HEMOGLOBINOPATIAS

Presentado por:
Verónica Viviana Vásquez
Oscar Julián Sánchez
Mario Román Mahecha

Presentado a:
Julia Ester Gallego

UNIVERSIDAD DEL TOLIMA

Facultad de Ciencias de la Salud
MEDICINA – Sistemas Orgánicos 2
HEMATOLOGÍA– B 2016
 HEMOGLOBINOPATÍAS

Anormalidad genética de la Síntesis de la

estructura (Cadena de globina) molécula de
hemoglobina

Defecto Cualitativo Defecto Cuantitativo

Cadena de Globina
(Anormalidad estructural) Su síntesis
 Hemoglobina Hemoglobina
cualitativa anormal cuantitativa
anormal

Mutaciones genéticas Defectos genéticos

Pérdida o sustitución de aa Disminución en la síntesis de

en la cadena de la proteína cadenas de globina
globina

Anemia de Células falciformes Talasemias

 Clínica de la hemoglobinopatía

Cadena de globina Gravedad de la hemólisis Producción

implicada compensadora de otras
cadenas (Globinas)

(α, β, δ o γ)
• Algunas hemoglobinopatías no producen signos ni síntomas
• Identifican por estudios en la población
• Descubrir los portadores silenciosos
• Es una enfermedad hereditaria mortal más común
 VARIANTES
ESTRUCTURALES DE
LA HEMOGLOBINA
Identificación de las
variantes de la
Hemoglobina
 Identificación de las variantes de la
Hemoglobina
Cambios estructurales hereditarios en una de las cadenas de globina

(α, β, δ o γ)
James Harrick - 1910
• Descubre los eritrocitos falciformes, en un
estudiante negro

• Estableció el patrón clínico de la anemia de

células falciformes
 Linus Pauling - 1949

• Descubre la alteración en la movilidad

electroforética de la Hemoglobina en los
pacientes con anemia de células falciformes

• Alteración de la carga eléctrica-> anormalidad

molecular de la cadena de la globina

• 300 hemoglobinas anormales

 Sustitución o pérdida de
un solo aa en la cadena no-
Variantes estructurales
polipeptídica de la Hb

No necesariamente

Funciones de la molécula
de Hb

Propiedades físicas
(Solubilidad y
estabilidad)
La mutación afecta estas
propiedades se produce
una enfermedad clínica
 Electroforesis de la Hemoglobina

Hb-> Carga eléctrica por carboxilo (COOH)

y grupos nitrogenados protonados (H+)

Tipo y fuerza carga -> secuencia del aa de la

Hb y el pH del medio.

Sustituciones de aa altera el cambio

electroforético de la molécula
Lisado de eritrocitos se aplica a un extremo
de la tira de acetato de celulosa

Remoja con amortiguador a un pH deseado

Aplica corriente a la tira

Dependiendo de la carga eléctrica de la Hb,

así será su velocidad de desplazamiento

Periodo especifico-> Se retira la tira y se

tiñe

Se cuantifica la cantidad de Hb en cada banda

(Densitometría)
Hemoglobinas rápidas

Hemoglobinas lentas
Cuantificación de la HbF
INDICIO DE LA PRESENCIA DE UNA
HEMOGLOBINOPATÍA

Anormalidades de la cadena β- globina

Disminución o ausencia de la hbA

Aumento compensatorio HbF o HbA2

Hbf se cuantifica por la prueba de

desnaturalización con álcalis o de elución ácida
 Desnaturalización con Elución ácida
álcalis

Amortiguador ácido cítrico

Se lava un vol. De
fosfato –pH3,3
eritrocitos y éstos se
lisan

Elución Hb del eritrocito,

Agrega NaOH 1,2 N
menos HbF

Muestra en portaobjetos, se tiñe y

HbF-> no desnaturaliza
examina
HbA -> Se desnaturaliza

HbF-Z se tiñe re oscuro

HbF-> Queda en el filtrado y se mide
espectrofotométricamente
HbA -> Se precipita
 Cuantificación de la HbA2

Estimación de la HbA2 Diagnóstico de β-

talasemias

HbA2 puede aumentar hasta constituir

7% de la Hb

Banda de A2, es objeto de

elución del acetato de
Electroforesis en acetato
celulosa y se mide
de celulosa
espectrofotométricamente
Nomenclatura
 NOMENCLATURA

Primera Hb anormal descubierta -> HbS

Otras variantes de la Hb-> letras

sucesivas del alfabeto a partir de la letra
C

Letra A -> Hemoglobina normal del

adulto
 NOMENCLATURA

La letra B, no se uso para evitar

confusiones con el grupo sanguíneo

Letra F-> Hemoglobina Fetal

Letra M-> Hb tienden a formar

metahemoglobina.
 NOMENCLATURA

Descubrir cada vez más variantes-

A las Hb se les dio el nombre de

acuerdo con el área geográfica en la cual
se descubrió (Hb Ft. Worth)

Si la Hb tenía la movilidad electroforética de una Hb que había recibido una letra

antes, se usó la letra además del área geográfica (HbG Honolulú)
 Comité internacional

HbS B6 (A3) Glu -> Val

DESIGNACIÓN CIENTIFICA 1. La mutación está en la cadena β
1. La cadena mutada 2. Aminoácido afectado en la sexta
2. La posición afectada el aminoácido posición de la cadena
3. La posición en la hélice de la mutación 3. En la posición A3 de la hélice
4. La sustitución del aa se sustituye por
4. La sustitución del aminoácido
glutamina
 NOMENCLATURA

La mayor parte de las hemoglobinas

anormales afectan a la cadena β

Una alteración de esta cadena produce

una cantidad suficiente de Hb anormal
para producir síntomas de enfermedad
Gen codificante para la globina – mutación
cadena β

Se produce HbA como la Hb anormal, y

se usa el termino “rasgo” – para
describir el trastorno heterocigoto

No se produce HbA, y se usa el termino

“enfermedad”, anemia por células
falciformes
Fisiopatología
Variantes estructurales de la Hb-> Causa
síntomas cuando la sustitución de aa Sitio crítico de la molécula

Cambios en la molécula de Hb producidos por mutación genética en las

cadenas de globina

Cambio Ejemplo
Solubilidad disminuida HbS; HbC;
Estabilidad disminuida Anemias hemolíticas congénitas con
cuerpos de Heinz
Alteración de la afinidad por el oxígeno HbM; Hb Chesapeake
 SOLUBILIDAD ALTERADA

Un aa no polar es sustituido por un Se puede afectar la solubilidad de la

residuo polar, cerca a la superficie de la molécula de la Hb
cadena
• En estado desoxigenado, la Hb S polimeriza en agregados
insolubles, rígidos.

• Sus sustituciones de superficie no afectan la estructura terciaria,

la función de hem, ni interacciones de la subunidad. (Inocuas)
 FUNCIÓN ALTERADA
Variantes estructurales de la Hb-> Causa Cerca de la hendidura hidrófoba de la
síntomas cuando la sustitución de aa cadena de globina

Contiene al hem, afectando la afinidad

de la Hb por el oxígeno

Al estabilizar el hierro del hem en el

estado férrico
La bolsa de hem no polar normal-> El
hierro de hem en estado ferroso
reducido.

Variables estructurales que afectan la

bolsa de hem (Sustitución de Tirosina
por Histamina)

Estabiliza el hierro en estado férrico,

produciendo metahemoglobina
permanente.
Mutaciones en el sitio de interacción de la subunidad α1, β2, afectan las
propiedades alostéricas de la molécula
Eritrocitosis congénita Anemia y cianosis
 ESTABILIDAD ALTERADA

Sustitución de aa en los residuos interno hacen que la molécula de la

hemoglobina se pliegue en forma anormal

´Pliegue anormal -> Sustitución de residuos interno polares por no polares

Pliegue normal -> Residuos hidrófilos sobre la superficie, residuos

hidrófobos hacia el interior
 Variantes inestables -> Anemias hemolíticas congénitas con cuerpos de
Heinz

La hemoglobina se desnaturaliza ewn forma de cuerpos de Heinz

Fija a la membrana celular

Produce lesiones y destrucción prematura de

la célula
Anemia de células
falciformes
(Drepanocitosis)
La anemia de las células falciformes es la hemoglobinopatía sintomática mas
común en todo el mundo

Heterocigotos hasta 40%

Las áreas geograficas con mayor incidencia del gen drepanocitico también son
áreas donde las infecciones por plasmodium falcipsrun son comunes.

Proporciona una ventaja selecctiva

contra infecciones palúdicas mortales
HbS

Aumento de la frecuencia del gen

Fisiopatología
 La hemoglonia S es un tipo de hemogloniana mutante

Producida
Cuando la valina no polar se sustituye por un acido
glutámico polar en la sexta posicion
En

La Helice A3 de la cadena Beta

Produce
Cambio en la carga neta de la superficie de la molecula

En
consecuencia
• Cambia la movilidad electroforética de la molecula
• Disminuye la solubilidad
• La desoxihemoglobina s polimeriza agregados rigidos
Organos en donde se
promueve
depende

DEMORA EN LA
DESOXIGENACION Y
FORMACION DE • Concentracion de hemoglobina
POLIMEROS DE HbS globular media (CHM)
• Hbs
• Fuerza ionica
• Tension del oxigeno

ambiente

• Hipoxico
• Acidotico
• Hipertonico
la drepanocitosis depende

Concentración de Hbs dentro del

eritrocito (CHCM)

% Hemoglobina A

% Hemoglobina S

% Hemoglobina A2

% Hemoglobina F

Mientras mas este concentrada la

HbS dentro de la celula, mayor es
el CHCMy el potencial de
formación agregados de la HbS
 Inicia con

Disminucion de la saturación de oxigeno

cercana a 38%
LA POLIMERIZACION DE LA
DESOXIHEMOGLONINA S
genera

✓ Rigidez del eritrocito

✓ Disminuye la deformabilidad
✓ Lesiona la membrana eritrocitica
✓ Aumenta la fragilidad de la celula
 LA POLIMERIZACION DE LA HEMOGLOBINA S

ETAPA
Nucleación
1 ETAPA 2 ETAPA 3
polimerización alineamiento

ESTADO Agregación de 15 moléculas de Aumento la viscosidad del Las fibras se alinean para
Hb. Eritrocito normal sin contenido IC al polimerizarse formar fasiculos. La celula
cambios la desoxihemoglobina S en 14 adquiere la forma de media
tiras luna

AMBIENTE
Depende de Ph, tensión de oxigeno, concentración de desoxihemoglobina, temperatura

Milisegundos a horas Algunos segundos Algunos minutos

 IRREVERSIBILIDAD DE LAS CELULAS
FALCIFORMES
REOXIGENACION

Fagocitos del bazo,

hígado y medula ósea

Células falciformes irreversibles

(CFI)
 CAUSA DE LA ANEMIA
Hemolisis extravascular
BAZO

HEMOGLOBINA
NORMAL

HEMOGLOBINA
FALCIFORMA

CORDON
ESPLENICO

MACROGAFO
 RASGO FALCIFORME
(DREPANOCITICO)
El rasgo falciforme no están grave como
la drepanocitemia

Porque si hay una variante estructural de la

cadena beta de la hemoglobina esta puede
intervenir en la polimerización
DATOS CLINICOS
 ANEMIA

VESICULA
BILIAR

Hemolisis = aumento bilirrubina = Formación de cálculos biliares

COLELITIASIS
 Los cambios
hemodinámicos se
producen e intentan
compensar el déficit de
oxigeno tisular
 En un intento inútil de
recuperar la destrucción
eritrocitaria primaria es
la hiperplasi de medula
osea
 CRISIS VASOOCLUSIVA
Se desencadenan por: infección, disminución de la presión
de oxigeno, deshidratación y flujo sanguíneo lento

Dolor, fiebre leve, disfunción

orgánica, necrosis tisular
 INFECCION BACTERIANA
es una de las causas mas común de muerte en estos
pacientes

Streptococcus pneumoniae y haemophilus influenzae

SECUESTRO ESPLENICO
AGUDO
Acumulación esplénica de eritrocitos falciformes disminuye
de forma súbita la masa eritrocitaria
 SINDROME TORACICO
Enfermedad semejante a la NEUMONIA
 SANGRE PERIFERICA
• Sangre que circula en todo el cuerpo
• la sangre periférica es un componente importante de la inmunidad general del cuerpo
como también en el transporte de nutrientes
DATOS DE LABORATORIO
• Drepanocitosis: presencia de anemia normocitica y normocrómica.
• Aquí es clásica la reticulocitosis de 10 a 20% .
• Hay variaciones de hemoglobina de 6 a 10 g/DL y hematocrito de 0.18 a 0.30 L/L
• El frotis de sangre muestra :

• Anisocitosis
• Macrocitos
• policromatofilos y poiquilocitosis .
• El ADE aumenta con el incremento de los reticulocitos.
• En adolescentes y adultos se observa en el frotis de sangre una posible hipofunción
esplénica
• Estudios revelaron que las personas con HbSS tienen los leucocitos normal
,especialmente en niños menores de 10 años
• las cantidades de plaquetas están aumentadas .

Después de los 40 años disminuyen la concentración de la hemoglobina,

reticulocitos, leucocitos, plaquetas.
 MEDULA OSEA
• Su función principal es dar la hematopoyesis

DATOS DE LABORATORIO

• Presencia de hiperplasia eritroide en aspirado de

MO
• Aumento de 5 a 6 veces de producción de eritrocitos
• Posible megaloblastosis
• Aumento en reservas de hierro
 ELECTROFORESIS DE LA
HEMOGLOBINA
• técnica para la separación de moléculas
según la movilidad de éstas en un campo
eléctrico
• Por medio de la electroforesis es posible
confirmar la presencia de HbSS.
• La HbSS se observa como un punto
situado en el medio de HbA y HbA2
• Hemoglobina fetal no es mayor a 15%
 PRUEBA DE SOLUBILIDAD

• Prueba que puede identificar diferentes compuestos y sustancias contenidas en

un compuesto desconocido.
• determina si la sustancia a analizarse es un ácido débil, una base fuerte, un
compuesto neutro o un ácido fuerte.
• Prueba confirmatoria para la HbS.
• La HbS se libera y se desoxigena lo que provoca que se polimerice.
• Presencia de HbS indica opacidad en la solución
 PRUEBA FALCIFORME
• pruebas que se utilizan para la detección de la hemoglobina S mediante la adición de
ciertos productos químicos (metabisulfito de sodio)que reducen la cantidad de
oxígeno presente en una muestra de sangre.
• Esta reducción de oxígeno causa que se formen células anormales en forma de hoz.
• Examinar en microscopio una vez haya pasado el tiempo reglamentario (30) para
determinar presencia o no de células falciformes
OTRAS PRUEBAS DIAGNOSTICAS
• Uso de parámetros isoeléctricos en geles de agar y
cromatografía liquida de alta resolución , para
identificar HbS
• Reaccion de en cadena de polimerasa usado para la
detección y diagnostico prenatal , para encontrar
mutaciones especificios en los genes de globina
OTROS DATOS DE LABORATORIO
Son menos específicos y estas pruebas no
proporciona información diagnostica sobre las
anemias de células falciformes pero si para presencia
de padecimient0s causantres de complicaciones
 TERAPEUTICA
• Desafortunadamente no se encuentra con la terapéutica necesaria para la
anemia de células caliciformes
• El tratamiento preventivo se dirige a eliminar las condiciones que precipitan
a la deshidratación e infección
• Trasfusión .
• Hoy día están usando fármacos para reducir la adopción intrA celular
• Hacer trasplante de MO
Enfermedad por
Hemoglobina C
Segunda hemoglobina variante más frecuente

Predominante -> Negros de África occidental

La Hb C se produce cuando la lisina se

sustituye por ácido glutámico en la sexta
posición (A3) en la cadena beta
 GLU

GLU

GLU
El ácido glutámico (GLU) sustituye la Lisina (LYS)
La desoxihemoglobina C -> Solubilidad
disminuida con formación de cristales
intracelulares (Deshidratación)

Los eritrocitos con cristales se vuelven

rígidos y son atrapados; y finalmente
destruidos en el bazo

Periodo de vida del eritrocito disminuye entre 30 y 55 días.

 Enfermedad por hemoglobina C -> Asintomática

Hemólisis variable, produce anemia de leve a moderada.

Enfermedad por
Hemoglobina S/C
Enfermedad por Hb S/C, ambas cadenas Un gen β codifica
β son anormales

Cadenas βs Cadenas βc

Hb S Hb C

Aumenta la concentración de la Hb en los

eritrocitos individuales
Signos y síntomas son similares a los de la
Pacientes desarrollan crisis
anemia de células falciformes leve
vasooclusivas
Presencia de anemia normocítica normocrómica Hematócrito es superior a 0,25 L/L y la
de leve a moderada. hemoglobina esta entre 10 y 14 g/dL
Hemoglobina D
 Hemoglobina D

Hb D Punjab Hb D Los Angeles

Hb D Hb S

Son asintomáticos
 Hb D Hb S
Incremento de células
blanco y disminución de la
fragilidad osmótica

• La Hb D es una hemoglobina soluble que no da lugar a la

adopción de la forma falciforme

Hb D Hb S

Produce una leve anemia de

células falciformes
Hemoglobina E
Tercera hemoglobinopatías más común en el mundo
 LYS
LYS

LYS
Sustitución de lisina por ácido glutámico en la cadena beta
 Hb E
Presencia de una anemia
microcítica leve y
asintomática con
disminución de la
supervivencia del eritrocito

Rasgos de Hb E es
asintomático y los
parámetros hemáticos son
normales.
 HEMOGLOBINA E/TALASEMIA
La cantidad de HbE depende si el
pacientes es homocigoto o
heterocigoto para Hb E
HbE βE

HbE
HbF
HbFgrave
Anemia

Anemia microcítica
HbE β +tal
hipocrómica con
β +tal poiquilocitosis y

β +tal
Anemia moderada βE
eritrocitos nucleados
Variables inestables de
la Hemoglobina
 Hemoglobinas inestables -> Cadena de
globina estructura anormal

Mutaciones en aa en porciones internas críticas

de las cadenas

Afectan la estabilidad molecular

Precipitación de la Hb anormal bajo la forma

de cuerpos de Heinz

Causa rigidez, daño en la membrana y

hemólisis del eritrocito

• Anemías hemólíticas congénitas con cuerpos de Heinz

Se produce sólo después de la administración de fármacos, infección o cambio en el ambiente
normal de las moléculas de Hb
 Fisiopatología
Variables sintomáticas

Heterocigoto Homocigoto

Hemoglobinas inestables Incompatible con la vida

Sustituciones o deleciones de aa, afecta la

estabilidad de las subunidad de globina o del
tetrámero hemoglobina
La hb inestable se desnaturaliza y precipita
bajo cuerpos de Heinz

Estos e fija a la superficie de la memebrana

Inclusiones atrapadas por macrófagos en el

bazo

Deja la célula con menos hemoglobina y la

membrana disminuida

Quedan células rígidas y a su destrucción

prematura en el bazo
 Datos Clínicos

Anemia hemolítica congénita -> trastorno de hemoglobina inestable

Historia del paciente (Génetica) – infecciones – Administración de fármacos

Hb con afinidad por el oxígeno, se acompaña por eritrocitosis, Disminuye la

cantidad de oxígeno liberado a los tejidos y aumentando las concentraciones
de eritrocitos
Hemoglobinas inestables con disminución en afinidad por el oxígeno, son
asintomáticas

Aumenta la cantidad de oxígeno entregado en los tejidos

La ictericia y la esplenomegalia -> Hemólisis extravascular crónica

Cianosis -> Desnaturalización de la Hb por sulfohemiglobina y
metahemoglobina
 Datos de laboratorio
Anemia hemolítica congénita con
Sangre periférica cuerpos de Heinz (Normocítica y
normocrómica)

Disminución de HCM y de la CHCM debido a la

eliminación de hemoglobina de los eritrocitos como
cuerpos de Heinz en el bazo

Frotis de sangre puede mostrar punteado

basófilo, células fragmentadas y
pequeñas células contraídas
 Prueba de
inestabilidad al
calor

Prueba de inestabilidad al calor, siempre

es positiva en los trastornos de
hemoglobina inestables

Lisado de eritrocitos en amortiguador

TRIS

Se calienta a 50 Grados durante 60

minutos
Prueba de estabilidad
con isopropanol

La hemoglobina inestable se precipita a

los 20 minutos

Isopropanol no polar

La hemoglobina normal permanece

disuelta durante 30 a 40 minutos
 Variables de la
hemoglobina con
alteración de la afinidad
por el oxígeno
 La sustitución de aa en las cadenas de
globina cerca del núcleo de hem

Afecta la capacidad de la Hb para

transportar el oxígeno

Y evitar la fijación del hem a la cadena de globina, o

estabilizar el hierro en el estado férrico oxidado

La disminuci´pon de la afinidad de la Hb se
caracteriza por la formación permanente de
metahemoglobina y cianosis
Disminución de la afinidad por el oxígeno

• La metahemoglobina es hemoglobina con hierro oxidado al

estado férrico (Fe+++).

• El oxígeno no puede ser transportado por la metahemoglobina

(cianosis)

• La metahemoglobina es un trastorno clínico presente cuando la

metahemoglobina representa más de 1% de la hemoglobina
 Producirse metahemoglobina adquirida

Fármacos Sustancias toxicas

Oxidan a la Hb en
circulación a una
velocidad que excede la
capacidad reductora del
sistema de la
metahemoglobina
reductasa
 Cianosis congénita -> presencia de la
metahemoglobina, puede heredarse…

Carácter Dominante Carácter Recesivo

Presencia de una variante estructura de Defecto en el sistema de

la Hb M reducción de la
metahemoglobina

Sustituciones o deleciones de aa, afecta la

estabilidad de las subunidad de globina o del
tetrámero hemoglobina
Hb M Hb ???

Incompatible con la vida

Hb M Hb ???
La Hb no puede entregar
oxígeno a los tejidos
 LYS
TYR
Sustitución de una tirosina la histidina de la cadena alfa
 Aumento en la afinidad por el oxígeno

Paciente de 81 años en el hospital de John

Hopkins

La hb con gran afinidad se heredan como autosómicas-

dominantes

Hemoglobina anormal, libera menos oxígeno a los

tejidos

Las personas con estas variantes de Hb son

asintomáticas
 ARG

ARG
ARG
Leucina sustituida por Arginina en la cadena alfa
GRA