Instituto Tecnológico de Mérida
Análisis Instrumental
Espectrofotometría.
Edgar Efraín Gómez Tinal.
José Eduardo Castillo Pech
Daniel Fernando Mena Contreras
Espectrofotometría por
emisión atómica
Espectroscopia de emisión atómica de llama: En la
espectrofotometría de emisión de llama, la muestra en solución
es nebulizada e introducida dentro de la llama, en donde es
desolvatada, vaporizada y atomizada, todo esto en rápida
sucesión. Subsecuentemente, los átomos y las moléculas se
elevan a estados excitados por colisiones térmicas con los
constituyentes de los componentes de la llama parcialmente
quemados.
Espectroscopia de emisión atómica basada en la atomización
con plasma (ICP): Un plasma es una mezcla gaseosa
conductora de la electricidad que contiene una concentración
significativa de cationes y electrones. En el plasma de argón
que se utiliza en los análisis de emisión, los iones de argón y
los electrones son las principales especies conductoras, aunque
Espectroscopia de emisión atómica
de llama:
Los instrumentos para trabajar con emisión de llama son similares a los
instrumentos de absorbancia de llama, excepto por el hecho de que en los
primeros la llama actúa como fuente de radiación.
En la espectrofotometría de emisión de llama, la muestra en solución es
nebulizada e introducida dentro de la llama, en donde es desolvatada,
vaporizada y atomizada, todo esto en rápida sucesión. Subsecuentemente, los
átomos y las moléculas se elevan a estados excitados por colisiones térmicas
con los constituyentes de los componentes de la llama parcialmente quemados.
Durante su regreso a un estado electrónico basal o más bajo, los átomos y
moléculas emiten la radicación característica de los componentes de esa
muestra. La luz emitida pasa por un monocromador que aísla la longitud de
onda específica para el análisis deseado. Un fotodetector mide la potencia
radiante de la radiación seleccionada, que entonces es amplificada y enviada a
un dispositivo de lectura: medidor, registrador o sistema con microcomputadora
ESPECTROSCOÍA DE EMISIÓN ATÓMICA BASADA EN LA
ATOMIZACIÓN CON PLASMA (ICP)
El plasma
Un plasma es una mezcla gaseosa conductora de la electricidad que contiene una
concentración significativa de cationes y electrones. En el plasma de argón que se
utiliza en los análisis de emisión, los iones de argón y los electrones son las
principales especies conductoras, aunque los cationes de la muestra también están
presentes en menor cantidad. Los iones argón, una vez que se han formado en un
plasma, son capaces de absorber suficiente potencia de una fuente externa, como
para mantener un nivel de temperatura en el que la ionización
adicional sustenta el plasma indefinidamente.
Las fuentes de plasma acoplado inductivamente proporcionan datos
analíticos mucho mejores que otras fuentes de emisión. La calidad de estos
resultados radica en la gran estabilidad, bajo ruido, poca radiación de fondo
y en la ausencia de interferencias de las fuentes, cuando se opera en las
condiciones experimentales apropiadas.
Esta técnica se emplea para una amplia variedad de aplicaciones, ya que un
gran número de elementos pueden ser determinados rápidamente a niveles
traza (ppm, ppb), y porque una amplia variedad de tipos de muestras
pueden ser analizados utilizando esta técnica.
• Agricultura y alimentos
• Biología y clínica:
• Geología
• Medio ambiente y aguas
• Metales
Ventajas:
- Menor interferencia entre elementos consecuencia directa de sus temperaturas más
elevadas.
- Se pueden obtener buenos espectros para la mayoría de los elementos con unas mismas
condiciones de excitación, y en consecuencia, es posible registrar simultáneamente los
espectros para docenas de elementos.
- Permiten la determinación de bajas concentraciones de elementos que tiende a formar
compuestos refractaorios, esto es, compuestos que son muy resistentes a la
descomposición térmica, tales como B, P, U, Zr Nb.
- Permiten la determinación de no metales como Cl, Br, I y S.
- Son aplicables en unos intervalos de concentración que abarcan varios órdenes de
magnitud.
- Menos tiempo de análisis.
Desventajas:
- Equipo más caro.
- Mayor coste de operación que la espectroscopia de absorción atómica.
- Menor precisión que la espectroscopia de absorción atómica.
Comparación entre los
métodos de absorción y
emisión.
Principales ventajas e inconvenientes de los dos métodos más utilizados de
espectroscopia de llama:
- Instrumentos. La principal ventaja de los procedimientos de emisión consiste en
que la llama actúa como fuente. Por el contrario, los métodos de absorción
necesitan de una lámpara diferente para cada elemento. La calidad del
monocromador de un instrumento de absorción no tiene que ser tan alta para
alcanzar el mismo grado de selectividad.
- Habilidad del operador. Los métodos de emisión requieren un mayor grado de
habilidad por parte del operador.
- Corrección del fondo. La corrección de los espectros de banda se realizan con
mayor facilidad y por lo general con más exactitud en los métodos de emisión.
Precisión y exactitud. En manos de un operador experto, la incertidumbre
es la misma para ambos procedimientos (±0,5 a 1% relativo). Con personal
menos entrenado, los métodos de absorción atómica presentan menos
problemas.
- Interferencias. Ambos métodos sufren interferencias químicas
semejantes.
Límites de detección. Ambos procedimientos presentan unos límites de
detección complementarios.
Espectrofotómetro por infrarrojo
Espectrofotómetro por infrarrojo
Los espectrómetros de infrarrojo de transformada de Fourier son, por lo
general, instrumentos de un sólo haz
El procedimiento típico para determinar la transmitancia o la absorbancia
consiste, en primer lugar, en la obtención de un interferograma de referencia
mediante barridos de una referencia (generalmente aire) 20 o 30 veces.
Luego se coloca la muestra en la trayectoria de la radiación y se repite el
proceso. Se calcula la relación entre los datos espectrales de la muestra y la
referencia, y se obtiene la transmitancia a distintas frecuencias.
Tipos de instrumentos en los espectrofotómetros por
infrarrojo
Dispersivos
Principalmente se emplean instrumentos de haz doble porque son menos
exigentes en las características de la fuente y el detector. Una razón adicional
es que se presenta recurrentemente la absorción del agua y del dióxido de
carbono atmosféricos en algunas regiones espectrales importantes, lo que
puede provocar serios problemas de interferencias.
Los espectrofotómetros de infrarrojo dispersivos incorporan un cortador de
baja frecuencia (de 5 a 13 ciclos por minuto) que permite al detector
discriminar entre la señal de la fuente y las señales de radiación extraña, tales
como la emisión de radiación en el infrarrojo de los distintos objetos que
rodean al detector.
La radiación que procede de la fuente se divide en dos haces, una mitad pasa
por el compartimento de la cubeta de la muestra y la otra mitad por la zona de
la referencia.
Después de la dispersión en la red, los haces alternativos llegan al detector y
se convierten en una señal eléctrica. La señal se amplifica y pasa al
rectificador sincrónico, un dispositivo que está acoplado mecánica o
eléctricamente al cortador de forma que el interruptor del rectificador y el haz
que sale del cortador cambien simultáneamente.
No dispersivo:
Pueden ser de tres tipos principales:
1. sencillos fotómetros de filtro o no dispersivos
2. instrumentos que emplean filtros de cuña en lugar de un elemento
dispersante para proporcionar espectros completos
3. los que no emplean ningún elemento de selección de la longitud de onda.
Por lo general, estos instrumentos son menos complicados, más resistentes,
más fáciles de mantener y más baratos que los otros tipos de instrumentos.
Partes del E.P.I
Fuente de luz.
Monocromador: El monocromador aísla las radiaciones de longitud de onda deseada
que inciden o se reflejan desde el conjunto, se usa para obtener luz monocromática.
Compartimento de Muestra: Es donde tiene lugar la interacción con la materia (debe
producirse donde no haya absorción ni dispersión de las longitudes de onda).
Detector: El detector es el encargado de captar la radiación y, a su vez, dejarla en
evidencia para su estudio posterior.
Fotodetectores: En los instrumentos modernos se encuentra una serie de
16 fotodetectores para percibir la señal en forma simultánea en 16 longitudes de
onda, cubriendo el espectro visible.
Celdas: Son los recipientes donde se depositan las muestras líquidas a analizar.
Espectrofotómetro ultravioleta visible
Espectrofotómetro ultravioleta – visible
Es un instrumento óptico que presenta la capacidad de “resolver”
radiaciones de diferentes longitudes de onda, dentro del Rango Ultravioleta
y Visible. Este rango, por lo general se encuentra dentro de los valores de
190 a los 1100 nm
Partes del espectrofotómetro U.V
Un Espectrofotómetro UV - Visible presenta los siguientes componentes:
Fuente de Radiación.
Celda de muestra y Compartimiento de Muestras.
Lentes, Espejos y el Sistema Monocromador
Detector y Pre - amplificador.
Pantalla de datos.
Procesador de Datos o Computadora Personal.
Periféricos de Salida de datos.
Espectrofotómetro de fluorescencia
Espectrofotometría de fluorescencia
Equipo que permite el análisis, la identificación y la cuantificación de
sustancias químicas con moléculas susceptibles de presentar fluorescencia,
mediante la técnica de espectrofotometría por fluorescencia o fluorimetría.
Aplicaciones:
La espectroscopia de fluorescencia es usada en los campos de investigación
como el bioquímico, médico y químico, entre otros, para el análisis
de compuestos orgánicos. Su uso también ha sido reportado en la diferenciación
de tumores malignos y benignos en la piel. Las técnicas de espectroscopia
atómica de fluorescencia son practicadas en otros tipos de análisis, y medición
de un compuesto presente en el aire, en el agua o en otro medio.
Instrumentos para la Espectrofotometría de
fluorescencia
Fluoró metros de filtro. Utilizan filtros para aislar la luz incidente y la luz
fluorescente.
Espectrofluorómetros. Usan monocromadores de retículo de difracción para
aislar la luz incidente y la luz fluorescente.
¡Gracias!
Edgar Efraín Gómez Tinal.
José Eduardo Castillo Pech
Daniel Fernando Mena Contreras
