Bioquímica y fisiología del
cristalino
MIGUEL ALBERTO MONSALVE REYES
Temario
1. Biología Molecular
1. Proteínas cristalinas
2. Proteínas estructurales de membrana y proteínas del citoesqueleto
3. Incremento de proteínas insolubles en agua con la edad
2. Metabolismo de carbohidratos
3. Daño oxidativo y mecanismos protectores
4. Fisiología
1. Balance de agua y cationes
5. Acomodación y presbicia
Biología molecular PROTEÍNAS CRISTALINAS
Proteínas del
cristalino Doble de proteínas que otros tejidos
Fracción soluble en jóvenes es de 80%
Aumento de fracción insoluble con la
edad
Insolubles en
Solubles en agua
agua
Insolubles en
Solubles en urea
urea (Proteínas de
α - Cristalinas β, γ - Cristalinas (proteínas
membrana
esqueléticas)
celular)
Solubles
α - Cristalinas
1/3 de la masa proteica
Las más grandes del cristalino
600-800kDa
2 subunidades: αA y αB
(20 kDa c/u) que forman complejos de 30 subunidades aprox.
Unión con proteínas desnaturalizadas y previenen su agregación
Inhibir la completa desnaturalización e insolubilización de otras
cristalinas.
“Chaperonas”
β, γ – Cristalinas (solubles)
Proteínas β Proteínas γ
Oligómeros compuestos por polipéptidos que Las más pequeñas
conforman dímeros y complejos de alto orden <20 kDa
Codificados en 7 genes Codificada por 4 genes
23-32 kDa No se asocia con sus pares ni otras proteínas
Cromatografía de β:
βH (alto peso molecular)
βL (bajo peso molecular) Ambas proteinas y su estructura se han mantenido durante
cientos de millones de años en la evolución de los vertebrados.
Funciones diversas
PROTEÍNAS ESTRUCTURALES DE
Biología molecular MEMBRANA Y DEL
CITOESQUELETO
Fracción insoluble en agua de las proteínas del
cristalino
Fracción Soluble en Urea
Contiene Proteínas
citoesqueléticas (soporte del Cristalino tiene 2 tipos de filamentos intermedios inusuales
entramado)
Filamentos con cuentas o gránulos:
Vimentina: compuestos por faquinina y filensina
(específicas del cristalino).
no usuales en células epiteliales
La disrupción genética de estos filamentos
produce catarata.
Fracción insoluble en agua de las proteinas del
cristalino
Fracción Insoluble en Urea
Contiene membranas
plasmáticas de las fibras células Proteínas asociadas:
del cristalino
MIP Proteína intrínseca principal Sufre escisión proteolítica con la edad
“Acuaporina 0”. formando un fragmento proteico de 22kDa.
Aparece cuando la fibra cristaliniana inicia su A los 20-30 años la proporción de ambas
elongación. 28kDa. proteínas es 50/50
INCREMENTO DE LAS PROTEÍNAS
INSOLUBLES EN AGUA CON LA
Biología molecular EDAD
Glutatión Mantener un ambiente reductor en el citoplasma cristalino
Depleción de su forma reducida acelera el crosslinking,
agregación proteica y dispersión de luz
Aumento de enlaces disulfuro
Crosslinking de proteinas nucleares por enlaces no disulfuro
Con el envejecimiento:
Agregación de proteínas en partículas grandes
Insolubles en agua y dispersoras de luz opacidad del cristalino
Conversión de soluble a insoluble en agua es un proceso natural en la maduración de las fibras que
ocurre más rápido en la catarata
Catarata brunescente la cantidad de proteína insoluble se correlaciona con el grado de opacidad
llegando casi al 90%.
Cambios oxidativos:
Uniones proteína - proteína
Uniones proteína – glutatión
Menos glutatión y mayor disulfuro de glutatión (oxidado) en citoplasma de las fibras nucleares
Proteinas insolubles contienen pigmentos amarillo a café
en mayor concentración en las cataratas nucleares
Fluorescencia aumentada se debe al crosslinks no
disulfuros que forman la catarata brunescente
Metabolismo de
carbohidratos
Objetivos
Mantener la trasparencia del cristalino
Depende en su mayoría de glucosa
La glucosa entra desde el humor acuoso, mecanismos:
Difusión simple
Difusión facilitada
Fosforilación 70-100 veces más lenta que otras enzimas en la glicolisis del cristalino, tasa
de velocidad limitada
Glucosa Fosforilación Glucosa -6- fosfato (G6P)
• Enzima hexoquinasa • Glicolisis anaeróbica
• Derivación de hexosa
monofosfato (HMP)
Glicolisis anaeróbica
Provee la mayoría de las uniones fosfato de alta Menos eficiente que glucolisis aeróbica (36 ATP
energía (ATPs) adicionales)
Transforma glucosa a lactato
La fosforilación del ADP a ATP ocurre en 2 pasos ¿Por qué anaeróbica y no aeróbica?
La velocidad limitada se debe a la enzima Baja tensión de oxígeno en el cristalino.
fosfofructoquinasa.
3% de la glucosa hace proceso aeróbico a través
Control por feedback de productos metabólicos de
del ciclo de ácido cítrico 25% ATP cristalino
la ruta glucolítica
Cristalino no depende de oxígeno
Mitocondrias
Podría vivir en ambiente de nitrógeno, pero con glucosa y mantener:
Niveles de ATP óptimos
Transparente
Actividades de bombas iónicas y de aminoácidos
Glucosa: nubloso en horas aún con O2.
Derivación de hexosa monofosfato (HMP)
Menos activa
“Vía pentosa fosfato”
<5% de la glucosa utiliza esta ruta
Se estimula con grandes niveles de glucosa
Vía del sorbitol
Entra la glucosa no fosforilada en G6P
Aldosa reductasa:
1. Baja afinidad por la glucosa (<4% convierte en sorbitol)
2. Se activa en estados hiperglicémicos y cuando la vía glicolítica
disminuye su tasa por feedback negativo
3. Rol fundamental en catarata diabética
Sorbitol Fructosa
1. Enzima poliol deshidrogenasa: Baja afinidad por sorbitol
2. Sorbitol acumulado antes de ser metabolizado
3. Cristalino con baja permeabilidad al sorbitol
4. Retención de sorbitol en el cristalino
Al acumular sorbitol, la tasa NADPH/NADH
Opacificación del
aumenta cristalino
Pérdida de
NADH estimula la vía de derivación HMP arquitectura
Edema de fibras citoesquelética
por sobrecarga de
Atracción de agua bombas
Aumento de
presión osmótica
Glucosa abundante
en el cristalino
+ acumulación de
Fructosa
Acumulación de
Sorbitol
Daño oxidativo y mecanismos protectores
Radicales libres
• Resultado de procesos metabólicos normales y agentes externos como la
radiación
• Reaccionan con moléculas de DNA directamente por la poca
concentración de O2
• Polimerización y crosslinking de proteínas (ej. Conexinas) o lípidos de
membrana
• Aumento de proteinas insolubles
• Pocos mecanismos de reparación de daño
Daño oxidativo y mecanismos protectores
Catalisa la destrucción del anión superóxido
(malo)
Superóxido dismutasa
Produce peróxido de hidrógeno el cual se
destruye por la catalasa
Catalasa
Enzimas protectoras contra
radicales libres o daño oxidativo Cataliza la reacción que forma glutatión
disulfuro (malo) y lo reconvierte en glutatión
(bueno) por la glutatión reductasa y usando
NADPH
Glutatión peroxidasa La derivación HMP produce NADPH
El glutatión el es el principal eliminador de
radicales libres
Vitamina E y Ac. Ascórbico están presentes en el cristalino. Eliminan radicales y protejen
de estrés oxidativo
Exposición a oxígeno
Terapias de oxígeno hiperbárico prolongadas causan shift miópico, opacidad nuclear y en
algunos casos catarata nuclear.
Durante cirugía de retina
Post vitrectomía: por daño y pérdida de la estructura del gel vítreo y de la hipoxia que protegía el
cristalino
Fisiología del MANTENIMIENTO DEL
BALANCE DE AGUA Y
cristalino CATIONES
Cristalino normal tiene 66% agua y 33% proteina
Corteza con mayor H2O que núcleo
5% de H2O extracelular
Intracristaliniano:
Na 20 mM
K 120 mM
El balance H2O y electrolíticos es CRÍTICO en la transparencia del cristalino
Relacionado con CATARATAS CORTICALES, muy poco de las nucleares
Epitelio del cristalino transporte activo
Crist. Menos hidratado y mayor K y AAs que
el humor acuoso y vítreo • Sacar sodio
Menos Na, Cl y H2O que su ambiente • Meter potasio
Balance de cationes depende dela Bombas • Depende del consumo de
permeabilidad de membranas celulares y la Na/K: ATP
actividad de las bombas Na/K • Regulada por enzima NA,
K- ATP asa
Teoría de Bomba-Fuga
Es la combinación del transporte activo y la permeabilidad de membrana
K y AA son transportados activamente hacia el lente a través del epitelio del
cristalino
Luego hay difusión por gradientes de concentración (no activo) a la parte posterior.
Na difunde por la parte posterior por gradiente
y luego se intercambia activamente por K en
el epitelio.
Gradiente anteroposterior de Na (post) y K
(ant)
Na, K-ATP asa en epitelio y fibras corticales
superficiales
Retirar cápsula con epitelio adherido
daña mecanismos activos pero no si
solo se disuelve cápsula con
colagenasa
Transporte pasivo en ambas
superficies
Acomodación y
presbicia
Teoría de Helmholtz:
La mayoría de cambios acomodativos suceden
en la superficie central anterior del cristalino.
Acomodación:
Cápsula anterior central más delgada
Mecanismo por el cual el ojo cambia el foco de
imagenes lejanas a cercanas, ocurre por un Fibras zonulares mas cerca al eje visual en la
parte anterior que posterior. Abulsión de región
cambio en la forma del cristalino resultante de la
anterior central.
acción del músculo ciliar sobre las fibras
zonulares. La parte más delgada de la cápsula posterior
permanece con misma curbatura.
El músculo ciliar, de forma anular se contrae
reduciendo su diámetro, relajando la tensión de las
fibras zonulares y permitiendo el abombamiento
del cristalino.
Diametro ecuatorial disminuye
Poder dióptrico Incrementa
Mediada por fibras parasimpáticas del III par Amplitud de la acomodación
(oculomotor) Cantidad de cambio en el poder refractivo del
Pilocarpina (parasimpaticomimético) induce ojo producido por la acomodación
acomodación
Adolescentes 12.00-16.00 D
Atropina (simpaticomimético) bloquea
acomodación Adulto 40 años 4.00-8.00 D
Relajantes del M. Ciliar --> ciclopléjicos Adulto 50 años <2.00 D
Presbicia
Pérdida gradual de la respuesta
acomodativa resultante de la
reducción de la elasticidad del
cristalino.
Rigidez de núcleo reduce
acomodación
Dureza y rigidéz del cristalino
aumenta 1000 veces con el paso de la
vida.
Bibliografía
Clinical Anatomy and Physiology of the Visual System 3th Ed
Libro 11-Lens and Cataract. AAO 2019-2020
