FISIOLOGÍA CELULAR

DR. LUIS FERNANDO LÓPEZ SOTO

[Link]@[Link]
luisfernandolopezsoto@[Link]
 Biología
Ciencia que se encarga del estudio de todos los seres vivos (su
forma, estructura, ciclo reproductivo, forma de vida y su relación
con el medio ambiente)

Biología Celular
Rama de la ciencia que estudia a las células (sus propiedades,
estructuras, funciones, organélos, interacción con el ambiente
y ciclo vital)

Fisiología
Es la ciencia que estudia las funciones de los seres vivos. Se
encarga del estudio de la función de cada parte del cuerpo.
 Fisiología Celular
Es una rama de la ciencia que estudia las funciones de la
unidad básica de los seres vivos. La célula realiza diversas
funciones con el fin de poder alimentarse, crecer, reproducirse,
sintetizar sustancias y relacionarse con el medio ambiente .
 Se relaciona con:

Bacteriología Genética
Biofísica Ecología
Ecología Paleoecología
Citología Paleontología
Histología Taxonomía
Microbiología Virología
Etología
 Surgimiento de la Biología Celular

Anton van Leeuwehoek, 1632-1723.

Se le atribuye el descubrimiento de los
protozoarios y espermatozoides.

Robert Hooke, 1635-1703.

Fue el primero en utilizar el término
Célula.

[Link]
 Eventos que permitieron el Establecimiento de la
Teoría Celular:

1801, Dutrochet y Purkinje. Describieron la organización celular de

vegetales y varios tejidos animales.

1831, Robert Brown, describió al núcleo celular.

1835, Dujarni, describió al protoplasma.

1838, Matias Scheilden, Observó que todas los organismos vegetales

son conformados por células.

1858, Virchow, describió el proceso de división (proliferación

celular), que todas las células surgen de células preexistentes.
 Teoría Celular
Por: J. Schleiden y T. Schwann

Se basa en 4 proposiciones:

Todos los organismos están compuestos de células.

En las células tienen lugar las reacciones

metabólicas de organismo.
Las células provienen tan solo de otras células
preexistentes.

Las células contienen el material hereditario.

De acuerdo con la Teoría Celular

“La Célula es la Unidad

Anatómica, Funcional y de
Origen de todos los seres vivos”
[Link]
 CÉLUL
A
La CÉLULA (del latín cellula, diminutivo de cella, hueco) es la unidad
morfología y funcional de todo ser vivo. Es el elemento de menor tamaño que
puede considerarse vivo.

UNICELULARES. Son los organismos vivos que poseen 1 sola célula

(protozoarios o las bacterias, organismos microscópicos)
PLURICELULARES. Son los organismos vivo que poseen un número variable
de células. Unos pocos cientos, como en algunos nematodos, a cientos de
billones (1014), como el ser humano.

Las células suelen poseer un tamaño de 10 µm y una masa de 1 ng, si bien

existen células muchos mayores.
Three Domain System
[Link]
Virus Partícula microscópica con capacidad infecciosa.

https://
[Link]/figure/The-influenza-A-virus-life-cycle-The-RNPs-are-represented-by-helical-
[Link]
 Organización Celular

[Link]
Organización Molecular de la
Célula
 Organización Molecular de la Célula

C, O, H, N, P y S. Son los elementos químicos indispensables

para la base de las estructuras celulares.

95%

H2O.- representa el 75% del total de la masa celular.

Sales minerales.-
• Precipitadas (carbonato cálcico y fosfato cálcico)
• Disueltas como Iones (Cl-, H2PO4-, SO4-2, SO3-2, Na+, K+, NH4+, Mg+2, Ca+2)
• Asociadas a moléculas orgánicas (fosfoproteínas, fosfolípidos, agares)
Principales funciones de las sales minerales dentro de la
célula:
- Mantener el grado de salinidad del medio interno.
- Estabilizar dispersiones coloidales.
- Intervenir en la ósmosis.
- Constituir soluciones tampón o amortiguadoras para mantener el pH intracelular.
- Formar estructuras esqueléticas
[Link]
 CARBOHIDRATOS

 Los glúcidos, carbohidratos , sacáridos o hidratos de carbono

 Son una clase de biomoléculas denominados polihidroxialdehidos y

polihidroxiacetona

 Son fuente de energía rápida

 Son almacenado a manera de reservas

 Su formula general es Cn(H2O)n

Clasificación: Número de carbonos
Triosas: 3 Carbonos
Tetrosas: 4 Carbonos
Pentosas: 5 Carbonos
Hexosas: 6 Carbonos
Heptosas: 7 carbonos

Rodwell VW, Bender D, Botham KM, Kenelly PJ, weil PA. 2018. Harper’s Illustrated
Biochemistry. 31 edition. Mc Graw Hill Education.
Clasificación: Número de azúcares

Monosacáridos: Glucosa, Fructosa o Galactosa

Disacáridos: Lactosa, Maltosa, Sacarosa

Oligosacáridos: Dos a diez monómeros

Polisacáridos
Rodwell VW, Bender D, Botham KM, Kenelly PJ, weil PA. 2018. Harper’s Illustrated
Biochemistry. 31 edition. Mc Graw Hill Education.
Rodwell VW, Bender D, Botham KM, Kenelly PJ, weil PA. 2018. Harper’s Illustrated
Biochemistry. 31 edition. Mc Graw Hill Education.
 POLISACÁRIDOS TIENEN LA FUNCIÓN DE
ALMACENAMIENTO Y ESTRUCTURA

ALMIDÓN.- Homopolímero de α glucosas, se divide en amilosa y

aminopeptina.

Rodwell VW, Bender D, Botham KM, Kenelly PJ, weil PA. 2018. Harper’s Illustrated
Biochemistry. 31 edition. Mc Graw Hill Education.
 POLISACÁRIDOS TIENEN LA FUNCIÓN DE
ALMACENAMIENTO Y ESTRUCTURA
GLUCÓGENO
 Lípidos

Son biomoléculas orgánicas conformadas por C, H y O (en menor proporción),

además de S, P y N.
Son insolubles en agua y solubles en solventes orgánicos (éter, cloroformo,
benceno, etc.)
LÍPIDOS SIMPLES: Ésteres de los ácidos grasos con diversos alcoholes.
a) Grasas: Ésteres de ácidos grasos con el glicerol. Los aceites son grasas en
estado líquido
b) Ceras: Ésteres de ácido grasos con alcoholes monohídrico de PM

LÍPIDOS COMPLEJOS: Ésteres de ácidos grasos que contienen grupos

adicionales al alcohol y el ácido graso.
a) Fosfolípido: Lípidos unidos al ácido fosfórico (adicionales al alcohol y el
ácido graso) y además una compuesto nitrogenadas y otros sustituyentes.
b) Glucolípidos (glucoesfingolípidos): Son lípidos con un ácido graso,
esfingosina y carbohidrato.
c) Otros lípidos complejos: sulfolípidos y aminolípidos (lipoproteínas)
LÍPIDOS PRECURSORES Y DERIVADOS: ácidos grasos, glicerol, esteroides,
alcoholes, otros aldehidos grasos y cuerpos cetónicos, hidrocarburos, vitaminas
liposolubles y hormonas.

Lós acilgliceroles, colesterol y los ésteres del colesterilo de denominan lípidos

neutros por no presentar carga alguna.
Los ácidos grasos son ácidos carboxílicos alifáticos, son los ácidos
grasos libres (no esterificados). Ésteres en grasas y aceites naturales.
Saturados (sin dobles enlaces) y insaturados (con dobles enlaces).

Los ácidos grasos Insaturados se clasifican en:

a) Monoinsaturados: Contienen una doble ligadura

b) Poliinsaturados: Contienen 2 más dobles ligaduras

c) Eicosanoides: Derivados del ácido graso de 20 carbonos
(araquidonico). Tromboxanos, leucotrienos, lipoxinas, prostaglandinas,
prostaciclinas.
 Tipos de lípidos

• Grasas (triglicéridos)
• Fosfolípidos
• Colesterol

[Link]
[Link]
[Link]
 IMPORTANCIA BIOLÓGICA
• Forman las membranas celulares conjuntamente con proteínas y
polisacáridos
• Almacenan energía que el organismo puede disponer fácilmente si
la necesita.
• Protegen diferentes partes de los seres vivos, el tejido adiposo
protege del frío por ser un buen aislante. Las ceras recubren algunos
órganos vegetales como hojas, evitando las pérdidas de agua.
• Intervienen en diversos procesos químicos intracelulares. Las grasas
se obtienen a partir de los alimentos ingeridos.
• Constituyen algunas de las vitaminas: A1, E y K son terpenos.
• Forman ciertas hormonas (progesterona, estradiol, testosterona,
hidrocortisona, aldosterona) son esteroides.
•Son constituyentes de algunos pigmentos, que están formados
algunos por terpenos.
 FUNCIONES DE LOS LÍPIDOS

Reserva. 1 gramo de Grasa produce 9.4 kcal

1 gramo de Proteína o Glúcido produce 4.1 kcal.

Estructural: Forman bicapas lipídicas de las membranas, recubren órganos,

protegen mecánicamente como el tejido adiposo de pies y manos.

Biológica: Favorecen o facilitan reacciones químicas en los seres vivos.

Ejemplo: las vitaminas lipídicas, las hormonas esteroides y las
prostaglandinas.

Transportadora: EL transporte de lípidos desde el intestino hasta su lugar de

destino se realiza mediante su emulsión gracias a los ácidos biliares y a los
proteolípidos.
 AMONIÁCIDOS Y PROTEÍNAS

• Largos polímeros de aminoácidos

•Moléculas orgánicas mas abundantes en las células.

•Cada proteína tiene funciones diferentes

•La información genética es transmitida por las proteínas.

•Todas producen, por hidrólisis, -aminoácidos.

 AMONIÁCIDOS Y PROTEÍNAS

Los 20 aminoácidos encontrados comúnmente como productos de

hidrólisis de las proteínas que contienen un grupo α-carboxilo, un
grupo α-amino y un grupo R distintivo sustituido en el átomo de
carbono α.
 AMONIÁCIDOS Y PROTEÍNAS

 Carbono α de los aminoácidos (excepto glicina) es asimétrico

 2 formas esteroisómeras L y D. Sólo se encuentran en las

proteínas los esteroisómeros L.
 AMONIÁCIDOS Y PROTEÍNAS

Los aa se clasifican según la polaridad de sus grupos R, en

cinco grupos:

1.- Apolar alifática: alanina, glicina, isoleucina, leucina,

prolina y valina. Fenilalanina, tirosina y triptófano

2.- Polares (sin carga): Asparagina, cisteína, glutamina,

metionina, serina y treonina.
 AMONIÁCIDOS Y PROTEÍNAS

3.-Los cargados negativamente (acídicos): Aspartato y

glutamato.

4.-Los cargados positivamente (básicos): arginina, histidina y

lisina.

5.-Aromáticos.- Fenilalanina, tirosina y triptófano

 IMPORTACIA BIOMÉDICA

1.- Unidad monomérica de las proteínas

2.- Neurotransmisor (ácidos glutámico), biosíntesis (BN)

3.- Péptidos Neuroendocrino (ADH)

4.- Bacitracina, gramicidina A y Bleomicina

 IMPORTACIA BIOMÉDICA
INDISPENSABLES DISPENSABLES
Fenilalanina Alanina
Isoleucina Glutamina
Leucina Cisteina
Lisina Tirosina
Metionina Glicina
Treonina Ácido Aspártico
Triptófano Ácido Glutámico
Valina Serina
Arginina Prolina
Histidina Asparagina
 IMPORTACIA BIOMÉDICA

La mayoría de los aminoácidos se L-aminoácidos: Ciclo de

la urea, Formación de hormonas

Los D-aminoácidos: Tejido cerebral, pared celular y en

fármacos
 CARGA (+), (-) O NINGUNA

Grupos Ionizables de los aminoácidos:

R – COOH R – COO- + H+
R – NH3+ R – NH2 + H+

Zwiteriones: Moléculas con el mismo número de

grupos ionizables pero con carga opuesta

pKa= Es la fuerza ácida de las moléculas con

protones disociables
CARGA (+), (-) O NINGUNA
 TENER CARGA (+), (-) O NINGUNA

Molécula Isoeléctrica: Cantidad idéntica de (+) y (-)

Punto Isoeléctrico (pI): pH donde la molécula tiene carga

neta igual a cero. Para los aminoácidos es el pH promedio
entre los 2 pKa

Cuando tienen más de 2 pKa, tomar los 2 pKs que están

entre el punto isoiónico.
 TENER CARGA (+), (-) O NINGUNA
Punto Isoiónico: pH donde las cargas negativas están
equilibradas con las positivas.

Para moléculas pequeñas (aminoácidos y péptidos) punto

isoeléctrico y punto isoiónico son iguales

Separación electroforética
 EL MEDIO AMBIENTE AFECTA AL pKa
Un medio ambiente polar favorece los compuestos cargados R–
COO- y R–NH3+

Un medio no polar favorece los compuestos no cargados R–

COOH y R–NH2

Los grupos cargados de los aa, aseguran la solubilidad en

solventes polares (agua, etanol) e insolubles en no polares
(benceno, hexano)

La elevada energía necesaria para romper las fuerzas iónicas

que estabilizan los cristales es similar para los aminoácidos
LAS R- DETERMINAN LAS PROPIEDADES
Glicina es el más pequeño

Las R – Hidrofóbicas (Val, Leu, Ile) se orientan al

interior de la proteína

Los cargados (+ o -) estabilizan conformaciones

proteicas específicas (iónicas, p. de hidrógeno e
interacciones electrostáticas)

La serina (-OH) y cisteina (-SH) son excelentes

nucleófilos
 ENLACE aa-aa: ENLACE PEPTÍDICO

Es el enlace covalente formado por el grupo carboxilo

(COOH) del primer aminoácido con el grupo amino (NH2) del
segundo aminoácido, liberando H2O.
IMPORTANCIA BIOMÉDICA DE LAS
PROTEÍNAS

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[Link]/wp-content/uploads/2015/05/Las-proteinas-son-las-encargadas-de-llevar-a-ca
[Link]
 •Como las glucoproteínas que forman parte de las membranas. 
•Las histonas que forman parte de los cromosomas 
Estructural
•El colágeno, del tejido conjuntivo fibroso. 
•La elastina, del tejido conjuntivo elástico. 
•La queratina de la epidermis. 

Enzimatica Son las más numerosas y especializadas. Actúan como biocatalizadores de las
  reacciones. 

•Insulina y glucagón 
•Hormona del crecimiento
Hormonal 
•Calcitonina
•Hormonas tropas 

•Inmunoglobulina
Defensiva
•Trombina y fibrinógeno

•Hemoglobina
Transporte •Hemocianina
•Citocromos

•Ovoalbúmina, de la clara de huevo

Reserva •Gliadina, del grano de trigo
•Lactoalbúmina, de la leche
 DE ACUERDO A SU COMPOSICIÓN

PROTEÍNAS SIMPLES:
Son aquellas que por hidrólisis producen solamente -
aminoácidos.

PROTEÍNAS CONJUGADAS:
Son aquellas que por hidrólisis, producen -aminoácidos
y además una serie de compuestos orgánicos e
inorgánicos llamados grupos prostéticos
 DE ACUERDO A SU COMPOSICIÓN

GRUPO PROSTÉTICO: Molécula de carácter orgánico o

inorgánico sin ser aminoácido, unido covalentemente a la
proteína y es indispensable para la función de la proteína:

1.-Nucleoproteínas (Ácido Nucléico)

2.-Metaloproteínas (Metal)
3.-Fosfoproteínas (Fosfato)
4.-Glucoproteínas (Glucosa)
5.-Lipoproteínas (lípidos)
 DE ACUERDO A SU CONFORMACIÓN

P. Fibrosas:

Constituidas por cadenas polipeptídicas, ordenadas de orden

paralelo a lo largo de un eje formando estructuras compactas
(fibras o láminas).

Son materiales físicamente resistentes e insolubles en agua y

soluciones salinas diluídas. Ej. Colágena, -queratina,
elastina.
 DE ACUERDO A SU CONFORMACIÓN

P. Globulares:

Constituidas por cadenas polipeptídicas plegadas

estrechamente, de modo que adoptan formas esféricas o
globulares compactas.

Solubles en sistemas acuosos, su función dentro de la célula

es móvil y dinámica. Ej. Enzimas, anticuerpos, hormonas.
 ESTRUCTURAS PROTEICAS
E. Primaria.- secuencia de aminoácidos de una cadena
polipeptídica

E. Secundaria.- Plegamiento de segmentos de proteína en

unidades ordenadas de manera geométrica (hélice α, hoja β)

E. Terciaria.- Conformación tridimensional completa de un

polipéptido

E. cuaternaria.- Número y tipo de unidades polipeptídicas de

proteínas oligoméricas y su disposición espacial
ESTRUCTURAS PROTEICAS

[Link]
ESTRUCTURA PRIMARIA DE LAS PROTEÍNAS

1.- Es el esqueleto covalente de la cadena polipeptídica.

2.- Es establecida por la secuencia de aminoácidos.

3.- Rige el orden de encadenamiento por medio del enlace

peptídico
HÉLICE α
 HÉLICE α

La estabilidad dela hélice α, se debe a

los enlaces puente de hidrógeno
formado entre el oxigeno del carbonilo y
el hidrógeno del nitrógeno del
aminoácido 4.

Las FVW del núcleo de esta estructura

¿Dónde está prolina?

 HOJA β PLEGADA
Esqueleto polipeptídico está más extendido. La estabilidad la
aportan los p. de hidrógeno, igual que en la hélice α, pero con
segmentos adyacentes de hoja β

hoja β antiparalela

hoja β paralela
 ESTRUCTURAS AL AZAR (ASAS, GIROS)

Son segmentos cortos de aminoácidos que unen 2 estructuras

secundarias en cualquier combinación.

Giro β (4 aa): Se forma un [Link] hidrógeno entre el aminoácido 1 y

el 4, formando una vuelta cerrada de 180°. A menudo esta
presente prolina y glicina.

Asa: Su longitud varía, es de conformación irregular e

intervienen en funciones biológicas importantes.

En ocasiones las asas conectan los dominios catalíticos de

lagunas enzimas. Hélice – Asa – Helice, forman en sitio de unión
proteico que se une al DNA.
 ESTRUCTURAS TERCIARIAS
Conformación tridimensional completa del polipéptido o
protómero.

Dominio.- Es una sección de la estructura proteínica suficiente

para llevara a cabo una función específica.

ESTRUCTURAS CUATERNARIAS

Conformación tridimensional completa de proteínas

conformada por más de un polipéptido ó protómero.
 FACTORES QUE ESTABILIZAN LAS
ESTRUCTURAS PROTEICAS

Interacciones Hidrofóbicas

Puentes de Hidrógeno

Puentes Salinos

Puentes disulfuro

Fuerzas de Van Der Walls

DESNATURALIZACIÓN DE LAS PROTEÍNAS

Pérdida de la estructura terciaria. Son en la estructura de la

proteína que trae como resultado una alteración o
desaparición de sus funciones.

FACTORES QUE AFECTAN LA ESTRUCTURA TERCIARIA:

Físicos: Temperatura
Variaciones de pH
Radiaciones ultravioleta
Altas presiones
Químicos: Ácidos
Bases
Sustancias con actividad de detergente
 HEMOGLOBINA Y MIOGLOBINA
IMPORTANCIA BIOMÉDICA
Intervienen en el transporte y almacenamiento, necesario
para la funciones fisiológicas del metabolismo oxidativo de
la célula.

MIOGLOBINA
Proteína monomérica del musculo y su función es
almacenar el oxígeno.

HEMOGLOBINA
Proteína tetramérica del eritrocito y su función es
transportar el oxigeno a los tejidos y regresa el CO2 y H+ a
los pulmones
 ENZIMAS

Son polímeros biológicos que catalizan las reacciones

químicas. Son catalizadores biológicos que aceleran una
reacción

CARACTERISTICAS DE LAS ENZIMAS

Catalizadores muy potentes y eficaces.
Pueden ser de naturaleza protéica o ribonucléica.
No modifican el sentido de los equilibrios químicos, si no que
aceleran su consecución.
Velocidad de la Reacción: Es la velocidad de formación de un producto B
a partir de un sustrato A.

V= d[B]/dt V= -d[A]/dt
V= d[B]/dt = -d[A]/dt = k1A

Constante de Activación: Es una medida directa de rapidez con la que

se produce una reacción. Una k grande es una reacción rápida

Paso limitante de la reacción: Es el paso más lento de la reacción

Energía de Activación: Es la barrera energética necesaria para la

realización de una reacción. Es la energía suficiente para alcanzar el
estado de transición y realizar la reacción
 Características de la reacción enzimática

Elevada especificidad:
Especificidad de sustrato. EL sustrato(s) es la molécula sobre la
que la enzima ejerce su acción catalítica.
Especificidad de acción: Cada reacción está catalizada por una
enzima específica bajo el mismo mecanismo.

Acción enzimática

E+S      ES      E+P

Característica sobresaliente

Se une a la enzima por interacciones débiles: puentes de hidrógeno, fuerzas

electrostáticas, fuerzas hidrofóbicas, etc en el centro activo de la enzima
 ENZIMAS

Catalizadores eficaces y muy específicos:

Catalizan la conversión de un sustrato a un producto

aumentando la velocidad de reacción. No se altera el equilibrio
de la reacción.

Son muy específica: 1 sustrato

Son estereoespecíficos
 ENZIMAS

Se clasifican por su tipo de reacción y mecanismo

The International Union of Biochemistry (IUB) Nombre y

número único para cada enzima

1.- Óxidoreductasas.- catalizan las de Óxido-Reducción

2.- Transferasas.- catalizan la transferencia de grupos
3.- Hidrolasas.- catalizan la ruptura hidrolítica
4.- Liasas.- catalizan la ruptura de enlaces C-C, C-N, C-S.
5.- Isomerasas.- Catalizan cambios geométricos y
estructurales
6.- Ligasas.- catalizan la unión de 2 moléculas acopladas
a la hidrólisis del ATP
Enzimas Oxido-reductasas: Enzimas que catalizan las reacciones de
oxido-reducción, las cuales implican transferencia de electrones.
Ribonucleotido reductasa (Síntesis de material genético)

Enzimas Transferasas: Enzimas que catalizan la transferencia de grupos

metílos de una molécula donadora hacia otra receptora. N-Metil transferasa
(Transfiere grupos metilos a grupos aminos)

Enzimas Hidrolasas: Enzimas que catalizan las reacciones de hidrólisis,

las cuales es necesaria la presencia de agua ya que interviene en la
reacción como sustrato. Fumarasa (A partir de fumarato más agua se
sintetiza malato)
Enzimas Liasas: Enzimas que catalizan las reacciones en las cuales
implican la ruptura de enlaces C-C, C-O, C-N, C-S. Son reacciones
exergónicas. Piruvato descarboxilasa

Enzimas Isomerasas: Enzimas que catalizan las reacciones donde el

arreglo espacial de las moléculas es alterado para generar isómeros.
Galactosa epimerasa

Enzimas Ligasas: Enzimas que catalizan las reacciones en las cuales

implican la formación de enlaces C-C, C-O, C-N, C-S. Son reacciones
endergónicas donde es necesaria la ruptura de ATP. DNA ligasa
 ENZIMAS

Grupo prostético.- Molécula unida covalentemente PLP, FAD,

Biotina, Co, Cu, Mg Mn, Zn (Metaloenzima). La interacción con
los sustratos para hacerlos más electrófilos y nucleófilos.

Cofactor.- Une reversiblemente con la enzima o elsustrato.

Cumplen la misma función que el grupo prostético pero se une
de manera transitoria. Iones metálicos (enzimas activadas por
metales).

Coenzima.- Lanzaderas reciclables (transportadores) de los

sustratos, estabilizandolos.
 ENZIMAS

La catálisis es el proceso donde se aumenta o disminuye

la velocidad de una reacción química por un catalizador.

Catálisis enzimática.- El aumento de la velocidad de

reacción es catalizado por una enzima.

La catálisis ocurre en el sitio activo, protege al sustrato del

disolvente y facilita la catálisis. El sitio activo enlaza y
orienta grupos prostéticos y/o cofactores.
 ENZIMAS

Catálisis por proximidad.- Se aproximan entre sí a una

distancia de formación del enlace. Al aumentar la
concentración se favorece la interacción y aumenta la
velocidad de reacción.

Catálisis ácido-base.- Las reacciones son catalizadas por

ácidos o bases. El sitio activo actúa como ácido o base. Son
sensibles a cambios en los protones o hidroxilos, su
velocidad de reacción se altera.
 ENZIMAS

Catálisis por Deformación.- El sitios catalítico deforma

al enlace covalente y lo rompe.

Catálisis covalente. En el sitio catalítico se forma un

enlace covalente, las principales son las transferasas
ENZIMAS

Los sustratos inducen

cambios conformacionales
en las enzimas

Tarea leer las teorías

enzimáticas:

1.- llave-cerradura
2.- Ajuste inducido
 ENZIMAS

Los residuos catalíticos son altamente conservados,

endoproteasas aspártico o de serina, usan mismo
mecanismo similar para catalizar una reacción en común
pero en diferentes sustratos. Se originan por fenómenos
de duplicación de genes
ENZIMAS
 ENZIMAS

Factores que Afectan la velocidad de reacción:

Temperatura

Concentración de los reactivos

Inhibición Enzimática

Tipos de Inhibidores:
1. Reversibles:
Inhibidor Competitivo
Inhibidor No competitivo
Inhibidor Incompetitivo

2. Irreversibles.
Inhibición Irreversible:
Inhibidores suicidas, inactivadores basados en el mecanismo ya que
utilizan el mecanismo de reacción enzimática normal para inactivar la enzima.
No es activo hasta que llega al sitio activo
En las rutas metabólicas hay grupos de enzimas que funcionan
conjuntamente en rutas secuenciales para llevar a cabo un proceso
metabólico determinado, por ejemplo de la glucosa a lactato.

Hay al menos una enzima que fija la

velocidad de la secuencia global

Muestran una actividad mayor o

Enzimas Reguladoras. menor en respuesta a ciertas
señales

Mediante diversos tipos de

moléculas señales las cuales son
generalmente metabolitos de baja
masa molecular o cofactores.
 Enzimas reguladoras.
Zimógenos

Enzimas Alostéricas: Enzimas reguladas por modificación

Allos: otro; stereos: sólido o forma covalente reversible

Funcionan a través de la unión

reversible, no covalente, de un Tienden a ser del tipo todo o
metabolito regulador denominado nada
modulador.

Fosforilación (fosfato), Adenililación

(adenosina monofosfato), Uridililación
(uridina monofosfato), ADP-Ribosilación
(adenosina difosfato ribosa) y metilación
(los grupos metilo)
Organización de la Célula
 STRUCTURAL CHARACTERISTICS OF A BACTERIAL CELL
STRUCTURE FUNCTION
Cell Wall protects the cell and gives shape
Outer protects the cell against some antibiotics (only present in Gram-negative
Membrane cells)
Cell regulates movement of materials into and out of the cell;  contains enzymes
Membrane important to cellular respiration
contains DNA, ribosomes, and organic compounds required to carry out life
Cytoplasm
processes
Nucleoid a region in which their genetic material is concentrated
Chromosome carries genetic information inherited from past generations
Plasmid contains some genes obtain through genetic recombination
Capsule protects the cell and assist in attaching the cell to other surfaces
protects the cell against harsh environmental conditions, such as heat or 
Endospore
drought
assist the cell in attaching to other surfaces, which is important for genetic
Pilus (Pili)
recombination
Flagellum moves the cell
 MEMBRANA PLASMÁTICA

La membrana plasmática es una estructura laminar que engloba a las células,

define sus límites y contribuye a mantener el equilibrio entre el interior y el
exterior de éstas. Está formada principalmente por lípidos, proteínas y
carbohidratos

Funciona como “un contenedor” para el citosol y los distintos compartimentos

internos de la célula, así como también otorga protección mecánica.

La principal característica de esta barrera es su permeabilidad selectiva, lo cual

le permite "seleccionar" las moléculas que entran y salen de la célula.
MEMBRANA PLASMÁTICA

[Link]
 PARED CELULAR

La pared celular es una capa rígida que se localiza en el exterior de la

membrana plasmática en las células procariontes y en plantas. La pared
celular protege los contenidos de la célula, da rigidez a la estructura
celular. Además, en el caso de plantas, define la estructura y otorga
soporte a los tejidos.

La pared celular se construye de diversos materiales dependiendo de la

clase de organismo. En las plantas, la pared celular se compone sobre
todo de un polímero de carbohidratos denominado celulosa. En las
bacterias, la pared celular se compone de peptidoglicano.
 PARED CELULAR

BACTERIAS PLANTAS
Alberts B, Jhonson AD, Lewis J, Morgan D, Raff M, Roberts K, Walter P. 2014. Molecular Biology of
the Cell. Sixh edition. Garland Science Taylor & Francis Group.
 CITOPLASM
A
El citoplasma se encuentra entre el núcleo celular y la membrana plasmática. Consiste
en una emulsión coloide muy fina de aspecto granuloso, el citosol y en una diversidad
de organélos celulares que desempeñan diferentes funciones.

Su función es albergar los organélos y contribuye al movimiento de los mismos. Es

sede de muchos de los procesos metabólicos.

En el citoplasma se encuentran varios nutrientes que lograron atravesar la membrana

plasmática
 CITOESQUELETO

Es una red de filamentos proteicos, en el citoplasma, que le confieren forma y

organización interna a la célula y permiten su movimiento. A estos filamentos se le
denomina citoplasma. Existen varios tipos de filamentos:

 Microfilamentos o filamentos de actina, típicos de las células musculares.

 Microtubulos, que aparecen dispersos en el citoplasma y forman estructuras
más complejas, como el huso acromático.
 Filamentos intermedios como los filamentos de queratina típicos de las células
epidérmicas.

A su vez, estas estructuras mantienen una relación con las proteínas, y originan
otras estructuras más complejas y estables. Asimismo, son responsables del
movimiento de la célula.
 CITOESQUELETO

Alberts B, Jhonson AD, Lewis J, Morgan D, Raff M, Roberts K, Walter P. 2014. Molecular Biology of
the Cell. Sixh edition. Garland Science Taylor & Francis Group.
 RETÍCULO
ENDOPLÁSMICO
El retículo endoplásmico es un complejo sistema y conjunto de membranas
conectadas entre sí. Forman un extenso sistema de canales y mantienen
unidos a los ribosomas. Es un conjunto de cavidades cerradas de forma
muy variable: láminas aplanadas, vesículas globulares o tubos de aspecto
sinuoso.

Retículo Endoplásmico Rugoso

Cuando la RE está rodeada de ribosomas, se le denomina retículo
Endoplásmico Rugoso (RER). El RER tiene como función principal la
síntesis de proteínas.

Retículo Endoplásmico liso

En la ausencia de ribosomas, se le denomina retículo endoplasmático liso
(REL). Su función principal es la de producir los lípidos de la célula,
concretamente fosfolípidos y colesterol, que luego pasan a formar parte de
las membranas celulares.
RETÍCULO
ENDOPLASMICO

Alberts B, Jhonson AD, Lewis J, Morgan D, Raff M, Roberts K, Walter P. 2014. Molecular Biology of
the Cell. Sixh edition. Garland Science Taylor & Francis Group.
 RIBOSOMA

Los ribosomas son gránulos citoplasmáticos encontrados en todas las células. El

ribosoma consta de dos partes, una subunidad mayor y otra menor; estas salen del
núcleo por separado.

La función de los ribosomas es la síntesis de proteínas citoplasma. Los ribosomas

activos pueden estar suspendidos en el citoplasma o unidos al retículo endoplásmico
rugoso.

Los ribosomas suspendidos en el citoplasma tienen la función principal de sintetizar

las siguientes proteínas:

Proteínas que formarán parte del citosol

Proteínas que construirán los elementos estructurales
Proteínas que componen elementos móviles en el citoplasma.
 RIBOSOMA

Alberts B, Jhonson AD, Lewis J, Morgan D, Raff M, Roberts K, Walter P. 2014. Molecular Biology of
the Cell. Sixh edition. Garland Science Taylor & Francis Group.
 APARATO DE GOLGI
El aparato de golgi, tienen una estructura similar al retículo
endoplásmico; pero es más compacto. Está compuesto de sacos de
membrana de forma discoidal y está localizado cerca del retículo
endoplásmico.

El aparato de golgi está formado por una o más series de cisternas

ligeramente curvas y aplanadas limitadas por membranas.

Sus funciones son:

Modificación de sustancias sintetizadas en el RER: en el aparato de
golgi se transforman las sustancias procedentes del RER. Estas
transformaciones pueden ser agregaciones de restos de carbohidratos
para conseguir la estructura definitiva o para ser hidrolisados y así
adquirir su conformación activa.
 APARATO DE GOLGI

Alberts B, Jhonson AD, Lewis J, Morgan D, Raff M, Roberts K, Walter P. 2014. Molecular Biology of
the Cell. Sixh edition. Garland Science Taylor & Francis Group.
 MITOCONDRI
A

La mitocondria es un organélo que puede ser hallado en todas las

células eucariotas y están rodeadas de una membrana doble.

En la mitocondria se llevan a cabo todos los procesos de la

respiración celular. Su función principal es producir ATP, el cual es
la principal fuente de energía de la célula.
 MITOCONDRI
A

Alberts B, Jhonson AD, Lewis J, Morgan D, Raff M, Roberts K, Walter P. 2014. Molecular Biology of
the Cell. Sixh edition. Garland Science Taylor & Francis Group.
 LISOSOMAS
Son vesículas esféricas que contienen alrededor de 50 enzimas, generalmente
hidrolíticas. Los lisosomas mantienen separadas a estas enzimas del resto de la
célula, y así previenen que reaccionen químicamente con elementos y organélos de
la célula.

Los lisosomas utilizan sus enzimas para reciclar las diferentes organélos de la
célula, englobándolas, digiriéndolas y liberando sus componentes en el citosol. Este
proceso se denomina autofagia.

La célula toma materiales del exterior celular y son internalizados mediante

endocitosis por la membrana plasmática, lo que forma un fagosoma. El lisosoma se
une al fagosoma y degrada las sustancias del fagosoma. Una vez hidrolizadas las
moléculas utilizables pasan al interior de la célula y lo que no es necesario para la
célula se desecha por exocitosis
 LISOSOMAS

[Link]
 PEROXISOMAS

Los peroxisomas (o microcuerpos) son cuerpos con membrana,

esféricos. Tienen un número de enzimas metabólicamente
importante, en particular la enzima catalasa y peroxidasa.

La principal función del peroxisoma es destoxificar a la célula ya

que cataboliza la degradación del peróxido de hidrógeno (H2O2) y
radicales libres mismos que dañan a muchos componentes
celulares.
PEROXISOMAS

[Link]
 VACUOLAS
La vacuola es un saco de fluidos rodeado de una membrana. En la
célula vegetal, la vacuola es una sola y de tamaño mayor; en cambio,
en la célula animal, son varias y de tamaño reducido. La membrana
que la rodea se denomina tonoplasto. La vacuola de la célula vegetal
tiene una solución de sales minerales azúcares, aminoácidos y
algunos pigmentos como antocianinas.

La vacuola vegetal almacena diversos compuestos:

1.- Es el almacén temporal de azúcares y aminoácidos.
2.- La antocianina es el pigmento que da color a los pétalos.
3.- Generalmente poseen enzimas y pueden tomar la función de
los lisosomas

En la célula animal, la vacuola funciona como almacén de proteínas.

Además, puede ser usada para el proceso de endocitosis y exocitosis.
VACUOLAS

[Link]
 CLOROPLASTOS

Los cloroplastos son los organélos celulares de las plantas en donde se

realiza la fotosíntesis. Están limitados por una envoltura formada por dos
membranas, los tilacoides, estromas y contiene todas las moléculas
necesarias para convertir la energía luminosa en energía química.

Los cloroplastos es el lugar donde se realiza la fotosíntesis. Existen 2

fases que se llevan a cabo en compartimentos distintos:

Fase luminosa.- Se lleva a cabo en los tilacoides, es la responsable de

la conversión dela energía lumínica en energía química (ATP y de la
generación del poder reductor (NADPH).
Fase oscura.- Se lleva a cabo en el estroma y es responsable de la
fijación del CO2, mediante el ciclo de Calvin.
CLOROPLASTOS

[Link]
 NÚCLEO
El núcleo celular es el organélo que contiene el material, además de la
maquinaria necesaria para la replicación y transcripción del material
genético. La función del núcleo es dirigir la actividad celular ya quedirige
el desarrollo y funcionamiento de la célula. Ademas,

Los principales elementos estructurales son:

La envoltura nuclear, que corresponde a una doble membrana que
lo encierra y separa del citoplasma celular.
La lámina nuclear, que es una red de filamentos intermedios que dan
soporte mecánico igual que el citoesqueleto en toda la célula.
Los poros nucleares, los cuales permitir el movimiento de moléculas
a través de la envoltura.

Nucléolo:- Es una parte del núcleo considerada como un organélo. La

función principal del nucléolo es la producción y ensamblaje de los
componentes ribosomales.
NÚCLEO

[Link]
 Membrana Nuclear

Es una doble membrana con poros que regula el paso de sustancias.

Crea y mantiene una estructura tridimensional que conforma el entorno

donde el ADN se organiza en los cromosomas, se expresa y replica.

Consiste en dos membranas (interna y externa) que periódicamente se unen

definiendo poros, que regulan selectivamente la entrada y salida del núcleo.
Lámina Nuclear
Red de filamentos intermedios
ubicada por debajo de la
membrana interna de la envoltura
nuclear (que mira hacia el
nucleoplasma).
Rodea al núcleo, excepto en las
regiones de los poros nucleares.
Su función es la de estabilizar la
envoltura nuclear.

[Link]
 Poros Nucleares
Estructura protéica embebida en la
envoltura nuclear.

Vía mediante la cual se da el

transporte de proteínas y ARN entre
el núcleo y el citoplasma.
Complejo multiprotéico de  120 kDa.

Evita el paso de partículas mayores a

9 nm. Solo permite el paso de
partículas mayores con una señal de
exportación nuclear.

[Link]
port-via-nuclear-pores
/
Nucleolo
Se encuentra los núcleos de
células con núcleo verdadero, a
excepción de ciertos
espermatozoides y núcleos de
anfibios.
Estas estructuras se encargan
de la síntesis de ARN
ribosomal.
Son cuerpos densos, no están
delimitados por membranas y
aparecen y desaparecen
durante la división celular.

[Link]
 Cromatina
Heterocromatina: Forma condensada de
la cromatina, no activa. Se puede
observar abundante heterocromatina en
células en reposo o de reserva.
Se considera transcripcionalmente
inactiva.

Eucromatina: se presenta como una

trama delicada por que las regiones de
ADN que deben ser transcritas o
duplicadas deben primero desenrollarse
antes de que el código genético pueda
ser leído. Es mas abundante en las
células activas (que están
transcribiendo).

[Link]
 Cromatina
Conjunto de ADN, Histonas y proteínas
No-Histónicas que se encuentran ubicadas
en el núcleo de la célula eucariótica.

Para que la cromatina sea funcional debe

estar EXTENDIDA, ya que condensada no
es activa.

Durante la división celular, la cromatina se

condensa, espiralizándose para formar
cromosomas. Al terminar la división
celular, la cromatina se desespiraliza en
mayor o menor medida.

Alberts B, Jhonson AD, Lewis J, Morgan D, Raff M, Roberts K, Walter P. 2014. Molecular Biology of
the Cell. Sixh edition. Garland Science Taylor & Francis Group.
 Ciclo Celular
Conjunto de eventos celulares que culmina
en el crecimiento de la célula y la
separación de esta en dos células hijas.

Se compone de 4 diferentes fases:

G1 ó Gap1 (Intervalo 1)
S, que representa síntesis (replicación del
DNA)
G2 ó Gap2 (Intervalo 2)
M, que significa mitosis, aquí se da la
división celular.

[Link]
 Mitosis
En esta etapa del ciclo celular sucede la división nuclear
y citocinesis.

Se producen 2 células hijas idénticas al llevarse a cabo

sus 5 fases:

Profase, Prometafase, Metafase, Anafase y Telofase.

 Mitosis
PROFASE.- La cromatina se empieza a condensar y se observa en el
microscopio como cromosomas.

Los centriolos se mueven a polos opuestos y se forma el uso mitótico.

Se disuelve la membrana nuclear desaparece y el nucleolo desaparece.

Los microtúbulos se adhieren a los centrómeros y comienzan a moverse

los cromosomas.

[Link]
 Mitosis
METAFASE.- Los cromosomas se
alinean a lo largo del medio celular.
La organización permite que cada una
de las futuras células hijas posean
una copia de cada cromosoma.

ANAFASE.- Los pares de cromosomas

se separan y se mueven a los lados
opuestos de la célula, hacia los
cinetocoros.

[Link]
[Link]
 Mitosis
TELOFASE.- Las cromátidas llegan a los polos de la célula.

Se forman nuevas membranas nucleares.

Los cromosomas se dispersan y nuevamente no son visibles al

microscopio óptico.

El huso se dispersa y se da la citocinesis.

[Link]
 Citocinesis
Un anillo fibroso compuesto de actina se coloca alrededor del
centro de la célula y se contrae

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[Link]/es/contenidos/cursos/Citometria/tema13/te
ma13_2_mitosis/[Link]
Técnicas para el Estudio de la
Biología Celular
 Microscopía
Deriva del griego: Micros, pequeño y
Scopen, ver.
Conjunto de técnicas e instrumentos que
permiten aumentar la imagen de un objeto
pequeño.
Consta básicamente de: Sistema de
iluminación, que permite visualizar el objeto y
de un Sistema de Lentes, que permite
aumentar la imagen del objeto observado.

Invención del microscópio compuesto: por Hans y Zacarías Jansen en

1590 (hasta 150X).
Anthony van Leeuwnhöek construyó sus propios microscopios
compuestos y se le considera el padre de la microscopía.
 Tipos de Microscopía
Microscopía óptica normal (de campo
brillante).- Se colorea el material con
colorantes que aumentan el contraste y
muestran detalles no visibles sin ellos.

Microscopía de campo brillante.- El

material se observa si coloración. La luz
pasa directamente y se observan detalles
que están coloreados naturalmente.
 Tipos de Microscopía
Microscopía de campo oscuro.- Utiliza una
luz muy intensa en forma de un cono hueco
concentrado sobre el espécimen. Las
porciones claras del espécimen aparecen
como un fondo oscuro y los objetos
minúsculos se observan brillantes sobre el
fondo.
Se usa para observar muestras sin
manchas, invisibles con iluminación normal.
 Tipos de Microscopía
Microscopía de contraste de fase.- Se usa para
aumentar el contraste entre las partes claras y oscuras
de una célula, normalmente se observan células aisladas
vivas, es ampliamente utilizado en biología y medicina.

Normarski (Microscopía diferencia de

contraste de interferencia, DIC).- Se utiliza
para la observación de relieves celulares, es el
método utilizado para fertilización in-vitro. Se usa
cuando el especimen es muy grueso para utilizar
contraste de fase.
 FLUORESCENC
IA
Un fluorocromo es una  molécula química que absorbe la luz a una
determinada longitud de onda (ENERGIA ) energía de excitación y
emite a una longitud superior (MENOR ENERGIA) 

Interacciona con la luz de excitación procedente de el láser.

Se utiliza unido a anticuerpos específicos (monoclonales) para

antígenos de la célula. La cantidad de fluorescencia con la cual una
célula se tiñe es proporcional a la cantidad de sitios de unión.
 Tipos de Microscopía:
Microscopía de Fluorescencia.- Una
sustancia natural (componente de la
misma célula) o un colorante
fluorescente aplicado es estimulado por
un haz de luz, emitiendo parte de la luz
absorbida como rayos luminosos
(fluorescencia).

El Microscopio de Fluorescencia posee

una lámpara especial que emite luz
excitadora de los fluorocromos
(colorantes) y posee un filtro que
permite el paso de la luz emitida por el
fluorocromo.
 Tipos de Microscopía:

Microscopía confocal.- Permite

obtener imágenes tridimencionales de las
células.
Se basa en el mismo principio que la
microscopía de fluorescencia pero se usan 2
diafragmas confocales uno antes y otro
después de la muestra.
Un láser se incide sobre la muestra y la va
barriendo plano a plano, creando muchas
imágenes bidimencionales que mediante un
software se procesa y se genera una imagen
en 3D del objeto.
 Tipos de Microscopía:

Microscopía Electrónica.-
Microscopio electrónico.- Diseñado por los
alemanes E. Rusk ay M Knoll en 1931. (premio
Novel de física a E. Ruska en 1986)

Utiliza a electrones como sonda (generados por

una lámpara de Tungsteno) para analizar
materiales y/o especímenes biológicos. [Link]

Tipos de microscopia electrónica:

TEM.- Microscopía Electrónica de Transmisión.
SEM.- Microscopía Electrónica de Barrido.

[Link]
[Link]
CeJ4nIgwSfqIHIAw&ved=0CAYQ_AUoAQ&biw=1920&bih=979#q=microscopia+electronica+de+barrido+mitocondria&tbm=isch&facrc=_&imgdii=_&imgrc=ohe1KErn1luKgM%253A%3BFehl70ge9pLPiM%3Bhttp%253A%252F
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 Citometría de flujo (CMF)
Es una técnica de análisis
celular multiparamétrico.
Se basa en pasar una
suspensión de células
(partículas) alineadas una
tras otra por delante de un
haz de láser focalizado.
Permite la medida
simultánea de múltiples
características físicas en
una sola célula, a una
velocidad de 500 a 4000
células por segundo.
 Citometría de flujo (CMF)
Hematología: tipificación y conteo de células , reticulocitos y
análisis de medula ósea.

Farmacología: Estudios de cinética celular.

Inmunología: Subpoblaciones de linfocitos ,tipaje tisular

Oncología: Diagnóstico y pronóstico, monitores de tratamientos

Microbiología: Diagnóstico bacteriano y vírico, estudios de

sensibilidad a los antibióticos

Genética: Cariotipo y diagnóstico de portador y diagnóstico

prenatal.
 Fijación y Coloración

Fijación
Proceso mediante el cual los elementos constitutivos de las células, son fijados
en su estado físico y parcialmente en su estado químico, lo cual permite
resistir el tratamiento sucesivo sin que ocurra pérdida, distorsión o
descomposición significativa
Consiste en sumergir el tejido u órgano en compuestos químicos denominados
fijadores.
Fijadores simples: formaldehído, cloruro de mercurio, ácido pícrico, alcohol
etílico, ácido tricloroacético, acetona, formalina ó el glutaraldehído
Fijadores compuestos: Ejemplos: Solución de Bouin, que contiene ácido
pícrico, formalina, ácido acético y agua. Solución de Zenker, que contiene
formalina, dicromato de potasio, cloruro de mercurio y agua.
Fijadores físicos: desecación, calor seco, calor húmedo, frío, congelación.
 Fijación y Coloración
Cualidades de un fijador ideal:

Actuar con rapidez, fijando a las células antes de que se inicien los fenómenos
pre-mortem y post-mortem (autólisis, fragmentación, desintegración, etc.).

Poseer alto poder de penetración para asegurar la fijación correcta hasta las
porciones profundas del espécimen.

Conservar, en la medida de lo posible, los detalles estructurales en un patrón

morfológico similar al que presentaban in vivo.

Permitir o favorecer la aplicación de los procedimientos requeridos para su

observación: procesamiento, inclusión en parafina, corte, tinción y observación,
así como la realización de técnicas histológicas, histoquímicas o inmuno-
histoquímicas específicas.  

Impedir la generación de estructuras artificiales (artificios y artefactos).

No generar retracción excesiva de los tejidos ni volverlos friables o quebradizos.

Ser económico, estable, con baja toxicidad y de fácil manejo.

 Fijación y Coloración
Coloración:
Combinación de fenómenos físicos y químicos de absorción.
Los fenómenos físicos de absorción, capilaridad y ósmosis participan en cierto
grado.
La afinidad de colorantes básicos por los tejidos ácidos y viceversa indican que
hay reacción química.
Colorantes.- compuestos mediante los cuales se colorean células y/o tejidos.
Poseen 3 componentes: esqueleto incoloro, al cual se unen 2 radicales uno que
aporta el color (cromóforo) y otro que posibilita la interacción con el tejido
(anxocromos).
 Clasificación de los Colorantes

Según la naturaleza química del cromóforo, los colorantes se clasifican en:

Nitrosos, ozoicos, derivados de la antroquinona, derivados de la acridina,
derivados de iminas quinónicas, derivados de diferrilmetano y triferrilmetano,
derviados del xanteno y derivados de las talocianinas.

Según la naturaleza química del auxocromo, los colorantes se clasifican en:

Ácidos, básicos, neutros e indiferentes.

Ortocromasia.- Cuando el colorante unido al tejido

tiene el mismo color que en la solución
Metacromasia.- Cuando el colorante se une al
tejido y refleja un color diferente al que tiene en
solución. Ej. Azul de Toloudina se observa púrpura
al unirse a ciertos gránulos de mastocitos.
Tinciones
La gran mayoría de los tejidos y
microorganismos son incoloros, por lo que
es necesario teñirlos para apreciar su
morfología.

Se basan en el uso de colorantes.

Una de las mas conocidas en histología es

la de Hematoxilina-eosina.
Sección de un glomérulo de un riñón de
mamífero obtenida a partir de una inclusión en
parafina y teñido con hematoxilina-eosina. Los
núcleos aparecen de color violáceo
(hemtoxilina) y el citoplasma de color rosado
(eosina).
 Tarea:

PCR
RT-PCR
Y PCR en tiempo real

En que consisten y para que

sirven estas metodologías???
 Se han diseñado protocolos para aislar Métodos de aislamientos de
células y obtener poblaciones celulares células para su cultivo
homogéneas, que luego pueden ser
incluso mantenidas y multiplicadas in-
Cultivo Celular

1. La centrifugación, que permite separar

vitro (“en vidrio” = en a las células por tamaño.
recipientes especiales, en el 2. La capacidad de adherencia al vidrio o
laboratorio). al plástico.
3. La unión a ciertos anticuerpos
específicos que se adhieren a sustancias
Los cultivos celulares son
particulares (p. e. plástico, imanes, etc.)
esenciales en la investigación científica, 4. La unión a ciertos anticuerpos
ya que permiten estudiar los procesos acoplados a
que ocurren en las células, y en diversas colorantes fluorescentes
aplicaciones de la biotecnología, como 5. La disección de un grupo de células a
la producción de moléculas de interés partir de una
industrial, ingeniería de tejidos, etc. sección de tejido

[Link]
 Tipos de Cultivos

Cultivos primarios

Cultivos preparados directamente a partir de un tejido u órgano.

Cultivo Celular

En estos cultivos las células están vivas, conservan sus características originales
y su proliferación es limitada.

Pueden ser removidas del recipiente de cultivo para formar cultivos secundarios.

Cultivos secundarios

En estas condiciones las células suelen multiplicarse hasta cubrir la superficie

del recipiente de cultivo, formando una monocapa (capa de una célula de
espesor).

Pueden subcultivarse durante semanas o meses.

En este estadío, las células frecuentemente mostrarán distintas propiedades

según su origen.

[Link]
 Tipos de Cultivos

Cultivos continuos o líneas celulares

La mayoría de las células de los vertebrados dejan de dividirse luego de un
determinado número de divisiones en cultivo, por un proceso llamado
senescencia celular. Sin embargo,
Cultivo Celular

existen protocolos que permiten la

inmortalización de los cultivos.
Cultivo Celular

[Link]
 La membrana celular
Funciones:

• Envuelve a la célula
• Define límites
• Diferencias entre contenido-entorno

• Contiene:
• Proteínas
• Actúan como sensores señales
externas (receptores)
• Célula cambia respuesta a
indicaciones ambientales
• Transfiere información
• Moléculas lipídicas
 La membrana celular
“Estructuras dinámicas, fluidas con moléculas capaces de
desplazarse en el plano de la membrana”

• Moléculas lipídicas: Doble capa 5 nm grosor

• Bicapa lipídica
• Estructura básica de la
membrana
• Barrera impermeable
• Moléculas proteicas que
atraviesan la membrana

https://
[Link]/photo_78085856_vector-de-membrana-celular-
 Bicapa lipídica
Base universal de la estructura de membrana celular
 Naturaleza de los fosfolípidos: ensamblaje espontáneo

Proteína
50%

Membrana Extremo
celular hidrofílico
Lípidos Todos (polar)
50% anfipáticos
Extremo
hidrofóbico
(no polar)
Mas abundantes:
fosfolípidos
 Fosfolípidos (FL)

Ácidos Grasos de 14 a 24 átomos de C

Moléculas Anfipáticas: Formación de
bicapa lipídica
Las moléculas anfipáticas
buscan estructura estable
energéticamente favorable:

Liposomas
Bicapas lipídicas en forma de
vesículas esféricas.
(Autosellado)

Micelas
Monocapa lipídica en forma de
vesículas esféricas.

[Link]
 Bicapa lipídica: Fluido Bidimensional
Las moléculas lipídicas pueden difundir libremente dentro de
las bicapas lipídicas.

Flip-Flop: Migración del FL de una monocapa a otra.

Movimiento lateral: Intercambio de lugar con moléculas vecinas

de la misma monocapa

[Link]
Fosfolípidos en la membrana
Diferentes clases de fosfolípidos

• Fosfatidiletanolamina
• Fosfatidilserina
• Fosfatidilcolina
• Esfingomielina

Diferentes tamaños y
composición, ¿para que?

Para que las proteínas de

membrana interactúen
con ellos
[Link]
 Asimetría Bicapa Lipídica

 Composición lipídica entre monocapas: diferente.

 Generada y mantenida por translocadores de fosfolípidos.
 Importante funcionalmente:
• Unión Proteínas Citosólicas: Cabeza de lípido específico
• Modificación de lípidos para unión de proteínas
• Distinción de células vivas o muertas: translocación de
fosfatidilserina .
 Microdominios lipídicos
 Transición
de fase temporal en la bicapa lipídica en la que se
concentran esfingolípidos y colesterol.
 Características:

 Mas gruesos (cadenas hidrofóbicas son mas largas).

 Acomodan ciertas proteinas de membrana.
 Cadenas hidrocarbonadas interactúan entre ellas.

[Link]
Glucolípidos en la membrana
 Lípido
• Glucolípidos mas complejos:
+ Carbohidrato
 Puente de Hidrogeno, fuerzas de Van der
Waals
 Aparato de Golgi

• Distribución asimétrica.
• Localización: Monocapa no citosólica,
microdominios lipídicos.

• Funciones:
• Proteger condiciones adversas (pH
bajo, enzimas degradativas).
• Procesos de reconocimiento celular
(lectinas).
¿Qué es Fluidez de la Membrana?

Se refiere a la viscosidad de la
bicapa lipídica
Determinantes de la Fluidez de la
Membrana

Composició Temperatura
n

Fluidez
Fluidez de membrana

Una cabeza polar

No dobles
enlaces
(saturada)
FL
2 colas
+
hidrocarbonadas
hidrofóbicas Curvatura en Empaquetamien
1 o mas dobles la cadena to de FL
enlaces “cis”
(insaturada)

Fluidez de
membrana
Fluidez de la membrana:
Composición
 Además de FL, en la membrana hay:
• Glucolípidos
• Diferentes clases de fosfolípidos
• Colesterol (1:1): Refuerza el carácter de ‘Barrera Permeable’
PROTEINAS DE
MEMBRANA
Generalidades

 Ayudan a desempeñar la mayoría de las funciones de la membrana.

 Representan hasta el 50% de la masa de la membrana.
 ¿Qué hay mas, lípidos o proteínas?

• Tienen sus oligosacáridos hacia el exterior de la

célula
Funciones de Proteínas de membrana
celular
 Transporte a través de membrana

• Catálisis de reacciones asociadas a membrana

• Eslabones estructurales
• Citoesqueleto con matriz extracelular

• Receptores: reciben y transducen señales

• Célula necesita proteínas para funcionar en

interaccionar con su entorno
Proteínas asociadas a la Bicapa

Proteínas en la
Membrana

Transmembrana Periféricas

Paso único Paso Múltiple

Proteínas Transmembrana
Transmembrana:
Atraviesan membrana

Paso único: Paso múltiple:

Cruza una Cruza varias veces
vez

Características:
Hélice α • Anfipáticas
• Unión covalente
Lámina β con lípidos
(Barril β)
[Link]
Proteínas Periféricas
Periféricas:
Unidas solo a una cara de la
membrana

Inclusión parcial: hélices α

anfipáticas

Interacción covalentes y no
covalentes con lípidos

Interacción con
oligosacárido de
fosfatidilinositol

Interacción no covalente
con proteínas de membrana [Link]
Movimiento de las proteínas

Movimiento de proteínas en
membrana

Flip- Flop: NO sucede

Difusión rotacional: Giran en eje

perpendicular a la membrana

Difusión lateral: Se
desplazan lateralmente
INTERCAMBIO DE LA
CÉLULA CON EL MEDIO
EXTERIOR
Objetivos
Que el alumno comprenda:

 Que es difusión a través de la membrana plasmática.

El papel de las proteínas en el transporte a través de
membrana.
Los procesos de endocitosis y exocitosis, y el
papel de las microvellosidades.
 Paso de Sustancias a través de la
Membrana

Por Difusión, a favor de un gradiente de concentración.

Transporte Activo: en contra del gradiente de concentración.

En Vesículas de transporte: Formación de vesículas. Endocitosis y

Exocitosis.
Ejemplos de sustancias que utilizan este sistema de transporte están: O2, CO2,
solutos liposolubles de peso molecular bajo: urea, glicerol, etc.

[Link]
Ósmosis es una clase especial de difusión que se define como "el flujo neto de
agua que atraviesa una membrana semipermeable que separa dos compartimentos
acuosos".

En el caso de soluciones intra y extracelular el agua se moverá

desde la solución que presente una menor concentración (Solución
hiposmótica) a la que tenga mayor concentración (Solución
hiperosmótica).

La presión hidrostática necesaria para impedir la ósmosis es denominada:

Presión Osmótica
Difusión a través de membrana
¿Quiénes difunden?
Tamaño
Polaridad
molecular

Pequeño No polar

Pequeño Polar sin carga

Grandes Polares sin carga

¿Las moléculas polares tienen que pasar la
membrana?

¡Sí!
Enfermedades como cistinuria
¿Cómo le hacen las moléculas polares
cargadas para pasar a través de la
membrana?

¡Con proteínas transportadoras!

Proteínas de Transporte: Clases

¿Que transportan?
• Moléculas polares como:
• Iones, carbohidratos, aa,
metabolitos celulares 2 clases
• Pueden transportar uno o mas al
mismo tiempo
Proteínas
¿Cómo son? transportadoras de Canales
• Multipaso membrana.

Poros hidrofílicos
que atraviesan la
Permeasas
membrana
Proteínas de Transporte: Clases

 Proteína transportadora • Proteína de canal

Sufren cambios conformacionales Poros hidrofílicos abiertos que
reversibles cuando se unen al soluto que será atraviesan membrana
transportado
Expone el soluto hacia una cara de la https://
membrana primero y luego hacia la otra [Link]/bitstream/123456789/627
6/1/[Link]%20celular%[Link]
Tipos de Transporte Transmembral

Tipos de transporte

Pasivo
Activo
(Difusión facilitada)

A favor de Transportador En contra de

Canales y
gradiente de (bomba) gradiente de
transporta-
concentración y acoplado a concentración y
dores
eléctrico energía (ATP) eléctrico
Tipos de Transporte Transmembral

[Link]
¿Qué es gradiente de concentración y
gradiente eléctrico?
 Gradiente de concentración
Diferencia en la concentración de solutos de la misma especie
en ambos lados de una membrana semipermeable

En contra del gradiente.

“Cuesta arriba”

A favor del gradiente.

“Cuesta abajo”

[Link]
Gradiente eléctrico:
Diferenciaen la cantidad de cargas a ambos lados de una
membrana semipermeable

¿Que hay mas, (+) ó (-)? ¿Que hay mas, (+) ó (-)?

[Link]
TRANSPORTE
ACTIVO
¿Qué es transporte activo?
 El que utiliza Transportador (bomba) acoplado a energía (ATP).

Transporte activo según el

Transporte activo según su
número de moléculas que se
fuentes de Energía
transportan
• Bombas impulsadas por • Uniporte
ATP • Simporte
• Bombas impulsadas por Luz • Antiporte
• Transportadores acoplados
Fuente de Energía
• Bombas impulsadas por ATP:
• Acoplan el transporte en contra de gradiente (concentración) a la hidrólisis
de ATP.

• Bombas impulsadas por Luz:

• Acoplan el transporte en contra de gradiente (concentración) a la entrada
de energía luminosa (bacterias).

• Transporte Acoplado:
• Transportan un soluto en contra de su gradiente y otro soluto a favor de
su gradiente al mismo tiempo.
Número de moléculas
• Uniportadores:
• Sólo transportan un soluto de un lado a otro de la membrana a una velocidad
determinada.
• Simportadores
• Transfieren un segundo soluto en la misma dirección que el primero.

• Antiportadores
• Transfieren un segundo soluto en dirección contraria al primero (intercambio).

[Link]
 Exterior célula: 10-20 veces mas sodio que adentro
Adentro célula: 10-20 veces mas potasio que exterior
¿Quién lo mantiene?

¡Bomba Sodio-Potasio!
Bomba Sodio-Potasio

• ¿Cómo funciona?

• Transportador de
intercambio

• Bombea Sodio (Na) hacia

afuera de la célula y
Potasio (K) hacia adentro

• Utilizando ATP

[Link]
Bomba Na/K en la Neurona

• Durante la transmisión de
un impulso nervioso:
• Sale K de adentro de la
célula y
• Entra Na a la célula

• Bomba Na/K mantiene la

concentración de K y Na.

http://
[Link]/2008/08/potencial-de-membrana-en-reposo
.html
CANALES IÓNICOS
Generalidades
 Forman poros hidrofílicos a
través de membrana
 Estrechos y selectivos:
 Abren solo para transportar
ciertos iones (Na, K, Ca, Cl)
 Transporte pasivo

A favor del gradiente de

concentración

• Células nerviosas:
especializadas en uso de
canales iónicos para recibir,
conducir y transmitir señales

[Link]
Propiedades
1. Selectividad iónica

• Solo algunos iones pueden pasar

• ¿Por qué?

• Por que el tamaño y la carga del

ion deben ser compatibles con el
canal y deben pasar un Filtro de
Selectividad.

• Filtro de selectividad: Los iones deben

estar ‘puros’. Sin moléculas de agua

[Link]
Propiedades
2. No están abiertos continuamente.

• Tienen ‘Puertas’
• ¿Cómo se abren?
• Estímulos!
Canales regulados
por Voltaje

Canales regulados
Estímulos
Mecánicamente

Extracelulares
Canales regulados
por Ligandos
Intracelulares
Estímulos
Voltaje: Cambios en el voltaje (gradiente eléctrico) a
través de la membrana
Mecánicos: Generados por estrés mecánico.

Alberts B, Jhonson AD, Lewis J, Morgan D, Raff M, Roberts K, Walter P. 2014. Molecular Biology of
the Cell. Sixh edition. Garland Science Taylor & Francis Group.
Estímulos

Ligandos. Pueden ser:

Extracelulares: Provenientes del exterior celular. Son

transmisores, como los neurotransmisores.

Intracelulares: Provenientes del interior celular. Como los

iones o nucleótidos.
Endocitosis
Se refiere a la entrada de material extracelular al
interior celular en vesículas.
2. Hay una ‘invaginación’ de la membrana,
y posteriormente un ‘estrangulamiento’

1. Sucede en pequeñas
depresiones de la membrana
celular

3. Se forma la vesícula

https://
[Link]/articulos/envoltura-celular/membrana-plasmatica-endocitosis-fa
Vía endocítica

Endocitosis mediada
por receptor
Endocitosis

Pinocitosis Ingestión de fluidos y solutos pequeños en

(endocitosis por vesículas pequeñas (100 nm)
volumen)

Ingestión de partículas grandes en vesículas grandes (250 nm) como microorganismos y restos
celulares
Ingestión de microorganismos infecciosos
Fagocitosis Ingestión de celulas moribundas o muertas por apoptosis
Fagocitosis ¿cómo sucede?
 Partícula a fagocitar esta
recubierta por Anticuerpos
 Ac se unen a su receptor en la
célula fagocitica
 La célula fagocítica extiende
sus pseudópodos que engullen a
la partícula
 Forma Fagosoma
 Fagosoma se une a Lisosoma
 Se forma un Fagolisosoma

[Link]
 La célula engulle fluido extracelular, conteniendo carbohidratos y/o proteínas.

2 Tipos

Pinocitosis
simple (‘a Mediada por
granel’) receptores

Vesícula
Vesículas
Caveola
revestidas
(Revestida de
de Clatrina
Caveolina)

Microdominios
lipídicos
Pinocitosis simple (a granel)
 Lacélula endocita fluidos y solutos pequeños en vesículas pequeñas, sin
reconocimiento previo (‘bebida celular’)

[Link]
En general, ¿que sucede en la endocitosis?

1. Una molécula es endocitada en

una vesícula

2. Se fusiona un endosoma
temprano de forma irregular

3. Algunas moléculas son

seleccionadas para dirigirse al
endosoma tardío (pH 6, empieza
la digestión)
4. Se fusiona con lisosoma:
• Se alcanza pH 5.
• Proteínas de membrana
que vienen en la vesícula
del RTG se recuperan.
http://
[Link]/2008/07/endosomas-tem
Endocitosis Mediada por Receptores
 Sucedeen zonas especializadas revestidas de proteína Clatrina o
Claveolina.

Una zona de la membrana

esta revestida

Invaginación al interior de la
célula

Formación de vesículas
revestida (claveolina,
clatrina)

Pérdida del recubrimiento

Fusión con el endosoma

temprano
[Link]