NUTRICIÓN MICROBIANA
[Link]
al4316_prebioticos_probioticos_rumiantes_figura02.jpg
[Link]
2016/01/[Link]
https://
[Link].
com/wp-content/uploads/2011/03/
[Link]
[Link]
AAAAAAAAGFc/xPwTGv9yVJo/s400/Colonia+pura+E.+[Link]
[Link]
upload/2015/08/28/20150828101158-b49bd7d2-
[Link]
1
Unidadde Aprendizaje: Microbiología, que se
imparte en la Licenciatura de Químico en
Alimentos del 3º semestre. Plan 2015
Unidad de Aprendizaje Teórica-Práctica
Total de Horas: 2 teóricas
4 prácticas
Créditos: 8
Tema: Nutrición Microbiana
Autor: Dr. Octavio Dublán García
Fecha de elaboración: 01 de septiembre de 2018
2
Guión explicativo
Este material didáctico está elaborado para los
alumnos del 3° semestre de la licenciatura de
Químico en Alimentos, con la finalidad de que
conozcan la nutrición microbiana, el metabolismo
como definición y los diferentes medios de cultivo, su
composición y sus funciones para la obtención de
cultivos puros.
La Nutrición Microbiana, tema de esta Unidad de
aprendizaje abarca desde lo que es la definición del
metabolismo, hasta los tipos de medio y su función.
3
Contenido temático que apoya el material
Diap. 6 Metabolismo microbiano
Diap. 7 Microorganismos según su fuente
Diap. 8 Tipos metabólicos en los microorganismos
Diap. 9 Fermentaciones bacterianas
Diap. 10 La Nutrición microbiana
Diap. 11 Macronutrientes (Carbono)
Diap. 12 Macronutrientes (Nitrógeno)
Diap. 13 Macronutrientes (Otros elementos)
Diap. 14 Macronutrientes (Hierro)
Diap. 15 Macronutrientes (Elementos traza)
Diap. 16 Factores de crecimiento
Diap. 17 Fuentes de obtención de microorganismos
Diap. 18 Medios de Cultivo
Diap. 19 Componentes básicos de medios de cultivo
Diap. 20 Tipo de medios de cultivo por composición
Diap. 21 Medios sólidos y líquidos
Diap. 22 Tipos de medios de cultivo por su origen
4
4
Diap. 23 Medio de cultivo químicamente definidos
Diap. 24 Medio definido (Leuconostoc mesenteroides)
Diap. 25 Medio definido para quimiorganótrofo
Diap. 26 Medio de cultivo complejo
Diap. 27 Extractos utilizados en medios de cultivo
Diap. 28 Medio de cultivo naturales
Diap. 29 Medio de cultivo artificiales
Diap. 30 Tipos de medios de cultivo por su función
Diap. 31 Medios de cultivo generales
Diap. 32 Medios de cultivo enriquecidos
Diap. 33 Medios de cultivo selectivos
Diap. 35 Medios de cultivo diferenciales
Diap. 36 Factores ambientales que influyen sobre el crecimiento microbiano
Diap. 37 Transferencia aséptica
Diap. 38 Obtención de cultivos puros
Diap. 39 Morfología colonial
Diap. 40 Características de la morfología colonial
Diap. 41 Referencias
5
5
Metabolismo microbiano
METABOLISMO = ANABOLISMO + CATABOLISMO
ANABOLISMO = Suma de todas las reacciones biosintéticas de la célula, siendo un
conjunto de procesos de síntesis de componentes celulares. Requiere
energía y moléculas orgánicas e inorgánicas.
CATABOLISMO = Reacciones bioquímicas destinadas a la conservación de energía
(normalmente ATP) por parte de la célula, y son procesos de
degradación de moléculas orgánicas e Inorgánicas para generar
energía y obtener materiales para el anabolismo.
Anabolismo y catabolismo se dan simultáneamente a lo largo de toda la vida de las células y
están íntimamente relacionados.
(Madigan et al., 2015; Atlas y Bartha, 2008)
Microorganismos según su fuente de energía
Fuentes de energía
Compuestos químicos Luz
Quimiotrofía Fototrofía
Compuestos orgánicos Compuestos inorgánicos
Glucosa, acetato, etc Autótrofos
H2, H2S, Fe2+, NH4+, etc
Heterótrofos Autótrofos
Quimioorganótrofos Quimiolitótrofos Fotótrofos
(Glucosa + O2 CO2 (H2 + O2 H2O) (Luz)
+ H2O)
ATP ATP
ATP 7
(Madigan et al., 2015)
Tipos metabólicos en los
microorganismos
Tipo Fuente de Fuente de Ejemplos
energía carbono
Fotoautótrofas Luz CO2 Algas y
cianobacterias
Fotoheterótrofas Luz Compuestos Algas y bacterias
orgánicos fotosintéticas
Quimioautótrofas o Química Compuesto Pocas bacterias
Litótrofas inorgánicos: H2,
NH3, NO2, H2S, CO2
Quimioheterótrofas o Química Compuesto La mayoría de
Heterótrofas orgánicos: glucosa bacterias
(Atlas y Bartha, 2008; Schlegel, 2014)
8
Fermentaciones bacterianas
Tipo Reacción Organismos
Alcohólica Hexosa 2 etanol + 2CO2 Levaduras, Zymomonas
Homoláctica Hexosa 2 lactato- + 2H+ Streptococcus,
Lactobacillus
Heteroláctica Hexosa lactato- + etanol + CO2 + H+ Leuconostoc,
Lactobacillus
Del ácido 3 Lactato 2 propionato + acetato + CO2 + Proponibacterium,
propiónico H2O Clostridium propionicum
Ácidos mixta Hexosa etanol + 2,3 butanodiol + Enterobacterias
succionato2- + lactato- + acetato- + formiato- + (Escherichia, Salmonella,
H2 + CO2 Shigella, Klebsiella,
Enterobacter)
Del ácido Hexosa butirato- + 2H2 + 2CO2 + 2H+ Clostridium butyricum
butírico
Del butanol 2 Hexosa butanol + acetona + 5CO2 + 4H2 Clostridium
acetoutylicum
Acetogénica Fructosa 3 acetato- + 3H2 Clostridium aceticum
(Madigan et al., 2015)
9
La nutrición microbiana consiste en aportar a las células los ingredientes
químicos que necesitan para la síntesis de monómeros, que son los componentes
de las macromoléculas, que a su vez construyen las estructuras celulares.
Monómeros Macromoléculas Estructuras
celulares
Monosacáridos Polisacáridos Pared celular
Glicocalix
Aminoácidos Proteínas Membrana
Ribosomas
Flagelo
Pelos y fimbrias
Enzimas
Ácidos grasos Lípidos Membranas
Bases nitrogenadas Ácidos nucleicos Cromosoma
Ribosomas
Plásmidos
10
(Atlas y Bartha, 2008; Madigan et al., 2015; Schlegel, 2014)
Macronutrientes (Carbono)
Elemento más abundante en las macromoléculas.
Constituye el 50% del peso seco de las células.
Muchos procariotas son heterótrofos. Necesitan algún
tipo de compuesto orgánico como fuente de carbono
para hacer nuevo material celular.
Los aminoácidos, los ácidos grasos, los ácidos
C orgánicos, los azúcares, las bases nitrogenadas, los
compuestos aromáticos y un sinfín de compuestos
orgánicos de otro tipo pueden ser utilizados por las
bacterias.
Algunos procariotas son autótrofos, capaces de
construir todas sus estructuras orgánicas a partir del
CO2 con la energía obtenida de la luz o de compuestos
inorgánicos.
11
(Atlas y Bartha, 2008; Madigan et al., 2015; Schlegel, 2014)
Macronutrientes (Nitrógeno)
En una bacteria típica, alrededor del 12% de su peso seco
es N.
Forma parte de las proteínas, ácidos nucleicos y otros
constituyentes celulares.
En la naturaleza, se encuentra en forma orgánica e
inorgánica. Pero la mayor parte del N natural se encuentra
N en forma inorgánica ( NH3, NO3- o N2 ).
La mayoría de las bacterias son capaces de utilizar NH3
como única fuente de N, y otras muchas pueden utilizar
NO3- .
El N2 puede ser usado como fuente de nitrógeno por
algunas bacterias, las bacterias fijadoras de nitrógeno.
12
(Atlas y Bartha, 2008; Madigan et al., 2015; Schlegel, 2014)
Macronutrientes (Otros elementos)
P El P se presenta en la naturaleza en forma de fosfatos
orgánicos e inorgánicos.
La célula necesita P para la síntesis de ácidos nucleicos y
fosfolípidos.
El S es un componente de los aminoácidos cis y met y se
S encuentra en algunas vitaminas, como tiamina, biotina,
ácido lipoico y Coenzima A.
La mayoría del S celular procede de fuentes inorgánicas,
ya sean sulfatos o sulfuros.
K El K es necesario para todos los organismos. Es cofactor
de muchas enzimas.
Mg El Mg funciona como estabilizador de los ribosomas, las
membranas celulares y los ácidos nucleicos. También se
necesita para la actividad de muchas enzimas.
Ca El Ca ayuda a estabilizar la pared celular bacteriana y
tiene una función importante en la termorresistencia de
las endoesporas.
Na El Na es requerido por algunos microorganismos
(halófilos).
13
(Atlas y Bartha, 2008; Madigan et al., 2015; Schlegel, 2014)
Macronutrientes (Hierro)
Fe
El Fe es fundamental en la respiración celular.
citocromos y de proteínas que contienen Fe y S implicados
Forma parte de los
en el transporte de electrones.
En condiciones anaeróbicas, el Fe se encuentra en el estado de oxidación +2 (Fe+2) y es
soluble.
En condiciones aeróbicas suele estar en el estado de oxidación +3 ( Fe+3) y forma varios
minerales insolubles.
Para obtener el Fe de tales minerales, las células producen agentes quelantes llamados
sideróforos que solubilizan el Fe y lo introducen en la célula.
Es necesario en mayores cantidades que otros metales y no se considera un elemento traza.
14
(Atlas y Bartha, 2008; Madigan et al., 2015; Schlegel, 2014)
Micronutrientes (elementos traza)
Co, Cu, Mn, Mo, Ni, Se, W, V, Zn
Se requieren en muy pequeñas cantidades.
Son tan importantes para el funcionamiento celular como los macronutrientes.
Muchos son metales que actúan como cofactores de enzimas.
A menudo no es necesario añadirlos a los medios de cultivo.
Si el agua utilizada para elaborar el medio es ultrapura se añade al medio una
pequeña cantidad de una solución de metales traza.
15
(Madigan et al., 2015; Atlas y Bartha, 2008; Schlegel, 2014)
Factores de crecimiento
Los factores de crecimiento son compuestos orgánicos que se necesitan en
muy pequeñas cantidades y sólo por algunas células.
Los factores de crecimiento son vitaminas, aminoácidos, purinas y
pirimidinas.
La mayoría de los microorganismos son capaces de sintetizar estos
compuestos, pero en algunos casos es necesario añadirlos al medio.
Las vitaminas son los factores de crecimiento que se necesitan con mayor
frecuencia, funcionan formando parte de coenzimas.
Las principales vitaminas requeridas por los microorganismos son:
tiamina (vitamina B1)
biotina,
piridoxina (vitamina B6) y
covalamina (vitamina B12)
16
(Atlas y Bartha, 2008; Madigan et al., 2015; Schlegel, 2014)
Todos los microorganismos obtienen los nutrientes del ambiente
Ambientes Naturales Ambientes Artificiales
[Link]
[Link]
Fuente:
[Link]
Suelos
ACY/dzOchR4oT-4/s1600/IMAGEN+[Link]
Alimentos
[Link]
2JTYbnNE/s1600/[Link]
[Link]
lagrima/lagrima_azul_1.jpg
[Link]
[Link]
Mares Medios de cultivo
para estudio de
Animales microorganismo e
identificación
Humanos [Link]
[Link]
[Link]
revista/167/[Link]
Cuanto más “rico en nutrientes o nutritivo” es el ambiente, mayor posibilidad de desarrollo microbiano.
17
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009; Schlegel, 2014)
Medios de cultivo
Son preparaciones a partir de compuestos
naturales modificados, diseñadas para cultivar
microorganismos en el laboratorio.
Fuente:[Link]
e903dd28-8aeb-4414-b3f8-
305cabf4d963/[Link]
Fuente:[Link]
2013/02/placas_frascos_tubos.png
18
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009; Tortora, 2008)
Componentes Básicos de
Medios de cultivo
•Agua
•Fuente de C (H de C – glucosa, sacarosa, lactosa, almidón, etc.)
•Fuente de N (proteínas, peptonas, aminoácidos)
•Fuente de S, P, Ca, Na, Fe, (sales)
•Vitaminas y otros factores de crecimiento (extracto de levadura, extracto de
carne, etc.)
Algunos contienen un
agente solidificante:
AGAR-AGAR
(polímero extraído de
algas)
Fuente:[Link]
uploads/2013/05/[Link]?fit=930%2C354
19
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009; Tortora, 2008)
Tipos de Medios de cultivo por su
consistencia
Por su consistencia pueden ser:
Medios Líquidos Medios Sólidos Medios Semisólidos
- Aislamiento
- Aislamiento
Función - Aislamiento de - Conservación
- Preparación
muestras o cultivos - Pruebas bioquímicas
de antígenos
contaminados (movilidad de
microorganismos
Preparados con
Preparados con
0.1 – 0.5 % de
1.5 % de agar
agar
20
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009; Tortora, 2008)
Medios sólidos y líquidos
Los medios sólidos se preparan como los medios líquidos y se les
añade agar (1.5%) como agente gelificante.
El agar es un polímero sulfatado compuesto por D-galactosa, 3,6-
anhidro-L-galactosa y ácido glucurónico.
El agar se funde a 80-90ºC o a esterilización dependiendo de la
composición del medio de cultivo y se puede enfriar hasta una
temperatura de 40 a 45ºC sin endurecerse, el medio fundido se
vierte sobre placas Petri y se deja solidificar antes de su uso.
La mayoría de los microorganismos no pueden degradarlo.
Los medios sólidos inmovilizan a las células, permitiéndolas
crecer y formar masas aisladas visibles llamadas colonias.
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009; Atlas y Bartha, 2008; Tortora, 2008)
Tipos de Medios de cultivo por su
origen
1. Medio De Cultivo Químicamente Definido
2. Medio De Cultivo Complejo
3. Medios de cultivo Naturales
4. Medios de cultivo Artificiales
22
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009; Atlas y Bartha, 2008; Tortora, 2008)
Medio De Cultivo Químicamente Definido
Se prepara añadiendo cantidades precisas de compuestos orgánicos e
inorgánicos puros a un volumen conocido de agua destilada.
Se conoce su composición exacta.
Medio definido para Escherichia coli Medio definido para fotótrofos
K2HPO4 7g
KH2PO4 2g Co2 Burbujeo continuo
(NH4)2SO4 1g KNO3 1g
MgSO4 0,1 g MgSO4 0.5 g
CaCl2 0,02 g KH2PO4 0,035 g
Glucosa 4-10 g Elementos traza 2-10 g
Elementos traza 2-10 g (NaVO3, NiSO4, ZnCl2, H3BO3)
(Fe, Co, Mn, Zn, Agua destilada 1000 mL
Cu, Ni, Mo) Luz (solar o artificial)
Agua destilada 1000 mL
pH7
23
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009; Atlas y Bartha, 2008; Tortora, 2008)
Medio definido para Leuconostoc mesenteroides
- K2HPO4 0,6 g
- KH2PO4 0,6 g
- NH4Cl 3g
- MgSO4 0,1 g
- CaCl2 0,02 g
- Glucosa 25 g
- Acetáto sódico 20 g
- Aminoácidos (ala, arg, asn asp,cis, glu, gln, gly, his, iso,
leu, lis, met, phe, pro, ser, thr, trp, tyr, val).
100-200 g de cada uno
- Purinas y pirimidinas (adenina, guanina, uracilo, xantina).
10 mg de cada una
-Vitaminas (biotina, folato, ácido nicotínico, piridoxal,
piridoxamina, piridoxina, riboflavina, tiamina, pantotenato,
ácido p-aminobenzoico)
0,01-1 mg de cada una
Elementos traza 2-10 g
(Fe, Co, Mn, Zn,
Cu, Ni, Mo)
Agua destilada 1000 mL
pH7
24
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009; Atlas y Bartha, 2008; Tortora, 2008)
Medio definido para quimioorganótrofo
K2HPO4 0.6 g
KH2PO4 0.6 g
NH4Cl 3g
MgSO4 0,1 g
Glucosa 25 g
Acetato de sodio 20 g
Elementos traza 2-10 g
(Fe, Co, Mn, Zn, Cu, Ni, Mo)
- Aminoácidos (ala, arg, asn asp,cis, glu, gln, gly, his, iso, leu, lis, met, phe, pro,
ser, thr, trp, tyr, val). 100-200 g de cada uno
- Purinas y pirimidinas (adenina, guanina, uracilo, xantina).
10 mg de cada una
-Vitaminas (biotina, folato, ácido nicotínico, piridoxal, piridoxamina, piridoxina,
riboflavina, tiamina, pantotenato, ácido p-aminobenzoico)
0,01-1 mg de cada una
Agua destilada 1000 mL
pH7
25
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009; Atlas y Bartha, 2008; Tortora, 2008)
Medio De Cultivo Complejo
Se utilizan hidrolizados de proteínas y otras sustancias muy nutritivas pero no
definidas químicamente que se pesan y se añaden a un volumen conocido de
agua.
No se conoce la composición exacta del medio complejo.
Medio complejo Medio complejo
para Escherichia coli
y Leuconostoc mesenteroides
Extracto de levadura 3g
Peptona 5g Glucosa 15 g
NaCl 2g Extracto de levadura 5g
Agua destilada 1000 mL Peptona 5g
pH7 KH2PO4 2g
Agua destilada 1000 mL
pH7
26
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009; Atlas y Bartha, 2008; Tortora, 2008)
Extractos usados en medios de cultivo
Son concentrados de componentes
Extractos de carne hidrosolubles de la carne
Son productos de lisis ácida o
Extractos de levadura enzimática de levaduras
Extractos de malta Son productos de cebada malteada,
reemplazada al extracto de levadura
27
(Merchuk, 2011)
Medios de cultivo Naturales
Aquellos que existen como tal en la
naturaleza (leche, suero, sangre, agua, etc.).
Fuente:[Link]
q=tbn:ANd9GcSd4QAAY6_3bRUtaGxYnQgE-
1uYiyS7ebt4Pghk_Y0434uujaY1
28
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009; Benson, 2001)
Medios de cultivo Artificiales
Aquellos que se preparan a partir de diversos
componentes
Fuente:[Link]
T80jymm1KoI/AAAAAAAAAJg/0djCZImMt4U/s1600/
RobertKochInstitut1_Bild.jpg
29
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009; Benson, 2001)
Tipos de Medios de cultivo por su
Función
1. Medio De Cultivo Generales
2. Medio De Cultivo Enriquecidos
3. Medios de cultivo Selectivos
4. Medios de cultivo Diferenciales
30
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009; Benson, 2001)
Medios de cultivo Generales
Los medios generales mantienen el
crecimiento de muchos microorganismos.
Ejemplo: el caldo y agar nutritivo
Fuente:[Link]
productos/getImage?id=4d82fe9d-9a27-4311-
87b2-638613362442
30
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009)
Medios de cultivo
Enriquecidos
Medios generales a los que se añaden
nutrientes especiales para mantener el
crecimiento de microorganismos
heterótrofos exigentes.
Ejemplo: el agar sangre
Fuente:[Link]
content/uploads/2014/06/[Link] 31
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009)
Medios de cultivo
Selectivos
Favorecen el crecimiento de microorganismos
particulares. Ej Agar Levine (eosina-azul de metileno)
y Agar MacConkey se emplean para detectar
enterobacterias.
Contienen colorantes y sales biliares que inhiben el
crecimiento de las bacterias Gram positivas.
Otros medios selectivos contienen nutrientes que
pueden utilizar algunas bacterias de forma
específica. Ej., el agar celulosa se usa para aislar
bacterias que digieren la celulosa.
33
(Madigan et al., 2015; Benson, 2001)
•Para enriquecimiento: medios líquidos que
permiten el crecimiento de varios
microorganismos de una muestra, pero favorecen
a alguno que está en muy baja proporción
•Para aislamiento: medios sólidos que contienen
algún componente que favorece el desarrollo de
un grupo, inhibiendo a otro.
34
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009; Benson, 2001)
Medios de cultivo
Diferenciales
Medios que diferencian entre grupos distintos de bacterias e
incluso permiten una identificación tentativa de los
microorganismos según sus características biológicas.
Contienen algún componente que permite distinguir entre 2 o
más tipos de microorganismos por características
diferenciales de crecimiento (ej. Color de la colonia)
El agar MacConkey es tanto selectivo como diferencial. Como
contiene lactosa y colorante rojo neutro, las colonias
fermentadoras de lactosa (Escherichia coli) aparecen de color
rosa o rojo y se distinguen fácilmente de las colonias no
fermentadoras.
35
(Madigan et al., 2015; Merchuk, 2011; Prescott et al., 2009; Benson, 2001)
Factores ambientales que influyen
sobre el crecimiento microbiano
• Temperatura
• pH (grado de acidez – alcalinidad de un medio)
• Actividad de agua y solutos (agua disponible – sales y azúcares)
• Presión osmótica
• Oxígeno
• Radiación
36
(Madigan et al., 2015; Merchuk, 2011; Benson, 2001)
Transferencia aséptica
La transferencia aséptica es un procedimiento que se lleva a cabo para evitar la
contaminación cruzada durante la manipulación de los cultivos microbianos y de
los medios de cultivo estériles.
Fuente: Madigan et al. 2009. Brock, Biología de los microorganismos. 12ª. Edición.
Pearson-Prentice Hall
Figura a. Se calienta el asa de siembra hasta incandescencia y se deja enfriar
Figura b. El tubo se destapa
Figura c. Se pasa el extremo del tubo por la llama
Figura d. Se extrae la muestra con el asa esterilizada
Figura e. Se vuelve a flamear la boca del tubo y la muestra se deposita en un medio estéril
Figura f. Se vuelve a tapar el tubo y se calienta el asa de nuevo al final
Fuente: Madigan et al. 2015. Brock, Biología de los microorganismos. 14ª. Edición.
Pearson-Prentice Hall 37
(Merchuk, 2011; Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009; Benson, 2001)
Obtención de cultivos puros
Aislamiento por agotamiento de estrías
Fuente: Benson, 2001
Fuente:[Link]
microbiologia/unidades/curso/UNI_02/imagenes/
[Link]
38
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009; Benson, 2001)
Morfología colonial
Masa visible de células que
Colonia se forman por división de
una o varias células.
El desarrollo de colonias sobre superficies de agar permite al
microbiólogo identificar las bacterias porque las especies
forman a menudo colonias con una forma y aspecto
característico.
El tamaño, forma, textura y color de una colonia es propio de
cada organismo.
La morfología de la colonia de una bacteria puede variar
según el medio en que crezca la bacteria.
39
(Madigan et al., 2015; Prescott et al., 2009; Benson, 2001)
Características de la Morfología colonial
Puntiforme Circular Filamentoso Irregular Rozoide Eje
Plano Elevado Convexo Pulvinado Umbonado
Entero Undulado Lobato Erosionado Filamentoso Rizado
Fuente: [Link]
40
Referencias
1. Atlas, R. M., Bartha, R. 2008. Ecología microbiana y Microbiología ambiental. 4ª Ed.
Editorial Pearson.
2. Benson, 2001. Microbiological Applications Lab Manual. 8th ed. Editorial McGraw-Hill
3. Merchuk, J. 2011. Microbiología Industrial. Departamento de Educación, Cultura, Ciencia y
Tecnología
4. Madigan, M. T., Martinko, J.M., Dunlap, P.V., Clark, D.V. 2015. Brock biología de los
microorganismos, 14°Ed. Editorial: Pearson.
5. Prescott L.M., Harley J.P. and Klein G.A. 2009. Microbiología , 3a edición, Madrid, México,
Mc GrawHill‐Interamericana.
6. Schlegel, H.G. 2014. Microbiología General. Editorial: OMEGA.
7. Smith, J.L., and P.M. Fratamico. 2005. Emerging foodborne pathogens. In Foodborne
pathogens: Microbiology and molecular biology , ed. P.M. Fratamico, A.K. Bhunia, and J.L.
Smith. Norwich: Caister Academic.
8. Tortora G.J. 2008. Introducción a la Microbiología. 9ª Ed. Editorial Panamericana.
41
