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Técnica Northern Blot y sus Aplicaciones

El documento describe la técnica de Northern blot, que se utiliza para aislar y separar ARN de una muestra biológica. Se basa en la hibridación de ácidos nucleicos para identificar secuencias específicas de ARN. Involucra la obtención de ARN libre de ADN y proteínas, separación por tamaño mediante electroforesis, transferencia a una membrana, y detección de las cadenas de ARN reveladas con rayos X o una pantalla de fosforimager para establecer patrones de expresión génica

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Jessica Santiago
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Técnica Northern Blot y sus Aplicaciones

El documento describe la técnica de Northern blot, que se utiliza para aislar y separar ARN de una muestra biológica. Se basa en la hibridación de ácidos nucleicos para identificar secuencias específicas de ARN. Involucra la obtención de ARN libre de ADN y proteínas, separación por tamaño mediante electroforesis, transferencia a una membrana, y detección de las cadenas de ARN reveladas con rayos X o una pantalla de fosforimager para establecer patrones de expresión génica

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NORTHERN BLOT

FUNFAMENT O Y APLICACIÓN
¿QUE ES LA HIBRIDACIÓN DE
ÁCIDOS NUCLEICOS?
• Es un proceso de unión de dos cadenas
complementarias de ADN, ARN o de ADN y ARN ,
para formar una molécula de acido nucleico de
doble cadena
¿EN QUE SE BASA LA TECNICA DE
HIBRIDACIÓN?

• Se basa en el estudio de secuencias especificas


del ADN O ARN tanto como su identificación para
su eventual cuantificación.

• Para ello existen varias técnicas como la


Hibridación por filtración conocido como
Northern blot
JAMES ALWINE 1977
¿QUÉ ES NORTHERN BLOT?

• Northern blot es una técnica de


laboratorio que se utiliza para aislar
un ARN en partículas a partir de
una muestra biológica de cualquier
organismo
NORTHERN BLOT
• El objetivo de Northern blot es la separación
de ARN.
• El uso es para establecer patrones de
expresion diferentes de ARN en un tejido y
poder compararlos la expresion entre ellos
• Se puede separar diferentes productos de
expresion alternativa de un mismo gen
mediante el cual se obtiene varios ARNm
que seran traducidos a proteinas
Obtención de ARN libre de ADN y proteínas
Separar por electroforesis desnaturalizante
(Separación por tamaño y carga)
Transferencia cambio de las moléculas de ARN de
una superficie a otra
Transferir a membrana de nitrocelulosa o nylon
Cambio de las cadenas ARN
Revelar con placa de Rayos X ó pantalla de
fosforimager
APLICACIONES
• Ayuda a identificar los eventos
genéticos implicados en las
enfermedades neoplasicas.
• Trastornos hereditarios
• Predisposición a las
enfermedades multigenicas

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