NOXAS I
SEMANA 9
PLAN DE CLASE
Género Vibrio
Género Campylobacter
Género Helicobacter
Vibrionaceae
Bacterias que habitan ambientes acuáticos
marinos y fluviales.
Mas de 34 especies, 13 son patógenas en
el hombre.
Asociados a infección gastrointestinal :
Vibrio cholerae O1, V. cholerae no O1 ,
V.
parahaemolyticus
V. fluvialis, V. furnissii, V. hollisae. V.
mimicus,
Asociado a infecciones extraintestinales:
Vibrio alginolyticus (otitis externa) , V.
vulnificus (heridas, septicemia) V. damsela,
V. metschnikovii, V. carchariae, V.
cincinatiensis.
Vibrio spp
Cortos
Rígidos
Gram-negativo
Flagelo simple
Bacilo curvos o en forma de coma
206 serogrupos
Vibrios halofílicos
• V. parahaemolyticus
• V. alginolyticus
• V. vulnificus
• V. mimicus
Vibrios No-halofílicos
• V. cholerae 01
• biotipo clásico
• biotipo El Tor
• V. cholerae no-01
Antígenos flagelares - ‘H’ – comunes a
muchos vibrios
Antígenos ‘O’ presentes sobre la pared
celular y son diferentes entre cepas
– ‘O’ le confiere lo liso a las colonias
Clasificación: Antígeno O1
Factores de virulencia
Toxinas y enzimas
- Endotoxina termo estable
- enterotoxina (exotoxina
[toxina del cólera CT])
- CT es antigénica y
farmacológicamente idéntica en todos
los serotipos y biotipos
Factor de permeabilidad vascular (FPV)
CT aumenta el factor de permeabilidad capilar
Mucinasa
Extrema descamación celular
Resistencia
Susceptible al calor, desecación y temperatura de
autoclave. En alto pH y medio salino sobrevive
por 1-3 días.
ElTor sobrevive períodos más largos que el tipo
clásico.
Diagnóstico de laboratorio
Muestras:
De pacientes
– Heces acuosas
De contactos y portadores
– Hisopados rectales
Microscopía directa
No es confiable
Preparación en fresco en sol. salina/campo oscuro
• Movimiento de dardos (shooting star)
Inmovilización con antisuero
Cultivo
Heces pueden ser cultivadas directamente
Medios de cultivo:
– Agar TCBS
– Agar sangre
– Agar Mac Conkey
Aislamiento de Vibrios patógenos
Crecen en medios alcalinos no acidos
Muestra fecal : APA con 1% NaCl (37°C, 6-15 horas)
Agar TCBS (37°C, 18-24 horas)
• Colonias sospechosas (color amarillo) : screening
V. cholerae O1 e identificación TSI, LIA (37°C, 18-24h).
Colonias amarillas en TCBS : V. cholerae, V.
alginolyticus,V. carchariae, V. cincinatiensis,
V. fluvialis, V. furnissii.
Colonias verdes en TCBS : V.
parahaemolyticus, V.
mimicus, V. vulnificus
Cultivo en TCBS
Vibrio
•
cholerae
Agar TCBS altamente diferencial y selectivo.
Colonias 2 a 4 mm Amarillas: fermentación de la
Sacarosa
• Redondas, lisas brillantes y Ligeramente
aplanadas.
• Inocular en Agar TSI, LIA y TSA.
• Bacilos Gram Negativos pequeños de 0.5-1.5-
3um
• Aerobio, desarrolla a 37°C .
• Tiempo de generación muy corto.
• Crece bien medios alcalinos ph 9.2.
• Se destruye a pH ácidos.
Pruebas bioquímicas
Principales pruebas
Voges Proskauer
Hemólisis
Polymyxin B
Fago tipificación
Prueba de VP
coloración rojiza después de adicionar
hidróxido de potasio a los cultivos de
ciertos microorganismos en medio con
glucosa.
Esta coloración se debe a la oxidación
del acetilmetil carbinol a diacetilo el cual
reacciona con la peptona del medio
para dar un color rojo.
Vibrio cholerae
Identificación serológica de V. cholerae O1
1.- Serogrupos de Vibrio cholerae O1
El serogrupo O1 se relaciona con el
cólera epidémico y pandémico.
2.- Serotipos de Vibrio cholerae O1:
3 serotipos Inaba, Ogawa, Hikojima
Profilaxia
Medidas generales
– Sanitización y purificación de agua
– Aislamiento de pacientes
Medidas específicas
Parenteral –Vacuna de bacterias
muertas (Igual número de Inaba y
Ogawa)
Profilaxia
Un estudio reciente sobre las vacunas
disponibles y sus efectos, llegaron a la
conclusión de que la vacuna preparada
de bacterias muertas (célula completa)
es relativamente efectiva y segura.
Provee protección hasta por dos años
después de la primera dosis y tres a
cuatro años con refuerzos anuales.
Tratamiento
Reemplazo de agua y electrolitos
perdidos
NaCl 3.5 g
KCl 1.5 g
Citrato de sodio 2.9 g
Glucosa 20 g
Todo en un litro de agua
Antibióticos: (Secundarios)
Tetraciclina, Eritromicina, Quinolonas,
azitromicina
Cólera
Enfermedad diarreica aguda
• Período de incubación 6 hrs a 3 días
• Fuentes de infección: heces, vómitos,
estados de portador
• Muerte puede ocurrir en 24 hrs
• Vómitos sin esfuerzo
• Heces acuosas profusas (agua de arroz)
• Rápida deshidratación
• Shock hipovolémico – pérdida de fluidos
• Acidosis metabólica – por pérdida de fluidos
• anuria
• 15 -20 litros de líquido son perdidos en un día
Cólera
Diarrea grave inducida por una
enterotoxina secretada por V. cholerae
Infección transmitida por el agua causada
por la ingestión de agua/alimentos
contaminados por copépodos infectados
por V. cholerae
Enteropatía enterotóxica
(diarrea no-invasiva)
Enfermedad epidémica importante
Endémica – problema localizado
/condiciones sanitarias muy pobres
Epidémica – en una región geográfica/
causada por la migración de personas
Pandémica- en la mayor parte del
munedo/han habido 7 pandemias
¿Qué hay en el nombre?
“el apelativo de cólera
probablemente viene del griego
que se refiere a una gotera en el
techo, comparando la pérdida de
agua cuando llueve con la que
ocurre en una persona
infectada.”
- Dr. Jean-Pierre Raufman
American Journal of Medicine
Areas afectadas por V.
Cholerae (2000)
Epidemia del cólera en América
Epidemia inicial:
Enero 1991
Agosto 1991
Febrero 1992
Marzo 1993
Transmisión
Alimentos y agua contaminados
Tratamiento inadecuado de aguas negras
Falta de tratamiento de aguas
Mariscos mal sanitizados
Transmisión por contacto es poco probable
Epidemias
Transmisión Feco-oral
Heces de personas infectadas contaminan el
suministro de agua
Diarrea hace fácil que las bacterias se
diseminen en condiciones insanas
Incubación
Pocas horas a 5 días
Promedio 1-3 días
Período de incubación más corto:
pH gástrico alto (uso de antiácidos)
Consumo de altas dosis de cólera
Efectos de la toxina
Inactiva función de GTPasa de receptores
acoplados a proteína-G en las células
intestinales
Proteínas G quedan activadas
Aumenta 100 veces el cAMP
Activación de los canales de iones
Flujo y excreción de iones y agua
Síntomas
2-3 días después del consumo de agua o
alimentos contaminados
Usualmente leve o sin síntomas
75% asintomáticos
20% enfermedad leve
2-5% severa
Vomitos
Cólicos
Diarrea acuosa (1L/hora)
Sin tratamiento, la muerte llega desde 18
horas a varios días
Consecuencias de
Deshidratación severa
Depleción del volumen
intravascular
Severa acidosis metabólica
Fallo renal y cardíaco
Ojos hundidos, turgencia de
la piel disminuida
Casi no se produce orina
GÉNERO
CAMPYLOBACTER
MORFOLOGÍA: bacilos en forma de
coma, Gram (-), móviles, capa S, no
esporulados.
No fermentadores,
la mayoría son
microaerófilos.
Obtienen energía de
aa o intermediarios
del ciclo tricarboxílico
IMPORTANCIA
ABORTOS E INFERTILIDAD
ENTERITIS
HEPATITIS
ALIMENTOS
FACTORES DE VIRULENCIA
Antígenos polisacáridos
termoestables
Antígenos A y B
Microcápsula (proteína S)
Campylobacter fetus
“ coli
“ concisus
“ curvus
“ gracilis
“ helveticus
“ hyoilei
“ hyointestinalis
“ jejuni
“ lanienae
“ lari
“ mucosalis
“ rectus
“ showae
“ sputorum
“ upsaliensis
ESPECIES DE MAYOR
INTERES
• Campylobacter fetus subespecie
fetus
• C fetus subesp venerealis
• C jejuni
• C mucosalis
• C hyointestinalis
DIAGNÓSTICO
Examen directo:
Coloración con carbolfucsina
Coloración de Ziehl Neelsen
Inmunofluorescencia directa
CULTIVO
Agar Sangre
Agar Brucella
Agar Columbia
Selectivos: polimixina B,
novobiocina, cicloheximida
INCUBACIÓN
Atmósfera con CO2
MORFOLOGÍA COLONIAL
Colonias pequeñas (1 mm),
redondas, ligeramente elevadas,
lisas y translúcidas (gota de rocío)
Algunas pigmentadas
TIPIFICACIÓN
Prueba de la catalasa
Producción de SH2
Pruebas de tolerancia:
glicina 1% y ClNa 3,5%
glucosa 8%, formato 1% y 1,5% y
bilis 2%
selenito de Na 0,1%
Sensibilidad al ácido nadilíxico (R)
Sensibilidad a la cefalotina (S)
Diagnóstico de la infección por
Helicobacter pylori
Métodos invasivos
Histología
Cultivo
Test rápido de ureasa
Técnicas moleculares
Métodos no invasivos
Prueba del aliento con urea marcada
Serología (Técnicas moleculares, Inmunoblot,
Inmunoenzimático)
Detección de antígenos en heces fecales
Métodos Invasivos
Todos estos métodos precisan de la
obtención de una muestra de la mucosa
gástrica mediante un gastroscopio en la que
se pone en evidencia la infección por
Helicobacter pylori. Dentro de las pruebas
invasivas, la histología, el cultivo y el test de
ureasa son las más utilizadas.
Histología
[Link]
m [Link].
com
Entre los métodos de tinción más utilizados en la
actualidad están la Hematoxilina y eosina, Giemsa y
Warthin- Starry, aunque también se han empleado las
tinciones inmunohistoquímicas.
NH2-CO-NH2 + H2O 2NH4 + CO2
urea ureasa Amonio y anhídrido
carbónico
