ANTIGENOS
FEBRILES
Los antígenos febriles se usan para detectar anticuerpos en el suero del
paciente contra salmonella, brucella y rickettsia. (reacción cruzada con proteus
OX-19)Pueden adquirirse como frascos individuales o bien como equipos que
contienen cada uno de los siguientes antígenos:
Antígeno “O” salmonella typhi
Antígeno “H” salmonella typhi
Antígeno paratyphi A
Antígeno paratyphi B
Antígeno brucella abortus
Antígeno proteus OX-19
INDICACION DE LA PRUEBA.
Salmonella: La reacción de Widal en un método serológico usado
comúnmente en el diagnóstico de las fiebres tifoideas, entérica y
ondulante, la reacción mide el título del suero contra una suspensión
de microorganismo conocidos.
Salmonella: son bacilos no emporulados aerobios, Gram negativos.
Especies de salmonella.
Hay 3 especies clínicamente importantes de salmonella: enteritidis,
choleraesuis y typhi. Mas de 1800 tipos serológicos de enteritidis han sido
descritos choleraesuis y typhi tienen solo un tipos serológico cada una.
Tres síndromes principales resultan de la infección por salmonella :
1) gastroenteritis (la forma mas común)
2) fiebre tifoidea.
3) septicemia.
salmonella enteritidis salmonella choleraesuis salmonella typhi
Brucella: en esta prueba se detectan los anticuerpos contra brucella casi todas las
infecciones humanas por brucella se deben a B. ABORTUS. B.SUIS O B.MELITENSIS.
la brucelosis es una enfermedad aguda o crónica que se manifiesta principalmente por
escalofríos, fiebre y debilidad, ocasionalmente se presentan episodios febriles ondulatorios
que han dado lugar al nombre de “fiebre ondulante” de la enfermedad.
Rickettsia: las especies de rickettsia que causan tifo tienen componentes antigénicos
idénticos con proteus (OX-19, OX-2, OX-K); esta relación se usa en el diagnostico de
tifo.
Las especies de rickettsia son carboxilos pequeños pleomorfos que funcionan como
parásitos intracelulares. La inmunidad por lo general es de larga duración con algunas
excepciones:
1) el tifus endémico puede causar recaídas de 10-20 años después de aparente
recuperación (enfermedad de brill zinsser)
2) la fiebre de las trincheras se caracteriza por las recaídas.
Contenido del equipo
1 Frasco gotero con tapón de rosca contenido 5ml de antígeno “o” de salmonella typhi.
1 frasco gotero con tapón de rosca conteniendo de 5 ml de antígeno “H” de salmonella typhi.
1 frasco gotero con tapón de rosca conteniendo 5 ml de antígeno “paratyphi A”.
1 frasco gotero con tapón de rosca conteniendo 5ml de antígeno “paratyphi B”
1 frasco gotero con tapón de rosca conteniendo 5 ml de antígeno “brucella” de brucella oburtus.
1 frasco gotero con tapón de rosca conteniendo 5 ml de antígeno proteus OX-19.
1 frasco gotero con tapón de rosca conteniendo 2 ml* o 5ml** de control positivo.
1 frasco gotero con tapón de rosca conteniendo 2 ml* o 5ml** de control negativo.
Material y equipo necesario adicional.
Agitador de placas.
Placa de vidrio con divisiones.
Aplicadores.
Recolección y manejo de las muestras.
La sangre se recolecta por punción venosa, se deja coagular y se separa el
suero por centrifugación.
Procedimiento de prueba.
A) MÉTODO DE AGLUTINACIÓN RÁPIDA EN PLACA..
1.- utilizar de preferencia una placa de vidrio marcada con 5 hileras de 6 cuadros.
2.- anotar el antígeno que corresponda a cada serie.
3.- depositar en los cuadros de cada serie 0.08, 0.04, 0.02, 0.01, 0.05 ml de suero del
paciente de izquierda a derecha.
4.-Agregar una gota de antígeno a cada una de las cantidades de suero.
5.- mezclar con un aplicador limpio, comenzando con la ultima dilución de la derecha y
siguiendo con las restantes de la izquierda (utilizar un aplicador por cada serie).
6.- agitar suavemente la placa por rotación (120 RPM) durante 2 a 3 minutos.
7.- leer con luz indirecta.
B) METODO DE AGLUTINACION EN TUBO.
1) uno numerar 7 tubos (12 x 75 mm) del 1 al 6 y un testigo para cada antígeno.
2) adicionar 0,9 ml de solución salina al primero y 0.5 ml a los restantes.
3) agregar 0,1 ml del suero problema al tubo 2 y así sucesivamente hasta el 6,
eliminando 0.5 ml de esta ultima dilución . Obteniendose diluciones 1/10, 1/20, 1/40,
1/80, 1/160, 1/320.
4) adicionar 0.5 ml de antígeno diluido previamente 120 con dilución salina en cada uno
de los tubos.
5) agitar enérgicamente e incubar en baño maria en las siguientes condiciones.
antígeno temperatura Tiempo
Salmonella “0” 48-50ºC 18-24HRS
Salmonella “H” 37ºC 2 HRS
Paratificos “A” y “B” 48-50ºC 2 HRS
Brucella 37ºC 48 HRS
Proteus OX-19 37ºC 18 HRS
CONTROLES.
Para el método de aglutinación rápida en placa el control positivo
tiene un titulo mínimo de 1:80 con cualquiera de los antígenos.
Control negativo, no debe mostrar aglutinación con ninguno de
los antígenos.
Interpretación de los resultados.