UNIVERSIDAD DE SAN MARTIN DE
PORRES
FACULTAD DE MEDICINA HUMANA
FILIAL NORTE
BIOLOGIA CELULAR Y
MOLECULAR
LISOSOMAS, DEGRADACION Y
MUERTE CELULAR
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II
2018-II
H. Lezama 1
H. LEZAMA
UNIVERSIDAD DE SAN MARTIN DE PORRAS
FACULTAD DE MEDICINA HUMANA
FILIAL NORTE
MISIÓN VISIÓN
“Formar profesionales médicos competentes, “Al 2017 ser líder en la formación
con alto nivel científico, tecnológico y con de médicos y en la investigación,
sólidos valores éticos y humanistas.
Contribuir a la creación y difusión del así como en la difusión del
conocimiento médico, a través de la conocimiento de las ciencias de la
investigación. salud contribuyendo al desarrollo
Proyectar nuestra acción a la comunidad, por
medio de acciones dirigidas a la prevención y
integral del mundo”
el desarrollo de la salud de la población”
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 2
• LISOSOMAS
• PROTEINAS DE MATRIZ LISOSOMAL
• PROTEINAS DE MEMBRANA LISOSOMAL
• DEGRADACION DE PROTEINAS
• DEGRADACION LISOSOMAL
• DEGRADACION EN PROTEOSOMAS
• UBIQUITINACION
• AGRESOMAS
• MUERTE CELULAR
• APOPTOSIS
• NECROSIS
• AUTOFAGIA
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 3
• OTROS MECANISMOS
lisosomas
• ORGANELAS CITOPLASMÁTICAS
LIMITADAS POR UNA SOLA
MEMBRANA.
• DESCUBIERTAS POR CHRISTIAN DE
DUVE.
• PRESENTES EN TODAS LAS CÉLULAS
EUCARIOTAS.
• CONTIENEN 50-60 ENZIMAS
HIDROLÍTICAS.
• SON LOS DEGRADADORES DE
RESIDUOS O DESECHOS DE LA CÉLULA.
• SU FUNCION CATABÓLICA ES
COMPLEMENTADA POR ORGANELAS
4
ASOCIADAS A LOS LISOSOMAS (LROS).
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama
lisosomas
• MATRIZ LISOSOMAL ÁCIDA
(PH 4,8) FAVORABLE PARA
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA.
• 2 CLASES DE PROTEÍNAS
SON ESENCIALES PARA SU
FUNCIONAMIENTO:
• HIDROLASAS
LISOSOMALES.
• PROTEÍNAS INTEGRALES
DE LA MEMBRANA
LISOSOMAL
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II (LMPs) H. Lezama 5
lisosomas
• ENZIMAS HIDROLÍTICAS SON
ELABORADAS EN EL RE Y
MODIFICADAS EN EL APARATO DE
GOLGI.
• 50-60 ENZIMAS HIDROLÍTICAS.
• DEGRADAN MATERIAL PROCEDENTE
DE:
• ENDOCITOSIS
• FAGOCITOSIS
• AUTOFAGIA
• PARTICIPAN EN:
• DEGRADACIÓN EN VOLUMEN
• PROCESAMIENTO PRO-
PROTEÍNAS
• PROCESAMIENTO DE ANTÍGENOS
• DEGRADACIÓN DE LA MATRIZ
EXTRACELULAR
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 6
• INICIACIÓN DE APOPTOSIS
lisosomas
• PROTEÍNAS INTEGRALES DE LA
MEMBRANA LISOSOMAL (LMPs), APROX.
25 EN LISOSOMAS DE MAMÍFERO.
• CUMPLEN DIVERSAS FUNCIONES:
• ACIDIFICACIÓN DEL LUMEN
LISOSOMAL.
• IMPORTACIÓN DE PROTEÍNAS
DESDE EL CITOSOL.
• FUSIÓN DE MEMBRANAS.
• TRANSPORTE DE PRODUCTOS DE
DEGRADACIÓN AL CITOPLASMA.
• LAS MÁS ABUNDANTES:
• PROTEÍNA DE MEMBRANA
ASOCIADA AL LISOSOMA 1 (LAMP1).
• PROTEÍNA DE MEMBRANA
ASOCIADA AL LISOSOMA 2 (LAMP2).
• PROTEÍNA INTEGRAL DE MEMBRANA
LISOSOMAL 2 (LIMP2).
• TETRASPANIN CD63.
• BOMBA DE PROTONES TIPO
VACUOLAR.
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 7
CELULAS
ESPECIALIZADAS
EN FAGOCITOSIS
TIENEN GRAN
CANTIDAD DE
LISOSOMAS.
MACROFAGO DE
MEDULA OSEA
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 8
EVENTOS DURANTE LA FAGOCITOSIS:
FORMACION DEL FAGOLISOSOMA (M.E.)
ACTIVIDAD EN LOS FAGOLISOSOMAS
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 9
LAS ENZIMAS
DESTRUYEN EL
CONTENIDO DEL
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama FAGOLISOSOMA10
lisosomas
BIOGÉNESIS LISOSOMAL:
• REQUIERE INTEGRACIÓN DE
VÍAS ENDOCÍTICA Y
BIOSINTÉTICA.
• FRECUENTEMENTE EMERGE
DEL APARATO DE GOLGI.
• EN ALGUNOS CASOS SE
DESARROLLA
GRADUALMENTE A PARTIR
DE ENDOSOMAS TARDÍOS .
FOR ANUSMP-FMH-FN-BCM-2018-II
ANIMATED LOOK AT LYSOSOMAL FUNCTION. H. Lezama 11
HTTP://HIGHERED.MCGRAW-
HILL.COM/SITES/0072507470/STUDENT_VIEW0/CHA
LAS CÉLULAS CONTIENEN MÚLTIPLES
SISTEMA PARA
DEGRADAR PROTEÍNAS.
El Sistema Ubiquitin-proteasoma
El Sistema Lisosomal
El Sistema Intra-mitochondria
Calpains (Ca2+-dependiente de proteases)
Caspasas
Proteasas de membranas
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 12
9
DEGRADACIÓN DE
PROTEINAS MAL
PLEGADAS
• Mal plegada = no
funcional.
Desnaturalizacion.
• Rompe enlaces
covalentes, no
covalentes, disulfuro.
• Chaperona-n
glucanasa- ubiquitina.
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 13
• Proteosoma.
IMPORTANCIA CLINICA
Muchas enfermedades neurológicas y otras son causadas por la
acumulación, mas que por la degradación de proteínas con estructuras
anormales.
Enfermedad de Alzheimer (amyloid, tau)
Enfermedad de Huntington (Huntingtin)
Tau aggregates
(Azheimer’s disease)
Enfermedad de Parkinson (-synuclein)
Enfermedad de ALS “Lou Gerhig’s” (SOD)
Enfermedad de la espina-Bulbar y atrofia
muscular (receptores de andrógenos). Enfermedad por
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 14
Lewy Bodies
(Parkinson’s Disease) Priones “Mad Cow disease” (prion)
ROL FISIOLÓGICO DE LA DEGRADACIÓN
INTRACELULAR DE PROTEÍNAS
Control de calidad
Procesamiento antigénico
Regulación en funciones celulares
Adaptación a estadios fisiológicos
o patológicos
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 15
EL MODELO UBIQUITIN-PROTEASOMA
PARA LA DEGRADACIÓN DE PROTEÍNAS
TIENE DOS FASES.
Proteina
ATP Modificación del substrato
ADP por ubiquitin
Ub
ATP Degradación del substrato
ADP Por el proteasoma
Péptidos y
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 16
amino ácidos
UBIQUITINA
O 76 amino acids
=
Gly-C-OH
Carboxyl terminus
(glycine 76)
Mr = 8,000
Altamente conservada
Ampliamente distribuida
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 17
(glycine 76)
Proteínas Ubiquitinadas son degradadas
Por el proteasoma.
Proteolisis
Peptides and
ATP ADP amino acids
Not degraded
Proteasome
Reconoce la cadena
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II
Poliubiquitin y no la proteina
H. Lezama Monoubiquitin
18
LA ESPECIFICIDAD PARA UBIQUITINACION SE LLEVA A
CABO CON MÚLTIPLES ENZIMAS DE CONJUGACIÓN.
degron
E3(n)
Ubiquitin E3(n)
O E1 E2(n)
E2(n)
=
-C-OH ATP
G76
E1 E2(n)
PREMIO NOBEL 2004.
Avram Hershko y Irwin Rose
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 19
ESTRUCTURA DE UN
PROTEOSOMA
a) Imagen de microscopía
electrónica del
proteosoma 26 S de
levadura S. cerevisae
b) Representación
esquemática de la
estructura y función del
proteosoma 26 S
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 20
muerte celular
APOPTOSIS
AUTOFAGIA
CORNIFICACIÓN
NECROSIS
• MODALIDADES ATÍPICAS (EN ESTUDIO):
• CATÁSTROFE MITÓTICA (MUERTE CELULAR
PRECEDIDA POR MULTINUCLEACIÓN O
MUERTE CELULAR DURANTE METAFASE)
• ANOIKIS
• EXCITOTOXICIDAD
• DEGENERACIÓN WALLERIANA
• PARAOPTOSIS
• PIROPTOSIS
•
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II
PIRONECROSIS H. Lezama 21
• ENTOSIS
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 22
Muerte celular
Hotchkiss R et all. Cell death. N Engl J Med 2009; 361: 1570-83 .
APOPTOSIS
• PRIMERA DENOMINACIÓN: NECROSIS POR
CONTRACCIÓN (SHRINKAGE NECROSIS).
• 1972 KER LA DENOMINÓ APOPTOSIS.
• “CAER O MORIR COMO CAEN LOS
PÉTALOS O LAS HOJAS EN OTOÑO”
(GRIEGO).
• OCURRE DURANTE TODA LA VIDA.
• FUNDAMENTAL EN LA HOMEOSTASIS.
• DE CRUCIAL IMPORTANCIA DURANTE EL
DESARROLLO.
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 23
APOPTOSIS
• H. ROBERT HORVITZ (1986) INVESTIGO EL MODELO GENÉTICO
IMPLICADO EN LA MUERTE CELULAR PROGRAMADA.
• USANDO UN SISTEMA MODELO CONOCIDO Y CARACTERIZADO,
EL NEMATODO CAENORHABDITIS ELEGANS.
• LA APOPTOSIS, A DIFERENCIA DE LA NECROSIS, CONSUME ATP,
CUYA ENERGÍA ES UTILIZADA PARA LA ACTIVACIÓN DE UNAS
ENZIMAS LLAMADOS CASPASAS, CUYA ACTIVACIÓN EN
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 24
CASCADA PRODUCEN LOS EFECTOS QUE PODEMOS VER EN LA
CÉLULA.
LA APOPTOSIS SE DA EN TRES FASES
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 25
Mechanisms of caspase activation
a. Proteolytic cleavage e.g.
pro-caspase 3
b. Induced proximity, e.g.
pro-caspase 8
c. Oligomerization, e.g. cyt c,
Apaf-1 & caspase 9
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 26
Back
APOPTOSIS
• NO INDUCE RESPUESTA INFLAMATORIA.
• CAMBIOS MORFOLÓGICOS:
• PÉRDIDA DE ADHESIÓN CELULAR
• CONTRACCIÓN CELULAR POR PÉRDIDA DE
AGUA Y Na+
• CONDENSACIÓN DE CROMATINA A NIVEL
NUCLEAR (ESTRUCTURAS EN MEDIA LUNA)
• NÚCLEO SE ROMPE EN MÚLTIPLES
FRAGMENTOS
• FRAGMENTACIÓN DEL DNA (PIEZAS DE 180-
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 27
200 PB)
APOPTOSIS
• CAMBIOS MORFOLÓGICOS:
• SE MANTIENE INTEGRIDAD DE LA MEMBRANA
PLASMÁTICA
• FORMACIÓN DE CUERPOS APOPTÓTICOS QUE
SON RÁPIDAMENTE RECONOCIDOS Y
FAGOCITADOS POR MACRÓFAGOS O POR
CÉLULAS VECINAS SIN PÉRDIDA DE SU
CONTENIDO.
• MORFOLÓGICA: ENCOGIMIENTO NUCLEAR Y CELULAR,
CONDENSACIÓN DE CROMATINA (PICNOSIS),
FORMACIÓN DE YEMAS, FRAGMENTACIÓN NUCLEAR
(CARIORREXIS) Y FORMACIÓN DE CUERPOS
APOPTÓTICOS.
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 28
• BIOQUÍMICA: PERMEABILIZACIÓN DE LA MEMBRANA
PROCESOS EN LOS QUE INTERVIENE
LA APOPTOSIS
1.- En toda etapa del desarrollo o
reparación tisular en donde se
produzcan células en exceso.
2.- Eliminación de linfocitos.
3.- Eliminación de células infectadas
y tumorales
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 29
ETAPAS DE LA APOPTOSIS:
1.- Activación (inducción negativa/positiva)
*Receptores
a.- de muerte (Fas, TNF)
b.- normales (glutamato)
*Rutas de transducción celular (mensajeros: Ca2+,
radicales libres, proteínas codificadas por genes
supresores)
2.- Decisión (mitocondria)
3.- Ejecución (degradación de proteínas y ácidos nucleicos)
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 30
Caspasas
VÍAS QUE CONDUCEN A LA APOPTOSIS
• VÍA INTRÍNSECA (MITOCONDRIAL)
• VÍA EXTRÍNSECA (RECEPTOR DE MUERTE)
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 31
VÍAS QUE CONDUCEN A LA
APOPTOSIS
VÍA INTRÍNSECA (MITOCONDRIAL)
• CONTROLADA POR LA INTERACCIÓN DE PROTEÍNAS
PRO-APOPTÓTICAS Y ANTI-APOPTÓTICAS DE LA
FAMILIA BCL2.
• REGULADA POR LA CASPASA 9 (DAÑO CELULAR
ABRUMADOR).
• INICIADORES DE LA VÍA:
• INCREMENTO INTRACELULAR DE ROS
• DNA DAÑADO
• RESPUESTA DE PROTEÍNAS NO PLEGADAS
• DEPRIVACIÓN DE FACTORES
USMP-FMH-FN-BCM-2018-IIH. Lezama
DE CRECIMIENTO 32
FAMILIA DE PROTEÍNAS BCL2
ANTI- PRO-
APOPTÓTICO APOPTÓTICO
• BCL2 • BAX
• BCL-XL • BAK
• BCLW • BIM
• MCL1 • BID
• A1 • PUMA
• BOO/DIVA
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 33
VÍAS QUE CONDUCEN A LA APOPTOSIS
• VÍA EXTRÍNSECA (RECEPTOR MUERTE):
INICIA CUANDO MIEMBROS DE LA SUPERFAMILIA
TNF SE UNEN A RECEPTORES MUERTE DE LA
SUPERFICIE CELULAR.
• RECEPTORES DE MEMBRANA DE SUPERFAMILIA
DE RECEPTORES TNF (CD95, DR3 Y DR4),
INDUCEN EL RECLUTAMIENTO PROXIMAL DEL
COMPLEJO ACTIVADOR DE CASPASA.
• SE ACTIVA LA CASPASA-8.
• CASPASA 8 Y CASPASA 9 ACTIVADAS MOVILIZAN A
SU VEZ A LAS CASPASAS 3, 6 Y 7, PROTEASAS
QUE INICIAN LA DEMOLICIÓN
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama
DE LA CÉLULA
34
A
TRAVÉS DE LA DEGRADACIÓN DE NUMEROSAS
VÍAS DE LA
APOPTOSIS
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II
35
H. Lezama
NECROSIS
• CUANDO LAS CÉLULAS SUFREN DAÑOS TALES COMO
QUEMADURAS, ACCIDENTES, RADIACIONES, TRAUMAS,
INFECCIONES, ETC. SE PRODUCE NECROSIS.
NECROSIS
• LA MUERTE NO OCURRE DE FORMA ORDENADA, DE
MANERA GENERAL EL NÚCLEO NO PRESENTA CAMBIOS
APARENTES, LAS MITOCONDRIAS APARECEN
DAÑADAS, EL AGUA Y IONES FLUYEN HACIA EL
CITOPLASMA Y LA CÉLULA SE HINCHA, CON LO QUE
TERMINA POR ROMPERSE LIBERANDO EL CONTENIDO
CELULAR QUEDANDO EN EL MEDIO PROTEASAS Y
SEÑALES QUE ATRAEN CÉLULAS DEL SISTEMA
INMUNITARIO,
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II POR LO QUE TIENE LUGAR UNA
H. Lezama 36
REACCIÓN INFLAMATORIA EN LA ZONA.
NECROSIS
• CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS:
• EDEMA NUCLEAR Y MITOCONDRIAL.
• FORMACIÓN DE PROLONGACIONES EN
LA SUPERFICIE CELULAR.
• DESAGREGACIÓN DE RIBOSOMAS.
Características morfológicas (si persiste la noxa):
Se acentúan más los cambios.
“Burbujeo” extremo en la superficie celular.
Gran dilatación mitocondrial.
Ruptura de la membrana.
Disolución de las organelas y núcleo.
Degeneración lisosomal
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 37
Necrosis
• “CADAVER” (GRIEGO).
• RESPUESTA A UNA
NOXA.
• EL ESTÍMULO DE LA
MUERTE ES LA CAUSA
DIRECTA DE LA
DEFUNCIÓN CELULAR.
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II
38
H. Lezama
Necrosis
• MUERTE CELULAR POR
AGRESIÓN EXTERNA
(FÍSICA, QUÍMICA O
BIOLÓGICA).
• GRAN RESPUESTA
INFLAMATORIA EN EL
LUGAR DE LA INJURIA.
• CAMBIOS
GENERALMENTE DESDE
PARTE EXTERNA HACIA
LA INTERNA.
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II
39
H. Lezama
LA NECROSIS
TIENE TRES FASES
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II
40
H. Lezama
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II
41
H. Lezama
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 42
Autofagia
• “COMERSE UNO MISMO” (GRIEGO).
• PROCESO POR EL CUAL LA CÉLULA RECICLA SUS
PROPIAS ORGANELAS Y COMPONENTES
MACROMOLECULARES NO ESENCIALES,
REDUNDANTES O DAÑADOS.
• RESPUESTA ADAPTATIVA AL STRESS SUB-LETAL.
• PARTICIPA EN:
• SUPRESIÓN DEL CRECIMIENTO DEL TUMOR.
• SUPRESIÓN DE PROTEÍNAS TÓXICAS MAL PLEGADAS.
• ELIMINACIÓN DE MICROORGANISMOS
INTRACELULARES.
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 43
• PRESENTACIÓN DE ANTÍGENOS.
• A lo largo del desarrollo cualquier
organismo necesita la deshacerse de
ciertas estructuras y crear otras
• Durante un proceso de metamorfosis.
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II
44
H. Lezama
Autofagia
TRES FORMAS:
1.MACROAUTOFAGIA
2.MICROAUTOFAGIA
3.AUTOFAGIA MEDIADA POR
CHAPERONAS
REGULA FORMACIÓN DE AUTOFAGOSOMA:
• FOSFATIDILINOSITOL 3 KINASA
(PI3K)
• BECLIN-1 (BECN1)
• MTOR (SIROLIMUS)
USMP-FMH-FN-BCM-2018-II H. Lezama 45
46
Fuentes de información
1.Karp, G. “Biología Celular y Molecular, Conceptos y Experimentos”. Ed.
McGraw-Hill - Interamericana. México.
2. Darnell, J.; Lodish, H. y Baltimore, D. “Biología Celular y Molecular”. Ed.
Omega S. A. España.
USMP-FMH-
FN-BCM-
2018-II
