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Pruebas Serológicas: Fiebres y Sífilis

La determinación de aglutinaciones es importante para detectar anticuerpos e investigar infecciones. Existen dos técnicas principales para realizar pruebas serológicas: la técnica clásica con incubación a 37°C y la técnica de centrifugación rápida. Estas pruebas permiten diagnosticar enfermedades como la fiebre tifoidea, paratifoidea, malta y sífilis mediante la detección de anticuerpos en muestras de suero sanguíneo.

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Pruebas Serológicas: Fiebres y Sífilis

La determinación de aglutinaciones es importante para detectar anticuerpos e investigar infecciones. Existen dos técnicas principales para realizar pruebas serológicas: la técnica clásica con incubación a 37°C y la técnica de centrifugación rápida. Estas pruebas permiten diagnosticar enfermedades como la fiebre tifoidea, paratifoidea, malta y sífilis mediante la detección de anticuerpos en muestras de suero sanguíneo.

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INTEGRANTES:

ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y


- LAURA CARHUCUSMA COMUN
BIOQUIMICA
- NORCA CARRASCO GODOY
 
- DAYSI CHAVEZ VEGA
ASIGNATURA: ANALISIS CLINICOS I
- JHON REPUELLO PORRAS
TEMA: DETERMINACIÓN DE FIEBRE TIFOIDEA,
PARATIFOIDEA, MALTA, SIFILIS - JUSTINA QUISPE HUAMANI
DOCENTE: Dra. DIONICIO ESCALANTE ELISA - MARILUZ R. DELGADO SEVINCHA
ROXANA - ROSA LUDEÑA ASTOHUAMAN
TURNO: NOCHE CICLO: VI - ETHEL PAUCAR ECHEVARRIA
- VICTOR JUAN FELIPA PATRICIO
 
Se ocupa procedimientos de laboratorio
PRUEBAS análisis de sangre que buscan
anticuerpos en su sangre llevados a cabo en una muestra de suero
SEROLÓGICAS sanguíneo

PRUEBAS DIRECTAS
Son aquellas que basadas en el
principio de la reacción antígeno
anticuerpo investigan la presencia del PRUEBA PRIMARIA
antígeno. Son aquellas en las cuales la reacción
antígeno anticuerpo no da lugar a ninguna
CLASES DE manifestación visible
PRUEBA INDIRECTA
PRUEBAS Son aquellas en las cuales la reacción
antígeno-anticuerpo da lugar a una ma-
SEROLÓGICAS nifestación visible lo cual-permite una
lectura visual macroscópica. Su
PRUEBAS SECUNDARIAS
realización usualmente es simple. Son aquellas en las cuales la reacción
antígeno-anticuerpo da lugar a una
manifestación visible lo cual- permite
una lectura visual macroscópica
PRUEBAS SEROLOGICAS
DETERMINACION DE
FIEBRE TIFOIDEA,
PARATIFOIDEA Y MALTA
NOCION DE DIFERENCIAS
ENTRE ESTOS 3 TIPOS DE
FIEBRES
TIFOIDEA

 La fiebre tifoidea se propaga por vía entérica y causa fiebre y otros síntomas
generales (p. ej., dolor de cabeza, artralgias, anorexia, dolor abdominal y
sensibilidad); en etapas posteriores de la enfermedad, algunos pacientes
desarrollan diarrea grave a veces con sangre, una erupción característica
(manchas rosa), o ambas.
 En ocasiones, la bacteriemia causa infecciones focales (p. ej., osteomielitis,
endocarditis, meningitis, abscesos de los tejidos blandos, glomerulitis).
 Un estado de portador crónico se desarrolla en un 3% de los pacientes no
tratados; estos albergan microorganismos en su vesícula biliar y los diseminan
en las heces durante más de 1 año.
 Diagnosticar con hemocultivos y coprocultivos; como es frecuente la resistencia
a fármacos, las pruebas de susceptibilidad son esenciales.
 Tratar con ceftriaxona, una fluoroquinolona o azitromicina, según las pruebas de
sensibilidad; pueden administrarse corticoesteroides para aliviar los síntomas
graves.
PARATIFOIDEA

 Fiebre Paratifoidea . Es una infección entérica y bacteriana generalizada, que


suele tener principio brusco, con fiebre continua, esplenomegalia, a veces
manchas rosadas en el tronco, comúnmente diarrea e invasión de los tejidos
linfáticos del mesenterio y los intestinos. La letalidad es muy inferior a la de
la Fiebre Tifoidea, aunque clínicamente son similares. Pueden ocurrir
infecciones leves y asintomáticas.
 La conformación del diagnóstico en el laboratorio y la identificación de las
especies infectantes se hacen mediante el examen bacteriológico de la sangre,
las heces y la orina.
MALTA O BRUCELLA

 La brucelosis se adquiere por contacto directo con secreciones y excreciones de


los animales infectados o por la ingestión de alimentos o productos lácteos
contaminados.
 La infección suele causar fiebre y síntomas generales, pero rara vez se ven
afectados órganos específicos (p. ej., el cerebro, las meninges, el corazón, el
hígado, los huesos).
 La mayoría de los pacientes se recupera en 2 o 3 semanas, aun sin tratamiento,
aunque algunos desarrollan una enfermedad subaguda, intermitente o crónica.
 Diagnóstico con hemocultivos, cultivos de médula ósea o de líquido
cefalorraquídeo y pruebas serológicas en las etapas aguda y de convalecencia.
 Tratar a la mayoría de los pacientes con 2 antibióticos, normalmente doxiciclina
más rifampicina, un aminoglucósido o ciprofloxacina; controlar a los pacientes
hasta 1 año después, para detectar recidivas.
 TOMA DE MUESTRA DE SANGRE

 forma de la toma de muestra


1. ¿Cuál es la importancia clinica de la determinacion de aglutinaciones?

 La importancia es para detectar anticuerpos.


 Sirve para investigar problemas con el sistema inmunológico.
 Se utiliza para detectar infecciones y también para mirar que tanto
puede ser inmune o resistente un individuo ante una infección o
enfermedad especifica.
 Se utiliza para descartar sospechas de una infección.
MATERIALES Y REACTIVOS

Lamina de vidrio micropipeta

Moldadientes
REACTIVOS
TÉCNICA OPERATORIA

EXISTEN 2 TIPOS DE TÉCNICAS

TÉCNICA CLASICA TÉCNICA DE


CON INCUBACIÓN CENTRIFUGACIÓN
A 37°C RAPIDA
TÉCNICA OPERATORIA
TÉCNICA CLASICA CON
INCUBACIÓN A 37 °C

1. Se realiza diluciones de 1/10, 1/20, 1/40, 1/80 y 1/160 del suero en agua
fisiológica.
2. Para cada suspensión, añadir a una serie de tubos: 0,1 ml de cada dilución
del suero, 0,9 ml de suspensión.
3. Incubar en un baño de agua o incubadora a 37°C, durante 2 horas
4. Al final después del periodo de incubación examinar los tubos que
contienen la suspensión H: puede observarse una aglutinación H que es
coposa y fácilmente disociable.
5. Los tubos que contienen suspensiones O se dejan a temperatura ambiente
(18-30°C) hasta el día siguiente
6. Después de ese tiempo se observa que la aglutinación es fina, granular y
difícil de disociar.
TÉCNICA DE
CENTRIFUGACIÓN RAPIDA

1. Realizar dos diluciones del suero:


- Suero 0,2 0,1
- Solución salina fisiológica 1,8 1,9
- Dilución 1/10 1/20
2. Colocar 4 filas de tubos de hemólisis no rebordeados en una gradilla de
tubos de ensayo.
3. Centrifugar a unas 3.000 r.p.m. durante 5 minutos (hasta que las bacterias
se hayan sedimentado).
4. Volver a suspender el precipitado golpeando suavemente el fondo del
tubo. Si la suspensión es homogénea, el resultado es negativo. Un
resultado positivo viene indicado por la presencia de una aglutinación
perceptible a simple vista
 Gran cantidad de partículas como pueden ser eritrocitos, bacterias, hongos y
virus pueden ser aglutinados por anticuerpos séricos, algunas veces de
manera inespecífica y otras muy específicas, siendo ésta última, respuesta a
una previa inmunización del organismo productor de los anticuerpos séricos.
 Las pruebas para identificar anticuerpos específicos son llevadas a cabo
titulando seriadamente antisueros en diluciones al doble en presencia de una
cantidad constante de antígeno.

FUNDAMENTO
PROCEDIMIENTO:

Las determinaciones comprenden dos etapas:

Con una pipeta serológica o una


1. Prueba presuntiva micropipeta depositar una gota de
suero problema en cada cuadrado.

A cada gota de suero se le añade


una gota de cada antígeno previa
agitación.
Mezclar con un palillo
mondadientes para cada
cuadrado y leer en el término de
uno a tres minutos.

Lectura: La reacción es
positiva cuando aparece
aglutinación en uno de los 5
cuadrados.
Se preparan 5 cuadrados limpios
y con una pipeta depositar en
[Link] de titulación: cada uno el volumen de suero:
0,08, 0,04, 0,02, 0,01 y 0,005
mL de suero respectivamente

Los títulos serán: 1/20, 1/40,


1/80, 1/160 y 1/320.
Agregar a cada suero una gota
del antígeno. Mezclar.
Luego hacer la lectura.

Titulo
1/40 o 1/80 Sospechoso de tener la
Los resultados se expresan en enfermedad
términos de la más alta
1/80 a mas Considerados probatorias
dilución que presenta de enfermedades
aglutinación.
PRUEBAS SEROLOGICAS PARA DIAGNOSTICO DE SIFILIS

La sífilis es una enfermedad infecciosa cuyo agente causal


es el Treponema pallidum, perteneciente, junto con otros
treponemas (borrelias y leptospiras) a la familia
Treponemataceae. El mecanismo de transmisión es por
contacto directo con las lesiones, por paso a través de la
placenta o por transfusiones de sangre contaminada,
aunque actualmente este último mecanismo es muy raro
que ocurra.
Actualmente existen diferentes técnicas para el diagnóstico serológico
de sífilis: las no treponémicas (reagínicas) no determinan anticuerpos
específicos frente a Treponema pallidum y se basan en antígenos
compuestos de soluciones alcohólicas con cantidades determinadas
de cardiolipina, colesterol y lecitina. Miden anticuerpos frente a estas
sustancias que son producidas por los tejidos dañados por el T.
pallidum.
Estas pruebas son: VDRL (Venereal Research Disease Laboratory),
RPR (Rapid Plasma Reagin), TRUST (Toluidine Red Unheated Serum
Test), USR (Unheated Serum Reagin) y ELISA
(Enzimoinmunoensayo). Son de bajo costo, fáciles de efectuar, se
utilizan como pruebas de inicio en la detección de sífilis y para evaluar
la respuesta al tratamiento.
TOMA DE MUESTRA DE SANGRE
 
La prueba de sífilis generalmente es un análisis de sangre.
Durante la prueba de sífilis, el profesional de la salud toma
una muestra de sangre de una vena de un brazo con una
aguja pequeña. Después de insertar la aguja, extrae una
pequeña cantidad de sangre y la coloca en un tubo de
ensayo o frasco. Tal vez sienta una molestia leve cuando la
aguja se introduce o se saca, pero el procedimiento suele
durar menos de cinco minutos.
PRUEBAS SEROLOGICAS PARA
DIAGNOSTICO DE SIFILIS
MATERIALES Y REACTIVOS

PLACA REACTIVA MONDADIENTE


ROTADOR ELECTRICO

MICROSCOPIA MICROPIPETA
BAÑO MARIA
REACTIVOS

SOLUCIÓN ANTIGÉNICA DE RPR-CARBÓN (SUSPENSIÓN


DE ANTÍGENO DE CARDIOLIPINA 0,003%, LECITINA 0,02%
SOLUCION SALINA
Y COLESTEROL 0,09%, ADSORBIDO SOBRE PARTÍCULAS
DE CARBÓN 0,02%)
 
TECNICA OPERATORIA PARA EL DIAGNOSTICO DE LA SIFILIS

TECNICA POR SEROLOGICA

Técnica no treponemica: Técnica treponemica


VDRL MHA-TP
RPR FTA-ABS
ELISA
TECNICAS NO TREPONEMICAS

 En esta categoría se encuentran :VDRL Y RPR


 Corresponden a exámenes realizados con antígenos no derivados del
Treponema pallidium.
 Se usan como técnicas de tamizaje diagnóstico y de seguimiento.
 Determinan anticuerpos no específicos frente al Treponema pallidium.
 Examen cualitativo y cuantitativo
.
TECNICAS NO TREPONEMICAS
VDRL
 Es una prueba de micro floculación en lámina
 utiliza un antígeno que contiene cardiolopina, lecitina, y colesterol.
 La suspensión de antígeno forma grumos cuando se enfrenta con anticuerpos antilipídicos
presentes en el suero o líquido cefalorraquídeo de pacientes con sífilis o algunas otras
enfermedades de tipo crónico.
TECNICAS NO TREPONEMICAS
VDRL

FUNDAMENTO
Limitaciones de la técnica
a. Puede producirse un fenómeno de prozona, en el
cual la reactividad de un suero no diluido se ve
inhibida.
b. Puede producirse falsos positivos en muestras de
personas o pacientes que usan:
 Narcóticos
 Padecen de lupus eritematoso,
 Malaria,
 Lepra,
 Neumonía viral.
TECNICAS NO TREPONEMICAS
RPR
 Prueba floculación macroscópica.
 Utiliza un antígeno que es una modificación del antígeno de VDRL.
 Muestra en suero y plasma
 Positivo: Aglutinación franca
 Negativo: No aglutinación

Fundamento
Las reaginas plasmáticas, anticuerpos dirigidos contra antígenos derivados de fuentes no
treponémicas, producen agregaciones con el antígeno, coaglutinando con las partículas de
carbón
TECNICAS NO TREPONEMICAS
RPR

Limitaciones
 Pueden aparecer falsos negativos en sífilis primaria temprana y en sífilis tardía, o también debido a fenómenos
de prozona.
 No utilizar con líquido cefalorraquídeo
 Se han descrito con antígenos cardiolipínicos falsas positividades en enfermedades tales como:
TECNICA TREPONEMICA

 Detectan específicamente los anticuerpos contra Treponema pallidium


 Son exámenes confirmatorios(FTA-Abs y MHA-TP)
 Permanecen reactivas de por vida
 No son útiles al momento de distinguir enfermedad actual de enfermedad
antigua.
 No estandarizados para diagnóstico de Neurosífilis
 Examen cualitativo
TECNICA TREPONEMICA
MHA-TP

 Detecta anticuerpos treponémicos por técnica de hemaglutinación


 Se emplea como examen confirmatorio
 Es menos sensible que la prueba FTA-Abs en las etapas precoz y tardía de la enfermedad.
TECNICA TREPONEMICA
MHA-TP
 FUNDAMENTO
 Es una prueba de hemaglutinación pasiva que se basa en la aglutinación de
eritrocitos sensibilizados con Treponema Pallidium.
TECNICA TREPONEMICA
MHA-TP

 Limitaciones de la prueba
a. La prueba de MHA-TP, tiene una sensibilidad de 98-99%frente a la FTA-Abs.
b. No debe ser utilizada para evaluación de tratamiento
c. Puede ser reactiva en pequeño porcentaje (1%) en personas sanas
d. En suero de personas con Mononucleosis, Lepra y enfermedades autoinmunes,
puede dar falsos positivos.
TECNICA TREPONEMICA
FTA-ABS
 Es una prueba de anticuerpos fluorescentes indirecta
 Empleada como examen confirmatorio (FTA-Abs y MHA-Tp)
 Es un examen cualitativo
 Permanece positiva de por vida
 Es útil en todas las etapas de la enfermedad
 Es una técnica compleja y de alto costo, se requiere equipamiento y personal adiestrado
TECNICA TREPONEMICA
FTA-ABS

 Fundamento
 Es una prueba de inmunofluorescencia indirecta, en la que el suero problema,
es diluido en una solución absorbente(extracto de cultivo de Treponema
phagedenis),y colocado en una lámina que contiene el antígeno(Treponema
pallidium cepa Nichols).Si en el suero se encuentran anticuerpos contra
treponemas patógenos, estos se unirán al antígeno y cuando se adiciona el
conjugado(inmunoglobulina antihumana con isotiocianato de
fluoresceína)este se unirá al anticuerpo dando como resultado una reacción
que se visualiza en el microscopio de fluorescencia
TECNICA TREPONEMICA
ELISA

 Método de cuantificación inmunológica que evalúa la reacción antígeno-


anticuerpo mediante una reacción enzimática
 Usa proteínas recombinantes de Treponema pallidum
 Es la técnica de elección para tamizaje de bancos de sangre
 Detecta anticuerpos IgG o IgM
 Un test de ELISA positivo para treponema puede significar enfermedad actual o
antigua, y la sangre se considera no segura(Tamizaje).En esta situación se indica
realizar examen no treponémico(VDRL,RPR)
DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO: PT Test rápidos
. Realice la lectura del resultado a partir de los 15 minutos (hasta un máximo de 24
hs, no realizar la lectura antes de los 15 minutos) de acuerdo a la siguiente
interpretación:
Esquema de trabajo
,
positivo negativo invalido
Sifilis

Sifilis Sifilis

Sifilis Sifilis

lis li
s
fi fi
Si Si

1 2 3
Cortar una tira Añadir la sangre del Inmediatamente
por capilar apoyando agregar 1
la línea sobre la superficie y gota de
Resu ltado positivo Resultado Resultado punteada. esperar hasta que se buffer.
Dos bandas rojas de negativo invAlido Retirar el plástico impregne.
cualquier intensidad en las cobertor.
Una banda roja en la ventana Ausencia de banda en la
Colocar la tira
ventanas de control y de control y ausencia de ventana de control. Repetir en un lugar
paciente. banda en la ventana de el ensayo con una nueva plano.
paciente. tira, incluso si aparece una
banda en la ventana del ,
paciente.
positivo negativo invalido
,
Guia de l a i n te n s i d a d
de l a s b a r r a s p a r a E s c a l a ,de i n t e n s id a d d e Si fili s Sifilis Sifilis Sifilis
determinar e l lin ea de prs
resultado:
Cualquier tipo de tonalidad roja
que
pueda aparecer en la ventana de
resultados indica que el resultado
00:15
es positivo. El resultado es
0 1 2 3 4
positivo aunque la barra de la
ventana de resultados sea más
clara o más oscura que la barra negativo positivo
de la ventana de control.

4 5
21. Registre los resultados en la “Planilla de resultados de prueba rápida” Esperar al menos 15 Interpretación de
minutos los resultados.
para leer el resultado.
22. Descarte la tira, algodón y gasa como residuos patogénicos, en una bolsa
roja.
PRIMER NIVEL ATENCIÓN (PNA)
1.- Pruebas Rápidas 3.- Pruebas Rápidas PRS en el PDA
en el punto de P R S en el P N A Si se sospecha:
Sífilis primaria
en el punto de Si se
sospecha:
Sífilis
atención asociado
reciente atención, para nivel de primaria
(repetir entre las Iniciar

PRIMER NIVEL O
Iniciar
tratamiento Positiva Negativa 2 y 4 semanas Atención Primaria de tratamiento Positiva Negativa reciente
a algoritmo la PRS) (repetir
la Salud con posibi- entre las
2y4
tradicional. lidad de realizar Sífilis actual Descarta semanas
Sífilis actual o pasada Descarta SIFILIS

PDA
la PRS)
Prueba No o pasada SIFILIS
Treponémica
El laboratorio únicamente.
debe PNT 1

PNT 1
cuantificar
sin

LABORATORIO NIVEL II O APS CON


esperar la Reactiva NO Reactiva 2
El laboratorio
solicitud

LABORATORIO NIVEL I O APS CON


debe
médica*
Reactiva NO Reactiva
PT En caso de cuantificar
1 Para definir infección activa y duda sin
seguimiento del tratamiento. diagnóstica esperar la Si se sospecha:
2 Es necesario que el laboratorio conozca por solicitud Sífilis primaria
Positiva Negativa Positiva Negativa reciente
el resultado de la PRS a los efectos de sospecha médica. Confirma Descarta

LABORATORIO
la prosecución de la PT, pues de otro
de (repetir entre
modo el algoritmo tradicional
terminará en ese infección, SIFILIS SIFILIS las 2 y 4
repertir a
Tratar y actual
punto . Se sugiere la inscripción (“PRS + C onfirma SIFILIS semanas la

LABORATORIO
Tratar y Descarta Descarta notificar
ó PRS -) en la solicitud médica .
notificar SIFILIS
SIFILIS
pasada
SIFILIS
las 2
SN VS 2.0 o PNT)
actual o o muy semanas
SN V S 2.0 reciente. o
pasada
pasada. Evaluar. derivar
al LNR 1 Para definir infección activa y seguimiento
del tratamiento.
PRIMER NIVEL DE ATENCION (PNA)

2 .-Pruebas Rápidas
en el punto de P R S en el PDA Si se sospecha: .4 -Prueba Rápida en
atención asociado Sífilis primaria
reciente el punto de atención,
PRS en el PDA Sospecha de
(repetir entre las • Sífilis primaria
a algoritmo Iniciar
Positiva Negativa 2 y 4 semanas para nivel de APS sin (repetir entre
tratamiento
Tratar y las 2 y 4
reverso. la PRS)
Guía para la utilizaciónde pruebas rápidas deposibilidad de realizar notificar
SN VS 2.0
Positiva Negativa semanas la
PRS)
Sífilis actual o pasada Descarta SIFILIS Prueba No • Con clínica
sífilis compatible,
Treponémica tratar
Sífilis actual Descarta
o pasada SIFILIS
El PT En caso de
duda
laboratorio diagnóstica Consideraciones
LABORATORIO NIVEL

de por sospecha
be Positiva Negativa de infección, La muestra no reactiva en la prueba rápida inicial se define como: “muestra no reactiva para sífilis”. Si persiste la sospecha
cuantificar repertir a las
sin 2 semanas o
clínica de sífilis se deberá repetir el algoritmo entre las 2 y las 4 semanas después, para la exclusión del diagnóstico (esto
esperar la derivar al LNR dependerá del periodo de incubación de la enfermedad, ya que la respuesta humoral puede ser entre 17 y 118 días desde el
solicitud
médica
PNT 1 Falso positivo
de la PRS. inicio de la infección).
No tratar. No La muestra con resultados reactivos en las dos pruebas (PRS y prueba no treponémica), se define como: “muestra
seguir
III

reactiva para sífilis”. En ese caso se deberán cuantificar los anticuerpos no treponémicos (Algoritmo 4.2.3).
Reactiva NO Reactiva Por discordancia
previo diferente PT (TP - En las muestras con resultados discordantes se deberá realizar una prueba treponémica diferente a la PRS (FTA-abs, TP-
Tratar y
PA) PA, TP-HA), para descartar un falso positivo en la PRS (Algoritmo 4.2.1).
notificar
SN V S 2.0 Confirma Confirma
Positivo Negativo Muestras con resultados reactivos en dos pruebas treponémicas de distinta metodología y no reactivas en pruebas no
SIFILIS SIFILIS
actual o actual o trepo- némicas se definen como: “muestra reactiva para sífilis” (Algoritmos 4.2.1 y 4.2.2).
Falso positivo de la PRS y
pasada pasada CIA. No tratar. No
seguir
PRUEBA DE CAMPO OSCURO
VDRL
TREPONEMA PALLIDUM
• INMUNOLOGIA – V.D.R.L. Y
R.P.R
SÍFILIS: Diagnostico laboratorio
Identificación del T. pallidum
• Microscopio de campo oscuro
• Espiroqueta : 0.1 a 0.2 X 6 – 20 um.
• Movimiento rotacional
• Raspados del chancro duro
• No útil en lesiones de boca
• PCR
• Biopsia
PRUEBA V.D.R.L.
SEROLOGICAS (V.D.R.L.) CUALITATIVO
1. PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS.
Antígeno no Treponémico El antígeno de V.D.R.L. no es necesario
preparar todo el frasco de 500 pruebas, por
que una ves preparado tiene una duración
máxima de 48 horas.
Ejemplo:
1) 1 ml. solución buffer salina, 20
gotas antígeno (P/ 50 pruebas)
2) 0.5 ml. solución buffer salina 10
gotas antígeno (P/25 pruebas)
REACTIVO DE V. D. R. L.
3) 0.25 ml. solución buffer salina 05
1. SEROLOGICAS (V.D.R.L.).
gotas
• COMPONENTES:
antígeno (P/12 pruebas)
Muestra:
– Lecitina
– Cardiolipina –Suero o plasma
– Colesterol –ANTIGENO
– Buffer – 20 l para cada
PROCEDIMIENTO:
1. Extraer sangre venosa 2 ml. aproximadamente
con anticoagulante o sin anticoagulante.
2. Centrifugar cuidadosamente a 2,500 r.p.m. por
5 minutos.
3. Inactivar el suero a 56 por 30 minutos en
baño María.(VDRL)
4. Tomar el suero inactivado 50 l. en una
superficie plano con anillo y una gota de
antígeno preparado con una aguja calibre Nº
l8.
5. Homogeneizar y colocar la lámina en un
rotador eléctrico por 4 minutos a l80 Rpm.
180 r p m
6. Lectura al microscopio con lente de 40 x.
METODOLOGIA - REPORTE DE RESULTADOS
• REPORTE DE RESULTADOS
• Reactivo: Grumos medianos a grandes
• Reactivo Débil: Grumos pequeños con partículas de antígeno libre.
• No Reactivo: Sin grumos (antígeno libre)
PRUEBA DE V.D.R.L. CUANTITATIVO
Numerar 5 tubos y colocar en tubos del 1º al 5º
0.5 ml. de suero fisiológico.
[Link] el 1º tubo colocar 0.5 ml de suero problema,
homogeneizar y tomar 0.5 ml para el 2º tubo,
homogeneizar y tomar 0.5 para el tercer tubo y así
sucesivamente hasta el 5º tubo.
[Link] esta manera tenemos que las diluciones del suero
están en orden creciente, 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32
diluciones.
[Link] el contenido de cada tubo, realizar el mismo
procedimiento que para una prueba cualitativa. 0.5 ml
[Link] 01 gota de antígeno a cada uno de los
círculos del 1º al 5º , homogeneizar y rotar por 8 1 2 3 4 5
minutos.
[Link] lectura sigue los mismos parámetros que para 0
.
la 5

prueba cualitativa.
SUERO H
SUERO
[Link] el título en términos de la más alta dilución FISIOLOG SUERO F
HOMOGENIZAR Y RETIRAR
PARA EL TUBO 1, 0.5
en que se produzca un resultado reactivo (Reactivo .
ml. Y PARA T. 2 ,3 Y ASI
débil) . SUCESIVAMENTE
INTERPRETACION DE RESULTADOS PRUEBAS NO
TREPONEMAICAS

DELUCIONES DEL SUERO


RESULTADO
1:2 1:4 1:8 1:16 1:32

RD N N N N REACTIVO 2 DILS.

R R N N N REACTIVO 4 DILS.

R R R N N REACTIVO 8 DILS.

R R R R N REACTIVO 16 DILS.

R R R R R REACTIVO 32 DILS.

50 ul 25 ul 12.5 6.2 3.12


ul 5 ul ul
SEROLOGICAS
( R.P.R. )
( Antígeno no Treponémico)

COMPONENTES
• Cardiolipina
– Lecitina
– Colesterol
– EDTA
– Acetil colina
– Carbón

R. P. R.
(REAGINA PLASMATICA
RAPIDA).
PRUEBA DE R.P.R. SEMICUANTITATIVO
1. Colocar 50 l. de suero fisiológico al 0.9 % del 1º al 5º
círculo de la tarjeta
[Link] 50 l. del suero problema en el primer círculo,
mezcle bien y luego transfiera 50 l. al segundo
círculo mezcle bien y transfiera 50 l. al tercero
círculo, mezcle bien y transfiera 50 l. al 4º y 5º círculo,
mezcle y descarte 50 l. del último círculo.
[Link] un aplicador, extienda la mezcla en cada
círculo comenzando en el 5º y terminando en el 1º
círculo.
4. Adicionar 01 gota de antígeno a cada uno de los círculos
del 1º al 5º , homogeneizar y rotar por 8 minutos.
[Link] lectura sigue los mismos parámetros que para la
prueba cualitativa.
6. Reportar el título en términos de la más alta dilución
en
PRUEBA DE R.P.R. SEMICUANTITATIVO

SUERO
FISIOLOG.

1:2 1:4 1:8 1:16 1:32

50 ul
50 ul
100 ul
1 2 3 5
4

Suero fisiolog.50 ul
Suero humano 50 ul.

suero 50 ul 25 ul 12.5 ul 6.25 ul 3.12 ul


INTERPRETACION DE RESULTADOS PRUEBAS NO
TREPONEMAICAS-I Y II
CUADRO DE TITULACION PARA LA PRUEBA DE R.P.R
• Un resultado no reactivo sin evidencia clínica: SEMICUANTITATIVA
DELUCIONES DEL SUERO
– Puede indicar que no hay infección por treponemas o que el RESULTADO
tratamiento fue efectivo. 1: 1: 1:8 1:1 1:32
2 4 6
• Un resultado reactivo puede indicar
RD N N N N REACTIVO 2 DILS.
– Infección presente o pasada con Treponemas patógenos.
– Puede ser una reacción falso positiva, lo cual se detecta mediante una
prueba Treponémica.. R R N N N REACTIVO 4 DILS.

• Un resultado no reactivo con evidencia clínica: R R R N N REACTIVO 8 DILS.


– Puede observarse en sífilis primaria o en sífilis secundaria por
R R R R N REACTIVO 16 DILS.
exceso de anticuerpos
R R R R R REACTIVO 32 DILS.
• El incremento en cuatro veces el título inicial indica Infección o re-infección
y la disminución de cuatro veces el título indica un tratamiento efectivo. 50 ul 25 12. 6.2 3.12
ul 5 ul 5 ul
ul
1/ 1/ 1/ 1/1 1/3
2 4 8 6 2
Leyenda: N = No Reactivo ….RD: Reactivo Débil ….R: Reactivo
PRUEBAS CONFIRMATORIAS PARA SIFILIS
TPHA = Prueba de GRADOS
Hemoaglutinación del Treponema
Pallidum (agente causante
DE AGLUTINACION
de la sífilis). • Ausencia de
El TPHA = es un equipo anticuerpos
de diagnóstico para la detección formación de botón
de anticuerpos ESPECIFICOS al
treponema Pallidum en suero • Presencia de
humano, utilizando las técnicas de anticuerpos
Hemoaglutinación. formación
Hemaglutinación pasiva en la cual
el suero humano diluido es
enfrentado a glóbulos rojos de
carnero o pollo sensibilizados con
Treponema pallidum.
Cuando en la muestra de suero
existe anticuerpos contra Treponema
se forma una malla de aglutinación.
TRATAMIENTO
ESTADIO PLAN DE ELECCION ALTERNATIVA CONTROL

Sífilis < 1 (o Pen. G benzatínica 2,4 MUI -tetraciclina 500 mg c/6 h. (o 3-6-12 meses
2) años i/m en dosis única. doxiciclina 100 mg c/12 h) v/o
Puede repetirse a la semana, por 14 d.
especialmente - o ceftriaxone 1 g i/m o i/v 10
en d.
ambarazada o no adherente a
controles

Sífilis > 1 (o Pen. G benzatínica 7,2 MUI - tetraciclina 500 mg c/6 h. (o 3-6-12 meses
2) años i/m en 3 dosis, con 1 semana doxiciclina 100 mg c/12 h.
no de intervalo v/o, 28 d.
neurosífilis

Neurosífilis - penicilina G cristalina 18 a no hay 3-6-12-18-24 meses.


o manifestaciones 24 MUI i/v, 10 a 14 d PL c/6 meses
oculares
o auditivas
atribuidas a sífilis

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