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Cultivo de Hongos con Sabouraud Dextrosa

Este documento describe el medio de cultivo Sabouraud Dextrosa Agar, el cual se utiliza para cultivar hongos y levaduras. Contiene peptona de caseína, digerido pancreático de tejido animal y dextrosa como fuentes de nitrógeno, carbono y energía respectivamente. También contiene agar como agente solidificante. Proporciona instrucciones para su preparación, almacenamiento, siembra e incubación y control de calidad utilizando diversos microorganismos como Candida albicans, Trichophyton mentagrophytes

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Yudith Rosaluz Imata Condori
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Cultivo de Hongos con Sabouraud Dextrosa

Este documento describe el medio de cultivo Sabouraud Dextrosa Agar, el cual se utiliza para cultivar hongos y levaduras. Contiene peptona de caseína, digerido pancreático de tejido animal y dextrosa como fuentes de nitrógeno, carbono y energía respectivamente. También contiene agar como agente solidificante. Proporciona instrucciones para su preparación, almacenamiento, siembra e incubación y control de calidad utilizando diversos microorganismos como Candida albicans, Trichophyton mentagrophytes

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AGAR

SABOURAUD
DEXTROSA
utilizado para cultivo de mohos y levaduras
COMPOSICIÓN(G):
 Peptona de Caseína 5.0
 Digerido Pancreático de Tejido Animal 5.0
 Dextrosa 40.0
pH 5.6 ± 0.2 favorece el crecimiento de hongos, especialmente
dermatofitos y ayuda en la inhibición de flora contaminante.
FUNDAMENTO:
 Agar Bacteriológico 15.0
Peptonas proporcionan la fuente de carbono y nitrógeno para el crecimiento de
los microorganismos.
Dextrosa es la fuente de energía para el crecimiento de microorganismos.
Agar es agregado como agente solidificante.
La adición de antibióticos de amplio espectro inhibe una amplia gama
de bacterias Gram positivas y Gram negativas. El medio de cultivo se
siembra de acuerdo a las indicaciones con la muestra de ensayo. Los
hongos desarrollados se examinan micro y macroscópicamente.
PREPARACION DEL MEDIO

 Rehidratar 65 g del medio en un litro de agua destilada.

 Reposar 10 a 15 minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto


de ebullición durante 1 minuto para disolverlo por completo.

 Esterilizar en autoclave a 121ºC ( 15 lbs de presión) durante 15 minutos.

 Enfriar aproximadamente a 45ºC. Vaciar en placas de Petri estériles.


Cuando se requiera el medio en tubo de ensayo, distribuir el volumen
requerido antes de esterilizar y posteriormente enfriar en posición inclinada.

Almacenamiento

 Almacenar placas de Petri conteniendo Sabouraud Dextrosa Agar a 2-8ºC.

Procedimiento

 Recuento por siembra En superficie: inocular directamente la muestra.

Incubación:

 En aerobiosis a 20-25 ºC. El tiempo dependerá del hongo y levadura que se


quiera recuperar.
CONTROL:

crecimiento y pigmentación de colonias después de 2, 5 y 7 días de


incubación a 25 – 30 °C. C.

 Candida albicans (ATCC 60193).Correcto, presenta crecimiento entre


medio y denso, con colonias de color blanco a blanco grisáceo.
 Trichophyton mentagrophytes (ATCC 9533) Correcto presenta un
crecimiento de promedio a denso, con colonias de color blanco a blanco
grisáceo/marrón claro.

 Staphylococcus aureus MKTA 6538P, Inhibido.

 [Link] MKTA 25922, Inhibido.

 Aspergillus niger MKTA 16404, Correcto, Colonias negras y esporuladas en 5 días.


Con respecto a PCA estandarizado*, recuento 115-475%, pero de forma más
selectiva.

 Saccharomyces cerevisiae MKTA 9763, Correcto. Con respecto a PCA


estandarizado*, recuento 103-485%, pero de forma más selectiva.

 Candida albicans MKTA 10231, Excelente. Con respecto a PCA estandarizado*,


recuento 143-148%, pero de forma más selectiva.
S. cerevisiae es un hongo levaduriforme que presenta células
alargadas, globosas ó elipsoidales, pudiendo encontrarse en
agrupaciones de dos, en cadenas cortas, racimos o bien sin
agruparse. “La apariencia de las colonias es muy diversa: de color
crema a ligeramente café, de lisas a rugosas, en ocasiones
sectorizadas y brillantes u opacas” (López et al., 2002), Figura 1.
Esta levadura crece de forma óptima a pH´s ácidos (Calaveras,
2004; García, 2005).

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