INTRODUCCION

• Los linfocitos NK (del ingles Natural Killer) fueron identificadas

• originariamente par su citotoxicidad, es decir par
• su capacidad de matar in vitro algunas celulas de origen
• umoral. Hay dia sabemos que estas celulas no solamente
• son capaces de matar tumores sino que juegan un importante
• papel en la defensa frente a pat6genos, especialmente
• virus, tumores e incluso en el rechazo de 6rganos
• trasplantados. Ademas de su funci6n citot6xica 105linfocitos
• NK tienen capacidad para producir diversas citocinas
• y par 10tanto tambien tienen una funci6n reguladora.
• Aunque funcional y morfol6gicamente recuerdan
• mucho alas linfocitos T citot6xicos, se diferencian c1aramente
• de ellos tanto fenotipicamente como en la forma
• que tienen ambos tipos celulares de reconocer sus dianas.
• Una de las caracteristicas mas diferenciadoras de 105
• Iinfocitos NK es que para ejercer su actividad citolitica no
• se necesita una inmunizaci6n del individuo ni de preactivaci6n
• in vitro. De ahi el nombre de Natural Killer cuya traducci6n
• literal seria asesinas natas. Esta forma de citolisis
• las diferencia de 105Iinfocitos T citot6xicos que necesitan
• ser preactivados mediante complejos mecanismos en 105
• que intervienen otra celulas como 105 linfocitos T cooperadores
• y las celulas presentadoras de antigeno profesionales.
• Par esta raz6n se considera que 105linfocitos NK
• corresponden a la respuesta inmune de tipo innato.
 FENOTIPO
• Aunque 105linfocitos NK son linfocitos, no expresan el
• marcador CD3 ni reordenan 105genes del TCR,es decir no
• son celulas T. Tampoco expresan BCR ni reordenan 105
• genes de las inmunoglobulinas, luego no son celulas B. Par
• 10tanto se puede afirmar que constituyen un tercer tipo de
• celulas de Iinaje Iinfoide. A diferencia de 105otros dos tipos
• de linfocitos no existe un marcador universal que permita
• identificar todas 105linfocitos NK, par 10que su definici6n
• sigue siendo mas funcional que fenotfpica. Sin embargo
• existen algunos marcadores de membrana muy utiles para
• la identificaci6n de 105linfocitos NK (ver tabla 74.7).
 FUNCION
• Las principales funciones de 105Iinfocitos NK son citolisis
• y producci6n de citocinas.
• Los mecanismos que utilizan 105 Iinfocitos NK para
• matar a sus celulas diana se cree son muy similares alas
• utilizados par sus parientes 105linfocitos T. Los linfocitos
• NK contienen en su citoplasma granulos portadores de
• proteinas que una vez liberadas al media inducen la cito-toxicidad de las celulas diana. EI contenido de estes
granulos
• esta formado fundamentalmente por perforina, una proteina que polimeriza sobre la membrana de las celulas
• diana formando poras muy similares a 105que aparecen
• como consecuencia de la polimerizacion de C9 durante la
• activacion del complemento. Ademas de perforina estes
• granulos contienen granzimas: serina proteasas que actuan
• en conjuncion con la perforina para activar mecanismos
• que inducen apoptosis en las celulas diana.
• Cuando 105 linfocitos NK se activan son capaces de
• producir una variedad de citocinas y por 10tanto pueden
• ejercer funciones de activacion de otros linajes celulares
• importantes en la erradicacion de tumores 0 agentes
• infecciosos. Las principales citocinas producidas por 105
• linfocitos NK son IFN-y, TNF-a, GM-CSF e IL-3. Ademas 105
• linfocitos NK tam bien pueden responder a citocinas ya
• que expresan en su membrana algunos receptores especialmente
• para IL2, IL12 YTNF-a.
 MECANISMOS DE ACTIVACION
DE LOS LINFOCITOS NK
• La activacion de 105linfocitos NK puede producirse a
• traves de muchas seriales, aunque podemos distinguir
• clara mente una forma dependiente de anticuerpo y otra
• forma independiente de anticuerpo.
• Citotoxicidad dependiente de anticuerpo
• (ADCC)
• Los linfocitos NK son capaces de lisar otras celulas que
• presentan anticuerpos de isotipo IgG unidos a algun componente
• de su superficie. Para reconocer estas celulas
• utilizan la moleculas C016 0 FcyRIII, que es un receptor
• de baja afinidad para IgG. Esta molecula se expresa en
• casi todas 105linfocitos NK ademas de en monocitos y en
• algunos linfocitos T. Cuando C016 se une a moleculas de
• IgG que a su vez esten unidas a un antigeno de la superficie
• de una celula (ver fig. 74.7) el receptor transmite una
• serial de activacion al linfocito NK. Esta celula activada
• puede entonces ejercer su accion citotoxica y/o producir
• y secretar citocinas al medio. La transduccion de la serial
• de activacion se realiza a traves una proteina que se
• asocia no covalentemente con C016. Esta proteina es en
• algunos casas la cadena y del receptor FcyRI y en otras la
• cadena S del TCR. Ambas cadenas son muy parecidas y
• contienen motivos de activacion ITAM (Immunoreceptor
• Tyrosin-based Activation Motifs) que se describen en el
• capitulo 2.
 Citotoxicidad independiente
de anticuerpo: el papel de las moleculas
MHC de clase I
• Los Iinfocitos NK tambien son capaces de lisar celulas
• que no esten recubiertas de anticuerpos. Para reconocer
• sus celulas diana de esta forma, 105linfocitos NK utilizan
• un complejo sistema de receptores activadores e inhibidores
• y que tienen como Jigandos diferentes moleculas
• de la familia MHC de c1aseI.
• Algunos virus, como por ejemplo 105citomegalovirus,
• 0105 herpesvirus interfieren con diversos mecanismos de
• las celulas que infectan y estas pierden la expresion de
• moleculas HLA de c1aseI. De una forma analoga, algunos
• tipos de tumores acumulan mutaciones que les producen
• perdida de expresion de moleculas HLA de c1ase I. En
• estes casas las celulas (infectadas por virus en unos casas
• o tumorales en otros) se convierten en invisibles para 105
• Iinfocitos T citotoxicos y evitan de esta forma ser atacadas.
• Los linfocitos NK sin embargo son extraordinariamente
• eficientes en detectar celulas sin HLA de c1aseI en
• su superficie y de esta manera complementan el papel de
• 105linfocitos T citotoxicos.
• lComo detectan 105linfocitos NK la falta de expresion
• de moleculas HLA de c1ase I en la superficie? lComo
• toman la decision de matar a una celula diana cuando se
• ha detectado alguna alteracion de ese tipo?
• Aunque no se conoce en detalle el funcionamiento
• de la citotoxicidad NK independiente de anticuerpo el
• modelo mas aceptado se basa en que 105 Iinfocitos NK
• funcionan combinando seriales a traves de receptores de
• activacion y receptores de inhibicion (ver fig. 74.7). Segun
• este modele la serial inhibidora es dominante sobre la
• activadora, esto es, el linfocito NK matara su diana si esta
• recibiendo una serial activadora en ausencia de una serial
• inhibidora. Segun este modelo pueden darse tres situaciones,
• como las que se describen en la figura 74.7.
 RECEPTORESACTIVADORES
E INHIBIDORES. ESTRUCTURA
YFUNCION "
• En 105ultimos arios se han descubierto un gran numero
• de receptores activadores e inhibidores de 105 linfocitos
• NK. No se parecen en nada al receptor de 105linfocitos T ni
• estan codificados por genes que sufran reordenamientos.
• Atendiendo a su estructura estos receptores se pueden
• dividir en dos grupos: 105formados por proteinas que pertenecen
• ala superfamilia de las inmunoglobulinas y 105formados
• por protefnas de las superfamilia de las lectinas.
• Fig. 14.1. A) Mecanismo de citotoxicidad dependiente de anticuerpos (ADCC). B) Mecanismo de citotoxicidad independiente de anticuerpos. EI modele de
• dobe receptor. RI:Receptor inhibidor. RA: Receptor activador.
• Receptores de NKpertenecientes
• ala superfamilia de las inmunoglobulinas
• Estos receptores tienen al menos un dominio similar
• a los de las inmunoglobulinas, de ahf su nombre. Recientemente
• se han descrito un gran numero de genes que
• codifican protefnas de este tipo y todos ellos aparecen en
• una regi6n del genoma relativamente pequeria denominada
• LRC (Leukocyte Receptor Cluster) que se halla en el
• brazo largo del cromosoma 19. De ellos los mejor conocidos
• son los KIR (Killer Immunoglobulin-like Receptors),
• aunque en este complejo se encuentran multitud de genes
• relacionados como los ILTo LAIR cuya funci6n todavfa
• no esta demasiado clara.
• Los KIR son protefnas de membrana que tienen en su
• regi6n extracelular 2 6 3 dominios de tipo inmunoglobulina.
• Existen KIRactivadores y KIRinhibidores. Los KIR
• inhibidores se caracterizan por tener una cola citoplasmica
• larga en la que aparecen motivos ITIM (Immunoreceptor
• Tyrosine-based Inhibitory Motifs) 0 de inhibici6n. Estos
• motivos se caracterizan por tener ciertas tirosinas muy conservadas
• y, al reyeS que los motivos ITAM, cuando el receptor
• se une a su ligando los ITIM transducen una serial de
• inhibici6n (fig. 2.7). Los KIRactivadores tienen una cola citoplasmica
• mas corta y no tienen ITAM por si mismos sino
• que se asocian de forma no covalente a otra protefna
• (general mente DAP12) que sf tiene ITAM y es la que transduce
• la serial de activaci6n. Esta asociaci6n es similar a la
• que se encuentra en el receptor CD16 que media la citotoxicidad
• dependiente de anticuerpo como ya hemos visto.
• Todavfa no se conocen con detalle los ligandos de estos
• receptores y hasta el momenta los mejor caracterizados son
• moleculas HLA de c1aseI que pueden ser HLA-A, -B,- 6 -G Y
• que se unen a diferentes receptores inhibidores.
• Los genes que codifican estes receptores estan
• agrupados en una regi6n del cromosoma 12 denominada
• NKC (NK Complex). Existen varios receptores de esta familia
• y al igual que en el caso anterior existen receptores
• inhibidores y activadores, aunque 105 que mejor se conocen
• son 105 de tipo inhibidor.
• Estos receptores estan formados por dos cadenas polipeptfdicas
• unidas covalentemente: CD94 y NKG2, ambas
• de la familia de lectinas tipo C. Mientras que CD94 esta
• codificado por un solo gen hay varios genes que pueden
• codificar las protefnas NKG2 que se denominan NKG2A,
• NKG2CY [Link] heterodfmero CD94-NKG2A es el mejor
• conocido de todos ellos y tiene una funci6n inhibidora,
• mientras que CD94-NKG2C y CD94-NKG2E tienen funciones
• activadoras. Ambos tipos de receptores siguen la regia
• general respecto a la transducci6n de seriales: 105 receptores
• inhibidores tienen colas citoplasmicas mas largas que
• contienen motivos ITIM. Los receptores activadores se ayudan
• de una tercera protefna adaptadora (DAP12) que contiene
• 105 motives ITAM necesarios para transducir la serial.
 CD94-NKG2Aes un detector de niveles
de HIA de clase I
• EI Iigando del heterodfmero CD94-NKG2A es la
• molecula HLA-E. HLA-E depende para su expresi6n de
las
• moleculas HLA-A,-B Y -C, ya que necesita 105 peptidos
• Ifder de estas protefnas para poder expresarse en la
• superficie celular. Este receptor se expresa en una gran
• cantidad de Iinfocitos NK y de esta forma estas son
capaces
• de monitorizar la expresi6n de moleculas HLA de una
• forma indirecta que les permite utilizar un solo receptor
• para detectar muchas variantes polim6rficas de HLA-A,
• -B, -C 0 -G, a traves de HLA-E.
 NKG2D es un receptor activador que
detecta
moleculas MIC
• Otro receptor de la misma familia es NKG2D que, aunque
• comparte n0mbre con 105anteriores tiene una estructura
• c1aramente diferenciada y no se une a CD94. En
• realidad NKG2D, como casi todos 105receptores activadores,
• se une a una protefna adaptadora (denominada
• DAP10) que transduce la senal de activacion al interior
• celular. Recientemente se ha descubierto que su Iigando
• son las protefnas MIC (MHC Class I Chain-related) parientes
• lejanos de las moleculas HLA. Las moleculas MIC
• curiosamente estan codificadas por genes situ ados dentro
• del complejo HLA y aunque la homologfa aminoaddica
• entre MIC y HLA es Iimitada la estructura tridimensional
• de ambos tipos de moleculas tiene rasgos comunes.
• MIC se expresa fundamental mente en situaciones
• de estres celular (por ejemplo altas temperaturas) y se
• postula que la celula utiliza esta estrategia para lIamar la
• atencion de Iinfocitos NK que pueden activarse en presencia
• de esta molecula a traves de NKG2D (fig. 74.3).
• Recientemente tambien se ha descubierto que la infecci6n
• por citomegalovirus induce la expresi6n de MIC par
• 10tanto este sistema podrfa tambien permitir el reconocimiento
• de celulas infectadas por algunos virus.
• Todavfa se desconocen muchos detalles del funcionamiento
• de estes receptores y de c6mo las senales activadoras
• e inhibidoras se combinan. Tampoco se conocen las
• reglas que gobiernan la expresi6n 0 no de 105numerosos
• tipos de receptores de 105linfocitos NK que se conocen
• aunque se acepta que debe existir un cierto tipo de seleccion
• que dependera de 105distintos alelos HLA de c1ase1
• de cada individuo.