Práctica No.
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COLORACIONES PERMANENTES Y ESPECIALES
PARA PROTOZOARIOS
M. SC. Ketty Velarde Dunois
CONOCIMIENTO TEORICO
REQUERIDO
La utilidad principal de esta metodología es la sensibilidad para
diagnosticar los trofozítos de protozoarios.
CONOCIMIENTO TEORICO
REQUERIDO
Permiten el estudio preciso, con objetivos de inmersión, de la
Cromatina nuclear, que es un punto clave para diagnosticar las
especies de protozoarios
CONOCIMIENTO TEORICO
REQUERIDO
Es algo menos eficaz para quistes de Protozoarios; y
no es efectivo para el hallazgo de huevos o larvas de helmintos,
CONOCIMIENTO TEORICO
REQUERIDO
Este método permanente, permite un estudio con mucha
definición de la cromatina nuclear
CONOCIMIENTO TEORICO
REQUERIDO
La técnica tricrómica, es un procedimiento rápido que
proporciona buenos resultados para la identificación rutinaria
de protozoarios intestinales, en muestras fecales recientes.
CONOCIMIENTO TEORICO
REQUERIDO
El citoplasma de trofozoítos de E. histolytica y los quistes
aparecen de color azul verdoso o rosa claro.
CONOCIMIENTO TEORICO
REQUERIDO
Los quistes de E. coli son un poco púrpuras, la estructura
nuclear se ve con claridad, los cariosomas de los núcleos se
tiñen de rojo.
CONOCIMIENTO TEORICO
REQUERIDO
El procedimiento requiere que las preparaciones fecales
se fijen con PVA o solución de Schaudinn.
COMPETENCIAS
Reconoce posibles fuentes de error en los procedimientos de
laboratorio.
• Selecciona los procedimientos para ejecutar un análisis fecal
de rutina para el diagnóstico de parasitosis.
COMPETENCIAS
• Ejecuta las tinciones especiales como la Tricrómica y las
permanentes para Protozoarios.
COMPETENCIAS
COMPETENCIAS
• Identifica los parásitos en tinciones a través de la resolución
de problemas que se presentan en el campo de trabajo del
profesional.
MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.
Microscopio
Centrifugadora
Portaobjetos
MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.
Cubreobjetos
Aplicadores de madera
Lápiz graso o marcador
Tubos cónicos
Gasa
Algodón
Pipeta pasteur
MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.
Hematoxilina férrica alcohólica
Hematoxilina acuosa
MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.
Hematoxilina para Spencer Monroe
Colorante tricrómico
Fucsina para Ziehl-Neeksen modificada
Safranina( Cryptosporidium)
MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.
Tricrómica modificada para
Microsporidium (Weber)
Alcohol yodado 70%
Alcohol 70%
Alumbre férrico amónico 4%
Carbol xileno
Ácido pícrico
MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.
Xilol
Azul de metileno
Metanol
Acido clorhídrico
PVA
Etanol 100%
MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS.
Permount
Alcohol Ácido acético
TECNICA O PROCEDIMIENTO
Coloración Heidenhain modificada
• Filtre el material fijado en PVA, con una gasa doble, para
eliminar los restos gruesos.
• Centrifugar el material obtenido durante 5minutos a
3500rpm.
• Elimine el sobrenadante, con una pipeta Pasteur tome el
material de la superficie del sedimento.
• Coloque dos gotas sobre un portaobjetos y extiéndalo con un
cepillo de dientes, la superficie del frotis debe ser de 2,5cm de
lado.
TECNICA O PROCEDIMIENTO
Coloque el preparado en las siguientes soluciones:
-Alcohol yodado70% 15min -Alcohol70%,5min -Agua corriente
-Mordiente (alumbre férrico amónico 4%) 24 h -Agua corriente
10min
-Hematoxilina 0,5%24 horas, lavar con agua -Ácido pícrico sat.
15 min -lavar con agua
15 min. -Alcohol 70% con unas gotas de C03U 5min. -Alcohol
100% 5 min -Carbol xilol
10min. -Xilol, 10min
-Saque el preparado y sin que seque móntelo en DPX o Clarite.
TECNICA O PROCEDIMIENTO
Coloración Safranina- azul de metileno (Cryptosporidium)
• Obtenga el preparado y fije a la llama
• Coloque el portaobjetos en Metanol-ácido clorhídrico 4
minutos
• Lave con agua corriente durante 2 minutos
• Cubra con solución de Safranina 1 % (caliente sin que hierva)
1 min
• Lave con agua corriente 2 minutos
• Agregue azul de metileno tamponado 1 minuto
• Lave nuevamente con agua corriente y deje secar.
TECNICA O PROCEDIMIENTO
Coloración tricrómica para Microsporidium (Weber)
• Con el sedimento obtenido por las técnicas de concentración,
o bien heces
formolizadas, haga una extensión del tamaño de una moneda,
de 20mm
de diámetro, deje secar.
• Cubra el preparado con metanol durante 5 minutos
• Coloque en el colorante tricrómico modificado 90 min.
• Decolore en alcohol ácido acético al 0,45% 10 segundos.
• Etanol 100% 5 minutos
TECNICA O PROCEDIMIENTO
Coloración tricrómica para Microsporidium (Weber)
• Carbol xileno 5 minutos
• Xilol 5 minutos
• Montar en Permount u otro.
Tinción tricrómica
[Link]
Tinción Ziehl Neelzen modificada pata
parasitosis intestinales
[Link]
Leishmaniasis
[Link]
