RECONOCIMIENT
O DE PROTEINAS
Nerlin Julieth Santa Florez
Laboratorio de Orgánica.
• La Gelatina es una proteína derivada
de la hidrólisis parcial del colágeno. Se
compone de 18 aminoácidos diferentes
que están unidos por enlaces
peptídicos en la formación de la
molécula de gelatina
• La gelatina tiene una gran habilidad de
enlace con el agua y sus cadenas de
configuración helicoidal son
importantes para la formación del gel.
• La ovoalbúmina es la
principal proteína de la clara
del huevo y la que le da sus
propiedades características
• En términos porcentuales,
la ovoalbúmina comprende
entre el 60 y el 65% del
contenido proteico total de
la clara de huevo
• La reacción o prueba de Biuret es un método
que detecta la presencia de compuestos de tres
o más enlaces peptídicos y, por tanto, sirve
para todas las proteínas y péptidos cortos. El
reactivo de Biuret consiste en una solución
acuosa de sulfato cúprico (CuSO4) en medio
alcalino (NaOH).
Se observa rápida
reacción de
reconocimiento de
proteínas
Prueba de biure
Violeta
Para la prueba de biuret se utilizo: característico
- albumina de huevo (la cual es
extraida de la clara de huevo)
- 2 ml de solución NaOH
-4-5 gotas de 1% CuSO4 solución y
se calentó la mezcla durante unos 5
minutos.
. El complejo presenta un color
violeta característico, el cual se da
por la coordinación de un átomo de
cobre con cuatro átomos de
nitrógeno. El complejo se basa en la
desprotonación de los grupos amida
para formar el enlace con el cobre
(II) o por el establecimiento de un
enlace coordinado entre el metal y
los pares de electrones libres de los
átomos de oxigeno y de nitrógeno
del péptido.
REACCION DE BIURETE
Se observa la unión
de un átomo de
cobre, con cuatro de
nitrógeno
En la figura se muestra la ovoalbúmina. Con los
círculos amarillos se encuentran encerrados los
enlaces peptídicos que fue lo que ocasiono que
diera positivo en la prueba de biurete.
En la figura se muestra la gelatina. Con los
círculos amarillos se encuentran encerrados los
enlaces peptídicos que fue lo que ocasiono que
diera positivo en la prueba de biurete.
Prueba xanthoproteica
La reacción básicamente
detecta la presencia del
grupo bencénico, tanto en
aminoácidos, como en
proteínas y péptidos. El
ácido nítrico actúa sobre
el anillo bencénico de los
aminoácidos que lo
poseen, formando
nitrocompuestos fenólicos
Para la prueba xanthoproteica se utilizo:
-2 ml de la muestra (Egg albumin, Gelatin
dispersión) en un tubo de ensayo
- agregar algunas gotas de Conc. HNO3
calentar el tubo de ensayo.
• Para esta prueba se
produce la nitración
del anillo bencénico
presente en los
aminoácidos
obteniéndose
nitrocompuestos de
color amarillo.
como arrojo el
resultado con las
sustancias A Y B
Según las guías químicas es una reacción cualitativa, mas no
cuantitativa. Por ende determina la presencia o no de proteína
En la figura se muestra la ovoalbúmina. Con los
círculos amarillos se encuentran encerrados los
anillos bencénicos que es lo que ocasiona que de
positivo en la prueba xanthoproteica.
En la figura se muestra la gelatina. Con los
círculos amarillos se encuentran encerrados los
anillos bencénicos que es lo que ocasiona que de
positivo en la prueba xanthoproteica.
Prueba ninhidrina
Todas aquellas sustancias
que presentan al menos un Debido a que la ninhidrina
y el NaNo3 son reactivos
grupo amino y uno carboxilo que por medio de
calorimetría reaccionan
libre, reaccionaran con la con las proteínas y los
aminoácidos formando
soluciones de tonalidades
ninhidrina. La positividad se violetas
manifiesta por la aparición
de un color violáceo
Para la prueba se utilizo:
-2 ml de la muestra (Egg albumin, Gelatin
dispersión)en un tubo de ensayo
-3-4 gotas de solución de ninhidrina y hierva el
contenido.
. La ninhidrina (hidrato de tricetohidrindeno) es un
oxidante energético que por una des-aminación
oxidativa de los aminoácidos conduce a la formación del
aldehído correspondiente, con liberación de amoniaco y
gas carbónico y formación de la ninhidrina reducida o
hidrindrantina. La molécula de hidridantina, en
presencia de otra de ninhidrina, condensa a través del
amoniaco produciendo una estructura denominada
indanona.
En la siguiente estructura
(Ovoalbúmina) observamos con
círculos azules carboxilos libres
y con círculos violeta los grupos v
amino.
En la siguiente estructura
(Gelatina) observamos con
círculos azules carboxilos libres
y con círculos violeta los grupos
amino.
PRUEBA DE MILLON
El reactivo de Millón es un ensayo
químico que sirve para saber si existe
tirosina en la solución, si esto es así se
genera un coagulo blanco que por
calentamiento pasa al rojo carne
Para la prueba utilizamos:
-1-2 ml de la muestra (Egg albumin,
Gelatin dispersión) en un tubo de
ensayo
- 2 gotas del reactivo de Millon.
PRUEBA MILLON
ARTICULO CIENTIFICO
• BOLETIN-2012-nov-dic-220-224.pdf (ins.gob.pe)
