Biomateriales
MC. Carlos Eduardo Belman Flores
Unidad 1: Introducción a los biomateriales
1. Introducción 1. Estructura y propiedades
1. Caracterización
1. ¿Qué son los 1. Caracterización física y química. biológica
biomateriales?
1. Infrarrojo por transformada de Fourier (FTIR) 1. Biocompatibilidad
2. Desarrollo histórico,
utilización actual y su 2. Pruebas in vivo
2. Resonancia magnética nuclear de protón
futuro previsible
(RMN-1H).
3. Pruebas in vitro
3. Normas de clasificación
3. Espectroscopía UV-Vis
y marco regulatorio
4. Caracterización mecánica: Tensión y
4. I+D en biomateriales: la
compresión.
transformación de un
material
5. Caracterización térmica
Actividad 0: En
una palabra
● De manera individual, responde el formulario que
aparece en la siguiente liga:
https://forms.gle/i6SE3v4hvC9cgNcz8
● Como evidencia de la actividad, subirás una captura
de pantalla o foto de la confirmación del envío.
● Finalmente, comparte con la clase tus
observaciones e ideas.
● Valor: 2 puntos
Entonces, qué son?
● A) Material utilizado en un dispositivo médico, pensado para interactuar
mutuamente con sistemas biológicos.
● B) Cualquier sustancia o combinación de sustancias de origen natural o
artificial que puede ser usada durante cierto tiempo como un todo o como
parte de un sistema que permite tratar, aumentar o reemplazar algún tejido,
órgano o función del cuerpo humano.
● C) Material sintético empleado para reemplazar parte de un sistema vivo o
que está en íntimo contacto con fluidos biológicos.
● ¡Vota!
Biomaterial
A material designed to take a form that can
Material empleado en un dispositivo direct, through interactions with living
médico con el fin de interactuar con
systems, the course of any therapeutic or
sistemas biológicos.
diagnostic procedure.
Soc. Europea Biomat.
Chester, 1986 Zhang & Williams,
Chengdu, 2018
Actividad 1: Qué son los biomateriales
● Ingresa al sitio para escuchar o leer la nota y consultar el
artículo.
● Posteriormente, en binas, elaboren un mapa conceptual
acerca de los biomateriales: Definición, características,
evolución (generaciones), materiales utilizados, aplicaciones.
Finalicen la actividad escribiendo en conjunto una reflexión
sobre la el rol de un ingeniero(a) biomédico(a) en el
desarrollo de los biomateriales.
● Para finalizar subirás el mapa mental al espacio
correspondiente en la plataforma.
● Cabe señalar que el software que se utilice para el diseño de
los mapas el libre.
Evolución
Sustituir Reparar Regenerar
• Inertes: tolerables • Activos y • Estimular y simular
• CoCrMo, Alumina, degradables • Nanocompositos
PU • Ti, HA, PLA, PGA
i+D: De la idea a la realidad.
https://www.conicet.gov.ar/desarrollo-de-bio
materiales-para-ingenieria-de-tejidos/#:~:text
=Para%20que%20los%20biomateriales%20c
umplan,mec%C3%A1nicas%20del%20tejido
%20a%20reemplazar
Act 2. De regulación y legalidad
● De forma individual, realizar la lectura del documento proporcionado.
Posteriormente, elabora dos cuadros sinópticos:
○ El primero sobre los dispositivos médicos: la clasificación según la Ley General de Salud.
Incluye dos ejemplos para cada categoría.
○ El segundo, sobre los criterios de clasificación de dispositivos médicos para registrarlos.
● Finalmente, realiza un diagrama de bloques en donde presentes las etapas
que debe seguir un material para clasificar como dispositivo médico de
acuerdo al marco legal mexicano vigente.
● Valor: 6 puntos
Dispositivo Médico
Instrumento, aparato, utensilio,
máquina, incluido el software para
su funcionamiento, producto o
material implantable, agente de
diagnóstico, material, sustancia o
producto similar, para ser empleado,
solo o en combinación, directa o
indirectamente en seres humanos;
con alguna(s) finalidades de uso.
PROYECTO de Norma Oficial Mexicana PROY-NOM-241-
SSA1-2018, Buenas prácticas de fabricación de dispositivos
Clasificación (para efectos de registro)
Nivel de riesgo: según el tiempo de contacto con el organismo humano, el grado de
invasividad, si libera medicamentos para el paciente, si se utiliza combinado con
otro medicamento o dispositivo.
Clase I Clase II Clase III
• Menor riesgo: • Insumos conocidos • Insumos nuevos
completamente que pueden tener que se introducen al
evaluados. variaciones en su organismo, y que
• Generalmente no se elaboración o permanecen
introducen al cuerpo concentración. periodos mayores a
humano. • Se introducen al 30 días.
cuerpo humano • Avance médico
menos de 30 días. tecnológico:
innovación para la
producción y/o
diseño.
Act. 3: Conociendo las propiedades.
● En equipos colaborativos (4) integrantes: elegir una de las técnicas de
caracterización.
● Realizar una búsqueda documental de información que les permita:
○ Identificar el nombre de la técnica (¿qué es?)
○ El principio físico de operación (¿cómo funciona?)
○ En qué consiste el análisis (¿qué hace esa prueba?)
○ Información obtenida (¿qué datos me entrega? ¿cómo se ven? 2 ejemplos)
○ Relación con los biomateriales (¿para que me servirá?)
● Entrega: 14 de febrero.
Similares en apariencia, pero con diferente
respuesta biológica.
Biocompatibilidad
● Bio= vida compatibilidad= capacidad de estar con.
● “Capacidad que tiene un material de generar una
respuesta biológica aceptable durante el tiempo y
modo de contacto para una aplicación específica”
● Ausencia de rechazo: aceptación biológica, química
y mecánica.
● Seguridad para el uso
● La realización de estos ensayos del material, in-vitro
e in-vivo, requiere de un laboratorio
multidisciplinario
1 Evaluation and Testing
2 Animal Welfare Requirements
3 Tests for Genotoxicty, Carcinogenicity, and Reproductive Toxicity
4 Selection of Tests for Interactions with Blood
5 Tests for Cytotoxicity – In Vitro Methods
6 Tests for Local Effects after Implantation
Norma ISO 10993: 7 Ethylene Oxide Sterilization Residuals
8 Selection and Qualification of Reference Materials for Biological Test
indica los ensayos a 9 Framework for Identification & Quantification of Potential Degradation Products
realizar para evaluar 10 Test for Irritation and Sensitization
11 Test for Systemic Toxicity
dispositivos médicos.
12 Sample Preparation and Reference Materials
13 Identification and Quantification of Degradation Products from Polymers
Cualitativa o 14 Identification and Quantification of Degradation Products from Ceramics
Identification and Quantification of Degradation Products from Coated and
15
cuantitativamente Uncoated Metals and Alloys
16 Toxicokinetic Study Design for Degradation Products and Leachables
17 Establishment of Allowable Limits for Leachable Substances
18 Chemical Characterization of Materials*
19 Physicochemical, Mechanical and Morphological Characterization (Draft)
20 Principles and Methods for Immunotoxicology Testing of Medical Devices (Draft)
https://www.iso.org/ics/
11.100.20/x/p/1/u/0/w/0/d/0
Efectos biológicos a evaluar
Toxicidad
Citotoxicidad Sensibilización Irritación sistémica
aguda
Toxicidad Hemocompat Carcinogéne
Genotoxicidad
subcrónica ibilidad sis
Toxicidad
reproductiva y Implantación Pirogenicidad Degradación
del desarrollo
Cuáles debo de
realizar a mi
material? ●
Dependerá de:
Función
● Lugar de la aplicación
● Tiempo de contacto
● Clasificación
Electrodos
para ECG
Materiales:
PDMS
Ag/AgCl
Act 5 Modelando evaluaciones biológicas
● Elige dos dispositivos médicos o materiales para aplicaciones médicas que
sean de tu interés que se encuentren en el mercado o en desarrollo.
● En una tabla descriptiva, incluye información relevante: nombre, una
imagen, función que cumple, descripción como debe ser utilizado,
material(es) de los que está hecho, y la clasificación del dispositivo médico
con base en los criterios de la COFEPRIS).
● Con base en la información recabada, y haciendo uso de la tabla de ensayos
biológicos (ISO 10993), identifica qué características biológicas deberán
evaluarse para declararlo como un material biocompatible.
● Valor: 6 puntos
¿Cómo se evalúa la
biocompatibilidad?
Caracterización: técnicas,
procedimiento, análisis e interpretación
para describir la relación huésped-
material.
Proyección de los Evaluación de las
efectos interacciones en
biológicos en modelos
pequeña escala biológicos
y ambientes complejos.
controlados
Fuera: Condiciones Respuesta
simuladas generalizada de
los sistemas.
Predecir
Evidenciar
Evaluación in vitro
● Requieren cultivos celulares
Diferentes metodologías:
● Fluorométricas, colorimétricas y
quimioluminométricas
● Biología molecular
● Factores solubles
Tinción violeta
100 µL PBS
50 µL
agente de
tinción x 10
min
100 µL de
PBS (6x)
Morfología de las células BAOEC cultivadas en contacto directo con nanogeles P(NIPAM-co-MAA)-BIS Morfología de las células
6% a diferentes tiempos (1 mg/mL, tinción con cristal violeta, magnificación 10x). BAOEC (5 días, tinción con
cristal violeta, magnificación
400x).
Kim, H. et al (2015) Vascular Specialist International (31)2: 8:33-40.
29
Cultivos celulares (Cell culture)
● Conjunto de técnicas que permiten el mantenimiento de
las células in vitro, conservando al máximo sus
propiedades fisiológicas, bioquímicas y genéticas.
Requerimientos:
• Nutricionales
• Fisiológico
• Infraestructura
• Materiales
Citotoxicidad in vitro
Alteraciones en la célula: morfológica,
metabólica o del crecimiento.
Análisis cualitativo o cuantitativo.
● Ensayo: MTT, XTT, Resozurina,
Alamar Blue, LDH, etc…
● Metodologías: Reducción del
indicador colorimétrico por efecto
de la actividad metabólica en
células viables.
Cambio en la absorbancia
140
Ejemplo 120
● Películas de PU modificado: PU-Cat-HS 20
100
I. Catecol (Catprot)
% Viabilidad
II. Segmento duro (HS) 80
III. Segmento blando (SS)
60
● Con NPs: Plata y Cobre
40
Línea celular: Células troncales de
folículo dental humano (mesenquimales). 20
Experimental: 5x103 cel. + 200 mL
0
Control (+): Medio de cultivo Día 3 Día 7 Día 10
Incubación: 48 h (37 °C, 95% humedad Catprot HS SS Ag Cu)
y 5% CO2) → λ= 562 nm Viabilidad de células en contacto directo con películas de 5mm de PU a
diferentes tiempos.
Cómo calcular la viabilidad?
● Medir las absorbancias: UV-Vis
● Identificar los datos obtenidos: ¿qué datos obtuve?
● Promediar: ¿cuántas repeticiones se usaron?
● Convertir a porcentajes: aplicar fórmula
𝑉𝑖𝑎𝑏𝑖𝑙𝑖𝑑𝑎𝑑 ( % )=¿
● Graficar: uso de software
● Explicar: ¿qué significan esos números?
Datos
ISO 10993-5: Citotoxicidad
Línea celular: BAOEC
(endoteliales). Material 0.5 mg/mL a 72 h
Experimental: 1x1040 cel. + 1 Promedio S.D.
n1 n2 n3
mg/mL
C(-): DMSO 5% & C(+): Medio de 0 0.468 0.673 0.468 0.536 0.14
cultivo 0.3 0.611 0.632 0.611 0.618 0.01
Incubación: 4 h (37 °C, 5% CO2) →
0.5 0.579 0.445 0.579 0.534 0.09
λ= 570 nm
0.8 0.741 0.631 0.741 0.704 0.08
1 0.689 0.589 0.689 0.656 0.07
C+ 0.555 0.57 0.567 0.564
Azul Rosa
C- 0.01 0.001 0.001
Células
viables 0.004
Reducción del indicador colorimétrico por efecto de
la actividad metabólica en células viables
0.5 mg/mL a 72 h %Viabilidad
Prom SD Prom S.D.
n1 n2 n3
0.468 0.673 0.468 0.536 0.14
0 95.4 25.8
0.611 0.632 0.611 0.618 0.01
0.3 110.0 2.6
0.579 0.445 0.579 0.534 0.09
0.5 95.0 16.9
0.741 0.631 0.741 0.704 0.08
0.8 125.5 13.8
0.689 0.589 0.689 0.656 0.07
1 116.8 12.6
0.555 0.57 0.567
C+ 0.564
0.01 0.001 0.001 Relación NIPAM/MAA
C- 0.004
Viabilidad de células BAOEC cultivadas en contacto directo con 1 mg/mL
de nanogeles P(NIPAM-co-MAA)-BIS 6% a diferentes tiempos.
35
ISO 10993-4:
Hemocompatibilidad
Ensayo: hemólisis
Muestras: BIS 6% en 1 mg/ml
(Solución de eritrocitos 5%)
C(-): Solución salina (NaCl
0.9%).
C(+): Agua destilada.
Incubación: 1 h (37 °C, 5%
CO2) → λ= 570 nm
Hem ó li 𝑠𝑖𝑠 ( % ) =¿
Relación NIPAM/MAA
Actividad hemolítica de los nanogeles de P(NIPAM-co-MAA)-BIS 6%
36
Evaluación in vivo
Caso: Biocompatibility Testing Performed
on the P4HB Suture Fiber.
Odermatt, Erich et al (2012). MonoMax Suture: A New Long-Term Absorbable Monofilament Suture Made from Poly-4-Hydroxybutyrate. 2012. 10.1155/2012/216137.
Ensayos de citotoxicidad de los andamios con osteoblastos
Act 6. Ejercicio
Mitocondria
deshidrogenasa
Generación del cultivo primario de osteoblastos de rata wistar y determinación de la
viabilidad con los tres tipos de andamios [15].
