Bacilos Gramnegativos
Fermentadores de Glucosa
Objetivo
Conocer las principales características
biológicas de los bacilos
gramnegativos, su capacidad para
producir infecciones, las posibilidades
diagnósticas y las medidas profilácticas
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Taxonomía
Familia
Enterobacteriaceae
Géneros Especies
Escherichia E. coli
Shigella S. flexneri, S. sonnei, S. boydii, S. dysenteriae
Salmonella S. enterica, S. bongori
Klebsiella K. pneumoniae, K. oxytoca
Enterobacter E. cloacae, E. aerogenes, E. agglomerans
Serratia S. marcescens, S. odorifera, S. fonticola
Citrobacter C. freundii, C. diversus
Proteus P. vulgaris, P. mirabilis
Yersinia Y. enterocolítica, Y. pestis
y 20 más
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Familia Enterobacteriaceae
Bacilos gramnegativos
Anaerobios facultativos
No esporulados
Catalasa positiva
Fermentadores de glucosa
Oxidasa negativa
Reductores de nitratos a nitritos
Móviles, las que lo son, mediante flagelos peritricos.
Se los encuentra en el suelo, el agua, animales y plantas.
Pueden formar parte de la flora normal y ser patógenos.
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Enterobacterias - Determinantes antigénicos
Antígeno O (somático): se encuentra en la pared bacteriana. Permite
clasificarlas en serotipos O. Son polisacáridos.
Antígeno H (flagelar): sólo presente en especies móviles. Permite
clasificarlas en serotipos H. Son proteínas.
Antígeno K (capsular): sólo presente en especies capsuladas. Permite
clasificarlas en serotipos K. Son polisacáridos.
Antígeno F (fimbrial): presente en algunas bacterias fimbriadas. Son
proteínas.
Antígeno Vi (superficie): presente en algunas especies.
Su conocimiento tiene aplicación en la tipificación con fines diagnósticos
(identificación serológica) y epidemiológicos.
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Enterobacterias - Factores de patogenicidad
Cápsula: es adhesiva y es antifagocitaria.
Fimbrias: permiten la adherencia a la célula huésped.
Exoenzimas: ureasa, gelatinasa, lipasa, desoxirribonucleasa.
Aerobactinas: permiten la captación de hierro desde el medio.
Endotoxina: LPS de pared, se libera al destruirse la bacteria.
Exotoxinas: no todas las especies las producen. Sólo son producidas
por las patógenas obligadas.
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Enterobacterias - Patógenos oportunistas
Géneros: Escherichia, Klebsiella, Serratia, Enterobacter,
Citrobacter, Proteus, Morganella, Providencia, etc.
Forman parte de la flora normal del hombre y los animales,
están presentes en el suelo, el agua y las plantas.
Producen infección cuando salen de su hábitat o hay
alteraciones de las defensas locales.
Producen infecciones extraintestinales como ser:
infecciones urinarias, sepsis, meningitis, abscesos,
neumonías, otitis, sinusitis, meningitis, etc.
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Enterobacterias oportunistas
Diagnóstico de laboratorio
Orina, sangre, punción de heridas y abscesos, esputos, etc.
Examen en fresco y Coloración de Gram
Siembra en Agar E.M.B. o Mac Conkey y Agar sangre
Incubar 24 hs a 37ºC
Coloración de Gram y estudio de colonias
Pruebas bioquímicas
Antibiograma
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Diferenciación BGN
OF
(Oxidación-fermentación)
Fermentadores Oxidativo o Inertes
(ambos tubos viran al amarillo) (vira el tubo expuesto al 02, o
no vira ninguno, respectivamente)
Bacilos Gram (-) Bacilos Gram (-)
fermentadores de la glu no fermentadores de la glu
Enterobacterias Pseudomonas
Vibrio Acinetobacter
Aeromonas Moraxella
Alcalígenes
Burkholderia
Stenotrophomonas
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Diferenciación BGNFG
Oxidasa
(+) (-)
Vibrio Enterobacterias
Aeromonas
Ox
Ox
Oxidasa
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Enterobacterias - Diagnóstico de laboratorio
Ox
Ox
Oxidasa
Citrato Urea SH2
Agar Mac Conkey
Triple azúcar hierro (TSI)
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Enterobacterias oportunistas
Diagnóstico de laboratorio
Género Lactosa Movilidad Urea Citrato SH2
Escherichia + + - - -
Klebsiella + - + + -
Proteus - + + - +
Citrobacter + + - + +
Serratia + + - + -
Enterobacter + + +/- + -
Otras pruebas: producción de indol, descarboxilasas, rojo de
metilo, DNAsa, Voges-Proskauer, fermentación de azúcares, etc.
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Enterobacterias Patógenos Obligados
Géneros: Escherichia, Shigella, Salmonella, Yersinia
No forman parte de la flora normal y su presencia en la muestra
es indicativa de infección.
Se transmiten de hombre a hombre por vía ano-mano-boca o se
adquieren a partir de aguas y alimentos contaminados.
Producen infecciones intestinales excepto Salmonella que puede
producir sepsis, neumonías, etc.
Son la primer causa de muerte de etiología infecciosa en niños
de países subdesarrollados.
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E. coli diarreogénicas
Existen 6 virotipos o patotipos
E. coli enteropatógena
E. coli enteroinvasiva
E. coli enterohemorrágica
E. coli enterotoxigénica
E. coli enteroadherente
E. coli enteroagregativa
Aunque hay diferencias antigénicas, pueden compartir antígenos
somáticos
Producen diarrea relacionada con la ingestión de alimentos
contaminados con materia fecal, variando de acuosas a
disentéricas. 13
Patogénesis
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Shigella
4 especies pertenecientes a 4 grupos serológicos O:
A S. dysenteriae B S. flexneri
C S. boydii D S. sonnei
Las especies más frecuentes
en nuestro país son
S. flexneri (85%) y S. sonnei (15%)
Son todas inmóviles
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Patogénesis
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Salmonella
2 especies: S. bongori y S. enterica
6 subespecies de S. enterica:
S. enterica, S. salamae, S. arizonae
S. houtenae, S. diarizonae, S. indica
Más de 2500 serotipos según sus antígenos O, H y Vi.
La mayoría de las especies son móviles
Producen diarrea relacionada con la ingestión de alimentos
contaminados con materia fecal, pudiendo dar complicaciones
como sepsis, neumonías, abscesos, etc. Salmonella Typhi produce
fiebre tifoidea.
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Patogénesis
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Enterobacterias diarreogénicas
Diagnóstico de laboratorio
Materia fecal
Examen en fresco y Coloración de Gram
Siembra en Agar E.M.B. o Mac Conkey y Agar SS
Incubar 24 hs a 37ºC
Pruebas bioquímicas
Identificación serológica
Antibiograma
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Protocolo mínimo
Rutina ® Salmonella y Shigella
Heces sanguinolentas ® + ECEH
Inmunocomprometido ® + Cryptosporidium
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Siembra inicial-Aislamiento primario
Medios poco
selectivos
Medios selectivos
Medios de
18 hs
enriquecimiento
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Siembra Inicial
Agar Eosina Azul de Metileno
Agar Mac Conkey
Agar Salmonella Shigella
Agar XLD
Agar Verde Brillante Bilis
Agar Hektoen Enterico
Medios cromogénicos
Agar Mac Conkey Sorbitol
Caldo Selenito
Caldo Tetrationato
Caldo Rappaport-Vassiliadis
Caldo Bolton
Agua peptonada alcalina
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Caldos de enriquecimiento
Salmonella: Selenito o rappaport Vasiliadis
E. coli O157: Agua peptonada +TEL + CFX
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EMB Agar Mac Conkey
24
Agar Salmonella Shigella
25
Agar XLD Agar Hektoen Enterico
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CHROMagar E. coli 0157
CHROMagar Salmonella
0157
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Identificación inicial
ATS
SF
SIM LDC FEA ONPG
Colonias
sospechosas
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Identificación definitiva
ATS TSI URE ODC ADH OXI CIT DNAsa
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Enterobacterias diarreogénicas
Diagnóstico de laboratorio
Género Lactosa Movilidad Urea Citrato SH2
Escherichia + + - - -
Shigella - - - - -
Salmonella - + - + +
Yersinia - - + - -
Otras pruebas: producción de indol, descarboxilasas, rojo de metilo, acetato,
Voges-Proskauer, fermentación de azúcares, etc.
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ONPG
(-) (+)
Fenilalanina
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SIM Lisina Decarboxilasa
SH2- Ind+
SH2+ Ind+ SH2+ Ind-
Mot+
Mot+ Mot-
SH2- Ind-
Mot-
Citrato/Acetato
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Triple Azúcar Hierro
Ureasa
Positivo Negativo
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Lisina Hierro Agar
LIA – SH2 - LIA + SH2 - LIA + SH2 -
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Identificación serológica
Serotipos Salmonella
Serovariedad Chaco Corrientes TOTAL
o serotipo
n n n %
S. Newport 4 57 61 35,5
S. Enteritidis 10 34 44 25,5
S. Infantis 27 8 35 20,3
S. Typhimurium 7 2 9 5,2
Otros 7 16 23 13.5
Total 55 117 172 100
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Antibiograma
Acido nalidíxico
Ampicilina
Ampicilina/sulbactama
Trimetoprima/sulfametoxazol
Cefalosporinas de 3ra generación
Ciprofloxacina
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Prevención de las diarreas
Uso de agua potable para beber
Provisión de agua para higiene
Higiene personal
Higiene de los alimentos
Adecuada disposición de excretas
Adecuada conservación de los alimentos
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Medidas de control
1) calentar el alimento hasta alcanzar
temperatura suficiente para eliminar a las
bacterias, de 65 a 74°C
2) conservar el alimento a temperaturas
menores de 5°C
3) prevenir la contaminación cruzada
después del tratamiento térmico y
4) evitar que las personas con síntomas de
gastroenteritis o portadores, manipulen
alimentos.
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Recordar:¡En unas
pocas horas, los
gérmenes se pueden
multiplicar en
millones¡
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