Introducción a los Bioprocesos
Alumno—
Sofía Dinorah García Rendón
ID—
181443
Fecha—
15 de Junio del 2020
Materia—
Normatividad y certificación de bioprocesos
Profesor—
Raúl Holguín Soto
BIOPROCESOS
Los procesos biotecnológicos, mejor conocidos como
bioprocesos, han seguido el desarrollo humano desde los
inicios de la civilización, aún sin conocer que era un
bioproceso.
Un bioproceso es cualquier operación a gran escala que involucre la
transformación en un producto, de cualquier materia prima, biológica o no
biológica, mediante la acción de microorganismos, cultivos de células
animales o vegetales y/o por sus derivados (enzimas, metabolitos, etc.).
Etapas de un bioproceso
En los bioprocesos se parte de la materia prima para obtener producto y se
consideran tres etapas para el desarrollo de este.
1.Etapa de Tratamiento 2.Etapa de Biorreacción 3.Etapa de Tratamiento de los
Previo Productos (Downstream)
Transformación de
Selección, tamizado, reducción de Operaciones predominantemente
sustrato en biomasa o
tamaño, hidrólisis, formulación de físicas, mediante las cuales se
en biomasa y algún
medios y esterilización. obtiene la concentración y
producto bioquímico o
purificación de los productos.
enzima.
NOTA: Se deben de examinar las propiedades físicas y químicas de los materiales que
se procesarán y delimitar las tensiones máximas a las que serán sometidas de manera
que puedan ser resistidas.
1.ETAPA DE TRATAMIENTO PREVIO
La materia prima debe alcanzar las condiciones requeridas para pasar a las biorreacciones,
mediante operaciones físicas de procesamiento, después, se llevan a cabo las etapas de
tratamiento previo específicas de los bioprocesos, como esterilización, hidrólisis y
formulación de medios.
La mayoría de los bioprocesos requieren del cultivo de microorganismos o de
células, por ende es importante el mantenimiento del cultivo que se
inoculara en el birreactor. La contaminación con otros microorganismos y
virus se previene con la esterilización.
Los métodos de esterilización más importantes son la
esterilización por calor y la esterilización por filtración.
ESTERILIZACIÓN POR CALOR
Esterilización Discontinua
Se utiliza el vapor como medio de calentamiento para lograr la eliminación de los
organismos vivos.
Se comienza por evacuar el aire que hay dentro del equipo, empleando chorros de
vapor a presión, el proceso se lleva a cabo en recipientes enchaquetados a los que
se le suministra vapor en la chaqueta durante un periodo de tiempo determinado.
Un ejemplo de esto son los autoclaves.
Esterilización Continua
La inyección directa de vapor vivo en el medio, con lo que se elimina el
intercambio de calor a través de la chaqueta; El medio se mantiene en el
circuito de esterilización por un tiempo determinado de manera de asegurar el
tiempo de retención necesario para asegurar la esterilización.
El proceso se completa con una cámara de vacío para la expansión del vapor,
lo que permite separar parte del agua que se le añade al medio.
ESTERILIZACIÓN POR FILTRACIÓN
En esta hay 2 etapas de filtrado, una etapa inicial para eliminar
impurezas, con filtros que tengan un tamaño de poros de 0.45 µm y
terminar con filtros que tengan un tamaño de poros de 0.22 µm (en
algunos casos 0.1 µm), con los cuales se asegura la esterilización del
medio.
Para los medios líquidos que sean muy susceptibles al
calor y para la esterilización del aire en los procesos
aerobios.
PREPARACIÓN Y PROPAGACIÓN DE
INÓCULOS
En una biorreacción se parte de un recipiente limpio esterilizado, que se llena con medio
estéril hasta un 50 – 75 % de su volumen total, se inocula con un cultivo del 1 al 10% del
volumen total del medio en su fase de crecimiento exponencial
Preservación del inóculo Crecimiento del inoculo
Las cepas maestras no deberán ser cultivadas más El cultivo preservado se reactiva
que una vez cada dos años, controlando los niveles mediante crecimiento en un
de actividad con cada uso. Las cepas de trabajo cultivo líquido en o en medio
derivan de las cepas maestras y también tienen que sólido, las condiciones utilizadas
ser inspeccionadas en relación a su pureza y su en el cultivo inicial dependerán
capacidad de formar producto. del proceso específico.
Se va incrementando el volumen
de cultivo, para conseguir la
velocidad de crecimiento
adecuada.
FORMULACIÓN DE MEDIOS
La formulación cuidadosa de los medios de cultivo adecuado para el crecimiento del inóculo
y para la producción es un pre-requisito para el desarrollo exitoso de un bioproceso.
El medio formulado debe suministrar suficiente carbono, nitrógeno, minerales y
otros nutrientes, de manera que se pueda obtener la cantidad requerida de masa
celular y productos.
Fuente de Carbono + Fuente de Nitrógeno + minerales + nutrientes específicos + 0 2 → masa
celular + productos + C02 + H20.
2. ETAPA DE BIORREACCIÓN
Un Biorreactor tiene como función principal contener al organismo biológico en un entorno
óptimo garantizando la seguridad tanto del medio ambiente como de los operadores y del
propio cultivo.
Los componentes comunes de un biorreactor son: barreras físicas que garantizan la
contención biológica; Sistema de transferencia de; Sistema de transferencia de energía
calorífica o calor para esterilización y/o enfriamiento; Sistema de transferencia de
momentum para mantener la homogeneidad); Puertos para la inoculación, la toma de
muestra, la adición de reactivos y la inserción de dispositivos y sensores de medición; y
mirillas y equipo de seguridad.
La mayoría de los biorreactores para crecimiento microbiano y cultivo se operan
como equipos discontinuos o discontinuos alimentados.
Cultivo discontinuo: Se inicia a partir de la
inoculación de un medio, en un biorreactor
completamente mezclado, la composición del
medio en el fermentador cambia
continuamente según los nutrientes se
consumen para producir biomasa y
metabolitos
Cultivo discontinuo alimentado: Se le
añade una alimentación al caldo de
manera continua o discontinua, de esa
forma el volumen de caldo aumenta con el
tiempo y generalmente el volumen de
alimentación se incrementa en el tiempo,
para satisfacer la demanda de una
población creciente de células.
3. PROCESOS DE TRATAMIENTO DE
PRODUCTOS (DOWNSTREAM)
Los bioprocesos tratan materias primas y generan productos útiles, las operaciones
individuales que cambian o separan a los componentes se denominan como
operaciones unitarias
Las operaciones unitarias contienen las siguientes
El costo del tratamiento de los
etapas:
productos representa entre el
60 y el 80% de los costos del • Remoción de insolubles
proceso de producción
• Concentración
• Purificación
• Acabado
Remoción de insolubles:
Consiste en clarificar al caldo que sale del fermentador mediante
operaciones de filtración ó centrifugación
• Filtración: Operación de separación de sólidos en una suspensión
a través de un medio poroso, en una suspensión de un líquido o
gas, el medio poroso retiene los sólidos de mayor tamaño y
permite el paso del líquido y partículas de menor tamaño de la
porosidad.
• Centrifugación: Operación que permite separar sólidos de
líquidos, o líquidos de líquidos de diferentes densidades mediante
la utilización de una centrifuga de laboratorio.
CONCENTRACIÓN
Remueve diversos materiales con las mismas propiedades comparadas con las del
producto, también se le conoce como aislamiento del producto.
• Evaporación: Es una operación unitaria que permite remover un líquido de una
mezcla, con el objetivo de separar componentes o concentrar una solución,
suministrando energía.
• Adsorción: Operación que elimina algunos componentes de una fase fluida
mediante un sólido que los retiene, consta de la acumulación de material en una
superficie
• Extracción: Operación de transferencia de materia basada en la disolución de uno o
varios componentes de una mezcla -líquido o sólido- en un disolvente selectivo.
• Destilación: Operación que consiste en separar dos o más componentes de una
mezcla líquida, aprovechando la diferencia de volatilidades entre ellos.
PURIFICACIÓN
Depende de las características del producto que se desea obtener e involucra
operaciones de extracción con solventes ó diferentes tipos de cromatografía,
precipitación, electroforesis, etc.
• Precipitación: Operación que consiste en la obtención de un sólido a partir de
una disolución.
• Electroforesis: Operación para la separación de moléculas según la movilidad
de estas en un campo eléctrico, se puede realizarse sobre la superficie
hidratada de un soporte sólido, o bien a través de una matriz porosa.
ACABADO
Consiste en tener en producto listo para su uso final.
• Cristalización: Operación por el cual se forma un sólido cristalino, ya sea a partir de un
gas, un líquido o una disolución.
• Secado: Operación que consiste en separar pequeñas cantidades de agua u otro
líquido de un material sólido con el fin de reducir el contenido de líquido residual
hasta un valor aceptablemente bajo.
• Liofilización: Operación que tiene como objetivo separar el agua u otro solvente de
una disolución mediante congelación y posterior sublimación del hielo a presión
reducida.
• Cromatografía: La cromatografía es un método físico de separación en el que los
componentes a separar se distribuyen entre dos fases, una estacionaria (fase
estacionaria) y otra que se mueve (fase móvil) en una dirección definida.
PRINCIPIOS BÁSICOS DE ESCALADO
DE PROCESOS BIOTECNOLÓGICOS
Problemas que surgen relacionados con el cambio de escala
• Los que se relacionan con la necesidad de manejar
grandes volúmenes de material
• Afectados por el tamaño de la escala de operación
Requiere generalmente de equipos costosos y complejos cuando
se realizan en la escala industrial.
Emplear reactivos químicos comerciales en lugar de los de grado
analítico o la utilización de recipientes metálicos en lugar de los
de vidrio, lo que puede introducir problemas de contaminación.
ETAPAS A CONSIDERAR EN LOS
TRABAJOS DE INVESTIGACIÓN Y
DESARROLLO (I+D).
Se divide en 4 niveles: Laboratorio, Banco, Piloto e Industrial.
El concepto de escalado se refiere al paso
de una escala a otra, es el proceso El volumen de los equipos es un
mediante el cual se logra la exitosa puesta criterio fundamental a considerar
en marcha y la operación económica de para los límites entre escalas
una unidad a escala comercial basándose
en resultados de investigaciones
realizadaz a una escala más pequeña.
ESCALA LABORATORIO
El laboratorio constituye la unidad primaria de investigación en la que determinan el
procesamiento y se establecen las condiciones bajo las cuales se obtienen los
mejores resultados.
1. Seleccionar y evaluar cepas.
2. Optimizar el medio de cultivo y de otras
variables experimentales y de proceso.
3. Obtener información en cortos plazos de
tiempo a muy bajo costo.
ESCALA BANCO
Se orienta a la configuración de las unidades experimentales con características
geométricas y operacionales similares a los equipos de planta piloto o industriales
disponibles o recomendables, a diferencia de la etapa de laboratorio, donde el
equipamiento utilizado difiere considerablemente del industrial.
1. Seleccionar el procedimiento de desarrollo de inóculos, esterilización del medio,
aireación, agitación y operaciones de purificación.
2. Ajustar variables como razón de transferencia de oxígeno, evolución de dióxido de
carbono, producción de biomasa, biosíntesis de metabolitos y efectos del pH.
3. Estudiar el régimen de alimentación continua o incrementada.
4. Seleccionar alternativas de control e instrumentación.
5. Hacer la evaluación económica preliminar y el estimado de viabilidad del proceso.
ESCALA PILOTO
Esta escala posee un alto costo y la decisión de su realización está relacionada al
tipo de bioproceso que se busque desarrollar.
1. Confirmar los datos obtenidos a nivel de banco y verificar los criterios de
escalado.
2. Seleccionar las estrategias de esterilización del medio y de concentración y
purificación de productos.
3. Obtener cantidades de productos para pruebas de caracterización,
toxicológicas, promoción de mercado y verificación de la viabilidad del
proceso.
4. Ofrecer una información de validación a un costo relativamente alto.
ESCALA INDUSTRIAL
Enriquece la información ingenieril disponible, los modelos
matemáticos formulados, brinda información de gran valor
para el perfeccionamiento de equipos y para la optimización del
propio proceso productivo.
Ejemplo de escalado de un proceso
biotecnológico
Conclusión
Desarrollar un bioproceso no es una tarea sencilla, consta de mucha investigación
y de muchas etapas, cuyas características se deben de cumplir para que el
bioproceso sea un éxito y obtener un producto o servicio de calidad.
Los procesos de bioseparación son de gran utilidad en la industria ya que es
necesario separar los componentes de una mezcla en fracciones individuales
para obtener un producto de mejor calidad, es decir, que cumpla con las
características que satisfagan al cliente, La importancia de las operaciones
unitarias en los bioprocesos se debe a que representan la mayor parte del costo
de la producción total dependiendo del grado de pureza, el origen y destino del
producto.
¡GRACIAS!
