Scribd
Cargar
111 vistas4 páginas

Microscopio de Fluorescencia: Funcionamiento y Uso

El microscopio de fluorescencia utiliza luz ultravioleta para excitar moléculas en una muestra que emiten luz de mayor longitud de onda, permitiendo determinar la distribución de moléculas específicas dentro de una célula. Consta de una fuente de luz, filtros para seleccionar las longitudes de onda de excitación y emisión, y objetivos de cuarzo para transmitir la luz ultravioleta.

Cargado por

Alexandra Ortega
Derechos de autor
© © All Rights Reserved
Nos tomamos en serio los derechos de los contenidos. Si sospechas que se trata de tu contenido, reclámalo aquí.
Formatos disponibles
Descarga como PPTX, PDF, TXT o lee en línea desde Scribd
111 vistas4 páginas

Microscopio de Fluorescencia: Funcionamiento y Uso

El microscopio de fluorescencia utiliza luz ultravioleta para excitar moléculas en una muestra que emiten luz de mayor longitud de onda, permitiendo determinar la distribución de moléculas específicas dentro de una célula. Consta de una fuente de luz, filtros para seleccionar las longitudes de onda de excitación y emisión, y objetivos de cuarzo para transmitir la luz ultravioleta.

Cargado por

Alexandra Ortega
Derechos de autor
© © All Rights Reserved
Nos tomamos en serio los derechos de los contenidos. Si sospechas que se trata de tu contenido, reclámalo aquí.
Formatos disponibles
Descarga como PPTX, PDF, TXT o lee en línea desde Scribd

MICROSCOPIO DE

FLOURESCENCIA
La fluorescencia es uno de los fenómenos físicos más utilizados en microscopía biológica y analítica, sobre
todo por su alto grado de sensibilidad y especificidad. La fluorescencia es una forma de luminiscensia.
La microscopía de fluorescencia nos permite determinar la distribución de una sola especie de molécula, su
cantidad y su ubicación dentro de una célula.  
• El microscopio de fluorescencia es una variación del microscopio óptico, dotado de luz
ultravioleta en el que los objetivos son iluminados por rayos de una determinada longuitud de
onda.
• La imagen observada es el resultado de la radiación electromagnética emitida por las moléculas
que han absorbido la excitación primaria y reemitido una luz con mayor longitud de onfa
• Para dejar pasar solo la emisión secundaria deseada, se deben colocar filtros apropiados debajo
del condensados y encima del objetivo.
• Se usa para detectar sustancias con autofluorescencia (vitamina A) o sustancias marcadas con
fluorocromos
Instrumentación FUENTE LUMINOSA
(lámpara de mercurio o halógena)

Debe emitir la mayor cantidad de luz ultravioleta en el límite del espectro


visible, que atraviesan el material de la preparación de la misma forma en
que lo hace un microscopio óptico común

Nunca deben utilizarse más tiempo del recomendado por el fabricante


ya que existe riesgo de explosión que dañaría el microscopio y llenaría
la habitación de vapores de mercurio
1.La lámpara emite luz en todo el espectro.

2.El filtro de excitación sólo deja pasar la parte del espectro necesaria para excitar la muestra.

3.El espejo dicroico refleja hacia la muestra la excitación correspondiente.

4.La muestra se excita con la luz que le llega y emite en un espectro superior al de la excitación.

5.El espejo dicroico transmite la emisión de la muestra.

6.El filtro barrera hace una selección exacta del espectro de emisión que nos interesa.

7. Objetivos: Suelen ser de
cuarzo ya que el vidrio
absorbe la radiación ultra-
violeta

También podría gustarte