TÉCNICAS DE
AGLUTINACIÓN.
¿Qué es?
- SON ÚTILES PARA LA DETECCIÓN DE ANTÍGENOS Y
ANTICUERPOS. SU FUNDAMENTO ES INDUCIR UNA
AGRUPACIÓN MICROSCÓPICAMENTE VISIBLE DE
PARTÍCULAS, CAUSADA POR INTERACCIONES ANTÍGENO
ANTICUERPO QUE FORMAN PUENTES ENTRE ELLAS.
- USUALMENTE EL ANTÍGENO SE ENCUENTRA EN LAS
PARTÍCULAS Y LOS ANTICUERPOS FORMAN PUENTES.
VENTAJAS
Mayor grado de sensibilidad (son hasta mil veces más sensibles que la
precipitación).
Sencillez.
Bajo costo.
De lectura directa.
REACCIÓN DE AGLUTINACIÓN SEGÚN LA CONCENTRACIÓN DE
ANTÍGENO Y ANTICUERPO.
1.- Prozona:
se da en la zona donde existe exceso
de Ac frente al Ag.
2.- Equivalencia.
3.- postzona:
se da en la zona de exceso de Ag.
Técnicas de aglutinación.
Directa o activa. Indirecta o pasiva.
El
antígeno es por si mismo particulado,
por lo que no requiere fijación a
soportes inertes.
Son aglutinados directamente por los
Acs.
Aglutinación directa.
Aglutinación directa en tubos:
Antígenos febriles: salmonella y brucella. Determinación de isohemaglutininas en
Determinación de grupo sanguíneo y factor suero/plasma.
Rh Prueba de Coombs directa e indirecta.
ANTÍGENOS FEBRILES
Los antígenos febriles es un termino referido a un grupo de suspensiones bacterianas patógenas para
la especie humana y responsables de la aparición de infecciones como brucelosis y salmonelosis.
GRUPO SANGUÍNEO Y FACTOR RH
Prueba cualitativa para la determinación del grupo ABO y Rh.
El tipo sanguíneo dependerá del Ag presente en la superficie de los GR y el
suero del paciente.
PRUEBA DE COOMBS.
También conocido como test de Coombs antiglobulina, prueba o AGT. Se refiere a dos
análisis clínicos de sangre. Las dos pruebas de Coombs son el test.
Coombs directa
Coombs indirecta
COOMBS DIRECTA.
se utiliza para detectar autoanticuerpos contra los propios glóbulos rojos (GR) de un individuo. Es una
prueba que sirve para demostrar el revestimiento de los eritrocitos in vivo, (mientras los eritrocitos están
circulando en el individuo). La prueba se realiza agregando directamente el reactivo de Coombs a los
eritrocitos, previamente lavados para eliminar otras proteínas no fijadas a el; una prueba directa positiva
significa que la relación antígeno-anticuerpo ocurrió in vivo, es decir que la fijación del anticuerpo sobre el
antígeno se realizo en el organismo del individuo en estudio.
Anticoagulantes: EDTA, heparina.
COOMBS INDIRECTA
Se utiliza para las pruebas prenatales de las mujeres embarazadas, y en las pruebas de sangre antes de
una transfusión de sangre. Se detecta anticuerpos contra los glóbulos rojos que fluyen libremente en el
suero sanguíneo. Si produce aglutinación la prueba es positiva.
AQUÍ INICIA LA PASIVA
Los anticuerpos se dirigen contra moléculas que se han adherido
intencionalmente a una partícula que actúa como medio de soporte pasivo
(látex). Una variante es la aglutinación pasiva reversa, en donde lo que se
detecta es el antígeno y las partículas están recubiertas por el anticuerpo.
Reacciones de Aglutinación pasiva directa:
Se basan en la sensibilización de la partícula inerte con el Ag, por lo que resultan
útiles para la detección y titulación de Ac en distintos fluidos biológicos.
Reacciones de aglutinación pasiva reversa:
Se basan en la inmovilización de Ac (en general, se inmoviliza un anticuerpo
monoclonal) en la superficie de la partícula inerte, siendo este tipo de reacciones
particularmente útiles para la detección de Ag en distintas muestras biológicas.