CROMATOGRAFÍA
SUPERCRÍTICA
EQUIPO 3
ES:
• Similar a la cromatografía de gases y a la cromatografía de líquidos, pero utiliza dióxido de carbono
como fase móvil para que la ruta del flujo se encuentre a una gran presión
• Es una técnica híbrida entre la cromatografía de gases (GC) y la HPLC, que combina lo mejor de
ambas técnicas. Esta técnica es importante porque permite la separación de mezclas en las que no es
adecuada la aplicación de la GC ni de la HPLC.
• Se aplica a compuestos no volátiles o térmicamente inestables que no pueden separarse mediante GC,
o aquellos que contienen grupos funcionales que imposibilitan su detección en la HPLC.
• La cromatografía de fluidos supercríticos (SFC) emplea fluidos supercríticos como fase móvil. Un fluido
supercrítico se forma cuando una sustancia se encuentra por encima de su presión y temperatura críticas (punto
crítico):
•Temperatura crítica: es aquella a partir de la cual una sustancia no
puede existir en fase líquida, independientemente de la presión.
•Presión crítica: máxima presión a la cual un líquido puede ser
convertido en un gas por incremento de la temperatura.
La cromatografía de fluidos supercríticos es realmente una
combinación de las técnicas de cromatografía de gases y las de
cromatografía de líquidos. En ciertas aplicaciones es superior a la CG y
la HPLC.
EQUIPO
La instrumentación empleada en la cromatografía
supercrítica es similar a la de cromatografía de
líquidos, aunque debe incorporar un horno
termostato (similar al de cromatografía de gases,
para controlar con precisión la temperatura de la
fase móvil) y un sistema de contrapresión (que
sirve para mantener la presión de la columna en el
nivel deseado y para convertir el eluato a gas y
arrastrarlo al detector)
COLUMNAS:
• Debido a la baja viscosidad de los fluidos supercríticos, las
columnas deben ser mucho más largas que las empleadas en
cromatografía de líquidos. En cromatografía de fluidos
supercríticos se emplean tanto las columnas capilares como las
columnas de relleno:
Columnas capilares o tubulares abiertas: Columnas de relleno:
son de sílice fundida con recubrimientos internos (de son de acero inoxidable de 10 a 25 cm de largo,
un espesor de 0’05 a 1 μm) de varios tipos de siloxanos diámetros que varían entre 0’5 y 5 mm y cuyas
enlazados o entrecruzados, similares a las empleadas en partículas tienen un diámetro que oscila entre 3 y 10
cromatografía de gases, con longitudes que van desde los μm. Son semejantes a las empleadas en cromatografía de
10 a los 20 m y diámetros internos que oscilan entre reparto y proporcionan más platos teóricos (más de
50 y 100 μm. 100.000) y manejan volúmenes más grandes de
muestra que las columnas capilares.
FASES MÓVILES
• Las propiedades de algunos de los fluidos supercríticos empleados en Cromatografía supercrítica se recogen en la
siguiente tabla:
• La fase móvil más ampliamente utilizada en cromatografía de fluidos supercríticos es el dióxido de carbono:
• Su temperatura crítica es de 31’3 ºC y su presión crítica es de 72’9 atm, por lo que puede ser utilizado en un amplio
rango de temperaturas y presiones, que no superan los límites de operación de los actuales equipos de HPLC.
• Es un disolvente excelente para una gran cantidad de moléculas orgánicas no polares.
• Es inodoro y no es tóxico.
• Es más económico y fácilmente disponible.
• Es una sustancia transparente en el ultravioleta.
Cabe mencionar que es esencial colocar medidores de presión, de temperatura y flujo del solvente a lo
largo de todo el proceso, ya que su control depende de dichas propiedades. El 𝐶𝑂2 siendo el fluido de
extracción más utilizado actualmente, tiene una serie de ventajas adicionales en comparación de otros:
• No genera contaminación en el proceso.
• Presenta baja toxicidad y es poco reactivo.
• No es inflamable
• Existe en abundancia
• Es barato en grados de pureza elevada.
• Posee condiciones críticas fácilmente accesibles
DETECTORES
La principal ventaja de la cromatografía con fluidos supercríticos frente a
la HPLC es el uso de detectores de ionización de llama, como en la
cromatografía de gases.
Este detector es de respuesta universal para compuestos orgánicos, de
elevada sensibilidad y exento de problemas.
También pueden emplearse, como en la cromatografía de gases, detectores
de absorción en el ultravioleta y en el infrarrojo, de emisión de
fluorescencia, termoiónico y fotométrico de llama.
Los espectrómetros de masas también se pueden adaptar como detectores,
más fácilmente que para HPLC.
VENTAJAS Y DESVENTAJAS
VENTAJAS DESVENTAJAS
Se usan temperaturas moderadas, lo que evita El equipo de equilibrio de fase entre soluto y
el deterioro de los componentes solvente puede ser complicado.
térmicamente lábiles del producto.
La alta volatilidad de estos fluidos facilita su Cuando se necesitan utilizar cosolventes para
eliminación y asegura niveles muy bajos de alterara la polaridad del fluido, éstos pueden
solventes residuales en el producto final. quedar en el extracto, requiriendo una
operación de separación posterior.
La separación se realiza sin cambios de fase. Baja disponibilidad de quipos y reducido
desarrollo de diseños.
Pueden extraerse en forma diferencial Costo de mantenimiento elevado
compuestos volátiles y no-volátiles, ajustando
la densidad del fluidos para variar su poder
solvente.
SE UTILIZA PARA:
• Se utiliza a menudo para analizar bajas concentraciones de compuestos y moléculas con pesos moleculares
elevados.
• También habitualmente en el análisis de medicamentos y en el análisis de alimentos, explosivos, petróleo,
polímeros y propelentes.
• A menudo para analizar bajas concentraciones de los compuestos, la pureza del CO2 tiene importancia.
• Se puede utilizar en distintos métodos de detección
APLICACIÓN:
• La SFC se aplica a una gran variedad de
compuestos, entre los que podemos citar
drogas, alimentos, herbicidas, tensio activos,
polímeros y aditivos para éstos, impelentes,
explosivos o combustibles fósiles.
• Una aplicación importante es la separación
de quiral o enantiómeros, que se logra con
mayor resolución y menor tiempo que con
HPLC.
