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Estructura y Tinción de Bacterias Gram

El documento compara la estructura ultraestructural de células grampositivas y gramnegativas. Las células grampositivas tienen una capa simple de peptidoglicano mientras que las gramnegativas tienen tres capas. La tinción de Gram ocurre debido a diferencias estructurales en las paredes celulares. El cristal violeta se adsorbe a la superficie bacteriana debido a cargas negativas. El yodo forma un complejo insoluble con el cristal violeta que se fija a la pared. El etanol remue

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El documento compara la estructura ultraestructural de células grampositivas y gramnegativas. Las células grampositivas tienen una capa simple de peptidoglicano mientras que las gramnegativas tienen tres capas. La tinción de Gram ocurre debido a diferencias estructurales en las paredes celulares. El cristal violeta se adsorbe a la superficie bacteriana debido a cargas negativas. El yodo forma un complejo insoluble con el cristal violeta que se fija a la pared. El etanol remue

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Bacillus cereus

Serratia marcescens
Figure 3.21. A comparison of the ultrastructure of gram-positive and gram-
negative cells. The different Gram reactions occur because of structural differences
between the bacterial cell walls. Gram-positive cells (Group B streptococci) appear
smooth in a scanning electron micrograph (A) and are composed of a single layer of
peptidoglycan (B). Gram-negative cells (E. coli) have an undulating surface and
have three layers (C and D). (Sources: S. H. Pincus, et al.1992. J. Bacteriol
174:3739-3749 [panels A and B]; M. E. Bayer and C. C. Remsen. 1970. J. Bacteriol.
101:304-313 [panel C]; T. J. Beveridge. 1999. J. Bacteriol. 181:4725-4733 [panel
D])
1.- LA PARED CELULAR
0
2. Cristal Violeta
CRISTAL VIOLETA

Adsorción (Baker, 1950)


• Ya que los ácidos teicoicos de las Gram positivas
y los lipopolisacáridos de las Gram negativas
confieren carga neta negativa en la superficie de
las paredes bacterianas, las moléculas de cristal
violeta son adsorbidas.
2. Mordante de Yodo
COMPLEJO CV-I

CV-Cl + I-  CV-I + Cl-


Intercambio metatético (Davies et al., 1983)
Efecto mordante
• Mordante, substancia capaz de formar compuestos insolubles con
tinciones, lo que causa su fijación al material teñido.

• La formación del complejo CV-I permite que el CV se absorba.

• La formación del complejo CV-I permite que el CV sea menos


suceptible a ser removido por el etanol o acetona ya que el complejo
es insoluble en esos solventes.

(Biswas, Pasu y Pal, 1970)


CRISTAL VIOLETA- YODO
3. Agente diferenciante
• En experimentos con B. subtillis y E. coli se
observaron daños en la superficie celular después de
haber sido tratadas con etanol…

(Beveridge y Davies, 1983)


B. subtillis

(Beveridge y Davies, 1983)


E. coli

(Beveridge y Davies, 1983)


(Beveridge y Davies, 1983)
(Beveridge y Davies, 1983)
• La pared celular de las bacterias Gram positivas debido a su
composición baja en lípidos, es deshidratada, lo que disminuye el
tamaño de los poros del peptidoglicano y los complejos de CV-I
quedan atrapados.

• En las Gram negativas el contenido de peptidoglicano es menor y


aunque el tamaño de los poros es reducido, no lo es suficiente para
retener los complejos CV-I, además de que la membrana externa es
disuelta.

(Bisen, 2014)
4. LA CONTRATINCIÓN
Se utiliza comúnmente safranina. (Bisen, 2014)

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