-Crecimiento: carbono y nitrógeno, glucosa, aa, vitaminas.
INDICADORES
Descarboxilación de la lisina
o Resultado Positivo: superficie alcalina / profundidad alcalina
(pico violeta / fondo violeta).
o Resultado negativo: superficie alcalina /profundidad ácida
(pico violeta / fondo amarillo).
Desaminación de la lisina:
o Resultado positivo: superficie rojiza / profundidad ácida.
Esto sucede con cepas del género Proteus, Providencia y
algunas de Morganella spp., por acido alfa-ceto-carbonico +
sales de hierro + oxigeno
Producción de SH2 :
o Resultado positivo: ennegrecimiento del medio de cultivo
(especialmente en el límite entre la superficie y profundidad).
R/__ : LISINA DESAMINASA (+)
o Resultado negativo: el medio de cultivo permanece sin
K/__ : LISINA DESAMINASA (-)
cambio de color
__/K : LISINA DESCARBOXILASA (+)
__/A : LISINA DESCARBOXILASA (-)