Biología Molecular
Aplicada al Diagnóstico
Clínico
Docente: Ph. D. Irene Leal Solís
Grupo 6-8
Luis Fernando González Banda 309221
Lizeth Patricia Trujillo Salas 309121
« El diagnóstico es una etapa crítica en el manejo de
un paciente, que implica decisiones que definirán el
progreso del cuidado de un individuo, por ello
cualquier apoyo diagnóstico es fundamental para el
equipo médico »
(Farfán,M., 2015)
Diagnóstico Molecular
● Técnicas de biología molecular en beneficio de la salud humana, detectando y/o cuantificando
secuencias genéticas específicas.
● Crecimiento anual del 12%
50-60%
Problemas clínicos, ciencias básicas y desarrollo
tecnológico
● El desarrollo de nuevas técnicas de diagnóstico tienen su origen en los
problemas que requieren con urgencia un método diagnóstico.
Gold estándar para la detección de reordenamiento
Southern Blot de los genes que codifican cadenas ligeras y pesadas
de las inmunoglobulinas
Reacción de la Polimerasa en Cadena (RPC)
● Permite la amplificación de una región
específica de ADN utilizando secuencias de
ADN que delimitan la zona.
● Alta Especificidad → hibridación de las
secuencias complementarias a la secuencia
blanco.
● Alta Sensibilidad → baja cantidad de ADN que
requiere
Kary B. Mullis
1993
PCR Características Aplicaciones
PCR Estándar Amplificación de un Detección de un segmento de
segmento ADN
PCR Múltiple Amplificación de 2 o más Detección de varios segmentos
segmentos en una sola de ADN en una sola reacción
reacción de amplificación
RFLP-PCR PCR estándar + digestión Detección de SNP’s
con enzimas
RT-PCR Síntesis cADN a partir de Expresión de genes y
ARN + PCR detección de virus ARN
TR-PCR PCR estándar con Detección de segmentos ADN
tinciones o sondas y Cuantificación de ADN en la
muestra
Impacto del
diagnóstico
molecular en
distintas áreas
Diagnóstico Molecular en Enfermedades
Infecciosas
● “Punta de lanza” para el desarrollo de test de diagnóstico molecular
● Técnicas de elección para el diagnóstico de enfermedades infecciosas (Gold
Standard)
● No es necesaria la presencia de un organismo viable
B. perussis
● Agente etiológico de la coqueluche
● CULTIVO → alta especificidad & sensibilidad del 12-
60%
● TÉCNICAS MOLECULARES → Especificidad del 86-
100% & Sensibilidad entre 70-99%
● Tiempo de detección 1-4 hrs
CMV
● Morbilidad y mortalidad en Px. trasplantados
● Trasplante de precursores hematopoyéticos (35%)
● Trasplante de órgano sólido (36%)
● Técnica de tipo TR-PCR tiene alta sensibilidad y
especificidad
Diagnóstico
Molecular en
Cáncer
Gran número de alteraciones
genéticas
Diagnóstico
Monitorización
Cromosoma Philadelphia
Presente en 95% de las leucemias mieloides crónicas y
30% de leucemias linfoblásticas agudas del adulto
Diagnóstico
Molecular Tipo
Point of Care
Necesidad de contar con un diagnóstico
rápido y preciso
● Cepheid Xpert
● Detección de
Streptococcus del grupo
B en embarazadas
● 55 min.
● >90% sensibilidad y
especificidad
Necesidad de implementar test
de Dx molecular donde no se
cuenta con infraestructura y/o
acceso a un laboratorio de ● Necesidad de nuevos métodos
referencia rápidos de diagnóstico.
● Filmarray detecta 20 patógenos
virales y bacterianos en 60
minutos.
Limitaciones del Diagnóstico Molecular
Costo Falta de Regulación Integración
● Superan los ● Desarrollo ● Limitación para crecer
valores de los desorganizado del de forma armónica y
ensayos sector transversal con los
comúnmente ● Falta de estándares laboratorios clínicos
utilizados en ante las necesidades
clínica del paciente.
Nuevas herramientas de diagnóstico molecular
● Next-Generation Sequencing (NGC)
Microarrays
Referencia
Farfán M. noviembre 7, 2018. Biología Molecular Aplicada al Diagnóstico Clínico.
Revista Médica Clínica Condes, 26, pp. 788-793.
