Aglutinaciones
Reacción visible
in vitro
que resulta de la
interacción secundaria
entre
un antígeno particulado y
su
anticuerpo específico
Principio de aglutinación
Clasificación
Aglutinación Directa
Antígeno particulado persé
Aplicación: serotipificación de
grupos sanguíneos
Clasificación
Indirecta o Pasiva
1° Sensibilización de
la partícula con el
antígeno soluble.
2° Incubación con el
anticuerpo
específico.
Clasificación
Reversa
Anticuerpo inmovilizados,
unidos a partículas.
Métodos
Cualitativo
Se realiza en
portaobjetos
Métodos
Semicuantitativo
En tubos
Métodos
Semicuantitativo
En microplaca
LA INMUNO AGLUTINACION
Es una técnica en la que se utilizan los principios de la
reacción Ag-Ac para determinar la presencia de
diferentes componentes inmunológicos utilizando
directamente estos o materiales de soporte que permiten
visualizar una aglutinación macro y microscópica para su
posterior interpretación clínica
En esta presentación se mencionaran al LATEX, la
aglutinación directa y al CARBON
INMUNOAGLUTINACION CON LATEX
El látex es un material polimérico compuesto de grasas y
resinas vegetales.
Contiene grupos carboxilos que le dan la propiedad ligar
imunocomponentes de manera eficaz.
Se pegan los Ac’s o Ag’s en partículas de látex de un
tamaño de 0,5 a 1 μm por condensacion
Entonces cuando se añada el reactante a las partículas
de látex con recubierto inmunológico se formaran
aglutinados que se observan macroscópicamente.
PARTICULAS DE ANTICUERPOS IgM
LATEX PENTAMERICOS EN EL
RECUBIERTAS CON SUERO
Ag
AGLUTINADO MACROSCOPICAMENTE VISIBLE
De esta manera funcionan muchos de los kits
comerciales usados en el laboratorio de inmunología
clínica tales como:
1. Determinación de estreptolisina “O” (ASTO)
2. Determinación de factores reumatoideos (RF)
3. Determinación de proteína C-reactiva (PCR)
LA INTERPRETACION CLINICA
ASTO
NO AGLUTINA AGLUTINA
En el suero del paciente se encuentran
Se hacen otras pruebas para anticuerpos anti-estreptolisina “O”
confirmar el estado (exotoxinas bacterianas)
aparentemente saludable del
paciente
El paciente cursa una infección
por Streptococus Pyogenes u
otro β hemolitico
El paciente podria estar
cursando una
amigadlitis, escarlatina, o
pielonefritis infecciosa
Se sospecha de otra
enfermedad que se confirm a
con precipitación de
RF globulinas con sulfato de
amonio
NO AGLUTINA AGLUTINA
En el suero del paciente hay presencia de
Se hacen otras pruebas para Factor reumatoideo (RF) que son
confirmar el estado anticuerpos anti-IgG o llamados COHN
aparentemente saludable del
paciente
Los Ac COHN son anticuerpos
autoinmunes destructores de las
articulaciones
El paciente cursa una patología
autoinmune; ARTRITIS
REUMATOIDEA
PCR AGLUTINA
En el suero del paciente se encuentra una
NO AGLUTINA alta concentración de proteína C-reactiva
(que se pega a las partículas de látex del
kit cubiertas en este caso con anticuerpos
anti-PCR)
Se hacen otras pruebas para
confirmar el estado
aparentemente saludable del El paciente cursa una
paciente El paciente cursa inflamación aguda por
una INFECCIÓN destrucción de tejido
BACTERIANA O
FUNGICA O
El paciente podría estar
cursando un episodio de
PREINFARTO DE
MIOCARDIO, TRAUMA
SEVERO o PROLIFERACION
NEOPLASICA (cáncer)
AGLUTINACION DIRECTA EN
SUSPENSIÓN DE ANTIGENOS
En este caso se utilizan directamente los antígenos
en una suspensión salina sin un soporte como el
látex o carbón.
Se usan células muertas de los agentes infecciosos
como en la prueba de widal para la detección de
salmonella y brucella
WIDAL
NO AGLUTINA AGLUTINA
En el suero del paciente se encuentran
Se hacen otras pruebas para anticuerpos anti-membranas flagelares de
confirmar el estado salmonella y brucella
aparentemente saludable del
paciente
El paciente cursa una infección
por salmonella o brucella
El paciente podría estar
cursando una FIEBRE
ENTERICA, SEPTICEMIA,
AGLUTINACION EN CARBON
El carbón (activado) proveniente de la combustión de
materias vegetales y es un potente adsorbente de varias
sustancias.
Esta propiedad adsorbente se le atribuyen a los micro
poros que tienen sus partículas con poros de
aproximadamente 1 nm de radio o menos.
En inmunoaglutinacion las partículas de carbón tienen
adsorbidas a sus partículas sustancias como colesterol,
leticina y cardiolipina o conocidas como reagininas
plasmáticas en la prueba de RPR
BASICAMENTE FUNCIONA ASI
REAGININAS ANTICUERPOS
ADSORBIDAS EN IgM
REAGININ
AS EL CARBON
CARBON
ACTIVADO
AGLUTINADO
INTERPRETACION CLINICA
RPR
NO AGLUTINA AGLUTINA
En el suero del paciente se encuentran
Se hacen otras pruebas para anticuerpos anti-reaginas producidas por
confirmar el estado las células infectadas posiblemente con T.
aparentemente saludable del pallidum y por el mismo MO
paciente
El paciente posiblemente cursa
una infección aguda inicial por T.
pallidum
Se debe confirmar si se trata de SÍFILIS
relacionando el resultado de laboratorio con la
clínica o pruebas mas especificas ya que el RPR
no es especifico del Ag de T pallidum
Pruebas mas detalladas
Aglutinacion en latex
Esun método de laboratorio para examinar ciertos
anticuerpos o antígenos
Los anticuerpos o antígenos conocidos son unidos a partículas de látex, con el objeto
de facilitar la visualización de la prueba. Sepueden emplear otras partículas insolubles
como el poliestireno o la bentonita
Tipos de reactivos en latex
PREPARACION REACTIVO REACCION
ANTICUERPOS
ANTIGENOS
DEFÁCILUSO
MUY RÁPIDO Muy cómodo
Aglutinación en látex
CUALITATIVOY
SENSIBLEYESPECIFICO SEMICUANTITATIVO
PRESUNTIVO
procedimiento
PCR– proteína c reactiva
se produce en el hígado cuando hay una infección o inflamación aguda en el
cuerpo. Su importancia es que reacciona con el sistema del complemento
que es un sistema de defensa contra agresiones externas del cuerpo humano
¿PARA QUÉ SEREALIZA?
enfermedades infecciosas enfermedades inflamatorias
bacterianas
Para realizar este análisis No se precisa estar
en ayunas.
PRUEBA EN
PORTA
La determinación se efectúa ensayando una suspensión de látex recubierto con
anticuerpos anti-PCR, frente a los sueros problema. La presencia de aglutinación
es indicativa de un aumento del nivel de PCRpor encima del límite superior del
intervalo de referencia de las muestras ensayadas
COMPOSICION DE LOSREACTIVOS
CONTROL-
R CONTROL+
Reactivo PCR-Latex. Suero humano con una Suero animal, con una
Suspensión estabilizada y concentración de PCR> concentración máxima
tamponada de partículas 15 mg/L. Contiene 0,95 de 1 mg/L de PCR
de látex recubiertas con g/L de azida sódica humana. Contiene 0,95
anticuerpos específicos g/L de azida sódica
anti-PCR humana.
Contiene 0,95g/L de azida
sódica
PRUEBA EN
PORTA
La determinación se efectúa ensayando una suspensión de partículas de látex recubiertos con
gamma globulina humana frente a los sueros problema. La presencia o ausencia de aglutinación
visible es indicativa de la presencia o ausencia de FRen las muestras ensayadas
COMPOSICION DE LOSREACTIVOS
CONTROL+ CONTROL-
R
Reactivo FR-Latex. Suero humano con una Suero animal con una
Suspensión estabilizada y actividad aproximada actividad inferior a 5
tamponada de partículas equivalente a 25 UI/mL. Contiene 0,95 g/L
de látex recubiertas con UI/mL. Contiene 0,95 de azida sódica
gamma globulina humana. g/L de azida sódica
Contiene 0,95 g/L de azida
sódica
PCR
Artritis reumatoide
Infarto de miocardio
Fiebre reumática
Artritis aguda Cáncer.
Infarto pulmonar PCR Traumatismos
Infecciones bacterianas (urinarias, Problemas de rechazo
tuberculosis, etc...) de transplantes
Otras enfermedades autoinmunes
(Síndrome de Reiter, Enfermedad de
Crohn, vasculitis, LED, etc...)
ANTIESTREPTOLISINA-O(AS0)
es la medición de anticuerpos anti-Estreptococo betahemolíticos del tipo A. Esta
bacteria produce una enzima llamada estreptolisina O, que puede destruir los
hematíes y el cuerpo reacciona contra ella produciendo anticuerpos específicos
antiestreptolisina O.
¿PARA QUÉ SEREALIZA?
La presencia de títulos altos de antiestreptolisinas O ó ASLO, indican una infección por
la bacteria Estreptococo betahemolíticos del tipo A, que puede producir una
glomerulonefritis, una fiebre reumática, una endocarditis bacteriana o una escarlatina
Para realizar este análisis NO se precisa estar en ayunas.
Niveles normales de ASLO
en adultos Menores de 160 Unidades/ml
en niños menores de 2 años Menores de 50 Unidades/ml
en niños entre 2 y 4años Menores de 160 Unidades/ml
en niños entre 4 y 12años Entre 160 y 300 Unidades/ml
Niveles normales de Saturación de l
transferrina a
Hombres del 20 al 50%
Mujeres del 15 al 50%
En estos valores puede haber ciertasdiferencias
ASLO-Latex
Determinación de anti-estreptolisina O
PRUEBA EN PORTA
La determinación se efectúa ensayando una suspensión de partículas de látex recubiertos con
estreptolisina frente a los sueros problema. La presencia o ausencia de aglutinación visible es
indicativa de la presencia o ausencia de ASLOen las muestras nsayadas a niveles significativos
COMPOSICION DE LOS
REACTIVOS
R CONTROL + CONTROL -
Antígeno ASLO-Latex. Suero humano con una Suero animal con una
Suspensión estabilizada y actividad ASLO superior a 200 actividad ASLO inferior a
tamponada de partículas de UI/mL. Contiene 0,95 g/L de 100 UI/mL. Contiene 0,95
látex recubiertas con azida sódica g/L de azida sódica.
estreptolisina O. Contiene
0,95 g/L de azida sódica.
ASO
• Infección por Estreptococo
beta hemolíticos del tipo A
• Endocarditis
bacteriana • Fiebre reumática
ASLO
•Pioderma por Estreptococo
• Escarlatina
betahemolíticos del tipo A
• Glomerulonefritis
FACTORREMATOIDEO(FR)
El factor reumatoide (FR) es una prueba que mide la presencia y nivel de la IgM
específica contra las inmunoglobulinas IgG anormales, producidas por los linfocitos de
la membrana sinovial, de las articulaciones de personas afectadas por la Artritis
Reumatoide
¿PARA QUÉ SE REALIZA ESTEESTUDIO?
LaArtritis Reumatoide es una enfermedad crónica, que produce la inflamación de las
articulaciones principalmente de manos y pies.
VALORES NORMALES DE FACTOR REUMATOIDE (FR)
Valores normales o NEGATIVOS:
• Menor de 60 U/ ml (por nefelometría).
• Título menor de 1:80 (método de aglutinación)
En estos valores puede haber muy pequeñas diferencias por la técnica o por criterios de
normalidad propios de laboratorios concretos, a veces en el rango de valores y otras veces
por las unidades a las que se hace referencia.
PRUEBA EN
PORTA
La determinación se efectúa ensayando una suspensión de partículas de látex
recubiertos con gamma globulina humana frente a los sueros problema. La presencia o
ausencia de aglutinación visible es indicativa de la presencia o ausencia de FR en las
muestras ensayadas
COMPOSICION DE LOSREACTIVOS
R CONTROL+ CONTROL-
Reactivo FR-Latex. Suero humano con una Suero animal con una
Suspensión estabilizada y actividad aproximada actividad inferior a 5
tamponada de partículas de equivalente a 25 UI/mL. UI/mL. Contiene 0,95 g/L
látex recubiertas con Contiene 0,95 g/L de azida de azida sódica
gamma globulina humana. sódica
Contiene 0,95 g/L de azida
sódica
FR
Artritis Reumatoide
Tuberculosis
Leucemia
Escleroderma Hepatitis crónica
Infección viral crónica
(FR) Mononucleosis infecciosa
Dermatomiositis Lupus Eritematoso Sistémico
Síndrome Nefrótico
Síndrome de Sjogren