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Tipos y Aplicaciones de Microscopía

Este documento describe diferentes tipos de microscopía, incluyendo microscopía óptica, microscopía electrónica de barrido y transmisión, y microscopía de fluorescencia. Explica conceptos clave como magnificación, resolución, difracción y refracción. También muestra imágenes de varios especímenes observados bajo diferentes microscopios como neuronas, células cancerígenas y cultivos celulares marcados.

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Tipos y Aplicaciones de Microscopía

Este documento describe diferentes tipos de microscopía, incluyendo microscopía óptica, microscopía electrónica de barrido y transmisión, y microscopía de fluorescencia. Explica conceptos clave como magnificación, resolución, difracción y refracción. También muestra imágenes de varios especímenes observados bajo diferentes microscopios como neuronas, células cancerígenas y cultivos celulares marcados.

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MICROSCOPÍA

DANIEL VILLARROEL

Gusano de la Seda (MEB)


Keratella sp. (MO)

Ameba proteus (MCF) Tardigrado (MEB)

Desmids sp. (MO)


MICROSCOPÍA ÓPTICA

• Magnificación
• Resolución
• Difracción
• Refracción
DIFRACCIÓN

Cambio de dirección de la luz al pasar por los extremos de un objeto o a través de una
entrada o abertura pequeña
DEMOSTRACIÓN DE DIFRACCIÓN DE LA LUZ

• Sostengan una mano en frente de una luz fuerte y lentamente junten dos
dedos mientras observan la luz transmitida entre ellos.
• A medida que los dedos se aproximan uno a otro (casi hasta tocarse) se
deben ver una serie de líneas oscuras paralelas a los dedos
Densidad del Aire: 0.001225 g/ml
REFRACCIÓN
Densidad del Aire: 0.99802 g/ml

• Cambio de dirección de los rayos


de luz cuando pasan por un medio
de diferente densidad.

DAir: 15°C y 1 ATM


DWater: 21°C y 1 ATM
MICROSCOPIO ÓPTICO
• Muchos tipos. Desde muy básicos a los de mayor
complejidad (+ resolución; + contraste)
• Microscopio Simple: Un lente simple para magnificar
(i.e. Lupa)
• Microscopio Compuesto: Serie de lentes para
magnificar la imagen de la muestra
• Microscopio Digital: Puede tener lentes simples o
compuestos, usa una computadora para visualizar la
imagen sin un ocular
• Estereomicroscopio: Usado para disección,
epiluminación.
• Microscopio invertido: Para ver las muestras desde
abajo, usado para ver cultivos celulares líquidos
OTROS TIPOS DE MICROSCOPIO
• Microscopio electrónico de Barrido. Produce imágenes de la superficie de una muestra utilizando rayos de
electrones dirigidos. Estos electrones interactúan con los átomos de la muestra, produciendo señales que
contienen información acerca de la topografía de la superficie.
• Microscopio electrónico de Transmisión. Produce imágenes utilizando rayos de electrones que son transmitidos
a través de un espécimen.
• Microscopio de Campo Oscuro. Efectivo para la visualización de muestras vivas o biológicas sin teñir, células
montadas
• Microscopio de Contraste de Fases. Uso preferible cuando son necesarias magnificaciones altas (400x, 1000x)
para un espécimen sin color o los detalles no se aprecian bien. La mayoría de los organismos vivos
microscópicos son muy evidentes con este microscopio.
• Microscopio de Fluorescencia. Utiliza fluorocromos y fosforescencia para el estudio de las propiedades
organicas e ingoránicas de las sustancias. El espécimen es iluminado con rayos de luz de una longitude de onda
determinada, los cuales son absorbidos por fluorocromos, los cuales emiten luz de longitudes de onda diferente.
Un fluorocromo es un compuesto químico fluorescente que puede re-emitir luz cuando es excitado.
Neutrófilos
Células
en
Mitosis
This region harbors neural
stem cells that continue to
generate new neurons
throughout life, and it is the
largest neurogenic niche in
the adult brain.
Represented in red are
stem cell processes
emerging between the
ependymal cells (outlined
in blue) to receive nutrients
and signals circulating
through the lateral
ventricle.
It shows brain cancer cells forming sphere in a lab dish.
Primary neuronal cultures stained for Bornavirus antigens
Pancreatic cancer cells (nuclei in blue) grow as a and Tetanus toxin. Culture of neurons were infected with
sphere encased in membranes (red). By growing Bornavirus, follow by incubation with fluorescent tetanus
cancer cells in the lab, researchers can study factors toxin (red). After fixation of the cultures, Bornavirus
that promote and prevent the formation of deadly phosphoprotein (green) and ßIII tubulin (blue), a neuronal
tumors. marker, were detected by immunofluorescence analysis.
Fluorescence confocal image of
a mouse dorsal root ganglion
using fluorophores Cy3
(neurotubulin) and Cy2 (cell
bodies)
Cultured neuron stem cell on day 1: Cultured NeuN+ The photomicrograph shows Green Fluorescent
(blue) and B III Tubulin+ (green) cells express IGFBP-3 Protein expressing new neurons and the nuclei of
(red the granule cell layer labeled with DAPI (blue).
ANALYSIS AND DISCUSSION TIME
ANALYSIS AND DISCUSSION TIME

• ¿Qué tipo de perspectivas/conocimiento nuevo ha brindado la microscopía acerca


de los organismos vivos?
• ¿Qué criterios ustedes consideran que los científicos han tomado en cuenta para
continuar inventando nuevos tipos de microscopios?
• ¿Con el surgimiento de microscopios cada vez más complejos y precisos,
considerarían que el microscopio óptico ha perdido valor/importancia? Si? No? ¿Por
qué?
• ¿Qué retos actualmente enfrentaríamos de no haberse inventado los microscopios?
• ¿Cómo los microscopios han revolucionado la medicina?

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